專利名稱：抗腫瘤化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的抗腫瘤化合物、包含抗腫瘤化合物的藥物組合物以及它們用作抗 腫瘤劑的用途。
背景技術(shù)：
在W0 95/27730中，Perez Baz等公開了來自海洋生物小單孢菌屬 (Micromonospora sp.)的新的抗腫瘤劑Thiocoraline A的分離和二維結(jié)構(gòu)鑒定。 在1999年，Erba等報道了該化合物在抑制細(xì)胞周期進(jìn)程和克隆形成的濃度下 作為 DNAa 聚合酶抑制劑的活性(Erba，E. ；Bergamaschi, D. ；Ronzoni, S. ；Faretta, M.； Taverna, S. ；Bonfanti, M. ；Catapano, C. V. ；Faircloth, G. ；Jimeno, J. ；D' Incalci, M. British J. Cancer 1999，80，971-980)。在W0 02/49577 中，Boger 和 Lewis 公開了 Thiocoraline A 和 BE-22179 的全合 成。該全合成允許闡明Thiocoraline A相對立體化學(xué)和絕對立體化學(xué)。他們還報道了 Thiocoraline A類似物的制備，其中2-羥基喹啉基被其它喹啉或喹喔啉代替。 Z = CH, = R2 = HZ = N, = R2 = HZ = CH, = OMe, R2 = OH他們還報道了通過具有很少或沒有明顯序列選擇性的高親和性雙插入 (bisintercalation)使 thiocoraline A、BE-2179 及其類似物與 DNA 結(jié)合。
最近，Gago等公開了 Thiocoraline A的X-射線結(jié)構(gòu)及其DNA結(jié)合特性(Negri， A. ；Marco,E. ；Garcla-Hernandez, V. ；Domingo,A. ；Llamas-Saiz, A. L. ；Porto-Sanda, S.； Riguera, R. ；Laine, ff. ；David-Cordonnier, M-H. ；Bailly, C. ；Garcia—Fernandez, L. F.； Vaquero, J. J. ；and Gago, F. J. Med. Chem. 2007，50，3322—3333)。Thiocoraline A與抗腫瘤肽抗生素家族共享一些共同的部分(motive)，所述抗 腫瘤肽抗生素家族包括三骨菌素(Triostin)A(Shoji, J.，et al. J. Antibiot. 1961，14， 335-339)、BE-22179(0kada，H.，et al. J. Antibiot. 1994，47，129-135)和棘霉素(Corbaz， R.，et al. Helv. Chim. Acta 1957，40，199—204)。 三骨菌素:X= 0 ;Y = -SCH2-；禮=i-Pr ;R2 = Me ；HTC = 2-喹喔啉基；BE-22179 X = S ;Y = -SCH2-；禮=CH2 = ;R2 = H ；HTC = 3-羥基-2-喹啉基；棘霉素X= 0 ;Y = CH(SMe)；隊=i~Pr ;R2 = Me ；HTC = 2_ 喹喔啉基；雙重對稱或偽對稱二環(huán)八肽的這種基團(tuán)表現(xiàn)出復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，包含a)由反向平行 模式的兩條肽鏈形成的二環(huán)結(jié)構(gòu)；b)處于肽鏈末端部分的酯鍵或硫酯鍵；c)處于肽鏈中間 的二硫鍵或類似的橋接；d)處于N-末端部分的插入生色團(tuán)部分；e)若干N-甲基氨基酸的 存在；以及f)D構(gòu)型的非天然氨基酸。Boger和Lee于2000年報道了 Azatriostin A的合成和對白血病細(xì)胞系L1210的 細(xì)胞毒活性(Boger, D. L. ；Lee, J. K. J. Org. Chem. 2000,65 (19)，5996—6000)。Azatriostin A為三骨菌素A的類似物，其中肽鏈末端部分的酯鍵被酰胺鍵代替。Azatriostin A對該細(xì) 胞系的活性比三骨菌素A低兩個數(shù)量級?，F(xiàn)有技術(shù)中公開的其它Thiocoraline A類似物為Oxathiocoraline，其表現(xiàn)出對 GI5Q 值為 3. 0E-7M 至 4. 62E-7M 的三種細(xì)胞系的細(xì)胞毒活性(Tulla-Puche，J. ；Bayo-Puxan, N. ；Moreno, J. A. ；Francesch, A.M. ；Cuevas, C. ； Alvarez, M. ； and Albericio, F.J.Am. Chem. Soc. 2007，129，5322-5323)；和 Azathiocoraline，其表現(xiàn)出對 GI50 值為 5. 67E-6M 至 2. 58E-7M 的一組細(xì)胞系的細(xì)胞毒活性(Bayo-Puxan, N. ；Fernandez, A. ；Tulla-Puche J.； Riego, E. ；Cuevas, C. ；Alvarez, M. ；and Albericio, F. Chem. Eur. J. 2006,12,9001-9009 ； Bayo-Puxan, N. Ph. D. Thesis, University of Barcelona, 2006)；以及 Azathiocoraline 類 似物，其中將位于Thiocoraline A的N_末端部分的插入生色團(tuán)部分和/或環(huán)狀氨基酸進(jìn) 行修飾(Bayo-Puxan, N. ；Fernandez, A. ；Tulla-Puche J. ；Riego, E. ；. Alvarez, M. ；and Albericio, F.Int. J. of Peptide Research and Therapeutics. 2007,13,295-306)。
化合物XZRiR2R3OxathiocoralineOCH-CH2-SMeOHOHAzathiocoralineNHCH-CH2-SMeOHOH[TVMe-Leu4, ArMe-Leus] azathiocoralineNHCHi-PrOHOHAzathiocoraline + 3HQANHCH-CH2-SMeOHCQy。/、 O[2QXA, Mvle-Ala4] AzathiocoralineNHNMeHH[2QNA, TVMe-Ala4] AzathiocoralineNHCHMeHH還將化合物[匪e-Leu4，NMe-Leu8]Azathiocoraline,[2QXA, We-Ala4] Azathiocoraline 和[2QXA，NMe-Ala4]Azathiocoraline 針對 GI50 值大于 9. 99E-6M 的這些 ^fflIfiτΙΗ (Bayo-Puxan, N. Ph. D. Thesis, University of Barcelona，2006)。在動物和人類中，癌癥是死亡的主要原因。已經(jīng)盡極大努力并仍在努力以獲得有 效且安全地向患有癌癥的患者給予的抗腫瘤劑。本發(fā)明要解決的問題是提供在癌癥治療中 有用的化合物。發(fā)明_既述一方面，本發(fā)明涉及通式I的化合物或其藥物可接受的鹽、衍生物、互變異構(gòu)體、 前藥或立體異構(gòu)體， 通式I其中禮、R4, R6和R9各自獨(dú)立地選自氫、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取 代的C2-C12烯基和取代或未取代的C2-C12炔基；R3和R8各自獨(dú)立地為取代或未取代的C1-C12巰基烷基，其中可以將巰基任選地保 護(hù)；或使R3和R8形成基團(tuán)-CH2-S-S-CH2-；
R2 為氫；R7為氫；或R1-R2對和/或R6-R7對獨(dú)立地形成取代或未取代的C1-C12亞烷基，或者與它們所 連接的相應(yīng)C原子一起形成取代或未取代的C3-C12環(huán)烷基；R5和Rltl各自獨(dú)立地選自氨基保護(hù)基團(tuán)和_ (C = 0) R”，其中每一 R”獨(dú)立地選自取 代或未取代的雜環(huán)基和取代或未取代的雜環(huán)基烷基；Ra、Rb、R。、Rd、Re和Rf各自獨(dú)立地選自氫和取代或未取代的C「C12烷基；Y 選自 S、0 禾口 NRi;Rh選自取代或未取代的C1-C12燒基、η為1至25的-(CH2-CH2O)n-CH3基團(tuán)、取代或 未取代的C2-C12烯基和取代或未取代的C2-C12炔基；并且Ri為選自以下基團(tuán)的基團(tuán)氫、取代或未取代的C1-C12烷基、η為1至25 的-(CH2-CH2O)n-CH3基團(tuán)、取代或未取代的C2-C12烯基和取代或未取代的C2-C12炔基。另一方面，本發(fā)明涉及將通式I的化合物或其藥物可接受的鹽、衍生物、互變異構(gòu) 體、前藥或立體異構(gòu)體作為藥品，特別是用于治療癌癥的藥品的用途。另一方面，本發(fā)明還涉及通式I的化合物或其藥物可接受的鹽、衍生物、互變異構(gòu) 體、前藥或立體異構(gòu)體在治療癌癥或制備優(yōu)選治療癌癥的藥品中的用途。本發(fā)明的其它方 面是治療方法和用于這些方法的化合物。因此，本發(fā)明還提供治療患有癌癥的任何哺乳動 物，特別是人的方法，所述方法包括向患病的個體給予治療有效量的如上文所定義的化合 物。另一方面，本發(fā)明還涉及將通式I的化合物或其藥物可接受的鹽、衍生物、互變異 構(gòu)體、前藥或立體異構(gòu)體作為抗癌劑的用途。另一方面，本發(fā)明涉及包含通式I的化合物或其藥物可接受的鹽、衍生物、互變異 構(gòu)體、前藥或立體異構(gòu)體以及藥物可接受的載體或稀釋劑的藥物組合物。本發(fā)明還涉及獲得通式I化合物和由這些化合物形成的衍生物的方法。優(yōu)選實(shí)施方案詳述本發(fā)明涉及如上文所定義的通式I的化合物。在這些化合物中，能夠根據(jù)以下指導(dǎo)選擇來基團(tuán)烷基可以是支鏈或非支鏈的，并且優(yōu)選具有1至約12個碳原子。更優(yōu)選的一類烷 基具有1至約6個碳原子。甚至更優(yōu)選的烷基具有1、2、3或4個碳原子。在本發(fā)明的化合 物中，特別優(yōu)選的烷基是甲基，乙基，丙基，異丙基和包括叔丁基、仲丁基及異丁基在內(nèi)的丁 基。優(yōu)選的另一類烷基具有6至約10個碳原子；并且甚至更優(yōu)選7、8或9個碳原子。這一 類最優(yōu)選的烷基是庚基、辛基和壬基。本發(fā)明化合物中優(yōu)選的烯基和炔基可以是支鏈或非支鏈的，具有一個或多個不飽 和鍵，并具有2至約12個碳原子。更優(yōu)選的一類烯基和炔基具有2至約6個碳原子。甚至 更優(yōu)選的烯基和炔基具有2、3或4個碳原子。優(yōu)選的另一類烯基和炔基具有4至約10個 碳原子，仍然更優(yōu)選6至約10個碳原子；并且甚至更優(yōu)選7、8或9個碳原子。亞烷基可以是支鏈或非支鏈的，并優(yōu)選具有1至約12個碳原子。更優(yōu)選的一類亞 烷基具有1至約6個碳原子。甚至更優(yōu)選的亞烷基具有1、2、3或4個碳原子。在本發(fā)明的
8化合物中，特別優(yōu)選的亞烷基是亞甲基、亞乙基、亞丙基、異亞丙基和包括仲亞丁基及異亞 丁基在內(nèi)的亞丁基。優(yōu)選的另一類亞烷基具有6至約10個碳原子；并且甚至更優(yōu)選7、8或 9個碳原子。這一類最優(yōu)選的亞烷基是亞庚基、亞辛基和亞壬基。本發(fā)明化合物中優(yōu)選的環(huán)烷基具有3至約12個碳原子。更優(yōu)選的一類環(huán)烷基具 有3至約6個碳原子。甚至更優(yōu)選的環(huán)烷基具有3、4或5個碳原子。本發(fā)明化合物中適當(dāng)?shù)姆蓟▎苇h(huán)和多環(huán)化合物，該多環(huán)化合物包括包含分離 的芳基和/或稠合的芳基的多環(huán)化合物。通常的芳基包含1至3個分離的或稠合的環(huán)，并 具有6至約18個碳環(huán)原子。優(yōu)選的芳基具有6至約10個碳環(huán)原子。特別優(yōu)選的芳基包括 取代或未取代的苯基、取代或未取代的萘基、取代或未取代的聯(lián)苯基、取代或未取代的菲基 和取代或未取代的蒽基。適當(dāng)?shù)碾s環(huán)基包括包含1至3個分離的或稠合的環(huán)并具有5至約18個環(huán)原子 的雜芳基和雜脂環(huán)基。優(yōu)選地，雜芳基和雜脂環(huán)基具有5至約10個環(huán)原子。本發(fā)明化 合物中適當(dāng)?shù)碾s芳基具有選自N、0或S原子的一個、兩個或三個雜原子，并且包括例如， 包括8-香豆素基的香豆素基、包括8-喹啉基的喹啉基、異喹啉基、吡啶基、吡嗪基、吡唑 基、嘧啶基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噻唑基、異噻唑基、三唑基、四唑基、異噁唑基、噁唑 基、咪唑基、噴哚基、異吲哚基、噴唑基、中氮茚基、酞嗪基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、噻二 唑基、呋咱基(furazanyl)、噠嗪基、三嗪基、噌啉基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱 基(benzofurazanyl)、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基 (naphthyridinyl)和呋喃并吡啶基(furopyridyl)。本發(fā)明化合物中適當(dāng)?shù)碾s脂環(huán)基具 有選自N、0或S原子的一個、兩個或三個雜原子，并且包括例如，吡咯烷基、四氫呋喃基、二 氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫噻喃基、哌啶基、嗎啉基、硫代嗎啉基、噻噁烷基、哌嗪基、氮雜 環(huán)丁烷基、氧雜環(huán)丁烷基、硫雜環(huán)丁烷基(thietanyl)、高哌啶基(homopiperidyl)、氧雜環(huán) 庚烷基(ox印anyl)、硫雜環(huán)庚烷基(thi印anyl)、氧氮雜卓基(oxaz印inyl)、二氮雜卓基 (diazepinyl)、噻氮雜卓基(thiaz印inyl)、1，2，3,6-四氫吡啶基、2_吡咯啉基、3-吡咯啉 基、二氫吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二噁烷基、1，3-二氧戊環(huán)基、吡唑啉基、二噻烷基、 二硫戊環(huán)基、二氫吡喃基、二氫噻吩基、二氫呋喃基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮雜 二環(huán)[3. 1. 0]己基、3-氮雜二環(huán)[4. 1. 0]庚基、3H-吲哚基和喹嗪基。雜環(huán)基烷基為由雜環(huán)基取代的烷基，其中烷基和雜環(huán)基為如上文所定義的?？梢允股鲜龌鶊F(tuán)在一個或多個有效的位置被一個或多個適當(dāng)?shù)幕鶊F(tuán)取代，所述適 當(dāng)?shù)幕鶊F(tuán)例如，OR，、= 0、SR，、S0R，、S02R，、N02、NHR，、N(R，)2、= N-R，、NHC0R，、N(C0R，)2、 NHSO2R', NR' C( = NR，)NR，R，、CN、鹵素、COR，、C00R，、0C0R，、0C0NHR，、0C0N (R，)2、受保護(hù) 的OH、受保護(hù)的氨基、受保護(hù)的SH、取代或未取代的芳基以及取代或未取代的雜環(huán)基，其中 每一 R’基團(tuán)獨(dú)立地選自氫、OH、NO2, NH2, SH、CN、鹵素、C0H、CO烷基、CO2H、取代或未取代的 C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基 以及取代或未取代的雜環(huán)基。當(dāng)這樣的基團(tuán)自身被取代時，取代基可以選自以上所列。本發(fā)明化合物中適當(dāng)?shù)柠u素取代基包括F、Cl、Br和I。適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基團(tuán)為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知。Wuts，P. G. Μ.和GreeneT. W.在 Protecting groups in Organic Synthesis,4th Ed.(有機(jī)合成的保護(hù)基團(tuán)，第四版) Wiley-Interscience 中以及由 Kocienski P. J.在Protecting Groups, 3rd Ed.(保護(hù)基團(tuán)，第三版)Ge0rg Thieme Verlag中提供了有機(jī)化學(xué)中保護(hù)基團(tuán)的概述。這些參考文獻(xiàn)提供了 0H、氨基和SH基團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)的章節(jié)。所有這些參考文獻(xiàn)以引用的方式整體并入本文。這 樣的受保護(hù)的OH的實(shí)例包括醚、甲硅烷基醚、酯、磺酸酯、次磺酸酯和亞磺酸酯、碳酸酯和 氨基甲酸酯。在醚的情況下，OH的保護(hù)基團(tuán)能夠選自甲基、甲氧基甲基、甲硫基甲基、(苯基 二甲基甲硅烷基)甲氧基甲基、芐氧基甲基、對甲氧基芐氧基甲基、[(3，4_ 二甲氧基芐基) 氧基]甲基、對硝基芐氧基甲基、鄰硝基芐氧基甲基、[(R)-I-(2-硝基苯基)乙氧基]甲 基、(4-甲氧基苯氧基)甲基、愈創(chuàng)木酚甲基(gimiaC0lmethyl)、[(對苯基苯基)氧基]甲 基、叔丁氧基甲基、4-戊烯氧基甲基、甲硅烷氧基甲基、2-甲氧基乙氧基甲基、2-氰乙氧基 甲基、雙(2-氯乙氧基)甲基、2，2，2_三氯乙氧基甲基、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基、 薄荷氧基甲基、鄰雙(2-乙酰氧基乙氧基)甲基、四氫吡喃基、氟四氫吡喃基、3-溴四氫吡 喃基、四氫噻喃基、1-甲氧基環(huán)己基、4-甲氧基四氫吡喃基、4-甲氧基四氫噻喃基、4-甲氧 基四氫噻喃基S，S-二氧化物、1-[ (2-氯-4-甲基)苯基]-4-甲氧基哌啶-4-基、1-(2-氟 苯基)-4-甲氧基哌啶-4-基、1-(4-氯苯基)-4-甲氧基哌啶-4-基、1，4- 二噁烷-2-基、 四氫呋喃基、四氫噻喃基、2，3，3a，4，5，6，7，7a-八氫_7，8，8-三甲基-4，7-亞甲基苯并呋 喃-2-基、1-乙氧基乙基、1-(2-氯乙氧基)乙基、2-羥基乙基、2-溴乙基、1- [2-(三甲基甲 硅烷基)乙氧基]乙基、ι-甲基-ι-甲氧基乙基、ι-甲基-ι-芐氧基乙基、ι-甲基-ι-芐 氧基-2-氟乙基、1-甲基-1-苯氧基乙基、2，2，2-三氯乙基、1，1-聯(lián)茴香基(dianisyl) -2， 2，2-三氯乙基、1，1，1，3，3，3-六氟-2-苯基異丙基、1-(2-氰乙氧基)乙基、2-三甲基甲 硅烷基乙基、2-(芐硫基)乙基、2-苯基硒基)乙基、叔丁基、環(huán)己基、1-甲基-1’ -環(huán)丙基 甲基、烯丙基、異戊二烯基、肉桂基、2-苯烯丙基(phenallyl)、炔丙基、對氯苯基、對甲氧基 苯基、對硝基苯基、2，4_ 二硝基苯基、2，3，5，6_四氟-4-(三氟甲基)苯基、芐基、對甲氧基 芐基、3，4_ 二甲氧基芐基、2，6_ 二甲氧基芐基、鄰硝基芐基、對硝基芐基、戊二烯基硝基芐 基、戊二烯基硝基胡椒基、鹵代芐基、2，6-二氯芐基、2，4-二氯芐基、2，6-二氟芐基、對氰基 芐基、氟芐基、4-氟烷氧基芐基、三甲基甲硅烷基二甲苯基、對苯基芐基、2-苯基-2-丙基、 對?；被S基、對疊氮芐基、4-疊氮-3-氯芐基、2-三氟甲基芐基、4-三氟甲基芐基、對 (甲基亞磺?；?芐基、對硅雜環(huán)丁烷基(siletanyl)芐基、4-乙酰氧基芐基、4_(2_三甲 基甲硅烷基)乙氧基甲氧基芐基、2-萘基甲基、2-吡啶甲基、4-吡啶甲基、3-甲基-2-吡啶 甲基N-氧橋、2-喹啉基甲基、6-甲氧基-2-(4-甲基苯基-4-喹啉甲基、1-芘基甲基、二苯 基甲基、4-甲氧基二苯基甲基、4-苯基二苯基甲基、p，p’ - 二硝基二苯甲基、5-二苯并環(huán)庚 基、三苯基甲基、三(4-叔丁基苯基)甲基、a-萘基二苯基甲基、對甲氧基苯基二苯基甲基、 二(對甲氧基苯基)苯基甲基、三(對甲氧基苯基)甲基、4-(4’ -溴苯甲酰甲氧基)苯基 二苯基甲基、4，4，，4”_三(4，5_ 二氯鄰苯二甲酰亞氨基苯基)甲基、4，4，，4”_三(乙酰 丙酰氧基(levulinoyloxy)苯基)甲基、4，4，，4”-三(苯甲酰氧基苯基)甲基、4，4，- 二 甲氧基-3”-[N-(咪唑基甲基)]三苯甲基、4，4，- 二甲氧基-3”-[N-(咪唑基乙基)氨基 甲?；鵠三苯甲基、雙(4-甲氧基苯基)-1，-芘基甲基、4-(17_四苯并[a，c，g，i]芴基甲 基)-4，4”_ 二甲氧基三苯甲基、9-蒽基、9-(9_苯基)咕噸基、9-苯硫基咕噸基、9-(9_苯 基-10-氧代)蒽基、1，3_苯并二硫戊環(huán)-2-基和4，5_雙(乙氧基羰基)-[1，3]_ 二氧戊 環(huán)-2-基、苯并異噻唑基S，S-二氧化物。在甲硅烷基醚的情況下，OH的保護(hù)基團(tuán)能夠選 自三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、三異丙基甲硅烷基、二甲基異丙基甲硅烷基、二乙基異丙基甲硅烷基、二甲基己基甲硅烷基、2-降冰片基二甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷 基、叔丁基二苯基甲硅烷基、三芐基甲硅烷基、三-對二甲苯基甲硅烷基、三苯基甲硅烷基、 二苯基甲基甲硅烷基、二-叔丁基甲基甲硅烷基、雙(叔丁基)-1_芘基甲氧基甲硅烷基、三 (三甲基甲硅烷基)甲硅烷基、(2-羥基苯乙烯基)二甲基甲硅烷基、(2-羥基苯乙烯基)二 異丙基甲硅烷基、叔丁基甲氧基苯基甲硅烷基、叔丁氧基二苯基甲硅烷基、1，1，3，3_四異丙 基-3-[2-(三苯基甲氧基)乙氧基]二硅氧烷-1-基和氟甲硅烷基。在酯的情況下，OH的 保護(hù)基團(tuán)能夠選自甲酸酯、甲酸苯甲酰酯、乙酸酯、氯乙酸酯、二氯乙酸酯、三氯乙酸酯、三 氯乙酰胺酯(trichloroacetamidate)、三氟乙酸酯、甲氧基乙酸酯、三苯基甲氧基乙酸酯、 苯氧基乙酸酯、對氯苯氧基乙酸酯、乙酸苯酯、乙酸二苯酯、3-丙酸苯酯、雙氟鏈?zhǔn)奖；?(bisfluorous chain type propanoyl)、4_ 戊烯酸酯、4_ 氧代戊酸酯、4，4_ (乙烯二硫代) 戊酸酯、5[3_雙(4-甲氧基苯基)羥基甲基苯氧基]乙酰丙酸酯、新戊酸酯(pivaloate)、 1-金剛酸酯(1-adamantoate)、巴豆酸酯、4-甲氧基巴豆酸酯、苯甲酸酯、對苯基苯甲酸酯、 2，4，6-三甲基苯甲酸酯、4-溴苯甲酸酯、2，5-二氟苯甲酸酯、對硝基苯甲酸酯、卩比啶甲酸 酯、煙酸酯、2_(疊氮甲基)苯甲酸酯、4-疊氮丁酸酯、(2-疊氮甲基)苯基乙酸酯、2-{[(三 苯甲基巰基(tritylthio))氧基]甲基}苯甲酸酯、2-{[(4_甲氧基三苯甲基巰基)氧基] 甲基}苯甲酸酯、2-{[甲基(三苯甲基巰基)氨基]甲基}苯甲酸酯、2-{{[(4_甲氧基三 苯甲基)巰基]甲基氨基}_甲基}苯甲酸酯、2_(烯丙氧基)苯基乙酸酯、2-(異戊二烯氧 基甲基)苯甲酸酯、6-(乙酰丙酰氧基甲基(leVulinyl0Xymethyl))-3-甲氧基_2_硝基苯 甲酸酯、6-(乙酰丙酰氧基甲基)-3-甲氧基-4-硝基苯甲酸酯、4-芐氧基丁酸酯、4-三烷基 甲硅烷氧基丁酸酯、4-乙酰氧基-2，2-二甲基丁酸酯、2，2_二甲基-4-戊烯酸酯、2-碘苯甲 酸酯、4-硝基-4-甲基戊酸酯、鄰(二溴甲基)苯甲酸酯、2-甲酰苯磺酸酯、4-(甲硫基甲氧 基)丁酸酯、2_(甲硫基甲氧基甲基)苯甲酸酯、2-(氯乙酰氧基甲基)苯甲酸酯、2-[(2_氯 乙酰氧基)乙基]苯甲酸酯、2-[2-(芐氧基)乙基]苯甲酸酯、2-[2-(4_甲氧基芐氧基)乙 基]苯甲酸酯、2，6- 二氯-4-甲基苯氧基乙酸酯、2，6- 二氯-4- (1，1，3，3-四甲基丁基)苯 氧基乙酸酯、2，4_雙(1，1_二甲基丙基)苯氧基乙酸酯、氯二苯基乙酸酯、異丁酸酯、單琥珀 酸酯(m0n0SUCCin0ate)、(E)-2-甲基-2-丁烯酸酯、鄰(甲氧基羰基)苯甲酸酯、萘甲酸 酯、硝酸酯、烷基N，N，N’，N’ -四甲基二氨基磷酸酯和2-氯苯甲酸酯。在磺酸酯、次磺酸酯 和亞磺酸酯的情況下，OH的保護(hù)基團(tuán)能夠選自硫酸酯、烯丙基磺酸酯、甲磺酸酯、芐基磺酸 酯、甲苯磺酸酯、2_[ (4-硝基苯基)乙基]磺酸酯、2-三氟甲基苯磺酸酯、4-單甲氧基三苯 甲基次磺酸酯、烷基2，4- 二硝基苯基次磺酸酯、2，2，5，5-四甲基吡咯烷-3-酮-1-亞磺酸 酯、硼酸酯和二甲基硫膦基(dimethylphosphinothiolyl)。在碳酸酯的情況下，OH的保護(hù) 基團(tuán)能夠選自甲基碳酸酯、甲氧基甲基碳酸酯、9-芴基甲基碳酸酯、乙基碳酸酯、溴乙基碳 酸酯、2-(甲硫基甲氧基)乙基碳酸酯、2，2，2_三氯乙基碳酸酯、1，1_ 二甲基-2，2，2-三氯 乙基碳酸酯、2_(三甲基甲硅烷基)乙基碳酸酯、2-[二甲基(2-萘基甲基)甲硅烷基]乙 基碳酸酯、2_(苯基磺酰基)乙基碳酸酯、2-(三苯基磷鐺基)乙基碳酸酯、順式_[4-[[(甲 氧基三苯甲基)亞磺酰]氧基]四氫呋喃-3-基]氧基碳酸酯、異丁基碳酸酯、叔丁基碳酸 酯、乙烯基碳酸酯、烯丙基碳酸酯、肉桂基碳酸酯、炔丙基碳酸酯、對氯苯基碳酸酯、對硝基 苯基碳酸酯、4-乙氧基-1-萘基碳酸酯、6-溴-7-羥基香豆素-4-基甲基碳酸酯、芐基碳酸 酯、鄰硝基芐基碳酸酯、對硝基芐基碳酸酯、對甲氧基芐基碳酸酯、3，4_ 二甲氧基芐基碳酸酯、蒽醌-2-基甲基碳酸酯、2-丹酰乙基碳酸酯、2-(4-硝基苯基)乙基碳酸酯、2-(2，4- 二 硝基苯基)乙基碳酸酯、2-(2_硝基苯基)丙基碳酸酯、烷基2-(3，4-亞甲基二氧基-6-硝 基苯基)丙基碳酸酯、2-氰基-1-苯基乙基碳酸酯、2-(2_吡啶基)氨基-1-苯基乙基碳酸 酯、2-[N-甲基-N-(2-吡啶基)]氨基-1-苯基乙基碳酸酯、苯甲酰甲基碳酸酯、3’，5’ - 二 甲氧基苯偶姻碳酸酯、甲基二硫代碳酸酯和S-芐基硫代碳酸酯。在氨基甲酸酯的情況下， OH的保護(hù)基團(tuán)能夠選自二甲硫基氨基甲酸酯、N-苯基氨基甲酸酯、N-甲基-N-(鄰硝基苯 基)氨基甲酸酯。 受保護(hù)的氨基的實(shí)例包括氨基甲酸酯、脲、酰胺、雜環(huán)體系、N-烷基胺、N-烯基胺、 N-炔基胺、N-芳基胺、亞胺、烯胺、N-金屬衍生物、N-N衍生物、N-P衍生物、N-Si衍生物和 N-S衍生物。在氨基甲酸酯的情況下，氨基的保護(hù)基團(tuán)能夠選自氨基甲酸甲酯、氨基甲酸乙 酯、9-芴基甲基氨基甲酸酯、2，6_二-叔丁基-9-芴基甲基氨基甲酸酯、2，7_雙(三甲基甲 硅烷基)芴基甲基氨基甲酸酯、9-(2_磺基)芴基甲基氨基甲酸酯、9-(2，7_二溴)芴基甲基 氨基甲酸酯、17-四苯并[a，c, g，i]芴基甲基氨基甲酸酯、2-氯-3-茚基甲基氨基甲酸酯、 苯并[f]茚-3-基甲基氨基甲酸酯、1，1-二氧代苯并[b]噻吩-2-基甲基氨基甲酸酯、2-甲 基磺酰基-3-苯基-1-丙-2-烯氧基氨基甲酸酯、2，7_二-叔丁基-[9，(10，10-二氧代-10， 10，10，10-四氫噻噸基(thioxanthyl))]甲基氨基甲酸酯、2，2，2-三氯乙基氨基甲酸酯、 2-三甲基甲硅烷基乙基氨基甲酸酯、(2-苯基-2-三甲基甲硅烷基)乙基氨基甲酸酯、2-苯 基乙基氨基甲酸酯、2-氯乙基氨基甲酸酯、1，1- 二甲基-2-鹵乙基氨基甲酸酯、1，1- 二甲 基-2，2-二溴乙基氨基甲酸酯、1，1_ 二甲基-2，2，2-三氯乙基氨基甲酸酯、2-(2，_吡啶基) 乙基氨基甲酸酯、2-(4’_吡啶基)乙基氨基甲酸酯、2，2_雙(4’-硝基苯基)乙基氨基甲酸 酯、2-[(2_硝基苯基)二硫代]-1-苯基乙基氨基甲酸酯、2-(N，N-二環(huán)己基甲酰胺基)乙 基氨基甲酸酯、叔丁基氨基甲酸酯、C8F19CH2CH2C (CH3) 2_氨基甲酸酯、1-金剛烷基氨基甲酸 酯、2-金剛烷基氨基甲酸酯、1-(1_金剛烷基)-1_甲基乙基氨基甲酸酯、1-甲基-l-(4-聯(lián) 苯基(byphenylyl))乙基氨基甲酸酯、1_ (3，5_ 二-叔丁基苯基)甲基乙基氨基甲酸 酯、三異丙基甲硅烷氧基氨基甲酸酯、氨基甲酸乙烯酯、氨基甲酸烯丙酯、氨基甲酸異戊二 烯酯、1-異丙基烯丙基氨基甲酸酯、氨基甲酸肉桂酯、4-硝基肉桂基氨基甲酸酯、3-(3’_吡 啶基)丙-2-烯基氨基甲酸酯、己二烯氧基氨基甲酸酯(hexadienyloxycarbamate)、炔丙氧 基氨基甲酸酯、丁-2-炔雙氧基氨基甲酸酯、8-喹啉基氨基甲酸酯、N-羥基哌啶基氨基甲酸 酯、烷基二硫代氨基甲酸酯、芐基氨基甲酸酯、3，5-二-叔丁基芐基氨基甲酸酯、對甲氧基 芐基氨基甲酸酯、對硝基芐基氨基甲酸酯、對溴芐基氨基甲酸酯、對氯芐基氨基甲酸酯、2， 4_ 二氯芐基氨基甲酸酯、4-甲基亞磺?；S基氨基甲酸酯、4-三氟甲基芐基氨基甲酸酯、 C8F17CH2CH2-氨基甲酸酯、(C8F17CH2CH2) 3Si_氨基甲酸酯、2-萘基甲基氨基甲酸酯、9-蒽基甲 基氨基甲酸酯、二苯基甲基氨基甲酸酯、4-苯基乙酰氧基芐基氨基甲酸酯、4-疊氮芐基氨 基甲酸酯、4-疊氮甲氧基芐基氨基甲酸酯、間氯-對酰氧基芐基氨基甲酸酯、對(二羥基硼 基)芐基氨基甲酸酯、5-苯并異噁唑基甲基氨基甲酸酯、2-(三氟甲基)-6_色酮基甲基氨 基甲酸酯、2-甲硫基乙基氨基甲酸酯、2-甲基磺?；一被姿狨ァ?-(對甲苯磺?；? 乙基氨基甲酸酯、2- (4-硝基苯基磺酰基)乙基氨基甲酸酯、2- (2，4- 二硝基苯基磺?；? 乙氧基氨基甲酸酯、2-(4_三氟甲基苯基磺?；?乙基氨基甲酸酯、[2-(1，3_ 二噻烷基)] 甲基氨基甲酸酯、2-磷鐺基乙基氨基甲酸酯、2-[苯基(甲基)锍基]乙基氨基甲酸酯、
121-甲基-1-(三苯基磷鐺基)乙基氨基甲酸酯、1，1_二甲基-2-氰乙基氨基甲酸酯、2-丹酰 乙基氨基甲酸酯、2-(4_硝基苯基)乙基氨基甲酸酯、4-甲基-苯硫基氨基甲酸酯、2，4_ 二 甲硫基苯基氨基甲酸酯、間硝基苯基氨基甲酸酯、3，5_ 二甲氧基芐基氨基甲酸酯、1-甲 基-l-(3，5-二甲氧基苯基)乙基氨基甲酸酯、a-甲基硝基胡椒基氨基甲酸酯、鄰硝基芐基 氨基甲酸酯、3，4_ 二甲氧基-6-硝基芐基氨基甲酸酯、苯基(鄰硝基苯基)甲基氨基甲酸 酯、2-硝基苯基乙基氨基甲酸酯、6-硝基藜蘆基氨基甲酸酯、4-甲氧基苯甲酰甲基氨基甲 酸酯、3’，5’- 二甲氧基苯偶姻氨基甲酸酯、9-咕噸基甲基氨基甲酸酯、N-甲基-N-(鄰硝基 苯基)氨基甲酸酯、N-(2-乙酰氧基乙基)氨基甲酸酯、叔戊基氨基甲酸酯、1-甲基環(huán)丁基 氨基甲酸酯、ι-甲基環(huán)己基氨基甲酸酯、ι-甲基-ι-環(huán)丙基甲基氨基甲酸酯、環(huán)丁基氨基甲 酸酯、環(huán)戊基氨基甲酸酯、環(huán)己基氨基甲酸酯、異丁基氨基甲酸酯、異冰片基氨基甲酸酯、環(huán) 丙基甲基氨基甲酸酯、對癸氧基芐基氨基甲酸酯、二異丙基甲基氨基甲酸酯、2，2_ 二甲氧基 羰基乙烯基氨基甲酸酯、鄰(N，N-二甲基甲酰胺基)芐基氨基甲酸酯、1，1_ 二甲基-3-(N， N-二甲基甲酰胺基)丙基氨基甲酸酯、丁炔基氨基甲酸酯、1，1_二甲基丙炔基氨基甲酸酯、
2-碘乙基氨基甲酸酯、1-甲基-1-(4’_吡啶基)乙基氨基甲酸酯、1-甲基-1-(對苯基苯偶 氮基)乙基氨基甲酸酯、對(P’ -甲氧基苯偶氮基)芐基氨基甲酸酯、對(苯偶氮基)芐基氨 基甲酸酯、2，4，6_三甲基芐基氨基甲酸酯、異煙?；被姿狨?、4-(三甲基-銨)芐基氨 基甲酸酯、對氰基芐基氨基甲酸酯、二(2-吡啶基)甲基氨基甲酸酯、2-呋喃基甲基氨基甲 酸酯、苯基氨基甲酸酯、2，4，6_三-叔丁基苯基氨基甲酸酯、1-甲基-1-苯基乙基氨基甲酸 酯和S-芐基硫代氨基甲酸酯。在脲的情況下，氨基的保護(hù)基團(tuán)能夠選自吩噻嗪基-(10)-羰 基、N’-對甲苯磺?；被驶?、N’-苯基胺基硫代-羰基、4-羥基苯基氨基羰基、3-羥基色 胺基羰基(hydroxytryptaminocarbonyl)和N’ -苯基-氨基硫代羰基。在酰胺的情況下， 氨基的保護(hù)基團(tuán)能夠選自甲酰胺、乙酰胺、氯乙酰胺、三氯乙酰胺、三氟乙酰胺、苯基乙酰 胺、3-苯基丙酰胺、戊-4-烯基酰胺、吡啶酰胺、3-吡啶基氨甲酰胺(pyridylcarboxamide)、 N-苯甲酰苯丙氨?；⒈郊柞０?、對苯基苯甲酰胺、鄰硝基苯基乙酰胺、2，2_ 二甲基-2-(鄰 硝基苯基)乙酰胺、鄰硝基苯氧基乙酰胺、3-(鄰硝基苯基)丙酰胺、2-甲基-2-(鄰硝基 苯氧基)丙酰胺、3-甲基-3-硝基丁酰胺、鄰硝基肉桂酰胺、鄰硝基苯甲酰胺、3-(4_叔丁 基-2，6-二硝基苯基)-2，2_二甲基丙酰胺、鄰苯甲酰氧基甲基)苯甲酰胺、2-(乙酰氧基甲 基)苯甲酰胺、2_[(叔丁基二苯基甲硅烷氧基)甲基]苯甲酰胺、3-(3’，6’ - 二氧代-2’， 4，，5，-三甲基環(huán)己_1，，4，- 二烯)-3，3_ 二甲基丙酰胺、鄰羥基-反式-肉桂酰胺、2-甲 基-2-(鄰苯偶氮基苯氧基)丙酰胺、4-氯丁酰胺、乙酰乙酰胺、3-(對羥基苯基)丙酰胺、 (N’ - 二硫代芐氧基羰基氨基)乙酰胺和N-乙?；鞍滨０?。在雜環(huán)體系的情況下，氨基 的保護(hù)基團(tuán)能夠選自4，5- 二苯基-3-噁唑啉-2-酮、N-苯鄰二甲酰亞胺、N- 二氯苯鄰二甲 酰亞胺、N-四氯苯鄰二甲酰亞胺、N-4-硝基苯鄰二甲酰亞胺、N-硫二甘醇基、N- 二硫雜琥 珀酰亞胺、N-2，3-二苯基馬來酰亞胺、N-2，3-二甲基馬來酰亞胺、N-2，5-二甲基吡咯、N-2， 5-雙(三異丙基甲硅烷氧基)吡咯、N-1,1,4,4-四甲基二甲硅烷基氮雜環(huán)戊烷加合物、 N-1, 1，3，3-四甲基-1,3- 二硅雜異吲哚啉(disilaisoindoline)、N_ 二苯基甲硅烷基二乙 烯、N-5-取代的-1，3- 二甲基-1，3，5-三氮雜環(huán)己-2-酮、N-5-取代的-1,3-芐基-1,3, 5-三氮雜環(huán)己-2-酮、1-取代的3，5- 二硝基-4-吡啶酮和1，3，5- 二噁嗪。在N-烷基胺、 N-烯基胺、N-炔基胺或N-芳基胺的情況下，氨基的保護(hù)基團(tuán)能夠選自N-甲基、N-叔丁基、N-烯丙基、N-異戊二烯基、N-肉桂基、N-苯基烯丙基、N-炔丙基、N-甲氧基甲基、N-[2-(三 甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基、N-3-乙酰氧基丙基、N-氰基甲基、2-氮雜降冰片烯、N-芐基、 N-4-甲氧基芐基、N-2，4- 二甲氧基芐基、N-2-羥基芐基、N- 二茂鐵基甲基、N-2，4- 二硝基 苯基、鄰甲氧基苯基、對甲氧基苯基、N-9-苯基芴基、N-芴基、N-2-吡啶甲基胺N’ -氧化物、 N-7-甲氧基香豆-4-基甲基、N-二苯基甲基、N-雙(4-甲氧基苯基)甲基、N-5-二苯并環(huán)庚 基、N-三苯基甲基、N-(4-甲基苯基)二苯基甲基和N-(4-甲氧基苯基)二苯基甲基。在亞 胺的情況下，氨基的保護(hù)基團(tuán)能夠選自N-l，l-二甲硫基亞甲基、N-苯亞甲基、N-對甲氧基 苯亞甲基、N-二苯基亞甲基、N-[2-吡啶基)-2，4，6_三甲苯基(mesityl)]亞甲基、N_(N’， N’ - 二甲基氨基亞甲基)、N- (N’，N’ - 二芐基氨基亞甲基)、N- (N’ -叔丁基氨基亞甲基)、 N，N’ -異亞丙基、N-對硝基苯亞甲基、N-亞水楊基、N-5-氯亞水楊基、N-(5-氯-2-羥基 苯基)苯基亞甲基、N-亞環(huán)己基和N-叔亞丁基。在烯胺的情況下，氨基的保護(hù)基團(tuán)能夠選 自N- (5，5- 二甲基-3-氧代-1-環(huán)己烯基)、N-2，7- 二氯-9-芴基亞甲基、N-I- (4，4- 二甲 基-2，6- 二氧代亞環(huán)己基)乙基、N- (1，3- 二甲基-2，4，6- (1H，3H，5H)-三氧代嘧啶-5-基 亞基)甲基、N-4，4，4-三氟-3-氧代-1- 丁烯基和N- (1-異丙基-4-硝基-2-氧代-3-吡 咯啉-3-基)。在N-金屬衍生物的情況下，氨基的保護(hù)基團(tuán)能夠選自N-二苯基二取代硼 酸(borinic acid)、N-二乙基二取代硼酸、N-9-硼二環(huán)壬烷、N-二氟二取代硼酸和3，5-雙 (三氟甲基)苯基硼酸；并且還包括N-[苯基(五羰基鉻)]卡賓基、N-[苯基(五羰基鎢)] 卡賓基、N-[甲基(五羰基鉻)]卡賓基、N-[甲基(五羰基鎢)]_卡賓基、N-銅螯合物、N-鋅 螯合物和18-冠-6-衍生物。在N-N衍生物的情況下，氨基的保護(hù)基團(tuán)能夠選自N-硝基、 N-亞硝基、N-氧化物、疊氮化物、三氮烯和N-三甲基甲硅烷基甲基-N-芐基胼。在N-P衍 生物的情況下，氨基的保護(hù)基團(tuán)能夠選自N-二苯基次膦酰胺(phosphinamide)、二甲硫基 次膦酰胺、二苯硫基次膦酰胺、二烷基氨基磷酸酯(phosphoramidate)、二芐基氨基磷酸酯、 二苯基氨基磷酸酯和亞氨基三苯基正膦。在N-Si衍生物的情況下，NH2的保護(hù)基團(tuán)能夠選 自叔丁基二苯基甲硅烷基和三苯基甲硅烷基。在N-S衍生物的情況下，氨基的保護(hù)基團(tuán)能 夠選自N-亞磺?；苌锘騈-磺?；苌铩-亞磺?；苌锬軌蜻x自苯亞磺酰胺、 2-硝基苯亞磺酰胺、2，4_二硝基苯亞磺酰胺、五氯苯亞磺酰胺、2-硝基-4-甲氧基苯亞磺酰 胺(sulfanamide)、三苯基甲基亞磺酰胺、1-(2，2，2)-三氟-1，1-二苯基)乙基亞磺酰胺和 N-3-硝基-2-吡啶亞磺酰胺。N-磺?；苌锬軌蜻x自甲烷磺酰胺、三氟甲烷磺酰胺、叔丁 基磺酰胺、芐基磺酰胺、2_(三甲基甲硅烷基)乙烷磺酰胺、對甲苯磺酰胺、苯磺酰胺、茴香 基磺酰胺、2-硝基苯磺酰胺、4-硝基苯磺酰胺、2，4- 二硝基苯磺酰胺、2-萘磺酰胺、4-(4’， 8’-二甲氧基萘基甲基)苯磺酰胺、2-(4_甲基苯基)-6_甲氧基-4-甲基磺酰胺、9-蒽磺酰 胺、吡啶-2-磺酰胺、苯并噻唑-2-磺酰胺、苯甲酰甲基磺酰胺、2，3，6_三甲基-4-甲氧基苯 磺酰胺、2，4，6_三甲氧基苯磺酰胺、2，6_ 二甲基-4-甲氧基苯磺酰胺、五甲基苯磺酰胺、2， 3，5，6-四甲基-4-甲氧基苯磺酰胺、4-甲氧基苯磺酰胺、2，4，6-三甲基苯磺酰胺、2，6- 二 甲氧基-4-甲基苯磺酰胺、3-甲氧基-4-叔丁基苯磺酰胺和2，2，5，7，8-五甲基苯并二氫 吡喃-6-磺酰胺。這樣的受保護(hù)的SH的實(shí)例包括硫醚、二硫化物、甲硅烷基硫醚、硫酯、硫 代碳酸酯和硫代氨基甲酸酯。在硫醚的情況下，SH的保護(hù)基團(tuán)能夠選自S-烷基、S-芐基、 S-乙酰氨基甲基(Acm)、S-對甲氧基芐基、S-鄰羥基芐基、S-對羥基芐基、S-鄰甲氧基芐 基、S-對甲氧基芐基、S-對硝基芐基、S-鄰硝基芐基、S-2，4，6-三甲氧基芐基、S-4-吡啶甲基、S-2-吡啶甲基-N-氧化物、S-2-喹啉基甲基、S-9-蒽基甲基、S-9-芴基甲基、S-咕 噸基、S-二茂鐵基甲基、S-二苯基甲基、S-雙(4-甲氧基苯基)甲基、S-5-二苯并環(huán)庚基、 S-三苯基甲基、4-甲氧基三苯甲基、S- 二苯基-4-吡啶基甲基、S-2，4- 二硝基苯基、S-2-喹 啉基、S-叔丁基、S-I-金剛烷基、S-甲氧基甲基單縮硫醛、S-異丁氧基甲基單縮硫醛、S-芐 氧基甲基、S-I-乙氧基乙基、S-四氫吡喃基單縮硫醛、S-芐硫基甲基二硫縮醛、噻唑烷衍 生物、S-乙酰氨基甲基氨基硫縮醛、S-三甲基乙酰氨基甲基氨基硫縮醛、S-苯甲酰氨基甲 基氨基硫縮醛、S-烯丙氧基羰基氨基甲基、S-N-[2，3，5，6-四氟-4-(N’ -哌啶子基)-苯 基-N-烯丙氧基羰基氨基甲基、S-鄰苯二甲酰亞氨基甲基、S-苯基乙酰氨基甲基、S-(2-硝 基-1-苯基)乙基、S-2-(2，4-二硝基苯基)乙基、S-2-(4，-吡啶基)乙基、S-2-氰基乙 基、S-2-(三甲基甲硅烷基)乙基、S-2，2-雙(乙氧甲酰)乙基、S-(1-間硝基苯基-2-苯 甲?；?乙基、S-2-苯基磺?；一-I-(4-甲基苯基磺?；?-2-甲基丙-2-基和S-對 羥基苯甲酰甲基。在二硫化物的情況下，SH的保護(hù)基團(tuán)能夠選自S-S-tBu[S-(叔丁基硫烷 基)半胱氨酸、S-S-叔丁基)和S-Npys (S-3-硝基-2-吡啶亞磺酰基)。在甲硅烷基硫醚 的情況下，SH的保護(hù)基團(tuán)能夠選自上述列出的用于保護(hù)OH的甲硅烷基醚的基團(tuán)。在硫酯 的情況下，SH的保護(hù)基團(tuán)能夠選自S-乙?；-苯甲?；?、S-2-甲氧基異丁?；?、S-三氟 乙?；-N-[[對聯(lián)苯基)異丙氧基]羰基]-N-甲基-Y-氨基硫代丁酸酯和S-N-(叔丁 氧基羰基)-N-甲基-γ -氨基硫代丁酸酯。在硫代碳酸酯的情況下，SH的保護(hù)基團(tuán)能夠選 自S-2, 2，2-三氯乙氧基羰基、S-叔丁氧基羰基、S-芐氧基羰基、S-對甲氧基芐氧基羰基和 S-芴基甲基羰基。在硫代氨基甲酸酯的情況下，SH的保護(hù)基團(tuán)能夠選自S-(N-乙基氨基甲 酸酯)和S-(N-甲氧基甲基氨基甲酸酯)。不應(yīng)當(dāng)將提及的這些基團(tuán)理解為對本發(fā)明范圍 的限制，因?yàn)樗鼈儍H例示0H、氨基和SH基團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)，但具有所述官能的基團(tuán)其它基團(tuán) 可以為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知，并且它們也被認(rèn)為包括在本發(fā)明內(nèi)。術(shù)語“藥物可接受的鹽”、“衍生物”和“前藥”是指任何藥物可接受的鹽、酯、溶劑 合物、水合物或在施用于患者時能夠(直接地或間接地)提供本文所述化合物的任何其它 化合物。然而，應(yīng)當(dāng)理解非藥物可接受的鹽也在本發(fā)明的范圍內(nèi)，因?yàn)槟切┓撬幬锟山邮艿?鹽可以用于制備藥物可接受的鹽。能夠通過本領(lǐng)域已知的方法來制備鹽、前藥和衍生物。例如，通過常規(guī)的化學(xué)方法，從包含堿性或酸性部分的母體化合物來合成本文提 供的化合物的藥物可接受的鹽。通常，例如在水中或在有機(jī)溶劑中或在水與有機(jī)溶劑的混 合物中，通過使游離酸形式或游離堿形式的這些化合物與化學(xué)計算量的適當(dāng)堿或酸反應(yīng)來 制備這樣的鹽。通常，優(yōu)選如醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈的非水介質(zhì)。酸加成鹽的實(shí) 例包括無機(jī)酸加成鹽，例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽；以及有機(jī) 酸加成鹽，例如乙酸鹽、三氟乙酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、檸檬酸鹽、草酸鹽、琥珀酸鹽、酒 石酸鹽、蘋果酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽和對甲苯磺酸鹽。堿加成鹽的實(shí)例包括無機(jī)鹽，例如 鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽和銨鹽；以及有機(jī)堿鹽，例如諸如乙二胺、乙醇胺、N, N-二烯基乙醇胺、三 乙醇胺和堿性氨基酸鹽。本發(fā)明的化合物可以為游離化合物或溶劑合物(例如水合物)的結(jié)晶形式，并且 兩種形式均在本發(fā)明范圍內(nèi)。在本領(lǐng)域內(nèi)，溶劑化的方法通常是已知的。通式I化合物前藥的任何化合物在本發(fā)明的范圍和精神內(nèi)。術(shù)語“前藥”以其最 廣泛的含義的使用，并包括在體內(nèi)被轉(zhuǎn)化為本發(fā)明化合物的那些衍生物。這樣的衍生物容易被本領(lǐng)域技術(shù)人員所想起，并且包括例如游離羥基被轉(zhuǎn)化為酯的化合物。本文提及的任何化合物旨在表示這樣的特殊化合物以及某些變化或形式。特別 地，本文提及的化合物可以具有不對稱中心，并因此存在不同的對映異構(gòu)體形式。本文提及 的化合物的所有旋光異構(gòu)體和立體異構(gòu)體及它們的混合物被認(rèn)為在本發(fā)明范圍內(nèi)。因此本 文提及的任何給定的化合物旨在表示任一外消旋體、一種或多種對映異構(gòu)體形式、一種或 多種非對映異構(gòu)形式、一種或多種阻轉(zhuǎn)異構(gòu)形式以及它們的混合物。特別地，由上述通式I 表示的本發(fā)明的化合物可以包括取決于它們的不對稱性的對映異構(gòu)體或非對映異構(gòu)體。雙 鍵的立體異構(gòu)也是可以的，因此在某些情況下，分子可以存在(E)-異構(gòu)體或(Z)-異構(gòu)體。 如果分子含有若干雙鍵，則每一雙鍵會具有與該分子其它雙鍵立體異構(gòu)相同或不同的自身 立體異構(gòu)。單一的異構(gòu)體和異構(gòu)體的混合物在本發(fā)明范圍內(nèi)。而且，本文提及的化合物可以作為幾何異構(gòu)體(即，順式和反式異構(gòu)體)、互變異 構(gòu)體或阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體(atropoisomer)存在。特別地，術(shù)語互變異構(gòu)體是指化合物的兩種或更 多種結(jié)構(gòu)異構(gòu)體中的一種，該結(jié)構(gòu)異構(gòu)體以平衡狀態(tài)存在，并易于從一種異構(gòu)形式轉(zhuǎn)化為 另一種異構(gòu)形式。常見的互變異構(gòu)對為胺_亞胺、酰胺_酰亞胺、酮_烯醇、內(nèi)酰胺_內(nèi)酰 亞胺等。此外，本文提及的任何化合物旨在表示水合物、溶劑合物和多晶型物及它們的混合 物，當(dāng)這樣的形式存在于介質(zhì)中時。另外，本文提及的化合物可以以同位素標(biāo)記的形式存 在。本文提及的化合物的所有幾何異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體、水合物、溶劑合物、多 晶型物和同位素標(biāo)記形式以及它們的混合物被認(rèn)為在本發(fā)明的范圍內(nèi)。為了提供更簡明的描述，本文給出的某些定量表述未用術(shù)語“約”來修飾。應(yīng)當(dāng)理 解，不論是否明確使用術(shù)語“約”，本文給出的每一個量意圖指實(shí)際的給定值，并且還意圖指 基于本領(lǐng)域普通技術(shù)而合理地推斷的這樣的給定值的近似值，由于這樣的給定值的實(shí)驗(yàn)和 /或測量條件，所述給定值的近似值包括當(dāng)量和近似值。在通式I的化合物中，特別優(yōu)選的R1和R6各自獨(dú)立地為氫或者取代或未取代的 C1-C12烷基，并且更優(yōu)選的R1和R6各自獨(dú)立地為氫或者取代或未取代的烷基，所述烷基選自 甲基，乙基，丙基，異丙基和包括異丁基、仲丁基和叔丁基在內(nèi)的丁基。特別優(yōu)選的R1和R6 各自獨(dú)立地為甲基、甲硫基甲基或異丙基，最優(yōu)選的R1和R6為甲硫基甲基。特別優(yōu)選的R4和R9各自獨(dú)立地為氫或者取代或未取代的C1-C12烷基；并且更優(yōu)選 的R4和R9各自獨(dú)立地為氫或者取代或未取代的烷基，所述烷基選自甲基，乙基，丙基，異丙 基和包括異丁基、仲丁基和叔丁基在內(nèi)的丁基，最優(yōu)選的R4和R9為氫。特別優(yōu)選的R3和R8各自獨(dú)立地為巰基烷基，其中巰基是受保護(hù)的，或者R3和R8形 成基團(tuán)-CH2-S-S-CH2-O優(yōu)選地，R3和R8形成基團(tuán)-CH2-S-S-CH2-O特別優(yōu)選的R2和R7為氫。特別優(yōu)選的R5和Rltl各自獨(dú)立地為氨基保護(hù)基團(tuán)或-(C = 0)R”，其中每一 R”獨(dú) 立地為取代或未取代的雜芳基。更優(yōu)選的R5和Rltl各自獨(dú)立地為-(C = 0)R”，其中每一 R” 獨(dú)立地為雜芳基，所述雜芳基選自取代或未取代的噌啉基、取代或未取代的喹啉基、取代或 未取代的異喹啉基、取代或未取代的萘啶基、取代或未取代的喹喔啉基以及取代或未取代 的喹唑啉基；并且甚至更優(yōu)選的R5和Rltl各自獨(dú)立地為取代或未取代的喹啉基和取代或未 取代的喹喔啉基。最優(yōu)選的R”為取代或未取代的喹啉基。所述基團(tuán)的優(yōu)選取代基為OR’、 =0、SR\ SOR\ SO2R\ NO2, NHR，、N(R，)2、= N-R\ NHCOR\ N(COR' )2、NHSO2R，、NR，C(=NR，)NR，R，、CN、鹵素、COR，、C00R，、0C0R，、0C0NHR，、OCON (R' )2、受保護(hù)的 0H、取代或未取
代的芳基以及取代或未取代的雜環(huán)基，其中每一 R’基團(tuán)獨(dú)立地選自氫、0H、N02、NH2、SH、CN、 鹵素、C0H、C0烷基、C00H、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或 未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基以及取代或未取代的雜環(huán)基。當(dāng)這樣的基團(tuán)自 身被取代時，取代基可以選自以上所列。上述基團(tuán)的甚至更優(yōu)選的取代基為0H，SCH3, SH, NH2,NHC( = NH)NH2,CONH2,C00H，苯基，對、間或鄰羥基苯基，包括1_、2_和3-吲哚基在內(nèi)的 吲哚基以及包括4-和5-咪唑基在內(nèi)的咪唑基。特別優(yōu)選的Ra、Rb和R。各自獨(dú)立地為氫或者取代或未取代的C1-C12烷基。更優(yōu)選 的Ra、Rb和R。各自獨(dú)立地為氫或者取代或未取代的C1-C6烷基；并且甚至更優(yōu)選的Ra、Rb和 Rc各自獨(dú)立地為氫或甲基。特別地，最優(yōu)選的Ra為甲基，Rb為甲基并且R。為氫。特別優(yōu)選的Rd、Re和Rf各自獨(dú)立地為氫或者取代或未取代的C1-C12烷基。更優(yōu)選 的Rd、Re和Rf各自獨(dú)立地為氫或者取代或未取代的C1-C6烷基；并且甚至更優(yōu)選的Rd、Re和 Rf各自獨(dú)立地為氫或甲基。特別地，最優(yōu)選的Rd為甲基、Re為甲基并且Rf為氫。特別優(yōu)選的Rh為取代或未取代的C1-C12烷基或者η為1至25的-(CH2-CH2O)n_CH3 基團(tuán)。更優(yōu)選的Rh為取代或未取代的C1-C6烷基或者η為1至15的-(CH2-CH2O) n_CH3基團(tuán)。 甚至更優(yōu)選Rh為甲基、乙基、丙基或異丙基。最優(yōu)選的Rh為甲基。特別優(yōu)選的Y為S或NRi,并且最優(yōu)選的Y為NRitl特別優(yōu)選的Ri為氫或者取代或未取代的C1-C12烷基或者η為1至25的-(CH2-CH2O) n-CH3基團(tuán)。更優(yōu)選的Ri為取代或未取代的C1-C6烷基或者η為1至15 W-(CH2-CH2O)n-CH3 基團(tuán)。甚至更優(yōu)選的Ri為甲基、乙基、丙基或異丙基。最優(yōu)選的Ri為甲基。在本發(fā)明另一實(shí)施方案中，還優(yōu)選的是，R1-R2對和/或R6-R7對獨(dú)立地形成取代或 未取代的C1-C12亞烷基，或者與它們所連接的相應(yīng)C原子一起形成取代或未取代的C3-C12環(huán) 烷基。更優(yōu)選的R1-R2對和/或R6-R7對獨(dú)立地形成C1-C6亞烷基，或者與它們所連接的相應(yīng) C原子一起形成C3-C6環(huán)烷基。甚至更優(yōu)選的R1-R2對和/或R6-R7對獨(dú)立地形成C1-C4亞烷 基，或者與它們所連接的相應(yīng)C原子一起形成C3-C5環(huán)烷基。最優(yōu)選的R1-R2對和/或R6-R7 對獨(dú)立地形成亞甲基，或者與它們所連接的相應(yīng)C原子一起形成C3-環(huán)烷基。本發(fā)明優(yōu)選的化合物是通式II的那些化合物或其藥物可接受的鹽、衍生物、互變 異構(gòu)體、前藥或立體異構(gòu)體，通式II其中禮、R2、R5、R6、R7、R10, Y和Rh基團(tuán)具有以上給定的相同含義。
在通式II的化合物中，特別優(yōu)選的R1和R6各自獨(dú)立地為氫或者取代或未取代的 C1-C12烷基；并且更優(yōu)選的R1和R6各自獨(dú)立地為氫或者取代或未取代的烷基，所述烷基選 自甲基，乙基，丙基，異丙基和包括異丁基、仲丁基和叔丁基在內(nèi)的丁基。特別優(yōu)選的R1和 R6各自獨(dú)立地為甲基、甲硫基甲基或異丙基，最優(yōu)選R1和R6為甲硫基甲基。特別優(yōu)選的R2和R7為氫。特別優(yōu)選的R5和Rltl各自獨(dú)立地為氨基保護(hù)基團(tuán)或-(C = 0)R”，其中每一 R”獨(dú) 立地為取代或未取代的雜芳基。更優(yōu)選的R5和Rltl各自獨(dú)立地為-(C = 0)R”，其中每一 R” 獨(dú)立地為雜芳基，所述雜芳基選自取代或未取代的噌啉基、取代或未取代的喹啉基、取代或 未取代的異喹啉基、取代或未取代的萘啶基、取代或未取代的喹喔啉基以及取代或未取代 的喹唑啉基；并且甚至更優(yōu)選的R5和Rltl各自獨(dú)立地為取代或未取代的喹啉基和取代或未 取代的喹喔啉基。最優(yōu)選的R”為取代或未取代的喹啉基。所述基團(tuán)的優(yōu)選取代基為OR’、 =0、SR\ SOR\ SO2R\ NO2, NHR，、N(R，)2、= N-R\ NHCOR\ N(COR' )2、NHSO2R，、NR，C(= NR’)NR’ R’、CN、鹵素、COR’、C00R’、0C0R’、0C0NHR'、0C0N (R’)2、受保護(hù)的 OH、取代或未取 代的芳基以及取代或未取代的雜環(huán)基，其中每一 R’基團(tuán)獨(dú)立地選自氫、0H、N02、NH2、SH、CN、 鹵素、C0H、C0烷基、C00H、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或 未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基以及取代或未取代的雜環(huán)基。當(dāng)這樣的基團(tuán)自 身被取代時，取代基可以選自以上所列。上述基團(tuán)的甚至更優(yōu)選的取代基為0H，SCH3, SH, NH2,NHC( = NH)NH2,CONH2,C00H，苯基，對、間或鄰羥基苯基，包括1_、2_和3-吲哚基在內(nèi)的 吲哚基以及包括4-和5-咪唑基在內(nèi)的咪唑基。特別優(yōu)選的Rh為取代或未取代的C1-C12烷基或者η為1至25的-(CH2-CH2O)n_CH3 基團(tuán)。更優(yōu)選的Rh為取代或未取代的C1-C6烷基或者η為1至15的-(CH2-CH2O)nCH3基團(tuán)。 甚至更優(yōu)選的Rh為甲基、乙基、丙基或異丙基。最優(yōu)選的Rh為甲基。特別優(yōu)選的Y為S或NRi,并且最優(yōu)選的Y為NRitl特別優(yōu)選的Ri為氫或者取代或未取代的C1-C12烷基或者η為1至25的-(CH2-CH2O) n-CH3基團(tuán)。更優(yōu)選的Ri為取代或未取代的C1-C6烷基或者η為1至15 W-(CH2-CH2O)n-CH3 基團(tuán)。甚至更優(yōu)選的Ri為甲基、乙基、丙基或異丙基。最優(yōu)選的Ri為甲基。在本發(fā)明另一實(shí)施方案中，還優(yōu)選的是，R1-R2對和/或R6-R7對獨(dú)立地形成取代或 未取代的C1-C12亞烷基，或者與它們所連接的相應(yīng)C原子一起形成取代或未取代的C3-C12環(huán) 烷基；更優(yōu)選的是，R1-R2對和/或R6-R7對獨(dú)立地形成C1-C6亞烷基，或者與它們所連接的相 應(yīng)C原子一起形成C3-C6環(huán)烷基。甚至更優(yōu)選的是，R1-R2對和/或R6-R7對獨(dú)立地形成C1-C4 亞烷基，或與它們所連接的相應(yīng)C原子一起形成C3-C5環(huán)烷基。最優(yōu)選的是，R1-R2對和/或 R6-R7對獨(dú)立地形成亞甲基，或者與它們所連接的相應(yīng)C原子一起形成C3-環(huán)烷基。本發(fā)明特別優(yōu)選的化合物如下
化合物1并且所述化合物的優(yōu)選立體異構(gòu)體如下
Ivieiv ^ 、Nkl,.
汽、-=、sNMe化合物2能夠通過采用已知的合成相關(guān)化合物的過程的合成來獲得本發(fā)明的化合物 (Albericio et al. Int. J. of Peptide Research and Therapeutics,2007,13,295-306 ; Albericio et al. Chem. Eur. J. 2006,12,9001-9009 ；Albericio et al.J. Am. Chem. Soc.2007,129,5322-5323 ；Boger and Lewis, WO 02/49577 ；Boger and Lee, J. Org. Chem. 2000,65,5996-6000 ；Boger et al. J. Am. Chem. Soc. 2001,123, 561-568 ；Lorentz and Diederichsen, J. Org. Chem. 2000, 65, 5996-6000 ；Dietrich and Diederichsen, Eur. J. Org. Chem. 2005,147-153 ；Hae kim et al. Bioorganic Med. Chem. Lett. 2004,14, 541-544 ；Malkinson et al. J. Org. Chem. 2005,70,7654-7661 ；Olsen et al. Tetrahedron, 1982,38,57-61 ；Olsen and Dhaon, J. Org. Chem. 1981,46,3436-3440 ；Olsen and Chakravarty, Pept. Struct. Biol. Funct. Proc. Am. Pept. Symp. ,6th, 1979, 559-562 ；Olsen, J. Am. Chem. Soc. 1978,100, 7684-7690 ；Chakravarty and Olsen, Tetrahedron Lett. 1978, 19,1613-1616 ；Olsen and Ciardelli, J. Am. Chem. Soc. 1977,99,2806-1807 ；Olsen et al. J. Org. Chem. 1975，40，3110-3112 ；Shin et al. Bull. Chem. Soc. Japan, 1984,57, 2203-2210 ；Shin et al. Bull. Chem. Soc. Japan,1984,57,2211-2215 ；Shin et al. Bull. Chem. Soc. Japan,1978,51,1501 — 1506 ；Bayo-Puxan, N.Ph.D. Thesis, University of Barcelona,2006)。例如，能夠采用兩種不同的策略來合成化合物2。兩種策略都從制備連接至樹脂的四肽開始，這如方案1中所示地獲得。 (a)Fmoc-Gly-OH, DIEA, CH2Cl2 ； (b)MeOH ； (c)哌啶 /DMF(1 4) ； (d) Boc-D-Dap (Fmoc) -OH, HATU, HOAt, DIEA, DMF ； (e)哌啶 /DMF (1 4)，哌啶 /DBU/ 甲 苯 /DMF(1 1 4 14) ； (f)2-NBSCl, DIEA, CH2Cl2 ； (g)PPh3, DIAD, MeOH, THF ； (h) HO-CH2CH2-SH, DBU ； (i) Alloc-NMeCys (Me) -OH, HATU, HOAt，DIEA，DMF ； (1) Pd (PPh3) 4，PhSiH3, CH2Cl2 ； (m) AlIoc-WeCys(Acm)-OH, HATU, HOAt, DIEA, DMF.方案 策略 I在該策略中，在四肽樹脂的末端氨基上存在四肽樹脂的選擇性脫保護(hù)，并且獨(dú)立 地，根據(jù)方案2，脫保護(hù)后，使四肽從樹脂斷裂，隨后使兩個片段偶聯(lián)以提供直鏈八肽。 (a) Pd (PPh3)4, PhSiH3, CH2Cl2 ； (b) TFA/CH2C12 (2 98) ； (c) PyAOP, DIEA, DMF ； (d) Pd(Ph3)4, PhSiH3, CH2Cl2方案2根據(jù)方案3，通過形成-S-S-橋隨后斷裂使直鏈八肽進(jìn)行固相環(huán)化以提供單環(huán)八肽。 方案3根據(jù)方案4，使單環(huán)八肽溶液環(huán)化，隨后脫保護(hù)并與3-羥基喹啉-2-羧酸偶聯(lián)以提 供化合物2。 (a)EDC 'HCl, HOAt,DIEA,CH2C12, DMF ； (b)TFA/CH2C121 1 ； (c)EDC1，HOSu，3-羥 基喹啉-2-羧酸，DIEA, CH2C12方案4策略II在該策略中，除去末端保護(hù)基團(tuán)后，根據(jù)方案5，使四肽樹脂中的兩條四肽鏈通過 形成-S-S-橋而進(jìn)行一鍋環(huán)化，隨后從樹脂端斷裂以提供直鏈四肽二聚體。 方案5根據(jù)方案6，使該直鏈二聚體經(jīng)由形成兩酰胺鍵進(jìn)行雙環(huán)化，隨后脫保護(hù)并與 3-氨基-2-喹啉羧酸偶聯(lián)以提供化合物2。 (a) PyBOP, HOAt, DIEA, CH2Cl2, DMF ； (b) TFA/CH2C121 1 ；(c)EDC · HCl，HOSu，3_ 羥基喹啉 _2_ 羧酸，DIEA, CH2Cl2方案6能夠通過對化合物2所述的等效工藝，通過在每一種情況下選擇中間體化合物的 適當(dāng)取代基來合成化合物1和2的類似物。在必要時，能夠?qū)⑦m當(dāng)保護(hù)基團(tuán)用在取代基上以確保反應(yīng)基團(tuán)不受影響。能夠設(shè) 計合成以采用前體取代基，所述前體取代基能夠在適當(dāng)?shù)碾A段轉(zhuǎn)化為期望的取代基。能夠 將環(huán)結(jié)構(gòu)中的飽和或不飽和作為合成的一部分引入或除去。能夠?qū)⒃牧虾驮噭┤缢谕?地修飾以確保預(yù)期化合物的合成。此外，還能夠通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的合成有機(jī)化學(xué)中的常見方法由化合物1和2來合成類似物。能夠?qū)⑸鲜龊铣陕肪€如期望地修飾以提供立體定向化合物以及立體異構(gòu)體的混 合物。可以在合成期間，通過包括使用立體定向試劑的各種方法或者通過將手性中心引入 化合物來合成特定的立體異構(gòu)體或特定的混合物?？梢栽诤铣善陂g引入一個或多個立構(gòu)中 心，并且還可以轉(zhuǎn)化存在的立構(gòu)中心。此外，一旦通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)解決技術(shù) 合成化合物，則可以將立體異構(gòu)體分離。上述通式I和II化合物的重要特征在于它們的生物活性，特別是它們的細(xì)胞 毒活性。在這點(diǎn)上，我們驚訝地發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出比實(shí)例5所示的母體化合物 Azathiocoraline增強(qiáng)的抗腫瘤活性。因此，根據(jù)本發(fā)明，我們提供具有細(xì)胞毒活性的通式 I和II化合物的新藥物組合物，及它們作為抗腫瘤劑的用途。因此本發(fā)明還提供包含本發(fā) 明化合物或其藥物可接受的鹽、衍生物、互變異構(gòu)體、前藥或立體異構(gòu)體以及藥物可接受的 載體的藥物組合物。藥物組合物的實(shí)例包括適合配制為用于口服、局部或胃腸外給藥的任何固體(片 劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑等)或液體(溶液、懸浮液或乳液)組合物?？梢酝ㄟ^任何適當(dāng)?shù)姆椒ńo予本發(fā)明化合物或組合物，例如靜脈內(nèi)輸注、口服制 劑和腹腔內(nèi)給藥及靜脈內(nèi)給藥。我們優(yōu)選使用的輸注時間高達(dá)24小時，更優(yōu)選1小時至12 小時，最優(yōu)選1小時至6小時。特別期望允許進(jìn)行治療而不用在醫(yī)院過夜的短時間輸注。然 而，如果需要，輸注可以為12小時至24小時或者甚至更長的時間?？梢砸赃m當(dāng)間隔來進(jìn)行 輸注，例如1周至4周?？梢砸跃忈屩苿┗蛲ㄟ^其它標(biāo)準(zhǔn)遞送裝置，通過脂質(zhì)體或納米球封 裝來遞送包含本發(fā)明化合物的藥物組合物?；衔锏倪m當(dāng)劑量根據(jù)具體的制劑、應(yīng)用的方式和治療的具體部位、宿主和腫瘤 來改變。應(yīng)當(dāng)考慮其它因素，如年齡、體重、性別、飲食、給藥時間、排泄速率、宿主條件、聯(lián)合 用藥、反應(yīng)靈敏度和疾病嚴(yán)重性。能夠在最大耐受劑量內(nèi)連續(xù)地或周期地進(jìn)行給藥?？梢詫⒈景l(fā)明的化合物和組合物與其它藥物一起使用以提供聯(lián)合療法。其它藥物 可以形成相同組合物的一部分，或提供為同時或不同時給藥的單獨(dú)組合物，即單獨(dú)、同時或 連續(xù)給藥。本發(fā)明化合物的抗腫瘤活性包括但不限于肺癌、結(jié)腸癌和乳腺癌。 實(shí)施例總則受保護(hù)的氨基酸衍生物 PyBOP 由 Applied Biosystems (Framingham, MA)、Bachem (Bubendorf, Switzerland)、Albatross (Montreal, Canada)禾口 NovaBiochem Laufelfmgen, Switzerland)獲得。2-氯三苯甲基樹脂由 Iris Biotech(Marktredwitz, Germany)獲得。DIEA、DIPCDI、哌啶、TFA、氨、碘代甲燒、氯甲酸 烯丙酯和氯甲酸對硝基芐酯由Aldrich(Milwaukee，WI)獲得，并且EDC · HCl和HOAt來 自 Luxembourg Industries (Tel Aviv, Israel)。DMF、CH2Cl2、乙腈(HPLC級)、甲醇(HPLC 級)、二噁烷、Et2O, TBME (叔丁基甲基醚)和EtOAc (乙酸乙酯)由SDS(Peypin，F(xiàn)rance) 獲得。(R) (-)_噻唑烷-4-羧酸、三氟甲烷磺酸、N-羥基乙酰胺甲基(N-hidroxyacetamide methyl)和 N-羥基琥珀酰亞胺由 Fluka(Buchs，Switzerland)獲得。除了 DMF 和 CH2Cl2 及THF以外，所有市售的試劑和溶劑按收到的原樣使用，將DMF和CH2Cl2用氮?dú)夤呐菀猿] 發(fā)性污染物(DMF)并在活化的4 A分子篩(Merck，Darmstadt，Germany)上儲存，并且將THF 從鈉/ 二苯甲酮中蒸餾。在圓底燒瓶中進(jìn)行溶液反應(yīng)。將有機(jī)溶劑萃取物通過無水MgSO4干燥，隨后在低 于40°C的溫度下減壓除去溶劑。在配備聚乙烯多孔盤的聚丙烯注射器(2，5mL)中進(jìn)行固相合成。通過抽吸來除去 溶劑和可溶性試劑。用哌啶-DMF(1 4，v/v) (lXlmin，2X5min)來除去Fmoc基團(tuán)。對于每一次洗滌，使用5mL溶劑.g—1樹脂，以DMF (5 X Imin)禾口 CH2Cl2 (5 X Imin)進(jìn) 行脫保護(hù)、偶聯(lián)和最終脫保護(hù)之間的洗滌。在25°C下進(jìn)行肽合成轉(zhuǎn)化和洗滌。HPLC 柱(Symmetry C18 反相分析柱，5· ο μ mX 4. 6mmx 150mm 禾口Symmetry C18 反相半制備柱，5. 0μπιΧ7. 8mmX100mm)由 Waters (Ireland)獲得。在 Waters 儀器上 進(jìn)行分析HPLC，所述Waters儀器包括分離模塊(Waters 2695)、自動進(jìn)樣器、光電二極管陣 列檢測器(Waters996)和系統(tǒng)控制器(Millenium login)。在220nm和254nm處進(jìn)行UV檢 測，并且以1. OmLXmirT1的流速，將CH3CN (+0. 036% TFA)在吐0(+0· 045% TFA)中的線性梯 度運(yùn)行15min。在Waters儀器上進(jìn)行半制備HPLC，所述Waters儀器包括分離模塊(Waters 1525 二元泵)、自動進(jìn)樣器和雙波長吸收檢測器(Waters 2487)。在220nm和254nm處進(jìn)行 UV檢測，并且在每一情況的具體條件下以3. OmLXmirT1的流速運(yùn)行CH3CN(+0. 036% TFA)在 H2O (+0. 045% TFA)中的線性梯度。^lJM ACH^Mj ^Applied Biosystems VoyagerDE RP ±, ^^Waters Micromass ZQ分光計和Agilent離子阱(Agilent Ion Trap) 1100系列LC/MSDTrap中進(jìn)行肽樣品的 MALDI-T0F 和 ES (+) -MS 分析。實(shí)施例1Boc-D-Dap (Me) -Gly-0-CTC-PS.
O
e,f,g,h* BocHN
HN°
I(a)將CTC樹脂(400mg，1. 6mmol/g)置于配備了 2個聚乙烯濾片的IOmL聚丙烯注 射器中。將樹脂用 DMF (5 X Imin)和 CH2Cl2 (3 X Imin)洗滌，并添加 Fmoc-Gly-OH(118. 8mg， 0. 4mmol)和 DIEA(474 μ L, 2. 66mmol,6. 6eq.)的 CH2Cl2 溶液。IOmin 后，添加更多的 DIEA(237 μ L，1. 33mmol,3. 3eq)，并在室溫下將混合物攪拌50min。(b)通過添加MeOH (320 μ L)將反應(yīng)淬滅，并將混合物再攪拌lOmin。 (c)過濾后，將肽樹脂用 CH2Cl2 (3 X lmin)、DMF (3 X Imin)、哌啶-DMF (1 4 ； 2Xlmin,2X5min)洗滌。通過在290nm處測量吸光度而計算的裝載為0. 93mmol/g。(d)接著將 Boc-D-Dap (Fmoc)-OH (682mg，1. 6mmol，4eq)與作為偶聯(lián)劑的 HATU(456mg, 1. 6mmol,4eq)、H0At(218mg, 1. 6mmol，4eq)禾口 DIEA(570 μ L，3. 2mmol,8eq)引 入DMF中。(e)攪拌 35min 并過濾后，將肽樹脂用 DMF (3 X 0. 5min)、CH2Cl2 (3 X 0. 5min)、 DMF (3 X 0. 5min)、哌啶-DMF (1 4 ； 1 X lmin ;3 X 5min ； 1 X IOmin)、哌啶-DBU-甲
23
ο
a,b FmocHN-^Y"
c,d
BocHN、
FmocHN'
C
NH
/苯-DMF(1 1 4 14 ;2X5min)洗滌，并再次用 DMF(5X0. 5min)和 CH2C12(3X0. 5min)洗滌。(f)添加 2-NBS-Cl(354mg，1.6mmol，4eq.)和 DIEA (0. 726 μ L，4mmol，IOeq)的 CH2Cl2溶液，并將混合物攪拌90min。(g)過濾并用 CH2Cl2 (3X0. 5min)、DMF (3X0. 5min)、CH2Cl2 (3X0. 5min)和 THF (3 X0. 5min)洗滌后，將 PPh3 (524mg，2mmol，5eq)和 Me0H(160 μ L，4mmol，IOeq)的 THF 溶液與DIAD (404 μ L，2mmol,5eq)的THF溶液混合，并添加至肽樹脂中。攪拌Ih并過濾后， 將肽樹脂用 THF (3 X 0. 5min)、CH2Cl2 (3 X 0. 5min)、DMF (3 X 0. 5min)洗滌。使一等份的樹脂斷裂以提供Boc-D-Dap (Me) (o-NBS) -Gly-OH 昍1^條件、=10.01^11(梯度151^11內(nèi)，從0 100 至 100 0 (ACN/H20))；純 度 90%。HPLC-ES 條件tK = 10. Omin(梯度15min 內(nèi)，從 0 100 至 100 0(ACN/H20))。 C17H24N409Sm/z 計算值460. 13 ； [M+H]+ 實(shí)測值460. 10。(h)在 DMF 中用 DBU(300y L，2mmol，5eq.)和 2_ 巰基乙醇(280 μ L, 4mmol, IOeq) 處理(2X15min)后，將樹脂用 DMF (3 X0. 5min)、CH2Cl2 (3 X 0. 5min)和 DMF (3 X0. 5min)洗滌。使一等份的樹脂斷裂以提供Boc-D-Dap (Me) -Gly-OH HPLC 條件tK = 4. 23min(梯度15min 內(nèi)，從 0 100 至 100 0(ACN/H20))。HPLC-ES 條件tK = 3.87min(梯度15min 內(nèi)，從 5 100 至 100 0(ACN/H20))。 CnH21N305m/z 計算值275. 15 ； [M+H]+ 實(shí)測值276. 73。被{[Alloc-NMeCys(Acm)-NMeCys(Me)&][Boc-D-Dap(Me&)-Gly-O-CTC-PS]}-保
護(hù)的四肽
O⑴在 DMF 中，在 HATU(456mg，1. 6mmol，4eq)、H0At(218mg，1. 6mmol，4eq)和 DIEA(570 μ L, 3. 2mmol,8eq)的存在下，通過添加 Alloc-NMeCys (Me) _0H(373mg，1. 6mmol, 4eq)使肽鏈延長35min,并在過濾后用DMF(3X0. 5min)和CH2Cl2(3X0. 5min)進(jìn)行洗滌。 將De Clercq測試用于指示偶聯(lián)的完成。(1)接著，在 CH2Cl2 中將肽樹脂用 Pd(PPh3)4(46mg，0.04mmol，0. Ieq.)和PhSiH3 (292 μ L, 4mmol, IOeq.)處理(3 X 15min)，并用 CH2Cl2 (3 X 0. 5min)、DMF (3 X 0. 5min)、 CH2Cl2 (3 X 0. 5min)、DMF (3 X 0. 5min)洗滌。(m) AlIoc-WeCys (Acm)-OH(464mg，1. 6mmol，4eq)的引入需要在與步驟(i)中所 提供的那些條件相同的條件下重復(fù)進(jìn)行偶聯(lián)。將肽樹脂分為2部分將3/4用于4+4策略；將1/4保留為二聚體策略。實(shí)施例2:4+4方法被{[Boc-D-Dap (ΜΘ&1) -Gly-NMeCys (Acm) -NMeCys (Me) &2] [Alloc-NMeCys (Acm) -NM e-Cys (Me)&1] [Boc-D-Dap (Me&2) -Gly-O-CTC-PS]}-直鏈保護(hù)的八肽將用于4+4方法的肽樹脂進(jìn)一步分裂成2部分
Boc O如在實(shí)施例1中所述，在CH2Cl2中將1/3的樹脂用Pd (PPh3) 4和PhSiH3處理(HPLC 條件6.7min(主)，6.9min(次)；從 O 100 至 100 O (ACN/H20))；將2/3 的樹脂用 TFA/CH2C12 溶液(2 98，5 X Imin)處理，并在 H2O (12mL，60mL/g 樹脂)的存在下將濾液收集、干燥并凍干。HPLC條件tK = 9. 3min(次)，9. 7min(主)；15min 內(nèi)，從O 100 至 100 O (ACN/ H2O)。HPLC-ES 條件tK = 9. 7min ;15min 內(nèi)，從 O 100 至 100 0 (ACN/H20)。C27H46N601(1S2m/z 計算值678. 27 ； [M]+ 實(shí)測值677. 91。
Boc O
rr f/^0^,
0I °S、IBoe O
1 o sy 1PyAOP, DIEA. DMF , AIIocNv^An X-N^。 xSAcm HNvX
'Boo O^SJm“ °
/s7 c^VWoh- ° 1 V 1
A_V 入1H11
1 V 1 將凍干的四肽添加至DMF中的具有PyAOP (基于裝載的肽計算為94mg，0. 18mmol,
252eq)和DIEA(94yL，0. 54mmol，6eq)的肽樹脂部分。用DIEA將pH調(diào)節(jié)為8。在室溫下將 混合物攪拌過夜。不過濾，將De Clercq測試用于指示反應(yīng)的完成。測試陽性后，添加相同 量的PyAOP和DIEA，并將混合物再攪拌3小時。測試陽性后，添加更多的PyAOP和DIEA。 2小時后，當(dāng)測試顯示陰性時，過濾后，將樹脂用DMF (3 X0. 5min)、CH2Cl2 (3X0. 5min)和 DMF (3 X0. 5min)洗滌。HPLC-ES 條件tK = 10. 3min ;15min 內(nèi)，從 0 100 至 100 0 (ACN/H20)。C50H86N12O17S4 m/z 計算值=1254. 5 ； [M]+ 實(shí)測值=1254. 32。{ [Boc-D-Dap (Me&” - Gly-NMeCys (&2) -NMe-Cys (Me) & 3] [NMeCys (&2) -NMe-Cys (Me) &1] [Boc-D-Dap (Me&3) -Gly-OH]} _ 二硫橋鍵的形成
II
,O S、丨Boc OS、O 廣0丫。O
廣 H^ o-g a>p—SaTnhboc
b0cO‘ 0S- ‘C) TFA-CH2G2 (2:98)
IOI O 、
I通過在CH2Cl2 中用 Pd (PPh3) 4 (46mg, 0. 04mmol, 0. leq.)和 PhSiH3 (292 μ L, 4mmol, IOeq.)處理(3X15min)來使 Alloc 基團(tuán)斷裂，并用 CH2Cl2 (3X0. 5min)、DMF(3X0. 5min)、 CH2Cl2 (3 X0. 5min)和 DMF (3 X 0. 5min)洗滌。為 了形成二硫橋鍵，將 I2 (127mg，0. 5mmol， 5eq,2. 5eqXAcm)的DMF溶液(0. 01M)添加至肽樹脂中。于室溫下將混合物攪拌lOmin，并 在過濾后，重復(fù)處理。隨后，將樹脂用 DMF (3 X0. 5min)、CH2Cl2(3X0. 5min)、DMF (3 X 0. 5min) 和CH2Cl2 (3X0. 5min)洗滌。斷裂的肽等份的HPLC-MS分析指示反應(yīng)的完成。通過用TFA/ CH2Cl2溶液(2 98，5 X lmin)處理來實(shí)現(xiàn)肽斷裂，并在H2O (6mL，60mL/g樹脂)的存在下將 濾液收集，干燥并凍干。HPLC 條件tK = 9. 0 ;15min 內(nèi)，從 0 100 至 100 0 (ACN/H20)。HPLC-ES 條件tK = 7. 5min ;15min 內(nèi)，從 0 100 至 100 0 (ACN/H20)。C40H70N10O13S4 m/z 計算值1026. 40 ； [M] + 實(shí)測值1026. 45。{[Boc-D-Dap (ΜΘ&1) -Gly-匪eCys (&2) -NMe-Cys (Me) &3] [Boc-D-Dap (Me&3) -Gly-We Cys (&2) -NMe-Cys (Me) &1]-溶液中的環(huán)化
I
O ιO
MeN\ I SO H 、 ？ H O S-. ι NMe
O1 o Vs
I將溶于CH2C12/DMF(9 1，lOOmL，ImM)中的環(huán)肽(0. lmmol)添加至 H0At(54mg， 0. 4mmol,4eq.)在盡可能少的DMF中的溶液。添加DIEA直至pH為中性，并且當(dāng)添加 EDC · HCl (77mg, 0. 2mmol,2eq.)時，環(huán)化反應(yīng)開始。將混合物攪拌5小時，并且HPLC-MS分
‘、O 丨H0丫O O
0^vaN-jVnh LnA^nhboc
MeJl I LS\ H 、 EDCHCItHOAtlDIEA 、H 9I VMe CH2CI2,DMF
°1 0 :、S
26析指示反應(yīng)的完成。將有機(jī)層用飽和NH4Cl水溶液(2X50mL)和鹽水(2X50mL)洗滌，用 MgSO4干燥，過濾并在真空下蒸發(fā)。HPLC 條件tK = 12. 3 ;15min 內(nèi)，從 0 100 至 100 0 (ACN/H20)。HPLC-ES 條件tK = 12. 2min ;15min 內(nèi)，從 0 100 至 100 0 (ACN/H20)。C40H68N10O12S4 m/z 計算值1008· 4 ； [M+H-Boc]+ 實(shí)測值卯8· 49, [M+H-2Boc]+ 實(shí)測 值807. 45。{[3-HQA-D-Dap (ΜΘ&1) -Gly-WeCys (&2) -NMe-Cys (Me) &3] [3-HQA-D-Dap (Me&3) -Gly -NMeCys (&2) -NMe-Cys (Me) &1]-化合物 2 I
s^- O IOMeS、_ O Me O ΗΗΟγ^γ%
ΜΤΑΓΓηΝ _。。a)T^H2C,2(1:1)
_、1 S0、- MeJ, Me ^ O “ \ O
H O、、 I NMe b>3-殘基★琳-2-甲酸，g、s ^ NMe
人義人人入人EDC HCI, HOSu1 DIEA, CH2CI2ff 蘭 H V 、 lVle |
bochn^ AηΝγ^、Ν·ΑV—。
f^^ΟΗ °Μβ ° -SMe將雙環(huán)肽溶于TFA-CH2Cl2 (1 1，2mL)中，并在室溫下將混合物攪拌1小時。在減 壓下將溶劑蒸發(fā)，并通過與甲苯的共蒸發(fā)而除去殘留的酸。添加H2O,并將產(chǎn)物凍干。將產(chǎn) 物溶于HCl (0. 001M)中并再次凍干。將未受保護(hù)的雙環(huán)肽溶于CH2Cl2 (300 μ L)和DIEA中直至ρΗ為中性。將3_羥基 喹啉-2-羧酸(37mg,0. 2mmol,2eq)在 CH2Cl2 (ImL)中用 EDC · HCl (38mg，0. 2mmol，2eq)和 H0Su(22mg,0. 2mmol,2eq)預(yù)活化，15min后，將該溶液添加至先前制備的肽溶液中。將混合 物攪拌20h，并且HPLC-MS分析指示反應(yīng)的完成。將有機(jī)層用飽和NH4Cl水溶液(2 X 50mL) 和鹽水(2X50mL)洗滌，用MgSO4干燥，過濾并在真空下蒸發(fā)。HPLC 條件tK = 13. 2 ;15min 內(nèi)，從 0 100 至 100 0 (ACN/H20)。HPLC-ES 條件tK = 13. 3min ； 15min 內(nèi)，從 0 100 至 100 0 (ACN/H20)。 C50H62N12O12S4 m/z 計算值=1150. 4 ； [M+H+]實(shí)測值1151. 5。實(shí)施例3 二聚體策略 {[NMeCys (&1) -NMeCys (Me) &2) ] [Boc-D-Dap (Me&2) -Gly-OH]} 2_ 二聚體
O
丄 BocHN-^AklI…^
ι S、 J ^^、 S IhYJ
AIIocNvvA Av^NO0^a-K1Av/NH kMA^NHBoc
；-' Χ1 a) Pd(PPh3), PhSiH, CH2Cl2K^T
ACmS AcmS、丨 ο O^NHΟ·” H Me
ANOCN jV^NC IC) TFA-CH2C2 (2:98)BocHN^S ΗΝ^^Ο
‘I I 、、NHBoc。。人⑶丨。、s
ιι如在實(shí)施例1中所述，將肽樹脂在CH2Cl2中用Pd(PPh3)4和PhSiH3處理。通過用 I2(126. 9mg,0. 5mmol,0. 5eq.)的 DMF 溶液(IOmL)處理(2X IOmin)來實(shí)現(xiàn)二聚體的形成， 隨后用 DMF (3 X 0. 5min)、CH2Cl2 (3 X 0. 5min)、DMF (3 X 0. 5min)和 CH2Cl2 (3 X 0. 5min)洗滌。 斷裂的肽等分的HPLC-MS分析指示反應(yīng)的完成。隨后，通過用TFA/CH2C12溶液(2 98，
275 X Imin)處理使肽從樹脂解離，并在H2O (6mL，60mL/g樹脂)的存在下，將濾液收集，干燥并凍干。HPLC 條件:tE = 7. 1 ；15min 內(nèi)，從 0 100 至 100 0 (ACN/H20)。HPLC-ES 條件:tE = 6. Imin ； 15min 內(nèi)，從 0 100 至 100 0 (ACN/H20)。C40H72N10O12S4 m/z 計算值=1044. 4 ； [M+H]+ 實(shí)測值=1043. 49，[M+H]+2 實(shí)測值 522. 49。{[Boc-D-Dap (ΜΘ&1) -Gly-WeCys (&2) -NMe-Cys (Me) &3] [Boc-D-Dap (Me&3) -Gly-We Cys (&2) -NMe-Cys (Me) &1]-環(huán)化反應(yīng) 將肽(0.05mmol)溶于 CH2C12/DMF(9 1)中，并添加至HOAt (54mg，0. 4mmol,8eq.) 的 CH2C12/DMF(9 l，50mL，lmM)溶液中。添加 DIEA 直至 pH 為 8 并添加 PyBOP(208mg， 0. 4mmol,8eq)以開始反應(yīng)。將混合物攪拌12小時，并且HPLC-MS分析指示反應(yīng)的完成。將 有機(jī)層用飽和NH4Cl (2X50mL)和鹽水(2X50mL)洗滌，用MgSO4干燥，并在真空下蒸發(fā)。HPLC 條件:tE = 12. 1 ；15min 內(nèi)，從 O 100 至 100 O (ACN/H20)。HPLC-ES 條件tK = 12. Imin ； 15min 內(nèi)，從 O 100 至 100 0 (ACN/H20)。C40H68N10O12S4 m/z 計算值1008. 40 ； [M] + 實(shí)測值1008. 89。{[3-HQA-D-Dap (ΜΘ&1) -Gly-WeCys (&2) -NMe-Cys (Me) &3] [3-HQA-D-Dap (Me&3) -Gly -NMeCys (&2) -NMe-Cys (Me) &1]-化合物 2 I 按照實(shí)施例2最后步驟中公開的相同方法來獲得化合物2。HPLC 條件:tE = 13. 2 ；15min 內(nèi)，從 0 100 至 100 0 (ACN/H20)。HPLC-ES 條件tK = 13. 3min ;15min 內(nèi)，從 0 100 至 100 0 (ACN/H20)。C50H62N12O12S4 m/z 計算值1150. 40 ； [M+H]+ 實(shí)測值1151. 53。實(shí)施例4化合物2的純化和表征使由實(shí)施例2和3獲得的粗化合物2通過HPLC純化以獲得純化的化合物 2(952yg，1.0% 收率)。純化的HPLC條件30min內(nèi)，線性梯度從45 55至60 40(ACN/H20)；流速為
a)TFA-CH2CI2 (1:1)
b) 3-羥基喹啉-2-甲酸，3mL/min。tE = 13. 6min (4+4 策略)tE = 13. Omin ( 二聚體策略)分析HPLC 條件tK = 13. 0 ;15min 內(nèi)，從 5 95 至 100 0 (ACN/H20)。MALDI-T0F C50H62N12O12S4 m/z 計算值=1150. 4 ； [M+H]+ 實(shí)測值=1151. 5 ； _a]+ 實(shí) 測值1173. 8HRMS C50H63N12O12S4 計算值=1151. 3566 ；實(shí)測值=1151. 3573實(shí)施例5檢測抗腫瘤活性的生物測定該測定的目的是評價待測樣品的體外細(xì)胞抑制活性(延遲或停滯腫瘤細(xì)胞生長 的能力)或細(xì)胞毒性(殺死腫瘤細(xì)胞的能力)。細(xì)胞系 使用SBR比色測定評價細(xì)胞毒性將利用磺酰羅丹明B(SRB)反應(yīng)的比色型測定適用于細(xì)胞生長和存活力的定量測 量(按照 Skehan P et al. J. Natl. Cancer Inst. 1990，82，1107-1112 所述的技術(shù))。該測定形式采用SBS-標(biāo)準(zhǔn)96-孔細(xì)胞培養(yǎng)微板(Faircloth et al. Methods in cell science (細(xì)胞科學(xué)中的方法)，1988，11 (4)，201-205 ;Mosmann et al. Journal of. Immunological. Methods, 1983，65 (1-2)，55-63)。源自不同類型人癌癥的本研究中所用 的所有細(xì)胞系從美國模式培養(yǎng)物保藏所(American Type Culture Collection(ATCC))獲 得。在37 °C、5 % CO2和98 %的濕度下，將細(xì)胞保持在達(dá)爾伯克改良伊格爾培養(yǎng)基 (Dulbecco's Modified Eagle Medium) (DMEM)中，所述達(dá)爾伯克改良伊格爾培養(yǎng)基補(bǔ)充了 10%胎牛血清(FBS)、2mM L-谷氨酰胺、100U/mL青霉素和100U/mL鏈霉素。為了實(shí)驗(yàn)，利用 胰蛋白酶消化從亞融合性培養(yǎng)物(subconfluent culture)收獲細(xì)胞，并在計數(shù)和平板接種 之前再懸浮于新鮮的培養(yǎng)基中。將150 μ L等份的細(xì)胞以5 X IO3細(xì)胞/孔接種于96孔微量滴定板中，并允許細(xì)胞 在無藥物培養(yǎng)基中附著于板表面18小時。將每一細(xì)胞系的一種對照(未經(jīng)處理)板固定 (如下文所述)，并用作時間零點(diǎn)的參考值。隨后，將50 μ L等份的測試樣品以10 μ g/mL至 0. 00262 μ g/mL添加至十個連續(xù)稀釋的培養(yǎng)物中。48小時的暴露后，通過SRB方法評價抗 腫瘤效果簡言之，將細(xì)胞用PBS洗滌兩次，在戊二醛溶液中固定15min，在PBS中淋洗 兩次，并在室溫下于0.4% SRB溶液中染色30min。隨后將細(xì)胞用乙酸溶液淋洗若干次 并風(fēng)干。隨后在IOmM三羥甲基氨基甲烷堿(trizma base)溶液中提取SRB，并在自動分光光度板讀取器上于490nm處測量吸光度。將細(xì)胞存活率表示為對照細(xì)胞生長的百分?jǐn)?shù)。通 過應(yīng)用 NCI 算法(Boyd MR and Paull KD. Drug Dev. Res. 1995，34，91-104)來評價待測樣 品的最終效果。利用一式三份的培養(yǎng)物的平均值士SD，使用非線性回歸分析自動產(chǎn)生劑量-反應(yīng) 曲線。通過自動插值計算三個參考參數(shù)(NCI算法)=GI5tl=產(chǎn)生50%生長抑制的濃度；TGI =完全生長抑制(抑制細(xì)胞生長效果)以及LC5tl=產(chǎn)生50%凈細(xì)胞殺傷(細(xì)胞毒性效果) 的濃度。表1示出本發(fā)明的化合物相比母體化合物Azathiocoraline的生物活性數(shù)據(jù)，其 根據(jù) Bay0_Puxan，Mria :Ph. D. Thesis, University of Barcelona, 2006 中公開的方法獲得。表1細(xì)胞毒測定_活性數(shù)據(jù)(摩爾)
權(quán)利要求
通式I的化合物或其藥物可接受的鹽、衍生物、互變異構(gòu)體、前藥或立體異構(gòu)體，通式I其中R1、R4、R6和R9各自獨(dú)立地選自氫、取代或未取代的C1 C12烷基、取代或未取代的C2 C12烯基和取代或未取代的C2 C12炔基；R3和R8各自獨(dú)立地為取代或未取代的C1 C12巰基烷基，其中可以將所述巰基任選地保護(hù)；或R3與R8形成基團(tuán) CH2 S S CH2 ；R2為氫；R7為氫；或R1 R2對和/或R6 R7對獨(dú)立地形成取代或未取代的C1 C12亞烷基，或者與它們所連接的相應(yīng)C原子一起形成取代或未取代的C3 C12環(huán)烷基；R5和R10各自獨(dú)立地選自氨基保護(hù)基團(tuán)和 (C＝O)R”，其中每一R”獨(dú)立地選自取代或未取代的雜環(huán)基和取代或未取代的雜環(huán)基烷基；Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Rf各自獨(dú)立地選自氫和取代或未取代的C1 C12烷基；Y選自S、O和NRi；Rh選自取代或未取代的C1 C12烷基、n為1至25的 (CH2 CH2O)n CH3基團(tuán)、取代或未取代的C2 C12烯基和取代或未取代的C2 C12炔基；并且Ri為選自以下基團(tuán)的基團(tuán)氫、取代或未取代的C1 C12烷基、n為1至25的 (CH2 CH2O)n CH3基團(tuán)、取代或未取代的C2 C12烯基和取代或未取代的C2 C12炔基。FPA00001188730500011.tif
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中R4和R9各自獨(dú)立地選自氫和取代或未取代的 Ci-C12 焼基。
3.如權(quán)利要求2所述的化合物，其中R4和R9各自獨(dú)立地選自氫和取代或未取代的烷 基，所述烷基選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基。
4.如前述權(quán)利要求中任一權(quán)利要求所述的化合物，其中R3與R8形成基 團(tuán)-CH2-S-S-CH2-O
5.如前述權(quán)利要求中任一權(quán)利要求所述的化合物，其中R2和R7為氫。
6.如前述權(quán)利要求中任一權(quán)利要求所述的化合物，其中Ra、Rb、R。、Rd、民和&各自獨(dú)立 地選自氫或者取代或未取代Wc1-C6烷基。
7.具有以下通式II的如權(quán)利要求1所述的化合物或其藥物可接受的鹽、衍生物、互變 異構(gòu)體、前藥或立體異構(gòu)體 ι通式II其中HHRpRlt^Y和Rh如權(quán)利要求1中所定義。
8.如前述權(quán)利要求中任一權(quán)利要求所述的化合物，其中R1和R6各自獨(dú)立地選自氫和 取代或未取代WC1-C12烷基。
9.如權(quán)利要求8所述的化合物，其中R1和R6各自獨(dú)立地選自甲基、甲硫基甲基和異丙基。
10.如前述權(quán)利要求中任一權(quán)利要求所述的化合物，其中R2和R7為氫。
11.如前述權(quán)利要求中任一權(quán)利要求所述的化合物，其中各自獨(dú)立地選自氨基 保護(hù)基團(tuán)和-(C = 0)R”，其中每一 R”為取代或未取代的雜芳基。
12.如權(quán)利要求11所述的化合物，其中R5和Rltl各自獨(dú)立地為-(C= 0)R”，其中每一 R”為取代或未取代的喹啉基。
13.如前述權(quán)利要求中任一權(quán)利要求所述的化合物，其中RhSC1-C12烷基或者η為1 至 25 的-(CH2-CH2O) n-CH3 基團(tuán)。
14.如權(quán)利要求13所述的化合物，其中Rh選自甲基、乙基、丙基和異丙基。
15.如前述權(quán)利要求中任一權(quán)利要求所述的化合物，其中Y為S或NRi,并且Ri為氫、取 代或未取代的C1-C12烷基或者η為1至25的-(CH2-CH2O)n-CH3基團(tuán)。
16.如權(quán)利要求15所述的化合物，其中Y為NRi,并且Ri選自甲基、乙基、丙基和異丙基。
17.具有下式的如權(quán)利要求1所述的化合物或其藥物可接受的鹽、衍生物、互變異構(gòu) 體、前藥或立體異構(gòu)體
18.具有下式的如權(quán)利要求17所述的化合物或其藥物可接受的鹽、衍生物、互變異構(gòu) 體或前藥
19.藥物組合物，包含前述權(quán)利要求中任一權(quán)利要求所述的化合物或其藥物可接受的 鹽、衍生物、互變異構(gòu)體、前藥或立體異構(gòu)體以及藥物可接受的稀釋劑或載體。
20.用作藥物的如權(quán)利要求1至18中任一權(quán)利要求所述的化合物或其藥物可接受的 鹽、衍生物、互變異構(gòu)體、前藥或立體異構(gòu)體。
21.如權(quán)利要求20所述的化合物，用于治療癌癥。
22.如權(quán)利要求1至18中任一權(quán)利要求所述的化合物或其藥物可接受的鹽、衍生物、互 變異構(gòu)體、前藥或立體異構(gòu)體在制備藥物中的用途。
23.如權(quán)利要求22所述的用途，其中所述藥物用于治療癌癥。
24.治療患有癌癥的任何哺乳動物，特別是人的方法，所述方法包括向患病的個體給予 治療有效量的權(quán)利要求1至18中任一權(quán)利要求所述的化合物。
全文摘要
用作抗腫瘤劑的通式(I)的抗腫瘤化合物及其藥物可接受的鹽、衍生物、互變異構(gòu)體、前藥或立體異構(gòu)體。
文檔編號C07K7/56GK101932592SQ200880126032
公開日2010年12月29日 申請日期2008年12月10日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月14日
發(fā)明者朱棣特·圖拉-普持, 瑪麗亞·德爾·卡門·奎瓦斯馬昌特, 紐瑞阿·貝由-普西安, 艾麗奧諾拉·馬爾庫奇, 費(fèi)爾南多·阿爾波瑞希奧 申請人:馬爾藥品公司