專利名稱：：一種野黃芩素的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種野黃芩素
背景技術(shù)：
：野黃蒼素，又名燈盞花乙素皂苷苷元，其化學結(jié)構(gòu)是5，6，7，4-四羥基黃酮，與燈盞花乙素的區(qū)別在7位游離羥基，燈盞花乙素是燈盞花素注射液的主要成分，具有治療心腦血管疾病的作用，在臨床上具有很好的治療作用，而燈盞花素口服制劑的因為生物利用度低，臨床藥效作用不是很理想，大量文獻報道，燈盞花素在體內(nèi)的代^t產(chǎn)物為野黃芩素，而野黃芩素的生物利用度比燈盞花素高幾倍(《燈盞花乙素普元不同給藥劑量的大鼠藥動學比較》，車慶明等，中國新藥雜志2006年第15巻第18期)，因此，醫(yī)藥科研工作者認為野黃茶素可以開發(fā)成靳藥，但野黃茶素在燈盞花中含量很低，所以，需要科研工作者解決野黃芩素原料的問題。
發(fā)明內(nèi)容基于上述原因，我們科研人員通過長期研究發(fā)現(xiàn)，將燈盞花素水溶液，調(diào)節(jié)適當?shù)膲A性pH值，在適當?shù)臏囟认路磻?，調(diào)節(jié)pH值后，聚酰胺純化，得到含量大于98%的野黃茶素，本發(fā)明提取純化方法，以燈盞花素計得率更高，可以很^的解決提取率低難點。本發(fā)明通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)的。一種野黃茶素，按照下述方法制備得到燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值8-12，加熱至50°C-8(TC,恒溫50°C-80°C3-24小時，調(diào)節(jié)pH值2-6.5，濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用20°/。-90%乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到野黃茶素。其中燈盞花素中燈盞花乙素含量大于等于50%小于100%。其中優(yōu)選的野黃茶素，按照下述方法制備得到燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值8-10，加熱至5(TC-80。C，恒溫50°C-80°C3-24小時，調(diào)節(jié)pH值2-6.5，濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用20%-90°/乙醇洗，卩呆留乙醇洗脫液，濃縮，干燥,得到野黃芩素。其中優(yōu)選的野黃茶素，按照下述方法制備得到燈盞花素加水溶解完全,調(diào)節(jié)pH值8-12,加熱至60°C-75°C,恒溫60°C-75°C3-24小時，調(diào)節(jié)pH值2-6.5,濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用20%-90°/。乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，^燥,得到野黃芩素。其中優(yōu)選的野黃茶素，按照下述方法制備得到燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值8-12，加熱至50°C-80°C，恒溫50°C-80°C8-15小時，調(diào)節(jié)pH值2-6.5,濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用20%-90%乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到野黃芩素。其中優(yōu)選的野黃茶素，按照下述方法制備得到燈盞花素加水溶解完全,調(diào)節(jié)pH值8-12，加熱至50。C-8(TC，恒溫5(TC-8(TC3-24小時，調(diào)節(jié)pH值2-6.5,界縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用50%-80%乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，燥,得到野黃芩素。其中優(yōu)選的野黃茶素，按照下述方法制備得到燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值8-10,加熱至60°C-75°C，恒溫60°C-75°C8-15小時，調(diào)節(jié)pH值2-6.5，濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用50°/-80%乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥,得到野黃芩素。上述所述的方法制備得到野黃茶素為活性成分制備的藥物制劑。上述所述的方法制備得到野黃茶素在制備治療心腦血管疾病藥物中的應用。上述所述的藥物制劑，其中制劑為片劑、膠囊劑或顆粒劑。檢測分析方法高效液相色譜法色譜柱ds反相色譜柱。色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；O-IO分鐘時，甲醇的比例由5%升至100%，0.1-0.5%乙酸水溶液的比例由95%降至0%;10-20分鐘時，曱醇的比例由100°/。降至95%,0.1-0.5%乙酸水溶液的比例由0%降至5%;對照品溶液的配制精密稱取野黃茶素對照品到容量瓶中，加曱醇溶解搖勻，并稀釋至刻度；供試品溶液的配制精密稱取樣品，經(jīng)過處理后，放到容量瓶中，加甲醇溶解搖勻，并稀釋至刻度；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積或峰高計算含量即得。制備方法提取率比較試驗試驗方法取燈盞花素，等分，分別按照本發(fā)明工藝方法和發(fā)明專利(申請?zhí)?00410033687.5)工藝方法制備，得到野黃茶素，按照上述檢測方法，檢測其純度，計算得率。試驗結(jié)果見表l:表l不同制備方法工藝比較<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>公開專利工藝30.723.398.01I藥理試驗例試驗例1對大鼠離體心臟缺血再灌注損傷的保護作用實驗動物健康SD大鼠，體重200-300g。實驗方法將大鼠隨機分組正常對照組，模型組，燈盞花乙素組、野黃茶素組組。正常對照組給予含氧洛氏液，模型組給予氮飽和洛氏液，實驗藥物組給予含氮飽和藥物(實驗藥物用洛氏液配置)。取大鼠，尾靜脈注射肝素鈉(1000U/kg),15分鐘后擊暈，開胸，將心臟迅速取出，移至貯有4。C洛氏液的培養(yǎng)皿中，清洗心臟殘留血液，在液面下迅速把主動脈接于灌流的套管上，并以線結(jié)扎固定。立即以含氧洛氏液進行灌流。灌注壓70cm水柱，灌流溫度(38士5)。C，流速(11.5±0.5)mL/min。用蛙心夾夾住心尖部并與換能器相連，二道生理記錄儀描記心率變化。心臟復跳并心率顯示正常后，穩(wěn)定30min，再進行實驗。正常對照組，以含氧洛氏液持續(xù)灌流110min;才莫型組，以含氧洛氏液灌流30min后，改用氮飽和洛氏液灌注40min(此為缺氧灌注)，再恢復含氧洛氏液灌流40min;給藥組實驗方法基本同模型組，僅在缺氧灌注時改用不同濃度的氮飽和受試藥物灌注。實驗結(jié)果結(jié)果見表2。表2表對缺氧再給氧灌注損傷大鼠離體心臟冠脈流量的影響纟耳別劑量Mg/kg停灌前mLVmin復灌后2Q分鐘mL/min復灌后4G分鐘mlVmin正常組—7.2±0.36.3±0.8**5，7±L1*承模型組畫畫7.4±0.44.1±0.13.3±0.5燈盞花乙素組27.2±0.55.2±0.4*4.6±0.7*野黃荅素組27.4±0.55.8±0.3**5.0±0.6**注與沖莫型組比l交，*P<0.05,**P<0.01。試驗例2對大鼠急性心肌缺血的影響實驗動物Wistar大鼠，雌雄兼用，體重180—220g。實驗方法將大鼠隨機組即空白對照組、陽性藥物組、本發(fā)明藥物組。給藥量2mg/kg。每日灌胃給藥l次，連續(xù)7d，空白對照組給予等體積的蒸餾水。于末次給藥lh后用2.5%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，仰臥固定。用針電極刺入四肢皮下，記錄標準II導聯(lián)心電圖，作為基礎(chǔ)心電圖對照，然后尾靜脈注射垂體后葉素0.5U/kg，于10s內(nèi)注射完畢，立即記錄注射垂體后葉素后5s、10s、15s、30s、lmin、2min、3min的心電圖，，見察T波、ST^殳和心率的變化。以心電圖出現(xiàn)下列指標一項者即為陽性心肌缺血J點升高1.5mV以上，T波低平(降低原T波高度50%以上)、雙向、倒置，ST段水平下移0.5mV，心律不齊。實驗結(jié)果結(jié)果見表2。表2對大鼠急性心肌缺血的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>制備實施例實施例1燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值8，加熱至5(TC,恒溫50°C3-小時，調(diào)節(jié)pH值2,濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用20°/4乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥,得到野黃茶素。實施例2燈盞花素加水溶解完全,調(diào)節(jié)pH值12，加熱至8(TC,恒溫80°C24小時，調(diào)節(jié)j)H值6.5，濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用90%乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥,得到野黃芩素。實施例3燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值IO,加熱至65°C,恒溫65°C15小時，調(diào)節(jié)pH值4.5，濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用55%乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥,得到野黃芩素。實施例4燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值8，加熱至5(TC，恒溫5(TC3小時，調(diào)節(jié)pH值2,濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用201乙醇洗,保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到野黃茶素。實施例5燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值IO，加熱至8(TC，恒溫80°C24小時，調(diào)節(jié)pH值6.5,濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用90%乙醇洗,保留乙醇洗脫液，濃縮，千燥，得到野黃芩素。實施例6燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值8,5，加熱至55°C，恒溫55°C4小時，調(diào)節(jié)pH值3.5,濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗,再用25%乙醇洗,保留乙醇洗脫液，濃縮，千燥,得到野黃茶素。實施例7燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值8，加熱至6(TC，恒溫6(TC3小時，調(diào)節(jié)pH值2,濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用20%乙醇洗,保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到野黃茶素。實施例8燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值12,加熱至75°C，恒溫75°C24小時，調(diào)節(jié)pH值6.5,濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用90%乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到野黃茶素。實施例9燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值9.5，加熱至7(TC,恒溫7(TC8小時，調(diào)節(jié)pH值5，濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用50%乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到野黃茶素。實施例10燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值8,加熱至5(TC，恒溫50°C8小時，調(diào)節(jié)pH值2，濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗,再用2oy。乙醇洗,保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥,得到野黃芩素。實施例11燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值12,加熱至8(TC,恒溫80°C15小時，調(diào)節(jié)pH值6.5，濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用90%乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到野黃芩素。實施例12燈盞花素加水溶解完全,調(diào)節(jié)PH值ll，加熱至65。C,恒溫65°C14小時，調(diào)節(jié)pH值4.5,濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗,再用85%乙醇洗,保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥,得到野黃芩素。實施例13燈盞花素加水溶解完全,調(diào)節(jié)pH值8,加熱至5(TC,恒溫5(TC3小時，調(diào)節(jié)pH值2，濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用50°/。乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到野黃芩素。實施例14燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值12,加熱至80°C，恒溫80°C24小時，調(diào)節(jié)pH值6.5，濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用80%乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到野黃芩素。實施例15燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值11.5，加熱至55°C，恒溫55。C22小時，調(diào)節(jié)pH值5.0,濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用70%乙醇洗,保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥,得到野黃茶素。實施例16燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值8，加熱至6(TC，恒溫60°C8小時，調(diào)節(jié)pH值2，濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用50%乙醇洗,保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到野黃芩素。實施例17燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值IO,加熱至75°C，恒溫75°C15小時，調(diào)節(jié)pH值6.5，濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用80%乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥,得到野黃茶素。實施例18燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值9，加熱至70。C,恒溫70°C12小時，調(diào)節(jié)pH值4，濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用65%乙醇洗,保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥,得到野黃茶素。上述試驗例中燈盞花素中燈盞花乙素含量大于等于50%小于100%。上述試驗例制備的野黃茶素為活性成分制備的藥物制劑。其中制劑為片劑、膠囊劑或顆粒劑。上述試驗例制備的野黃茶素在制備治療心腦血管疾病藥物中的應用。權(quán)利要求1、一種野黃芩素，其特征在于燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值8-12，加熱至50℃-80℃，恒溫50℃-80℃3-24小時，調(diào)節(jié)pH值2-6.5，濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用20％-90％乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到野黃芩素。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種野黃茶素，其中燈盞花素中燈盞花乙素含量大于等于50%小于100%。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種野黃茶素，其中燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值8-10,加熱至50。C-80。C，恒溫5(TC-80。C3-24小時，調(diào)節(jié)pH值2-6.5,濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用20%-90%乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，千燥，得到野黃芩素。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種野黃茶素，其中燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值8-12,加熱至6(TC-75。C，恒溫6(TC-75。C3-24小時，調(diào)節(jié)pH值2-6.5，濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用20°/-90%乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，千燥,得到野黃芩素。5、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種野黃茶素，其中燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值8-12，加熱至50。C-8(TC,恒溫50°C-80°C8-15小時，調(diào)節(jié)pH值2-6.5，濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用20°/廣90°/。乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，千燥,得到野黃芩素。6、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種野黃茶素，其中燈盞花素加水溶解完全,調(diào)節(jié)pH值8-12,加熱至50。C-8(TC，恒溫50°C-80°C3-24小時,調(diào)節(jié)pH值2-6.5，濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用50%-80%乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到野黃芩素。7、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種野黃茶素，其中燈盞花素加水溶解完全，調(diào)節(jié)pH值8-IO,加熱至60°C-75。C，恒溫60°C-75°C8-15小時，調(diào)節(jié)pH值2-6.5,濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用50%-80%乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥,得到野黃芩素。.8、根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項所述的一種野黃芩素為活性成分制備的藥物制劑。9、根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項所述的一種野黃芩素在制備治療心腦血管疾病藥物中的應用。10、根據(jù)權(quán)利要求8所述的藥物制劑，其中制劑為片劑、膠嚢劑或顆粒劑。全文摘要本申請公開一種野黃芩素，其特征在于燈盞花素加水溶解完全，加熱至35℃-45℃，恒溫35℃-45℃，調(diào)節(jié)pH值8.0-12.0，加入消化酶，恒溫35℃-45℃放置2-12小時，調(diào)節(jié)pH值2.0-6.5，濃縮，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用20％-90％乙醇洗，保留乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到野黃芩素。本發(fā)明工藝方法提取率高，野黃芩素純度高，可以作為藥物制劑活性成分使用。文檔編號C07D311/00GK101591320SQ20091008767公開日2009年12月2日申請日期2009年7月2日優(yōu)先權(quán)日2009年7月2日發(fā)明者周小亮,周美吟,安曉雪申請人:周玲