專利名稱：一種從鐮形棘豆中制備鼠李檸檬素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物分離領(lǐng)域，尤其是涉及一種從鐮形棘豆中制備鼠李檸檬素的方法。
背景技術(shù)：
鐮形棘豆為豆科棘豆屬的一種藥用植物，藏藥稱之為“莪大夏”，是藏藥常用的三大抗炎藥之一，藏藥書籍記載，為全草入藥，具有清熱解毒、生肌斂瘡、澀脈止血、通利大便等功效；內(nèi)服可治流感、扁桃體炎、高燒、喉炎、氣管炎、出血、便秘、炭疽等癥以及藏醫(yī)的黃水病，外敷治療瘡癤腫痛、創(chuàng)傷、骨傷疼痛。現(xiàn)代研究表明，以酸水解工藝提取、純化得到的總黃酮苷元能增加腎上腺皮質(zhì)功能且無皮質(zhì)激素樣作用，在治療慢性氣管炎和祛痰方面有較好的療效。鐮形棘豆總提取物也被證實(shí)具有良好的鎮(zhèn)痛抗炎活性。鼠李檸檬素是鐮形棘豆中黃酮類的主要成分，在鐮形棘豆中約占0. 3%，它是鐮形棘豆的活性成分之一，具有抗氧化、抑菌作用，并對腫瘤生長有抑制作用?，F(xiàn)有從鐮形棘豆中制備鼠李檸檬素方法較少。如文獻(xiàn)“大孔吸附樹脂富集藏藥鐮形棘豆總黃酮的工藝研究”，文獻(xiàn)采用的方法為水提取、大孔樹脂吸附、乙醇梯度洗脫得到了總黃酮，鼠李檸檬素含量較低。再如文獻(xiàn)“藏藥鐮形棘豆中化學(xué)成分研究”，該文獻(xiàn)采用的方法是鐮形棘豆藥材，用90%工業(yè)乙醇浸泡，提取液減壓濃縮得粗浸膏133g，粗浸膏懸浮于水中用石油醚、氯仿、乙酸乙酯依次萃取，氯仿萃取部分，經(jīng)硅膠柱色譜分離，得到高純度鼠李檸檬素，該方法較繁瑣，專屬性較低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種鐮形棘豆中制備鼠李檸檬素的方法，工藝專屬性高，較易工業(yè)化。為了解決上述問題，本發(fā)明是采用以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的—種從鐮形棘豆中制備鼠李檸檬素的方法，其特征在于包含以下步驟1)提取將鐮形棘豆原料粉碎，加入7-10倍量50-70%甲醇溶液回流提取2_3次， 濾過減壓回收甲醇，得濃縮液；2)大孔樹脂吸附將上述濃縮液加適量水分散，加入大孔樹脂柱吸附，水洗樹脂柱無糖色，再用5-7倍量40-60%甲醇溶液洗脫，洗脫液回收甲醇加入鹽酸水解，離心，水洗固體物至中性，得粗提物；3)分離將上述粗提物，加2-3倍量5%碳酸氫鈉溶液攪拌溶解，離心去液體，沉淀物水洗中性，用甲醇溶解加入聚酰胺樹脂拌樣烘干，裝聚酰胺柱，丙酮溶液梯度洗脫，收集鼠李檸檬素流分濃縮放置結(jié)晶，得粗結(jié)晶物；4)重結(jié)晶將上述粗結(jié)晶物用90-95%乙醇回流重結(jié)晶2 3次，結(jié)晶物干燥得產(chǎn)
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ΡΠ O所述大孔樹脂型號可選AB-8、HZ-816和LSA-20中的一種。
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所述水解中鹽酸濃度2-4mol/L，水解溫度80_90°C。所述丙酮溶液梯度為先3-5倍量20-40%丙酮洗脫雜質(zhì)再4_6倍量50-70%丙酮洗脫有效成分。本發(fā)明積極效果在于，發(fā)明采用大孔樹脂吸附和聚酰胺分離，此法對分離鼠李檸檬素專屬性較高，酸水解提高了產(chǎn)品的的收率，本方法操作較為簡單，適合工業(yè)化生產(chǎn)，而且得到的產(chǎn)品含量較高。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1:取鐮形棘豆原料粉碎20目，取^g投入中試不銹鋼提取罐加入50kg50%甲醇溶液回流提取2小時，抽濾液體后，再加40kg50%甲醇溶液回流1小時，合并兩次提取液濾過減壓回收甲醇，濃縮液加適量水分散，加入3LAB-8大孔樹脂柱吸附，流速3L/h，吸附完成后， 水洗樹脂柱無糖色，用21L40%甲醇溶液洗脫，收集洗脫液回收甲醇加入鹽酸水解，使鹽酸濃度至2mol/L，保溫90°C，水解4小時，離心得固體物，水洗固體物至中性，得粗提物80g，粗提物加160ml 5%碳酸氫鈉溶液攪拌溶解，離心去液體，沉淀物水洗中性，用甲醇溶解加入 50g聚酰胺樹脂拌樣烘干，取250g聚酰胺裝柱，樣品裝入頂端，取1.5L20%丙酮洗脫雜質(zhì)， 再用1.8L50%丙酮洗脫有效成分，收集鼠李檸檬素流分濃縮至400ml放置結(jié)晶，得粗結(jié)晶物19g，將粗結(jié)晶物用95%乙醇回流重結(jié)晶2次，結(jié)晶物干燥得鼠李檸檬素11. 4g，經(jīng)高效液相檢測含量96.8%。實(shí)施例2:取鐮形棘豆原料粉碎40目，取^g投入中試不銹鋼提取罐加入40kg50%甲醇溶液回流提取2小時，抽濾液體后，再加40kg50%甲醇溶液回流1小時，合并兩次提取液濾過減壓回收甲醇，濃縮液加適量水分散，加入3L HZ-816大孔樹脂柱吸附，流速4L/h，吸附完成后，水洗樹脂柱無糖色，用15L60%甲醇溶液洗脫，收集洗脫液回收甲醇加入鹽酸水解，使鹽酸濃度至4mol/L，保溫80°C，水解2小時，離心得固體物，水洗固體物至中性，得粗提物95g， 粗提物加200ml 5%碳酸氫鈉溶液攪拌溶解，離心去液體，沉淀物水洗中性，用甲醇溶解加入60g聚酰胺樹脂拌樣烘干，取300g聚酰胺裝柱，樣品裝入頂端，取1. 1L40%丙酮洗脫雜質(zhì)，再用1. 5L70%丙酮洗脫有效成分，收集鼠李檸檬素流分濃縮至300ml放置結(jié)晶，得粗結(jié)晶物22g，將粗結(jié)晶物用90%乙醇回流重結(jié)晶3次，結(jié)晶物干燥得鼠李檸檬素9. 4g，經(jīng)高效液相檢測含量98.8%。實(shí)施例3:取鐮形棘豆原料粉碎60目，取5kg投入中試不銹鋼提取罐加入40kg70%甲醇溶液回流提取2小時，抽濾液體后，再加40kg70%甲醇溶液回流1小時，合并兩次提取液濾過減壓回收甲醇，濃縮液加適量水分散，加入3LLSA-20大孔樹脂柱吸附，流速3. 6L/h，吸附完成后，水洗樹脂柱無糖色，用18L60%甲醇溶液洗脫，收集洗脫液回收甲醇加入鹽酸水解，使鹽酸濃度至2mol/L，保溫80°C，水解3小時，離心得固體物，水洗固體物至中性，得粗提物 107g，粗提物加300ml 5%碳酸氫鈉溶液攪拌溶解，離心去液體，沉淀物水洗中性，用甲醇溶解加入80g聚酰胺樹脂拌樣烘干，取320g聚酰胺裝柱，樣品裝入頂端，取1.2L40%丙酮洗脫雜質(zhì)，再用2L60%丙酮洗脫有效成分，收集鼠李檸檬素流分濃縮至300ml放置結(jié)晶，得粗結(jié)晶物Mg，將粗結(jié)晶物用95%乙醇回流重結(jié)晶2次，結(jié)晶物干燥得鼠李檸檬素12. 4g，經(jīng)高效液相檢測含量94.8%。實(shí)施例4 取鐮形棘豆原料粉碎60目，取IOkg投入中試不銹鋼提取罐加入80kg70%甲醇溶液回流提取2小時，抽濾液體后，再加80kg70%甲醇溶液回流1小時，合并兩次提取液濾過減壓回收甲醇，濃縮液加適量水分散，加入6LHZ-816大孔樹脂柱吸附，流速7L/h，吸附完成后，水洗樹脂柱無糖色，用35L60%甲醇溶液洗脫，收集洗脫液回收甲醇加入鹽酸水解，使鹽酸濃度至3mol/L，保溫80°C，水解3小時，離心得固體物，水洗固體物至中性，得粗提物 210g，粗提物加600ml 5%碳酸氫鈉溶液攪拌溶解，離心去液體，沉淀物水洗中性，用甲醇溶解加入160g聚酰胺樹脂拌樣烘干，取440g聚酰胺裝柱，樣品裝入頂端，取1. 5L30%丙酮洗脫雜質(zhì)，再用3L60%丙酮洗脫有效成分，收集鼠李檸檬素流分濃縮至500ml放置結(jié)晶，得粗結(jié)晶物51g，將粗結(jié)晶物用95%乙醇回流重結(jié)晶2次，結(jié)晶物干燥得鼠李檸檬素23. 6g，經(jīng)高效液相檢測含量96.8%。
權(quán)利要求
1.一種從鐮形棘豆中制備鼠李檸檬素的方法，其特征在于包含以下步驟1)提取將鐮形棘豆原料粉碎，加入7-10倍量50-70%甲醇溶液回流提取2-3次，濾過減壓回收甲醇，得濃縮液；2)大孔樹脂吸附將上述濃縮液加適量水分散，加入大孔樹脂柱吸附，水洗樹脂柱無糖色，再用5-7倍量40-60%甲醇溶液洗脫，洗脫液回收甲醇加入鹽酸水解，離心，水洗固體物至中性，得粗提物；3)分離將上述粗提物，加2-3倍量5%碳酸氫鈉溶液攪拌溶解，離心去液體，沉淀物水洗中性，用甲醇溶解加入聚酰胺樹脂拌樣烘干，裝聚酰胺柱，丙酮溶液梯度洗脫，收集鼠李檸檬素流分濃縮放置結(jié)晶，得粗結(jié)晶物；4)重結(jié)晶將上述粗結(jié)晶物用90-95%乙醇回流重結(jié)晶2 3次，結(jié)晶物干燥得產(chǎn)品。
2.如權(quán)利要求1所述從鐮形棘豆中制備鼠李檸檬素的方法，其特征在于步驟幻中所述大孔樹脂型號可選AB-8、HZ-816和LSA-20中的一種。
3.如權(quán)利要求1所述從鐮形棘豆中制備鼠李檸檬素的方法，其特征在于步驟幻中所述水解中鹽酸濃度2-4mol/L，水解溫度80-90°C。
4.如權(quán)利要求1所述從鐮形棘豆中制備鼠李檸檬素的方法，其特征在于步驟幻中所述丙酮溶液梯度為先3-5倍量20-40%丙酮洗脫雜質(zhì)再4-6倍量50-70%丙酮洗脫有效成分。
全文摘要
本發(fā)明涉及了一種從鐮形棘豆中制備鼠李檸檬素的方法。方法是以鐮形棘豆為原料粉碎，加入7-10倍量50-70％甲醇溶液回流提取2-3次，提取液減壓回收甲醇，濃縮液加適量水分散，加入大孔樹脂柱吸附，水洗樹脂柱無糖色，5-7倍量40-60％甲醇溶液洗脫，洗脫液回收甲醇加入鹽酸水解，離心，水洗固體物至中性，加2-3倍量5％碳酸氫鈉溶液攪拌溶解，離心去液體，沉淀物水洗中性，用甲醇溶解加入聚酰胺樹脂拌樣烘干，裝聚酰胺柱，丙酮溶液梯度洗脫，收集鼠李檸檬素流分濃縮放置結(jié)晶，90-95％乙醇回流重結(jié)晶2～3次，干燥得產(chǎn)品。該方法專屬性高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07D311/40GK102464641SQ20101054979
公開日2012年5月23日 申請日期2010年11月19日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月19日
發(fā)明者劉東鋒, 李法慶, 楊成東 申請人:蘇州寶澤堂醫(yī)藥科技有限公司