專利名稱：一種純化橄欖苦苷的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種純化橄欖苦苷的方法，尤其是一種利用高速逆流色譜純化橄欖苦苷的方法。
背景技術：
橄欖苦苷是一種苯酚類裂環(huán)環(huán)烯醚萜苷，分子式=C25H32O13,分子量M0. 43，易溶于熱水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯等，不溶于氯仿、石油醚等非極性有機試劑。橄欖苦苷，具有抗氧化能力，能減輕低密度脂蛋白的氧化程度，預防冠心病、動脈粥樣硬化的發(fā)生，也能舒緩血管平滑肌和降低血壓。橄欖苦苷多是從橄欖葉和小葉丁香中提取，得到多是低含量產(chǎn)品。如中國專利“富含高純度橄欖苦苷的油橄欖葉提取物的制備方法”，該方法公開的是先用極性溶劑對油橄欖葉進行提取，再堿性離心沉降，獲得離心清液和沉淀物，接著進行膜耦合分離，得到通過納濾膜的濃縮液，再介質吸附，對吸附介質進行洗脫得到洗脫液，真空濃縮，再進行真空冷凍干燥或噴霧干燥，獲得橄欖苦苷含量50%左右。文獻“D-101大孔樹脂富集橄欖葉中橄欖苦苷的研究”，該文獻采用大孔樹脂富集， 制得含橄欖苦苷21. 6%的提取物。傳統(tǒng)的橄欖苦苷的提取工藝是從小香葉中提取，工藝路線為小葉丁香-乙醇流提取-滲濾濃縮-溶劑萃取-正丁醇浸膏-柱層析分-橄欖苦苷。這種工藝有機溶劑用量大，成本高。而專利“一種橄欖葉提取物的制備方法”是先用極性溶劑對橄欖葉進行提取，乙酸乙酯萃取，制備型高效液相色譜柱進一步分離，獲得橄欖苦苷含量大于90%。該方法采用制備液相純化，制備量小，溶劑利用率低，成本較高。文獻“kphadexLH-20純化橄欖苦苷”，分
離量小，周期長。

發(fā)明內容
本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種純化橄欖苦苷方法，是應用高速逆流色譜法分離橄欖苦苷，采用兩相溶劑高速逆流萃取，樣品無損失，溶劑可以重復利用。本發(fā)明是采用以下技術方案實現(xiàn)的一種純化橄欖苦苷的方法，其特征在于包含以下步驟1)提取橄欖葉粉碎，加入5-10倍量70-90%乙醇溶液回流提取2-3次，提取液加入活性炭脫色，濾出活性炭，回收乙醇，濃縮液加入水飽和正丁醇萃取3-5次，收集正丁醇層減壓回收，得到浸膏；2)分離選用氯仿-甲醇-正丁醇-水溶劑系統(tǒng)，用制備型高速逆流色譜儀分離浸膏，收集有效成分，減壓干燥得高含量橄欖苦苷。所述步驟2)氯仿-甲醇-正丁醇-水溶劑系統(tǒng)比為3-6 2-4 2-3 1_2。本發(fā)明積極效果在于高速逆流色分離是一種無需固體載體，利用兩相溶劑高速逆流分離，比常規(guī)硅膠柱、制備液相分離橄欖苦苷，周期短，產(chǎn)品收率高，制備量大。下面將結合具體實施方式
進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例1:橄欖葉粉碎，取1kg，加入10L90%乙醇溶液回流提取2次，合并提取液加入IOOg 活性炭回流脫色1小時，濾出活性炭，減壓回收乙醇，濃縮液加入IL水飽和正丁醇萃取3 次，收集正丁醇層減壓回收，得浸膏。取氯仿、甲醇、正丁醇、水按3 :4:2: 1混合，取下相溶解浸膏，以上相為固定相，用制備型高速逆流色譜儀分離，轉速控制850r/min，流速控制在2ml/min，進樣分離，收集橄欖苦苷有效成分減壓干燥，得9. Ig橄欖苦苷，含量96. 7 %。實施例2:橄欖葉粉碎，取1kg，加入10L70%乙醇溶液回流提取2次，合并提取液加入80g 活性炭回流脫色1小時，濾出活性炭，減壓回收乙醇，濃縮液加入500L水飽和正丁醇萃取5 次，收集正丁醇層減壓回收，得浸膏。取氯仿、甲醇、正丁醇、水按6 :3:3: 1混合，取下相溶解浸膏，以上相為固定相，用制備型高速逆流色譜儀分離，轉速控制lOOOr/min，流速控制在3ml/min，進樣分離，收集橄欖苦苷有效成分減壓干燥，得9. 5g橄欖苦苷，含量95. 5 %。實施例3:橄欖葉粉碎，取1kg，加入5L80%乙醇溶液回流提取3次，合并提取液加入120g 活性炭回流脫色1小時，濾出活性炭，減壓回收乙醇，濃縮液加入500L水飽和正丁醇萃取4 次，收集正丁醇層減壓回收，得浸膏。取氯仿、甲醇、正丁醇、水按4 :3:3: 2混合，取下相溶解浸膏，以上相為固定相，用制備型高速逆流色譜儀分離，轉速控制700r/min，流速控制在lml/min，進樣分離，收集橄欖苦苷有效成分減壓干燥，得8. 7g橄欖苦苷，含量97. 2%。
權利要求
1.一種純化橄欖苦苷的方法，其特征在于包含以下步驟1)提取橄欖葉粉碎，加入5-10倍量70-90%乙醇溶液回流提取2-3次，提取液加入活性炭脫色，濾出活性炭，回收乙醇，濃縮液加入水飽和正丁醇萃取3-5次，收集正丁醇層減壓回收，得到浸膏；2)分離選用氯仿-甲醇-正丁醇-水溶劑系統(tǒng)，用制備型高速逆流色譜儀分離浸膏， 收集有效成分，減壓干燥得高含量橄欖苦苷。
2.如權利要求1所述的從橄欖葉中提取橄欖苦苷的方法，其特征在于所述步驟2)氯仿-甲醇-正丁醇-水溶劑系統(tǒng)比為3-6 2-4 2-3 1-2。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種快速、高效純化橄欖苦苷的方法。方法是橄欖葉粉碎，加入5-10倍量70-90％乙醇溶液回流提取2-3次，提取液加入活性炭脫色，濾出活性炭，回收乙醇，濃縮液加入水飽和正丁醇萃取3-5次，收集正丁醇層減壓回收，得到浸膏；選用氯仿-甲醇-正丁醇-水溶劑系統(tǒng)(3-6∶2-4∶2-3∶1-2)，用制備型高速逆流色譜儀分離浸膏，收集有效成分，減壓干燥得高含量橄欖苦苷。采用本方法純化橄欖苦苷，所的產(chǎn)品含量高，制備量大，成本低。
文檔編號C07H17/04GK102464684SQ20101054980
公開日2012年5月23日 申請日期2010年11月19日 優(yōu)先權日2010年11月19日
發(fā)明者劉東鋒, 李法慶, 楊成東 申請人:蘇州寶澤堂醫(yī)藥科技有限公司