專利名稱：一種瓜子金皂苷己的提純方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種瓜子金皂苷己的提純方法，特別是涉及一種瓜子金皂苷己的高效快速提純方法。
背景技術(shù)：
瓜子金為遠(yuǎn)志科植物瓜子金/^hgah jaPonica Houtt.的干燥全草。又叫辰砂草、金鎖匙、瓜子草、掛米草、竹葉地丁、金牛草。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為瓜子金性味辛、苦，具有祛痰止咳，活血消腫，解毒止痛等功效。用于咳嗽痰多、咽喉腫痛；外治跌打損傷，療瘡癤腫，蛇蟲咬傷?，F(xiàn)代研究表明，瓜子金中含有皂苷類、黃酮類物質(zhì)等多種功能性成分，具有降血糖、抗炎鎮(zhèn)靜及抗腫瘤作用。瓜子金皂苷己(Polygalasaponin F)是一種從瓜子金中分離出的三萜類皂苷，分子式C53H86023，具有降血糖、抗炎鎮(zhèn)靜及抗腫瘤作用，也是衡量瓜子金藥材質(zhì)量的指標(biāo)性成分。通過文獻(xiàn)檢索，提純瓜子金皂苷己的方法，多采用乙醇回流提取，提取液再濃縮后上大孔樹脂吸附，洗脫液減所后硅膠柱發(fā)分離或再經(jīng)凝膠柱、制備液相分離制的高純度瓜子金皂苷己。如專利(申請(qǐng)?zhí)?00410089313.5) “瓜子金皂苷類化合物及苷元，總皂苷及總皂苷元及其在醫(yī)藥中的應(yīng)用”和文獻(xiàn)“瓜子金有效部位群抗炎作用機(jī)制研究”。這些方法多是操作復(fù)雜，尤其是在硅膠柱和凝膠柱分離過程，試劑用量大，樣品得率低，周期較長，尤其在放大過程重現(xiàn)率低，對(duì)人員技術(shù)水平要求較高，導(dǎo)致供量小、價(jià)格高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷和不足，提供一種瓜子金皂苷己的提純方法，方法操作簡單，效率高。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的 一種瓜子金皂苷己的提純方法，其特征在于以下步驟
i取瓜子金藥材粉碎60-80目，加入超臨界萃取釜中，在萃取壓力15-25MPa、溫度 40-600C的條件下，通入液態(tài)C02和夾帶劑超臨界萃取2-3小時(shí)，在壓力5_10MPa，溫度 50-60°C解析萃取物，原料殘?jiān)懦黾尤?0-90%乙醇溶液微波提取，提取液濃縮加入大孔樹脂中吸附，取3-7倍量40-70%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液濃縮得浸膏；
把上述浸膏采用高速逆流色譜純化，蒸發(fā)光散射檢測器檢測，收集目標(biāo)成分，回收試劑，減壓干燥即得。所述的夾帶劑可選甲醇、乙醇、丙酮和乙酸乙酯中一種，用量為原料的1-3倍量所述的大孔樹脂可選NK-9、ADS-21和HPD417中的一種。所述的高速逆流色譜分離的溶劑系統(tǒng)可選乙酸乙酯、丁醇、甲醇和水四元溶劑系統(tǒng)，混合比例4-10 1-3 1-2 5-10，取上相做固定相，下相做流動(dòng)相。所述的高速逆流色譜分離的溶劑系統(tǒng)可選乙酸乙酯、正丁醇和水三元溶劑系統(tǒng)，混合比例3-10:1-2:5-15，取上相做固定相，下相做流動(dòng)相。本發(fā)明的技術(shù)優(yōu)勢(shì)有
1.方法采用了超臨界C02萃取雜質(zhì)，因?yàn)楣献咏鹪碥占旱姆肿恿看?，不易被萃取出，而小分子和低極性的物質(zhì)，尤其有夾帶劑的更容易被萃取出，這種除雜方式操作簡便，而且周期較短。2.方法采用了高速逆流色譜法純化，方法簡便易操作，溶劑用量小，樣品無損失， 制備量大，可連續(xù)制備，而且無污染。
具體實(shí)施例方式下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明。實(shí)施例1
瓜子金藥材粉碎60目，取Ikg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)C02，設(shè)置在萃取壓力 20MPa、溫度50°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)C02流速為20kg/h，同時(shí)通入無水甲醇lL/h， 動(dòng)態(tài)萃取3小時(shí)，在壓力5MPa，溫度50°C調(diào)件下解析萃取物。原料殘?jiān)懦黾尤?0L70%乙醇溶液微波提取30分鐘，提取2次，提取液減壓濃縮加適量水稀釋，加入300gNK-9大孔樹脂中吸附，取3倍量70%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得浸膏12g。取乙酸乙酯、丁醇、甲醇和水溶劑，按比例4:1:1:5混合，充分分層后，取上相做固定注滿高速逆流色譜管，轉(zhuǎn)動(dòng)主機(jī)800rpm，泵入下相做流動(dòng)相，待動(dòng)態(tài)平衡后，流速調(diào)整為 2ml/min,同時(shí)用流動(dòng)相溶解浸膏，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，蒸發(fā)光散射檢測器在線檢測，收集目標(biāo)成分，連續(xù)制備，回收試劑，減壓干燥得白色粉末瓜子金皂苷己3g，經(jīng)檢測，含量95. 1。實(shí)施例2:
瓜子金藥材粉碎80目，取Ikg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)C02，設(shè)置在萃取壓力 25MPa、溫度50°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)C02流速為20kg/h，同時(shí)通入無水丙酮300ml/ h，動(dòng)態(tài)萃取3小時(shí)，在壓力8MPa，溫度50°C調(diào)件下解析萃取物。原料殘?jiān)懦黾尤?0L90% 乙醇溶液微波提取30分鐘，提取3次，提取液減壓濃縮加適量水稀釋，加入400g ADS-21大孔樹脂中吸附，取5倍量50%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得浸膏9g。取乙酸乙酯、丁醇、甲醇和水溶劑，按比例5:1:1:7混合，充分分層后，取上相做固定注滿高速逆流色譜管，轉(zhuǎn)動(dòng)主機(jī)900rpm，泵入下相做流動(dòng)相，待動(dòng)態(tài)平衡后，流速調(diào)整為 3ml/min,同時(shí)用流動(dòng)相溶解浸膏，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，蒸發(fā)光散射檢測器在線檢測，收集目標(biāo)成分，連續(xù)制備，回收試劑，減壓干燥得白色粉末瓜子金皂苷己3. 4g，經(jīng)檢測，含量98. 5%。實(shí)施例3:
瓜子金藥材粉碎60目，取Ikg加入超臨界萃取釜中，通入液態(tài)C02，設(shè)置在萃取壓力 15MPa、溫度60°C，達(dá)到上述參數(shù)后，調(diào)整液態(tài)C02流速為20kg/h，同時(shí)通入95%乙醇lL/h， 動(dòng)態(tài)萃取3小時(shí)，在壓力5MPa，溫度60°C調(diào)件下解析萃取物。原料殘?jiān)懦黾尤?0L70%乙醇溶液微波提取30分鐘，提取2次，提取液減壓濃縮加適量水稀釋，加入350g HPD417大孔樹脂中吸附，取7倍量40%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得浸膏14g。取乙酸乙酯、正丁醇和水溶劑，按比例4:1:5混合，充分分層后，取上相做固定注滿高速逆流色譜管，轉(zhuǎn)動(dòng)主機(jī)700rpm，泵入下相做流動(dòng)相，待動(dòng)態(tài)平衡后，流速調(diào)整為Iml/ min，同時(shí)用流動(dòng)相溶解浸膏，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，蒸發(fā)光散射檢測器在線檢測，收集目標(biāo)成分，連續(xù)制備，回收試劑，減壓干燥得白色粉末瓜子金皂苷己3. 7g，經(jīng)檢測，含量97. 5%。
權(quán)利要求
1.一種瓜子金皂苷己的提純方法，其特征在于以下步驟i取瓜子金藥材粉碎60-80目，加入超臨界萃取釜中，在萃取壓力15-25MPa、溫度 40-600C的條件下，通入液態(tài)C02和夾帶劑超臨界萃取2-3小時(shí)，在壓力5_10MPa，溫度 50-60°C解析萃取物，原料殘?jiān)懦黾尤?0-90%乙醇溶液微波提取，提取液濃縮后加入大孔樹脂中吸附，取3-7倍量40-70%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液濃縮得浸膏； 把上述浸膏采用高速逆流色譜純化，蒸發(fā)光散射檢測器檢測，收集目標(biāo)成分，回收試劑，減壓干燥即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的瓜子金皂苷己的提純方法，其特征在于步驟i中所述的夾帶劑可選甲醇、乙醇、丙酮和乙酸乙酯中一種，用量為原料的1-3倍量。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的瓜子金皂苷己的提純方法，其特征在于步驟i中所述的大孔樹脂可選NK-9、ADS-21和HPD417中的一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的瓜子金皂苷己的提純方法，其特征在于步驟ii中所述的高速逆流色譜分離的溶劑系統(tǒng)可選乙酸乙酯、丁醇、甲醇和水四元溶劑系統(tǒng)，混合比例 4-10 1-3 1-2 5-10，取上相做固定相，下相做流動(dòng)相。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的瓜子金皂苷己的提純方法，其特征在于步驟ii中所述的高速逆流色譜分離的溶劑系統(tǒng)可選乙酸乙酯、正丁醇和水三元溶劑系統(tǒng)，混合比例 3-10:1-2:5-15，取上相做固定相，下相做流動(dòng)相。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種瓜子金皂苷己的提純方法。方法步驟如下i取瓜子金藥材粉碎60-80目，加入超臨界萃取釜中，在萃取壓力15-25MPa、溫度40-60℃的條件下，通入液態(tài)CO2和夾帶劑超臨界萃取2-3小時(shí)，在壓力5-10MPa，溫度50-60℃解析萃取物，原料殘?jiān)懦黾尤?0-90%乙醇溶液微波提取，提取液濃縮后加入大孔樹脂中吸附，取3-7倍量40-70%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液濃縮得浸膏；ii把上述浸膏采用高速逆流色譜純化，蒸發(fā)光散射檢測器檢測，收集目標(biāo)成分，回收試劑，減壓干燥即得。采用本方法提純瓜子金皂苷己，生產(chǎn)周期短，效率高，污染小，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07H15/256GK102391350SQ20111030388
公開日2012年3月28日 申請(qǐng)日期2011年10月10日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月10日
發(fā)明者劉東鋒, 楊成東 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司