芥子堿氯化鹽的制備方法及其醫(yī)藥應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及中藥中生物活性成分的提取制備方法，尤其涉及具有降壓和平喘作用有效成分-芥子堿氯化鹽的制備方法。本發(fā)明以十字花科植物種子及其籽粕為原料，經(jīng)過提取，重結(jié)晶，離子交換等步驟獲得純度達(dá)80%-99%芥子堿氯化鹽。本發(fā)明具有提取工藝簡便、收率高、不引入有毒物質(zhì)，成本低廉的特點(diǎn)，在降壓、平喘藥物研究開發(fā)上具有非常重要的意義。
【專利說明】芥子堿氯化鹽的制備方法及其醫(yī)藥應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及芥子堿氯化鹽的制備工藝，還涉及芥子堿氯化鹽在降壓、興奮腸平滑肌方面的醫(yī)學(xué)應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]本發(fā)明人前期研究得到了國家自然科學(xué)基金項目“炒白芥子中鎮(zhèn)咳、平喘有效成分及其作用機(jī)理的研究(30600802)”的支持。目前，有關(guān)芥子堿的制備工藝及活性研究的文章及專利如下:
[0003](1)芥子堿在制備防治老年性癡呆疾病藥物中的應(yīng)用0吧00410064690.3。本專利源于十字花科植物種子的芥子堿在制備乙酰膽堿酯酶活性藥物和/或抑制外鈣內(nèi)流藥物中的應(yīng)用，可治療老年性癡呆病，尤其適用于治療伴有高血壓的老年性癡呆病人，有很強(qiáng)的體外抑制AchE的作用，且對腦組織AchE的抑制作用強(qiáng)，而對血漿AchE活性抑制弱，IC50血清/IC50腦=6.042 (倍)，對Glu引起的PC12細(xì)胞內(nèi)鈣升高的抑制作用強(qiáng)于對KCl引起內(nèi)鈣升高的抑制，表明其阻斷受體依賴型鈣通道的作用強(qiáng)于對電壓依賴型鈣通道的阻斷。 [0004](2)—種芥子堿活性成分的制備方法CN200410018237.9。本發(fā)明屬于天然藥物【技術(shù)領(lǐng)域】。本發(fā)明公開了一種從萊菔子提取芥子堿活性成分的制備方法。本發(fā)明以萊菔子為原料，經(jīng)過提取、分離純化等步驟獲得芥子堿活性成分，純度達(dá)80-99%。
[0005](3)—種用于動、植物抗輻射傷害的芥子堿的新用途CN 91107473.2本發(fā)明屬于有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域中的碳環(huán)化合物。本發(fā)明在十字花科植物中分離，純化得到一種芥子堿提取液和芥子堿結(jié)晶，發(fā)現(xiàn)它對萌發(fā)的植物種子和小白鼠、豚鼠有較明顯的輻射保護(hù)作用。本發(fā)明使用方便，飼喂動物和加入培養(yǎng)液中培養(yǎng)植物，即能達(dá)到抵抗輻射傷害的效果。該防護(hù)劑性能穩(wěn)定，100°C不變性，是一種實際無毒的輻射保護(hù)劑。
[0006](4)芥子堿提取工藝的研究(海峽藥學(xué)2006年第18卷第6期:15_18)。該報道采用正交實驗，考察提取時間、提取溫度、料液比3個因素的影響，建立芥子堿熱醇提取的最佳提取條件。并在此基礎(chǔ)上，研究微波、超聲波輔助提取對芥子堿提取效率的影響。結(jié)果熱醇提取優(yōu)化工藝條件是料液比為1: 30，提取溫度為80°C。微波輔助提取與熱醇提取相比提取效率提高了 89%，而超聲波輔助提取與熱醇提取相比提取效率提高了 85%。不同提取條件顯著影響芥子堿提取得率，微波與超聲波輔助提取可大大提高芥子堿提取效率。
[0007]上述專利和論文均有關(guān)于芥子堿分離制備的記載。但均存在一定的缺陷。例如:(O目前所制備的芥子堿多為芥子堿的硫氰酸鹽，由于芥子堿硫氰酸鹽在水中溶解度低，吸收差，限制了其藥用范圍。(2)目前采用的醇提、超聲提取、微波提取等工藝存在成本較高、不利于放大等缺點(diǎn)。(3)從十字花科各種種子類藥材中分離制備芥子堿，原料藥成本較高。
[0008]此外，目前關(guān)于芥子堿氯化鹽降壓、興奮平滑肌的藥理作用尚無文獻(xiàn)記載。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]本發(fā)明的目的在于提供一種從十字花科植物種子及其榨油后剩余的籽柏中分離并制備一種具有生物活性的生物堿-芥子堿氯化鹽的工藝，并因此提供了一種水溶性高的芥子堿鹽，完成芥子堿的水提工藝，達(dá)到降低成本的目的。本發(fā)明還利用油菜籽榨油后剩下的油菜籽柏為原料，從中分離制備芥子堿，達(dá)到變廢為寶的目的，大大降低了成本。最后，本發(fā)明還提供了芥子堿氯化鹽在降血壓、興奮平滑肌醫(yī)藥方面的應(yīng)用。
[0010]為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明一種芥子堿氯化鹽的制備方法，包括如下步驟:
[0011]S1、十字花科植物種子經(jīng)粉碎處理或者籽柏壓榨后，取粉碎物；
[0012]S2、所述粉碎物經(jīng)水提后，得含有芥子堿的提取液，再經(jīng)過濾，得過濾液；
[0013]S3、所述過濾液，與硫氰酸鉀溶液反應(yīng)，得芥子堿硫氰酸鹽；
[0014]S4、干燥后的芥子堿硫氰酸鹽用離子交換樹脂進(jìn)行離子交換得到芥子堿氯化鹽。
[0015]優(yōu)選方式下，步驟S2的過程為:取粉碎物以液料重量比1:3-5加入水，浸泡2-4小時后，加熱至80-10(TC，保持2-5個小時，同時攪拌，得提取液；而后停止加熱，待提取液冷卻至60-70°C時，過濾，去除濾渣；對濾渣重復(fù)以上水提過程2-4次；收集所有濾液。
[0016]優(yōu)選方式下，步驟S3的過程包括如下步驟:
[0017]S31、所述濾液靜置12-48小時后，分為三層，取中層液經(jīng)濃縮后得浸膏；以重量比浸膏:溶劑=1:3-5的計量加入濃度為60-95%的乙醇，萃取2-4次；合并萃取液，濃縮，第二次得到浸膏；
[0018]以所述第二次浸膏:水=1:40-100的比例稀釋，得濃縮液；
[0019]S32、將濃度為20%_30%的硫氰酸鉀加入到所述濃縮液中，置于0_10°C下靜置12-48小時后，濾出沉淀，得芥子堿硫氰酸鹽粗提物；
[0020]S33、將所述芥子堿硫氰酸鹽粗提物按照體積比1:80-100溶于40_80°C乙醇中，經(jīng)重結(jié)晶，得到芥子堿硫氰酸鹽濕晶，真空干燥，得芥子堿硫氰酸鹽。
[0021]最優(yōu)方式下，為了提高產(chǎn)品得率，上述步驟S32中將首次濾出沉淀后的溶液濃縮，再置于0-10°C下12-24小時，濾出沉淀；如此再反復(fù)兩次，合并所有沉淀為芥子堿硫氰酸鹽粗提物。
[0022]最優(yōu)方式下，為了提高產(chǎn)品純度，步驟S33中芥子堿硫氰酸鹽粗提物反復(fù)進(jìn)行重結(jié)晶，優(yōu)選法方式下，步驟S4選用氯型717陰離子交換樹脂。
[0023]本發(fā)明還提供了一種芥子堿氯化鹽的醫(yī)藥應(yīng)用，在降血壓藥物中的應(yīng)用，以及在興奮腸平滑肌的藥物中應(yīng)用。
[0024]本發(fā)明將十字花科植物種子及其籽柏用溶劑浸泡、提取，提取物濃縮后加入溶劑稀釋，過濾后進(jìn)行重結(jié)晶，干燥后用離子交換樹脂對其進(jìn)行離子交換得到易溶于水具降壓平喘作用的有效成分芥子堿氯化鹽。
[0025]本發(fā)明的有益效果是:制備的芥子堿氯化鹽水溶性高，有利于各種劑型的制備，還有利于提高其生物利用度。采用水提工藝制備芥子堿氯化鹽，降低了芥子堿的制備成本。運(yùn)用十字花科植物種子榨油后的籽柏為原料從中提取芥子堿，變廢為寶，同時降低成本。此外，本發(fā)明明確了芥子堿氯化鹽的降血壓、興奮平滑肌作用，為其臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0026]圖1是油菜籽柏中提取芥子堿硫氰酸鹽HPLC色譜圖?！揪唧w實施方式】
[0027]本發(fā)明的技術(shù)方案是:以十字花科植物種子及其榨油后剩余的籽柏中任何一種為原料，從中提取并制備芥子堿氯化鹽，具體方法步驟如下:
[0028]( 1)生藥材的加工-粉碎
[0029]將十字花科植物種子加入高速粉碎機(jī)中，以1500_5000r/min的速度粉碎2_3次，每次1-3秒，將生藥材粉碎成碎末。十字花科植物種子榨油后剩余的籽柏是粉碎過的，因此不用粉碎處理。
[0030](2)水提芥子堿
[0031]將步驟(1)所得的藥材碎末放置在廣口容器中，按照料液比為1:3-1:5加入自來水，浸泡2-4個小時。然后將廣口容器放置在電加熱套上加熱，使用電壓調(diào)節(jié)儀調(diào)節(jié)電壓，使其始終保持在微沸狀態(tài)(80-100°C)，并不時攪拌。從開始沸騰起計時，微沸2-5個小時后，停止加熱，待沸騰的提取液冷卻至60-70°C時，用6層紗布過濾出濾液后，再用8層紗布過濾，從而去除濾渣。重復(fù)上述提取步驟2-4次，合并所有濾液后靜置12-48小時。
[0032](3)芥子堿硫氰酸鹽的制備及分析
[0033]充分靜置步驟(2)所得的濾液，肉眼可見明顯分為三層，移除上層微黃色油層，下層沉淀層丟棄，將中層深褐色液體經(jīng)濾紙過濾后所得濾液減壓濃縮，濃縮至浸膏后加入濃度為60-95%的乙醇,攪拌。以浸膏:溶劑=1:3-5的固液比進(jìn)行萃取,萃取2-4次；合并萃取液后經(jīng)抽濾、減壓濃縮至無醇味，得浸膏；以浸膏:水=1:40-100比例稀釋成濃縮液。
[0034]在上述濃縮液中加入濃度20%_30%的KSCN溶液，制得水溶液(優(yōu)選法方式，先對KSCN溶解，而后混合到濃縮液中)。將上述溶液置于0-10°C (優(yōu)選4°C )冰柜中靜置12-48小時后，發(fā)現(xiàn)有沉淀析出，濾出沉淀。過濾后的濾液，繼續(xù)放置在4°C冰柜中12-24小時，過濾析出沉淀，如此再反復(fù)兩次，所得沉淀為芥子堿硫氰酸鹽沉淀。
[0035]將芥子堿硫氰酸鹽沉淀按照體積比1:8(Tl:100溶于40_80°C乙醇中進(jìn)行重結(jié)晶，有良好針狀結(jié)晶析出，將結(jié)晶濾出，殘余液濃縮至原體積1/2后繼續(xù)靜置24小時，又有結(jié)晶析出，如此反復(fù)兩次，結(jié)晶合并后減壓真空干燥，即為芥子堿硫氰酸鹽(分子式如下)。
[0036]
【權(quán)利要求】
1.一種芥子堿氯化鹽的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: S1、十字花科植物種子經(jīng)粉碎處理或者籽柏壓榨后，取粉碎物； S2、所述粉碎物經(jīng)水提后，得含有芥子堿的提取液，再經(jīng)過濾，得過濾液； S3、所述過濾液與硫氰酸鉀溶液反應(yīng)，得芥子堿硫氰酸鹽； S4、干燥后的芥子堿硫氰酸鹽用離子交換樹脂進(jìn)行離子交換得到芥子堿氯化鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述芥子堿氯化鹽的制備方法，其特征在于，步驟S2的過程為: 取粉碎物以液料重量比1:3-5加入水，浸泡2-4小時后，加熱至80-100°C，保持2_5個小時，同時攪拌，得提取液；而后停止加熱，待提取液冷卻至60-70°C時，過濾，去除濾渣； 對濾渣重復(fù)以上水提過程2-4次；收集所有濾液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述芥子堿氯化鹽的制備方法，其特征在于，步驟S3的過程包括如下步驟: 531、所述濾液靜置12-48小時后，分為三層，取中層液經(jīng)濃縮后得浸膏；以重量比浸膏:溶劑=1:3-5的計量加入濃度為60-95%的乙醇，萃取2-4次；合并萃取液，濃縮，第二次得到浸膏； 以所述第二次浸膏:水=1 =40-100的比例稀釋，得濃縮液； 532、將濃度為20%-30%的硫氰酸鉀加入到所述濃縮液中，置于0-10°C下靜置12-48小時后，濾出沉淀，得芥子堿硫氰酸鹽粗提物； 533、將所述芥子堿硫氰酸鹽粗提物按照體積比1:80-100溶于40-80°C乙醇中，經(jīng)重結(jié)晶，得到芥子堿硫氰酸鹽濕晶，真空干燥，得芥子堿硫氰酸鹽。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述芥子堿氯化鹽的制備方法，其特征在于，步驟S32中將首次濾出沉淀后的溶液濃縮，再置于0-10°C下12-24小時，濾出沉淀；如此再反復(fù)兩次，合并所有沉淀為芥子堿硫氰酸鹽粗提物。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述芥子堿氯化鹽的制備方法，其特征在于，步驟S33中首次重結(jié)晶、抽濾后的溶液經(jīng)濃縮，再次重結(jié)晶；再反復(fù)上述重結(jié)晶步驟兩次，收集所有芥子堿硫氰酸鹽濕晶。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一所述芥子堿氯化鹽的制備方法，其特征在于，步驟S4選用氯型717陰離子交換樹脂。
7.一種芥子堿氯化鹽的醫(yī)藥應(yīng)用，其特征在于，在降血壓藥物中的應(yīng)用。
8.一種芥子堿氯化鹽的醫(yī)藥應(yīng)用，其特征在于，在興奮腸平滑肌的藥物中應(yīng)用。
【文檔編號】C07C213/10GK103804207SQ201210436834
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2012年11月6日 優(yōu)先權(quán)日:2012年11月6日
【發(fā)明者】馮寶民, 丁韻, 王惠國, 盧軒, 秦海宏, 陶剛, 劉旭 申請人:大連大學(xué), 大連恒升科技有限公司