專利名稱：天然含羥基或/和羧基化合物的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物工程技術(shù)領(lǐng)域的一種天然含羥基或/和羧基化合物的提取方法， 尤其是天然含羥基或/和羧基化合物的提取方法。
背景技術(shù)：
隨著人們生活水平的提高和對天然植物性來源的無毒無害，安全高效的有利于保護(hù)人們身體健康，防病治病天然有機(jī)物質(zhì)的追求，生物療法已日益成為人工合成的西藥療法不可忽缺的必要輔助和替代。
同時，由于一些傳統(tǒng)人工合成農(nóng)藥，生物殘留量高，嚴(yán)重危害人們身體健康，不易降解，對水環(huán)境及生物有較大的毒性，因此，天然植物性來源的天然生物農(nóng)藥正成為綠色農(nóng)業(yè)的追求。
但這些天然含羥基或/和羧基化合物的簡單高效、快速，對環(huán)境安全的分離提取技術(shù)一直是世界性難題。常用的方法有重金屬鹽沉淀分離再酸還原法，有機(jī)溶劑萃取法，大孔樹脂吸附法及膜分離法。有機(jī)溶劑萃取，大孔樹脂吸附及膜分離設(shè)備投入大，生產(chǎn)效率低，生產(chǎn)成本高，產(chǎn)品有效成分含量低，甚至只有30 %左右，醫(yī)藥價值低，難以大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。而重金屬鹽沉淀再酸還原法將不可避免地產(chǎn)生高水溶性的重金屬鹽和強(qiáng)酸或強(qiáng)酸鹽的生產(chǎn)廢水，對水環(huán)境有很大的和難以消除的破壞作用。
重金屬鹽的使用是非常敏感的，關(guān)乎人們身體健康和水環(huán)境的重大問題。且難以清除至對人和環(huán)境的安全值以下，重金屬鹽對人和環(huán)境的安全值很低，現(xiàn)有技術(shù)很難徹底從廢水中清除重金屬鹽，而且處理成本高。所以重金屬鹽沉淀法提取天然含羥基或/和羧基化合物只是不考慮對人和環(huán)境毒害的實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)技術(shù)，是一種粗放的先污染后治理不可能大規(guī)模生產(chǎn)的“紙上談兵”生產(chǎn)技術(shù)。
天然黃酮苷類和白藜蘆醇苷類化合物，其生物活性是由其中的糖苷配基(即活性苷元)決定而不是由糖苷本身決定，因糖苷中的活性苷元(非糖體)上的活性基團(tuán)已被糖苷鍵破壞。在天然植物中糖苷雖然其化學(xué)性質(zhì)較穩(wěn)定，但已喪失了生物活性；糖苷配基生物活性強(qiáng)，但不穩(wěn)定；性質(zhì)穩(wěn)定和生物活性不可兼得。所以天然植物中游離的糖苷配基極少見，多以其相應(yīng)的糖苷形式存在?，F(xiàn)有工業(yè)化生產(chǎn)技術(shù)都是在提取黃酮苷(如大豆異黃酮苷、白藜蘆醇苷)，而不是其中的活性苷元(糖苷配基，如，真正的大豆異黃酮和白藜蘆醇)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所稱的天然含羥基或/和羧基化合物主要是指天然酸性三萜皂苷類(含羧基-COOH或羥基-0H)化合物、天然黃酮苷類(含羥基-0H，包括類黃酮苷和異黃酮苷)、白藜蘆醇苷類化合物(含羥基-0H)，但不包括花青素。
根據(jù)現(xiàn)有知識，絕大部分天然糖苷為D-葡萄糖苷且?guī)缀跛刑烊惶擒斩际铅滦吞擒?；根?jù)酶降解底物特異性，幾乎所有的葡萄糖苷酶(簡稱BGL，又稱β-D-葡萄糖苷水解酶)對底物的糖基部分結(jié)構(gòu)的專一性較差，能裂解C-O糖苷鍵、C-S鍵、C-N鍵、C-F鍵等，也能同時水解β -葡萄糖苷鍵和β -半乳糖苷鍵及木糖苷鍵、纖維二糖苷鍵；β -葡萄糖苷酶只針對天然糖苷中的β型糖苷鍵，而與天然糖苷中的糖苷配基的化學(xué)結(jié)構(gòu)無關(guān)，將天然糖苷水解成糖苷配基(如，大豆異黃酮)和糖(如，葡萄糖)；天然黃酮苷(含羥基-0Η， 包括類黃酮苷和異黃酮苷)都具有C6-C3-C6的基本骨架結(jié)構(gòu)，且大多數(shù)為C-O糖苷鍵連接的O-苷，所以其中的糖苷鍵對β-葡萄糖苷酶沒有本質(zhì)的區(qū)別，都能被其水解斷裂；白藜蘆醇苷中的糖苷鍵也同樣可被葡萄糖苷酶水解斷裂；本發(fā)明以葡萄糖苷酶水解黃酮苷和白藜蘆醇苷，主要針對C-O糖苷鍵(通過羥基-OH中的O橋)，這是鍵能最弱的一種糖苷鍵，最容易被β_葡萄糖苷酶水解斷裂。本發(fā)明天然黃酮苷類(含羥基-0Η，包括類黃酮苷和異黃酮苷)及白藜蘆醇苷中的糖苷鍵都能被葡萄糖苷酶水解斷裂。現(xiàn)有技術(shù)也已公開了葡萄糖苷酶的生化反應(yīng)條件及其水解糖苷鍵的作用機(jī)理，葡萄糖苷酶及其生化反應(yīng)條件是天然β-糖苷鍵水解斷裂的充分和必要條件。
根據(jù)現(xiàn)有知識，黃酮類(不包括花青素)和白藜蘆醇不溶或難溶于水，也不溶于中性水溶液，但溶于稀堿水溶液。
根據(jù)現(xiàn)有知識，陽離子表面活性劑十八烷基三甲基氯化銨和十八烷基三甲基溴化銨都只溶于熱水，而不溶于冷水，所以十八烷基三甲基氯化銨或十八烷基三甲基溴化銨只有在熱水中才能電離出帶長鏈親油基的陽離子基團(tuán)和相應(yīng)的氯/溴陰離子。而這帶長鏈親油基的陽離子基團(tuán)一旦被本發(fā)明的陰離子基團(tuán)化合成鹽，這將是水不溶性的，特別是在冷水中，因?yàn)檫@種帶長鏈親油基的陽離子基團(tuán)的鹽在冷水中很難電離。同樣，陽離子表面活性劑十六烷基三甲基氯化銨和十六烷基三甲基溴化銨中的十六烷烴親油基也具有較強(qiáng)的疏水性，而本發(fā)明的黃酮苷元/白藜蘆醇苷元不溶或難溶于水，所以當(dāng)十六烷基三甲基氯化銨或十六烷基三甲基溴化銨中的陽離子基團(tuán)與黃酮苷元/白藜蘆醇苷元的鈉鹽中的陰離子基團(tuán)化合成中性鹽后，這種鹽式化合物在水中也很難電離，而呈水不溶性，特別是在冷水中，鹽的溶解度(電離能力)也與水的溫度呈正相關(guān)關(guān)系。本發(fā)明就是利用十八烷基三甲基氯化銨或十八烷基三甲基溴化銨只溶于熱水而不溶于冷水的重要性質(zhì)，實(shí)現(xiàn)三萜皂苷、天然黃酮類(含羥基-0Η，包括類黃酮和異黃酮)、白藜蘆醇的提取。本發(fā)明方法也利用十六烷基三甲基氯化銨或十六烷基三甲基溴化銨能溶于常溫下的冷水而又能在冷水中與水溶性的黃酮類苷元/白藜蘆醇苷元的鈉鹽中的陰離子基團(tuán)化合成水不溶性的鹽這一重要性質(zhì)而直接得到黃酮類苷元和白藜蘆醇苷元。
根據(jù)現(xiàn)有知識，三萜皂苷是由三萜皂苷元和糖(葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖)或糖醛酸及其它有機(jī)酸(含羧基)組成，已發(fā)現(xiàn)達(dá)30余種類型。三萜皂苷多具有羧基，故又稱其為酸性皂苷，三萜皂苷多溶于水。
根據(jù)現(xiàn)有知識，羥基(-0Η)呈弱酸性，所以含羥基的三萜皂苷元雖不溶于水或中性鹽水溶液，但能溶于稀堿水溶液。
對于由三萜皂苷元與糖通過糖苷鍵(C-0糖苷鍵)結(jié)合，并且其三萜皂苷元上有一個或一個以上酸性羥基的三萜皂苷，可按照本發(fā)明黃酮類苷元/白藜蘆醇苷元的提取方法提取其高活性的三萜皂苷元。三萜皂苷元一般不溶或難溶于水，但含羥基(-0Η)的三萜皂苷元能溶于稀堿水溶液，所以其提取方法與本發(fā)明黃酮苷元/白藜蘆醇苷元提取方法相同。
本發(fā)明的技術(shù)立足點(diǎn)就是三萜皂苷(元)、黃酮類苷、白藜蘆醇苷中的羧基或/和羥基，對此，本發(fā)明方法具有廣泛的適應(yīng)性和可行性。
為有效地克服目前天然含羥基或/和羧基化合物的提取方法技術(shù)的缺陷，確實(shí)有力保護(hù)人們身體健康，防病治病，保護(hù)環(huán)境，本發(fā)明提供一種簡單可靠，技術(shù)可操作性強(qiáng)，投資少，生產(chǎn)成本低，效果好，提取產(chǎn)物純度高的天然含羥基或/和羧基化合物的提取方法。
本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是
I、本發(fā)明提取方法包括以下步驟
一、三萜皂苷類的提取
(I)植物加食用軟水或去離子水粉碎；
(2)以纖維素酶降解破壞植物細(xì)胞壁或用冷凍再加熱解凍方法破壞植物細(xì)胞壁； 對不需要破壞植物細(xì)胞壁的植物，此步可省略；
(3)將上述產(chǎn)物加入O. 2% -O. 5%的對陽離子物質(zhì)敏感、含直鏈親油基的水溶性陰離子表面活性劑，以提高三萜皂苷在水溶液中的溶解度，溫度30°C -60°C ;此步驟也可省略；
(4)將上述產(chǎn)物加熱攪拌，溫度25°C _80°C，攪拌速度50-200轉(zhuǎn)/分，以提高三萜皂苷在水中的溶解率；
(5)壓榨過濾，得含三萜皂苷的水溶液備用；
(6)將上述含三萜皂苷的水溶液加入適量的NaOH，使三萜皂苷被完全中和，生成水溶性的鹽；鹽水溶液PH7-12 ；
(7)將上述水溶液再加入陽離子表面活性劑十八烷基三甲基氯化銨或十八烷基三甲基溴化銨，再攪拌，使陽離子表面活性劑與水溶液中的三萜皂苷鹽充分反應(yīng)；陽離子表面活性劑分子連接在三萜皂苷分子上的一COO-脫氫羧基上或一O—脫氫羥基上，得到水不溶性的鹽；其中陽離子表面活性劑和陰離子表面活性劑也化合沉淀；并促進(jìn)陽離子表面活性劑與三萜皂苷的水不溶性的化合物與水的沉淀或懸浮分離；溫度30°c -70°C，轉(zhuǎn)速100-600轉(zhuǎn) /分，時間30-60分鐘；
(8)將上述產(chǎn)物降溫至1°C -30 °C，使全部反應(yīng)物沉淀或懸??；
(9)提取上述沉淀或懸浮物質(zhì)，與2% -30%的鹽酸在攪拌條件下置換反應(yīng)，轉(zhuǎn)速 50-600轉(zhuǎn)/分鐘，反應(yīng)時間10-30分鐘，溫度1°C _30°C，注意鹽酸只稍微過量，將反應(yīng)結(jié)束時水溶液控制在PH4-6. 9之間，使所加入的陽離子表面活性劑等被完全反應(yīng)沉淀或懸浮分離；恢復(fù)三萜皂苷的生物活性和水溶性；
反應(yīng)式Ai+HCl— Bj+Cj
在這里，A1表示陽離子表面活性劑與三萜皂苷上的脫氫羧基形成的水不溶性的鹽A1表示氫還原后的原三萜皂苷K1表示被Cl—離子還原后的低溫下水不溶性的十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物；
反應(yīng)式:②A2+HCl — B2 I +C2 I
在這里A2表示陰離子表面活性劑與陽離子表面活性劑的水不溶性的化合物。B2 表示陰離子表面活性劑與H+離子化合的水不溶性的化合物。C2表示陽離子表面活性劑與 CF離子化合形成的低溫下水不溶性的十八烷基三甲基氯化銨絮狀沉淀物或懸浮物；
反應(yīng)式③A3+HC1 — B3 I +H2O
在這里A3表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的OH—根化合生成的水不溶性的假堿。B3表示陽離子表面活性劑被Cl—離子還原后的十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物；
(10)將上述反應(yīng)物過濾，得到只含B1的水溶性水溶液，真空冷凍干燥，得到三萜皂苷干品，其中稍微過量的鹽酸(HCl氣體)被回收；干燥時間10 — 24小時，冷凍溫度_40°C 至_20°C，壓力彡25Pa ；
二、黃酮類苷元的提取
(I)植物加食用軟水或去離子水粉碎；
(2)將上述產(chǎn)物以纖維素酶降解破壞植物細(xì)胞壁或用冷凍再加熱解凍方法破壞植物細(xì)胞壁；對不需要破壞植物細(xì)胞壁的植物，此步可省略；
(3)將上述產(chǎn)物加入O. 2% -O. 5%對陽離子物質(zhì)敏感，含直鏈親油基的水溶性陰離子表面活性劑，以提高黃酮苷在水溶液中的溶解度，溫度30°C -60°C ;此步驟也可省略；
(4)加熱攪拌，溫度25°C _80°C，攪拌速度50-200轉(zhuǎn)/分鐘，以提高黃酮苷在水中的溶解率；
(5)壓榨過濾，得含黃酮苷的水溶液，加水溶性鈣鹽或鎂鹽與上述陰離子表面活性劑化合成水不溶性的鹽以去除陰離子表面活性劑，備用；
(6)將上述產(chǎn)物在攪拌中以葡萄糖苷酶降解，裂解糖苷鍵脫糖得黃酮苷元，溫度400C -500C，ΡΗ4-6. 9，轉(zhuǎn)速30-100轉(zhuǎn)，時間10-24小時；針對C-O糖苷鍵；
(7)將上述含黃酮苷元的水溶液加入適量的NaOH，使黃酮苷元上的一OH羥基被部分或完全中和，生成水溶性的鹽；鹽水溶液PH值為PH7-12 ；
(8)將上述水溶液再加入陽離子表面活性劑十八烷基三甲基氯化銨或十八烷基三甲基溴化銨或十六烷基三甲基氯化銨或十六烷基三甲基溴化銨，再攪拌，使陽離子表面活性劑與水溶液中的黃酮苷元鹽充分反應(yīng)；陽離子表面活性劑分子接在黃酮苷元分子上的一 0_脫氫羥基上，得到水不溶性的鹽；溫度40°C -80°C，轉(zhuǎn)速100-600轉(zhuǎn)/分，時間30-60分鐘；
(9)將上述產(chǎn)物降溫至IV -30 V，使全部反應(yīng)物沉淀或懸??；
(10)提取上述沉淀或懸浮物質(zhì)，與2% -30%的鹽酸在攪拌條件下置換反應(yīng)，轉(zhuǎn)速 50-600轉(zhuǎn)/分鐘，反應(yīng)時間10-30分鐘，溫度1°C _30°C，注意鹽酸只稍微過量，將反應(yīng)結(jié)束時水溶液控制在PH4-6. 9之間，使所加入的陽離子表面活性劑等被完全反應(yīng)/沉淀或懸浮分離；恢復(fù)黃酮苷元的生物活性；
I.十八烷基三甲基氯化銨或十八烷基三甲基溴化銨、鹽酸反應(yīng)式
反應(yīng)式?、貯fHCl — B1 I +C1 I
在這里,A1表示陽離子表面活性劑與黃酮苷元上的一0_脫氫羥基形成的水不溶性的鹽A1表示氫還原后的原黃酮苷元K1表示被Cl—離子還原后的低溫下水不溶性的十八烷基三甲基氯化銨絮狀沉淀物或懸浮物；
反應(yīng)式②A2+HCl — B2 I +H2O
在這里A2表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的0H—根化合生成的水不溶性的假堿。B2表示陽離子表面活性劑被Cl—離子還原后的十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物；B2和上述C1相同;
2.十六烷基三甲基氯化銨或十六烷基三甲基溴化銨、鹽酸反應(yīng)式
反應(yīng)式?、貯i+HCl — B1 I +C1
在這里,A1表示陽離子表面活性劑與黃酮苷元上的一 O—脫氫羥基形成的水不溶性的鹽A1表示氫還原后的原黃酮苷元K1表示被Cl—離子還原后的低溫下水溶性的十六烷基三甲基氯化銨；
反應(yīng)式②A2+HCl — Β2+Η20
在這里A2表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的OH—根化合生成的水不溶性的假堿。B2表示陽離子表面活性劑被Cr離子還原后的低溫下水溶性的十六烷基三甲基氯化銨；B2和上述C1相同;
(11)將上述(10). I中的產(chǎn)物加入NaOH、苯甲酸鈉和陰離子表面活性劑脂肪酸鈉鹽，并加熱到40°C—60°C;在將水溶液PH值調(diào)節(jié)到PH8-10之間，后再加入水溶液1% -2% 的苯甲酸鈉和相對于十八烷基三甲基氯化銨稍微過量的脂肪酸鈉鹽，脂肪酸鈉鹽的過量程度為水溶液的O. 2% -0.3% ;再攪拌，速度50-200轉(zhuǎn)/分，時間10-30分鐘；再將上述仏與脂肪酸鈉鹽化合的水不溶性的化合物過濾去除；再加水溶性鈣鹽或鎂鹽充分?jǐn)嚢瑁D(zhuǎn)速 100-200轉(zhuǎn)/分，使鈣鹽或鎂鹽與上述過量的脂肪酸鈉鹽化合，生成水不溶性的化合物而被過濾去除；這樣水溶液中只有苯甲酸鈉和目標(biāo)產(chǎn)物B1，再降溫至1°C -30°C，并用鹽酸調(diào)節(jié)水溶液PH值至PH7，這樣目標(biāo)產(chǎn)物B1大部分從水溶液中沉淀析出；在這里苯甲酸鈉的作用是協(xié)同增加目標(biāo)產(chǎn)物B1在水溶液中的溶解度，便于B1與其它物質(zhì)分離；苯甲酸鈉水溶液可循環(huán)重復(fù)利用；當(dāng)回收重復(fù)利用的苯甲酸鈉水溶液中氯化鈉含量過高時，可調(diào)節(jié)水溶液至酸性，回收苯甲酸再蒸發(fā)濃縮得NaCl干品；在這里苯甲酸鈉也可省略；此步驟分離最終目標(biāo)產(chǎn)物B1也可以采用以下步驟，先加入適量的NaOH，使水溶液PH值為PH8-12，使水溶液溫度為1°C -30°C，這樣只有目標(biāo)產(chǎn)物B1溶于低溫堿性水溶液而與十八烷基三甲基氯化銨分離，得到目標(biāo)產(chǎn)物B1水溶液，再用鹽酸調(diào)節(jié)水溶液PH值至PH7，這樣目標(biāo)產(chǎn)物B1從水溶液中沉淀析出，因?yàn)榇四繕?biāo)產(chǎn)物不溶于水或中性水溶液；
將上述(10). 2中的產(chǎn)物直接過濾，得到目標(biāo)產(chǎn)物B1并用飲用水或去離子水清洗此目標(biāo)產(chǎn)物中少量的陽離子表面活性劑，含陽離子表面活性劑的水溶液可循環(huán)重復(fù)利用， 極大地節(jié)約了陽離子表面活性劑原材料；
(12)將上述B1真空冷凍干燥，得到黃酮苷元干品，干燥時間1-24小時，冷凍溫度-40°C至_1°C，壓力彡25Pa ；
三、白藜蘆醇苷元的提取
(I)植物加食用軟水或去離子水粉碎；
(2)以纖維素酶降解破壞植物細(xì)胞壁或用冷凍再加熱解凍方法破壞植物細(xì)胞壁； 對不需要破壞植物細(xì)胞壁的植物，此步可省略；
(3)將上述產(chǎn)物加入O. 2% -O. 5%對陽離子物質(zhì)敏感，含直鏈親油基的水溶性陰離子表面活性劑，以提高白藜蘆醇苷在水溶液中的溶解度，溫度30°C — 60°C ;此步驟可省略；
(4)加熱攪拌，溫度25°C _80°C，攪拌速度50-200轉(zhuǎn)/分鐘，提高白藜蘆醇苷在水中的溶解率；
(5)壓榨過濾，得含白藜蘆醇苷的水溶液，加水溶性鈣鹽或鎂鹽與上述陰離子表面活性劑化合成水不溶性的鹽以去除陰離子表面活性劑，備用；
(6)將上述產(chǎn)物在攪拌中以葡萄糖苷酶降解，裂解糖苷鍵，脫糖得白藜蘆醇苷元，溫度400C -50°C，ΡΗ4-6. 9，轉(zhuǎn)速30-100轉(zhuǎn)/分，時間10-24小時；針對C-O糖苷鍵；
(7)將上述含白藜蘆醇苷元的水溶液加入適量的NaOH，使白藜蘆醇苷元上的羥基被部分或完全中和，生成水溶性的鹽；鹽水溶液PH7-12 ；
(8)將上述水溶液再加入陽離子表面活性劑十八烷基三甲基氯化銨或十八烷基三甲基溴化銨或十六烷基三甲基氯化銨或十六烷基三甲基溴化銨，再攪拌，使陽離子表面活性劑與水溶液中的白藜蘆醇苷元鹽充分反應(yīng)；陽離子表面活性劑分子接在白藜蘆醇分子上的一0_脫氫羥基上，得到水不溶性的鹽；溫度40°C -70°C，轉(zhuǎn)速100-600轉(zhuǎn)/分，時間30-60 分鐘；
(9)將上述產(chǎn)物降溫至1°C -30 °C，使全部反應(yīng)物沉淀或懸??；
(10)提取上述沉淀或懸浮物質(zhì)，與2% -30%的鹽酸在攪拌條件下置換反應(yīng)，轉(zhuǎn)速 50-600轉(zhuǎn)/分鐘，反應(yīng)時間10-30分鐘，溫度1°C _30°C，注意鹽酸只稍微過量，將反應(yīng)結(jié)束時水溶液控制在PH4-6. 9之間，使所加入的陽離子表面活性劑等被完全反應(yīng)/沉淀或懸浮分離；恢復(fù)白藜蘆醇的生物活性；
I.十八烷基三甲基氯化銨或十八烷基三甲基溴化銨、鹽酸反應(yīng)式
反應(yīng)式?、貯i+HCl — B1 +C1
在這里,A1表示陽離子表面活性劑與白藜蘆醇苷元上的一0_脫氫羥基形成的水不溶性的鹽辦表示氫還原后的原白藜蘆醇苷元K1表示被Cl—離子還原后的低溫下水不溶性的十八烷基三甲基氯化銨絮狀沉淀物或懸浮物；
反應(yīng)式②A2+HCl — B2 I +H2O
在這里A2表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的0H—根化合生成的水不溶性的假堿。B2表示陽離子表面活性劑被Cl—離子還原后的十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物；B2和上述C1相同;
2.十六烷基三甲基氯化銨或十六烷基三甲基溴化銨、鹽酸反應(yīng)式
反應(yīng)式?、貯i+HCl — B1 +C1
在這里,A1表示陽離子表面活性劑與白藜蘆醇苷元上的一0_脫氫羥基形成的水不溶性的鹽A1表示氫還原后的原白藜蘆醇苷元K1表示被Cl—離子還原后的低溫下水溶性的十六烷基三甲基氯化銨；
反應(yīng)式②A2+HCl — Β2+Η20
在這里A2表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的OH—根化合生成的水不溶性的假堿；B2表示陽離子表面活性劑被cr離子還原后的低溫下水溶性的十六烷基三甲基氯化銨；B2和上述C1相同；
(11)將上述(10). I產(chǎn)物加入NaOH、苯甲酸鈉和陰離子表面活性劑脂肪酸鈉鹽，并加熱到40°C -60°C;在將水溶液PH值調(diào)節(jié)到PH8-10之間，后再加入水溶液1% -2%的苯甲酸鈉和相對于十八烷基三甲基氯化銨稍微過量的脂肪酸鈉鹽，脂肪酸鈉鹽的過量程度為水溶液的O. 2% -O. 3%;再攪拌，速度50-200轉(zhuǎn)/分，時間10-30分鐘；再將上述C1與脂肪酸鈉鹽化合的水不溶性的化合物過濾去除；再加水溶性鈣鹽或鎂鹽充分?jǐn)嚢?，轉(zhuǎn)速100-200 轉(zhuǎn)/分，使鈣鹽或鎂鹽與上述過量的脂肪酸鈉鹽化合，生成水不溶性的化合物而被過濾去除；這樣水溶液中只有苯甲酸鈉和目標(biāo)產(chǎn)物B1，再降溫至1°C 一 30°C，并用鹽酸調(diào)節(jié)水溶液PH值至PH7，這樣目標(biāo)產(chǎn)物B1大部分從水溶液中沉淀析出；在這里苯甲酸鈉的作用是協(xié)同增加目標(biāo)產(chǎn)物B1在水溶液中的溶解度，便于B1與其它物質(zhì)分離；苯甲酸鈉水溶液可循環(huán)重復(fù)利用；當(dāng)回收重復(fù)利用的苯甲酸鈉水溶液中氯化鈉含量過高時，可調(diào)節(jié)水溶液至酸性， 回收苯甲酸再蒸發(fā)濃縮得NaCl干品；在這里苯甲酸鈉也可省略；此步驟分離最終目標(biāo)產(chǎn)物B1也可以采用以下步驟，先加入適量的NaOH，使水溶液PH值為PH8-12，使水溶液溫度為 I0C _30°C，這樣只有目標(biāo)產(chǎn)物B1溶于低溫堿性水溶液而與十八烷基三甲基氯化銨分離，得到目標(biāo)產(chǎn)物B1水溶液，再用鹽酸調(diào)節(jié)水溶液PH值至PH7，這樣目標(biāo)產(chǎn)物B1從水溶液中沉淀析出，因?yàn)榇四繕?biāo)產(chǎn)物不溶于水或中性水溶液；
將上述(10). 2中的產(chǎn)物直接過濾，得到目標(biāo)產(chǎn)物B1并用飲用水或去離子水清洗此目標(biāo)產(chǎn)物中少量的陽離子表面活性劑，含陽離子表面活性劑的水溶液可循環(huán)重復(fù)利用， 極大地節(jié)約了陽離子表面活性劑原材料；
(12)將上述B1真空冷凍干燥，得到白藜蘆醇苷元干品，干燥時間1-24小時，冷凍溫度_40°C至_1°C，壓力彡25Pa ；
2、所述提取方法優(yōu)選為
它是由下列步驟組成的
一、三萜皂苷類的提取
(I)植物加食用軟水或去離子水粉碎；
(2)以纖維素酶降解破壞植物細(xì)胞壁或用冷凍再加熱解凍方法破壞植物細(xì)胞壁；
(3)將上述產(chǎn)物加入O. 3%的對陽離子物質(zhì)敏感、含直鏈親油基的水溶性陰離子表面活性劑，以提高三萜皂苷在水溶液中的溶解度，溫度50°C ；
(4)將上述產(chǎn)物加熱攪拌，溫度50°C，攪拌速度50轉(zhuǎn)/分鐘，以提高三萜皂苷在水中的溶解率；
(5)壓榨過濾，得含三萜皂苷的水溶液備用；
(6)將上述含三萜皂苷的水溶液加入適量的NaOH，使三萜皂苷被完全中和，生成水溶性的鹽；鹽水溶液PH8 ；
(7)將上述水溶液再加入陽離子表面活性劑十八烷基三甲基氯化銨，再攪拌，使陽離子表面活性劑與水溶液中的三萜皂苷鹽充分反應(yīng)；陽離子表面活性劑分子連接在三萜皂苷分子上的一coo_脫氫羧基上或一0_脫氫羥基上，得到水不溶性的鹽；其中陽離子表面活性劑和陰離子表面活性劑也化合沉淀；并促進(jìn)陽離子表面活性劑與三萜皂苷的水不溶性的化合物與水的沉淀或懸浮分離 ’溫度60°c，轉(zhuǎn)速400轉(zhuǎn)/分，時間60分鐘；
(8)將上述產(chǎn)物降溫至20°C，使全部反應(yīng)物沉淀或懸??；
(9)提取上述沉淀或懸浮物質(zhì)，與10%的鹽酸在攪拌條件下置換反應(yīng)，轉(zhuǎn)速100轉(zhuǎn) /分鐘，反應(yīng)時間15分鐘，溫度20°C，注意鹽酸只稍微過量，反應(yīng)結(jié)束時水溶液PH5，使所加入的陽離子表面活性劑等被完全反應(yīng)沉淀或懸浮分離；恢復(fù)三萜皂苷的生物活性和水溶
反應(yīng)式Ai+HCl— Bj+Cj I
在這里，A1表示陽離子表面活性劑與三萜皂苷上的脫氫羧基形成的水不溶性的鹽A1表示氫還原后的原三萜皂苷K1表示被Cl—離子還原后的低溫下水不溶性的十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物；
反應(yīng)式:②A2+HCl — B2 I +C2 I
在這里A2表示陰離子表面活性劑與陽離子表面活性劑的水不溶性的化合物。B2 表示陰離子表面活性劑與H+離子化合的水不溶性的化合物。C2表示陽離子表面活性劑與 CF離子化合形成的低溫下水不溶性的十八烷基三甲基氯化銨絮狀沉淀物或懸浮物；
反應(yīng)式③A3+HC1 — B3 I +H2O
在這里A3表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的0H_根化合生成的水不溶性的堿。B3表示陽離子表面活性劑被Cl—離子還原后的十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物；
(10)將上述反應(yīng)物過濾，得到只含B1的水溶性水溶液，真空冷凍干燥，得到三萜皂苷干品，其中稍微過量的鹽酸(HCl氣體)被回收；干燥時間24小時，冷凍溫度_40°C，壓力 15Pa ；
二、黃酮類苷元的提取
(I)植物加食用軟水或去離子水粉碎；
(2)將上述產(chǎn)物以纖維素酶降解破壞植物細(xì)胞壁或用冷凍再加熱解凍方法破壞植物細(xì)胞壁；
(3)將上述產(chǎn)物加入O. 3%對陽離子物質(zhì)敏感，含直鏈親油基的水溶性陰離子表面活性劑，以提高黃酮苷在水溶液中的溶解度，溫度60°C ；
(4)加熱攪拌，溫度70°C，攪拌速度50轉(zhuǎn)/分鐘，以提高黃酮苷在水中的溶解率；
(5)壓榨過濾，得含黃酮苷的水溶液，并用碳酸氫鈣去除上述陰離子表面活性劑， 備用;
(6)將上述產(chǎn)物在攪拌中以葡萄糖苷酶降解，裂解糖苷鍵脫糖得黃酮苷元，溫度50°C，PH5，轉(zhuǎn)速30轉(zhuǎn)/分，時間24小時；針對C-O糖苷鍵；
(7)將上述含黃酮苷元的水溶液加入適量的NaOH，使黃酮苷元上的一OH羥基被部分或完全中和，生成水溶性的鹽；鹽水溶液PH值為PH8 ；
(8)將上述水溶液再加入陽離子表面活性劑十八烷基三甲基氯化銨，再攪拌，使陽離子表面活性劑與水溶液中的黃酮苷元鹽充分反應(yīng)；陽離子表面活性劑分子接在黃酮苷元分子上的一0_脫氫羥基上，得到水不溶性的鹽；溫度60°C，轉(zhuǎn)速400轉(zhuǎn)/分，時間60分鐘；
(9)將上述產(chǎn)物降溫至20°C，使全部反應(yīng)物沉淀或懸??；
(10)提取上述沉淀或懸浮物質(zhì)，與10%的鹽酸在攪拌條件下置換反應(yīng)，轉(zhuǎn)速50轉(zhuǎn) /分鐘，反應(yīng)時間30分鐘，溫度20°C，注意鹽酸只稍微過量，使反應(yīng)結(jié)束時水溶液為PH5，使所加入的陽離子表面活性劑等被完全反應(yīng)沉淀或懸浮分離；恢復(fù)黃酮苷元的生物活性；
反應(yīng)式①Ai+HCl — B1 +C1
在這里,A1表示陽離子表面活性劑與黃酮苷元上的一0_脫氫羥基形成的水不溶性的鹽A1表示氫還原后的原黃酮苷元K1表示被Cl—離子還原后的低溫下水不溶性的十八烷基三甲基氯化銨絮狀沉淀物或懸浮物；
反應(yīng)式②A2+HCl — B2 I +H2O
在這里A2表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的0H_根化合生成的水不溶性的假堿。B2表示陽離子表面活性劑被Cl—離子還原后的十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物；B2和上述C1相同;
(11)將上述產(chǎn)物加入NaOH、苯甲酸鈉和陰離子表面活性劑脂肪酸鈉鹽，并加熱到 600C ;在將水溶液PH值調(diào)節(jié)到PH10，后再加入水溶液I %的苯甲酸鈉和相對于十八烷基三甲基氯化銨稍微過量的脂肪酸鈉鹽，脂肪酸鈉鹽的過量程度為水溶液的O. 3% ;再攪拌，速度200轉(zhuǎn)/分，時間30分鐘；再將上述C1與脂肪酸鈉鹽化合的水不溶性的化合物過濾去除； 再加水溶性鈣鹽或鎂鹽充分?jǐn)嚢瑁D(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)/分，使鈣鹽或鎂鹽與上述過量的脂肪酸鈉鹽化合，生成水不溶性的化合物而被過濾去除；這樣水溶液中只有苯甲酸鈉和目標(biāo)產(chǎn)物B1,再降溫至30°C，并用鹽酸調(diào)節(jié)水溶液PH值至PH7，這樣目標(biāo)產(chǎn)物B1大部分從水溶液中沉淀析出；在這里苯甲酸鈉的作用是協(xié)同增加目標(biāo)產(chǎn)物B1在水溶液中的溶解度，便于B1與其它物質(zhì)分離；苯甲酸鈉水溶液可循環(huán)重復(fù)利用；當(dāng)回收重復(fù)利用的苯甲酸鈉水溶液中氯化鈉含量過高時，可調(diào)節(jié)水溶液至酸性，回收苯甲酸再蒸發(fā)濃縮得NaCl干品；此步驟分離最終目標(biāo)產(chǎn)物B1也可以采用以下步驟，先加入適量的NaOH，使水溶液PH值為PH8-12，使水溶液溫度為1°C -30°C，這樣只有目標(biāo)產(chǎn)物B1溶于低溫堿性水溶液而與十八烷基三甲基氯化銨分離，得到目標(biāo)產(chǎn)物B1水溶液，再用鹽酸調(diào)節(jié)水溶液PH值至PH7，這樣目標(biāo)產(chǎn)物B1從水溶液中沉淀析出，因?yàn)榇四繕?biāo)產(chǎn)物不溶于水或中性水溶液；
(12)將上述B1真空冷凍干燥，得到黃酮苷元干品，干燥時間3小時，冷凍溫度-40°C，壓力 15Pa ；
三、白藜蘆醇苷元的提取
(I)植物加食用軟水或去離子水粉碎；
(2)以纖維素酶降解破壞植物細(xì)胞壁或用冷凍再加熱解凍方法破壞植物細(xì)胞壁；
(3)將上述產(chǎn)物加入O. 3%對陽離子物質(zhì)敏感，含直鏈親油基的水溶性陰離子表面活性劑，以提高白藜蘆醇苷在水溶液中的溶解度，溫度50°C ；
(4)加熱攪拌，溫度50°C，攪拌速度200轉(zhuǎn)/分鐘，提高白藜蘆醇苷在水中的溶解率；
(5)壓榨過濾，得含白藜蘆醇苷的水溶液，加碳酸氫鈣去除上述陰離子表面活性劑，備用;
(6)將上述產(chǎn)物在攪拌中以葡萄糖苷酶降解，裂解糖苷鍵，脫糖得白藜蘆醇苷元，溫度50°C，PH5，轉(zhuǎn)速30轉(zhuǎn)/分，時間24小時；針對C-O糖苷鍵；
(7)將上述含白藜蘆醇苷元的水溶液加入適量的NaOH，使白藜蘆醇苷元上的羥基被部分或完全中和，生成水溶性的鹽；鹽水溶液PH8 ；
(8)將上述水溶液再加入陽離子表面活性劑十八烷基三甲基氯化銨，再攪拌，使陽離子表面活性劑與水溶液中的白藜蘆醇苷元鹽充分反應(yīng)；陽離子表面活性劑分子接在白藜蘆醇分子上的一0_脫氫羥基上，得到水不溶性的鹽；溫度60°C，轉(zhuǎn)速400轉(zhuǎn)/分，時間60分鐘；
(9)將上述產(chǎn)物降溫至20°C，使全部反應(yīng)物沉淀或懸?。?br> (10)提取上述沉淀或懸浮物質(zhì)，與10%的鹽酸在攪拌條件下置換反應(yīng)，轉(zhuǎn)速200 轉(zhuǎn)/分鐘，反應(yīng)時間30分鐘，溫度20°C，注意鹽酸只稍微過量，使反應(yīng)結(jié)束時水溶液為PH5， 使所加入的陽離子表面活性劑等被完全反應(yīng)/沉淀或懸浮分離；恢復(fù)白藜蘆醇的生物活
反應(yīng)式?、?Ai+HCl — B1 I +C1 ICN 102977179 A書明說10/16 頁
在這里,A1表示陽離子表面活性劑與白藜蘆醇苷元上的一0_脫氫羥基形成的水不溶性的鹽辦表示氫還原后的原白藜蘆醇苷元A表示被Cr離子還原后的低溫下水不溶性的十八烷基三甲基氯化銨絮狀沉淀物或懸浮物；
反應(yīng)式②A2+HCl — B2 I +H2O
在這里A2表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的0H_根化合生成的水不溶性的假堿。B2表示陽離子表面活性劑被Cl—離子還原后的十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物；B2和上述C1相同;
(11)將上述產(chǎn)物加入NaOH、苯甲酸鈉和陰離子表面活性劑脂肪酸鈉鹽，并加熱到 600C ;在將水溶液PH值調(diào)節(jié)到PHlO之間，后再加入水溶液I %的苯甲酸鈉和相對于十八烷基三甲基氯化銨稍微過量的脂肪酸鈉鹽，脂肪酸鈉鹽的過量程度為水溶液的O. 3% ;再攪拌，速度200轉(zhuǎn)/分，時間30分鐘；再將上述C1與脂肪酸鈉鹽化合的水不溶性的化合物過濾去除；再加水溶性鈣鹽或鎂鹽充分?jǐn)嚢?，轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)/分，使鈣鹽或鎂鹽與上述過量的脂肪酸鈉鹽化合，生成水不溶性的化合物而被過濾去除；這樣水溶液中只有苯甲酸鈉和目標(biāo)產(chǎn)物B1，再降溫至30°C，并用鹽酸調(diào)節(jié)水溶液PH值至PH7，這樣目標(biāo)產(chǎn)物B1大部分從水溶液中沉淀析出；在這里苯甲酸鈉的作用是協(xié)同增加目標(biāo)產(chǎn)物B1在水溶液中的溶解度，便于 B1與其它物質(zhì)分離；苯甲酸鈉水溶液可循環(huán)重復(fù)利用；當(dāng)回收重復(fù)利用的苯甲酸鈉水溶液中氯化鈉含量過高時，可調(diào)節(jié)水溶液至酸性，回收苯甲酸再蒸發(fā)濃縮得NaCl干品；此步驟分離最終目標(biāo)產(chǎn)物B1也可以采用以下步驟，先加入適量的NaOH，使水溶液PH值為PH8-12， 使水溶液溫度為1°C -30°C，這樣只
有目標(biāo)產(chǎn)物B1溶于低溫堿性水溶液而與十八烷基三甲基氯化銨分離，得到目標(biāo)產(chǎn)物&水溶液，再用鹽酸調(diào)節(jié)水溶液PH值至PH7，這樣目標(biāo)產(chǎn)物B1從水溶液中沉淀析出，因?yàn)榇四繕?biāo)產(chǎn)物不溶于水或中性水溶液；
(12)將上述B1真空冷凍干燥，得到白藜蘆醇苷元干品，干燥時間24小時，冷凍溫度-40°C，壓力 15Pa ；
本發(fā)明的有益效果是
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比
一、生產(chǎn)效率高，生產(chǎn)成本低，與環(huán)境相容性好，可實(shí)現(xiàn)無水污染物排放，適合大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。
二、從最終產(chǎn)物中分離出的水不溶性的化合物可燃燒提供熱能，降低能源消耗，并可回收氯化氫氣體、NO2氣體，循環(huán)利用或?yàn)槠渌I(yè)提供原料。
三、高選擇定向分離，產(chǎn)品純度高，可達(dá)96%以上(可能還含有一定量的未充分干燥的水份)。為天然有機(jī)化合物的高效、合理和充分利用開辟了新的可行的發(fā)展道路。
四、生產(chǎn)設(shè)備簡單，能源消耗低，節(jié)能、安全生產(chǎn)。
五、本發(fā)明提取物三萜皂苷、天然黃酮類(含羥基-0H，包括類黃酮和異黃酮)、白藜蘆醇為我國中草藥和生物農(nóng)藥發(fā)展開辟了新的道路。
六、本發(fā)明以陽離子表面活性劑化合反應(yīng)、降溫冷卻、其生成物以鹽酸置換反應(yīng)還原步驟或/和最終目標(biāo)產(chǎn)物B1與陽離子表面活性劑等的分離步驟及其組合是本發(fā)明的核心技術(shù)即創(chuàng)新必要技術(shù)特征。
具體實(shí)施例方式
下面就實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明
實(shí)施例I :
提取時按如下步驟進(jìn)行
一、三萜皂苷類的靈芝皂苷(或人參皂苷)的提取
(I)植物加食用軟水或去離子水粉碎；
(2)以纖維素酶降解破壞植物細(xì)胞壁或用冷凍再加熱解凍方法破壞植物細(xì)胞壁；
(3)將上述產(chǎn)物加入水溶液O. 3%的脂肪酸鈉鹽，以提高靈芝皂苷在水溶液中的溶解度，溫度50°C ；
(4)將上述產(chǎn)物加熱攪拌，溫度50°C，攪拌速度200轉(zhuǎn)/分鐘，以提高靈芝皂苷在水中的溶解率；
(5)壓榨過濾，得含靈芝皂苷的水溶液備用；
(6)將上述含靈芝皂苷的水溶液加入適量的NaOH，使靈芝皂苷被完全中和，生成水溶性的鹽；鹽水溶液PH8 ；
(7)將上述水溶液再加入陽離子表面活性劑十八烷基三甲基氯化銨，再攪拌，使陽離子表面活性劑與水溶液中的靈芝皂苷鹽充分反應(yīng)；陽離子表面活性劑分子連接在靈芝皂苷分子上的脫氫羧基一coo_上或脫氫羥基一0_上，得到水不溶性的鹽；其中陽離子表面活性劑和陰離子表面活性劑也化合沉淀；并促進(jìn)陽離子表面活性劑與靈芝皂苷的水不溶性的化合物與水的沉淀或懸浮分離 ’溫度50°c，轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)/分，時間60分鐘；
(8)將上述產(chǎn)物降溫至30°C，使全部反應(yīng)物沉淀或懸浮；
(9)提取上述沉淀或懸浮物質(zhì)，與20%的鹽酸在攪拌條件下置換反應(yīng)，轉(zhuǎn)速100 轉(zhuǎn)/分鐘，反應(yīng)時間30分鐘，溫度30°C，注意鹽酸只稍微過量，將反應(yīng)結(jié)束時水溶液控制在 PH5，使所加入的陽離子表面活性劑等被完全反應(yīng)沉淀或懸浮分離；恢復(fù)靈芝皂苷的生物活性和水溶性；
反應(yīng)式Ai+HCl— Bj+Cj I
在這里，A1表示陽離子表面活性劑與靈芝皂苷上的脫氫羧基形成的水不溶性的鹽A1表示氫還原后的原靈芝皂苷K1表示被Cl—離子還原后的低溫下水不溶性的十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物；
反應(yīng)式:②A2+HCl — B2 I +C2 I
在這里A2表示陰離子表面活性劑與陽離子表面活性劑的水不溶性的化合物。B2 表示陰離子表面活性劑與H+離子化合的水不溶性的化合物。C2表示陽離子表面活性劑與 CF離子化合形成的低溫下水不溶性的十八烷基三甲基氯化銨絮狀沉淀物或懸浮物；
反應(yīng)式！③A3+HC1 — B3 I +H2O
在這里A3表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的0H_根化合生成的水不溶性的堿。B3表示陽離子表面活性劑被Cl—離子還原后的十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物；
(10)將上述反應(yīng)物過濾，得到只含B1的水溶性水溶液，真空冷凍干燥，得到靈芝皂苷干品，其中稍微過量的鹽酸(HCl氣體)被回收；干燥時間24小時，冷凍溫度_40°C，壓力 15Pa ；
二、大豆異黃酮苷元的提取
(I)植物加食用軟水或去離子水粉碎；
(2)將上述產(chǎn)物加入水溶液O. 3%的脂肪酸鈉鹽，以提高大豆異黃酮苷在水溶液中的溶解度，溫度50°C ；
(3)加熱攪拌，溫度70°C，攪拌速度100轉(zhuǎn)/分鐘，以提高大豆異黃酮苷在水中的溶解率；
(4)壓榨過濾，得含大豆異黃酮苷的水溶液，加碳酸氫鈣攪拌去除上述陰離子表面活性劑，備用；
(5)將上述產(chǎn)物在攪拌中以葡萄糖苷酶降解，裂解糖苷鍵脫糖得大豆異黃酮苷元，溫度50°C，PH5，轉(zhuǎn)速50轉(zhuǎn)，時間10小時；針對C-O糖苷鍵；
(6)將上述含大豆異黃酮苷兀的水溶液加入適量的NaOH,使其苷兀上的一OH輕基被部分或完全中和，生成水溶性的鹽；鹽水溶液PH值為PH8 ；
(7)將上述水溶液再加入陽離子表面活性劑十八烷基三甲基氯化銨，再攪拌，使陽離子表面活性劑與水溶液中的大豆異黃酮苷元鹽充分反應(yīng)；陽離子表面活性劑分子接在黃酮苷元分子上的一0_脫氫羥基上，得到水不溶性的鹽；溫度50°C，轉(zhuǎn)速100轉(zhuǎn)/分，時間30 分鐘；
(8)將上述產(chǎn)物降溫至30°C，使全部反應(yīng)物沉淀或懸?。?br> (9)提取上述沉淀或懸浮物質(zhì)，與10%的鹽酸在攪拌條件下置換反應(yīng)，轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn) /分鐘，反應(yīng)時間30分鐘，溫度30°C，注意鹽酸只稍微過量，使所加入的陽離子表面活性劑等被完全反應(yīng)/沉淀或懸浮分離；恢復(fù)大豆異黃酮苷元的生物活性；反應(yīng)結(jié)束時水溶液PH 值為PH5 ；
反應(yīng)式?、貯i+HCl — B1 +C1
在這里,A1表示陽離子表面活性劑與大豆異黃酮苷元上的一0_脫氫羥基形成的水不溶性的鹽A1表示氫還原后的原大豆異黃酮苷元K1表示被Cl—離子還原后的低溫下水不溶性的十八烷基三甲基氯化銨絮狀沉淀物或懸浮物；
反應(yīng)式②A2+HCl — B2 I +H2O
在這里A2表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的0H_根化合生成的水不溶性的堿。B2表示陽離子表面活性劑被Cl—離子還原后的十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物； B2和上述C1相同；
(10)將上述產(chǎn)物加入NaOH、苯甲酸鈉和陰離子表面活性劑脂肪酸鈉鹽，并加熱到 500C ;在將水溶液PH值調(diào)節(jié)到PH10，后再加入水溶液I %的苯甲酸鈉和相對于十八烷基三甲基氯化銨稍微過量的脂肪酸鈉鹽，脂肪酸鈉鹽的過量程度為水溶液的O. 3% ;再攪拌，速度100轉(zhuǎn)/分，時間30分鐘；再將上述C1與脂肪酸鈉鹽化合的水不溶性的化合物過濾去除； 再加水溶性鈣鹽或鎂鹽充分?jǐn)嚢瑁D(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)/分，使鈣鹽或鎂鹽與上述過量的脂肪酸鈉鹽化合，生成水不溶性的化合物而被過濾去除；這樣水溶液中只有苯甲酸鈉和目標(biāo)產(chǎn)物B1,再降溫至30°C，并用鹽酸調(diào)節(jié)水溶液PH值至PH7，這樣目標(biāo)產(chǎn)物B1大部分從水溶液中沉淀析出；在這里苯甲酸鈉的作用是協(xié)同增加目標(biāo)產(chǎn)物B1在水溶液中的溶解度，便于B1與其它物質(zhì)分離；苯甲酸鈉水溶液可循環(huán)重復(fù)利用；當(dāng)回收重復(fù)利用的苯甲酸鈉水溶液中氯化鈉含量過高時，可調(diào)節(jié)水溶液至酸性，回收苯甲酸再蒸發(fā)濃縮得NaCl干品；此步驟分離最終目標(biāo)產(chǎn)物B1也可以采用以下步驟，先加入適量的NaOH，使水溶液PH值為PH8-12，使水溶液溫度為1°C -30°C，這樣只有目標(biāo)產(chǎn)物B1溶于低溫堿性水溶液而與十八烷基三甲基氯化銨分離，得到目標(biāo)產(chǎn)物B1水溶液，再用鹽酸調(diào)節(jié)水溶液PH值至PH7，這樣目標(biāo)產(chǎn)物B1從水溶液中沉淀析出，因?yàn)榇四繕?biāo)產(chǎn)物不溶于水或中性水溶液；
(11)將上述B1真空冷凍干燥，得到大豆異黃酮苷元干品，干燥時間4小時，冷凍溫度-40°C，壓力 15Pa ；
三、白藜蘆醇苷元的提取
(I)植物加食用軟水或去離子水粉碎；
(2)以纖維素酶降解破壞植物細(xì)胞壁或用冷凍再加熱解凍方法破壞植物細(xì)胞壁；
(3)將上述產(chǎn)物加入水溶液O. 3%的脂肪酸鈉鹽，以提高白藜蘆醇苷在水溶液中的溶解度，溫度50°C ；
(4)加熱攪拌，溫度50°C，攪拌速度200轉(zhuǎn)/分鐘，提高白藜蘆醇苷在水中的溶解率；
(5)壓榨過濾，得含白藜蘆醇苷的水溶液，加碳酸氫鈣去除上述陰離子表面活性劑，備用;
(6)將上述產(chǎn)物在攪拌中以葡萄糖苷酶降解，裂解糖苷鍵，脫糖得白藜蘆醇苷元，溫度50°C，ΡΗ5，轉(zhuǎn)速50轉(zhuǎn)/分，時間10小時；針對C-O糖苷鍵；
(7)將上述含白藜蘆醇苷元的水溶液加入適量的NaOH，使白藜蘆醇苷元上的羥基被部分或完全中和，生成水溶性的鹽；鹽水溶液PH8 ；
(8)將上述水溶液再加入陽離子表面活性劑十八烷基三甲基氯化銨，再攪拌，使陽離子表面活性劑與水溶液中的白藜蘆醇苷元鹽充分反應(yīng)；陽離子表面活性劑分子接在白藜蘆醇分子上的一0_脫氫羥基上，得到水不溶性的鹽；溫度50°C，轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)/分，時間60分鐘；
(9)將上述產(chǎn)物降溫至30°C，使全部反應(yīng)物沉淀或懸浮；
(10)提取上述沉淀或懸浮物質(zhì)，與10%的鹽酸在攪拌條件下置換反應(yīng)，轉(zhuǎn)速100 轉(zhuǎn)/分鐘，反應(yīng)時間30分鐘，溫度30°C，注意鹽酸只稍微過量，反應(yīng)結(jié)束時水溶液PH值為 PH5 ;使所加入的陽離子表面活性劑等被完全反應(yīng)/沉淀或懸浮分離；恢復(fù)白藜蘆醇的生物活性；
反應(yīng)式?、貯i+HCl — B1 +C1
在這里,A1表示陽離子表面活性劑與白藜蘆醇苷元上的一0_脫氫羥基形成的水不溶性的鹽辦表示氫還原后的原白藜蘆醇苷元A表示被Cr離子還原后的低溫下水不溶性的十八烷基三甲基氯化銨絮狀沉淀物或懸浮物；
反應(yīng)式②A2+HCl — B2 I +H2O
在這里A2表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的0H_根化合生成的水不溶性的假堿。B2表示陽離子表面活性劑被Cl—離子還原后的十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物；B2和上述C1相同;
(11)將上述產(chǎn)物加入NaOH、苯甲酸鈉和陰離子表面活性劑脂肪酸鈉鹽，并加熱到 500C ;在將水溶液PH值調(diào)節(jié)到PH10，后再加入水溶液I %的苯甲酸鈉和相對于十八烷基三甲基氯化銨稍微過量的脂肪酸鈉鹽，脂肪酸鈉鹽的過量程度為水溶液的O. 3% ;再攪拌，速度100轉(zhuǎn)/分，時間30分鐘；再將上述C1與脂肪酸鈉鹽化合的水不溶性的化合物過濾去除； 再加水溶性鈣鹽或鎂鹽充分?jǐn)嚢瑁D(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)/分，使鈣鹽或鎂鹽與上述過量的脂肪酸鈉鹽化合，生成水不溶性的化合物而被過濾去除；這樣水溶液中只有苯甲酸鈉和目標(biāo)產(chǎn)物B1,再降溫至30°C，并用鹽酸調(diào)節(jié)水溶液PH值至PH7，這樣目標(biāo)產(chǎn)物B1大部分從水溶液中沉淀析出；在這里苯甲酸鈉的作用是協(xié)同增加目標(biāo)產(chǎn)物B1在水溶液中的溶解度，便于B1與其它物質(zhì)分離；苯甲酸鈉水溶液可循環(huán)重復(fù)利用；當(dāng)回收重復(fù)利用的苯甲酸鈉水溶液中氯化鈉含量過高時，可調(diào)節(jié)水溶液至酸性，回收苯甲酸再蒸發(fā)濃縮得NaCl干品；此步驟分離最終目標(biāo)產(chǎn)物B1也可以采用以下步驟，先加入適量的NaOH，使水溶液PH值為PH8-12，使水溶液溫度為1°C -30°C，這樣只有目標(biāo)產(chǎn)物B1溶于低溫堿性水溶液而與十八烷基三甲基氯化銨分離，得到目標(biāo)產(chǎn)物B1水溶液，再用鹽酸調(diào)節(jié)水溶液PH值至PH7，這樣目標(biāo)產(chǎn)物B1從水溶液中沉淀析出，因?yàn)榇四繕?biāo)產(chǎn)物不溶于水或中性水溶液；
(12)將上述B1真空冷凍干燥，得到白藜蘆醇苷元干品，干燥時間5小時，冷凍溫度-40°C，壓力 15Pa。
實(shí)施例2:
按下述方法提取
一、三萜皂苷類的甘草酸的提取
(I)植物加食用軟水或去離子水粉碎；
(2)以纖維素酶降解破壞植物細(xì)胞壁或用冷凍再加熱解凍方法破壞植物細(xì)胞壁；
(3)將上述產(chǎn)物加入水溶液O. 3%的脂肪酸鈉鹽，以提高甘草酸在水溶液中的溶解度，溫度50°C ；
(4)將上述產(chǎn)物加熱攪拌，溫度50°C，攪拌速度200轉(zhuǎn)/分鐘，以提高甘草酸在水中的溶解率；
(5)壓榨過濾，得含甘草酸的水溶液備用；
(6)將上述含甘草酸的水溶液加入適量的NaOH，使甘草酸被完全中和，生成水溶性的鹽；鹽水溶液PH8 ；
(7)將上述水溶液再加入陽離子表面活性劑十八烷基三甲基氯化銨，再攪拌，使陽離子表面活性劑與水溶液中的甘草酸鹽充分反應(yīng)；陽離子表面活性劑分子連接在甘草酸分子上的一0_脫氫羥基上，得到水不溶性的鹽；其中陽離子表面活性劑和陰離子表面活性劑也化合沉淀；并促進(jìn)陽離子表面活性劑與甘草酸的水不溶性的化合物與水的沉淀或懸浮分離；溫度50°C，轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)/分，時間60分鐘；
(8)將上述產(chǎn)物降溫至30°C，使全部反應(yīng)物沉淀或懸?。?br> (9)提取上述沉淀或懸浮物質(zhì)，與20%的鹽酸在攪拌條件下置換反應(yīng)，轉(zhuǎn)速100 轉(zhuǎn)/分鐘，反應(yīng)時間30分鐘，溫度30°C，注意鹽酸只稍微過量，將反應(yīng)結(jié)束時水溶液控制在 PH5，使所加入的陽離子表面活性劑等被完全反應(yīng)沉淀或懸浮分離；恢復(fù)甘草酸的生物活性和水溶性；
反應(yīng)式Ai+HCl— Bj+Cj
在這里，A1表示陽離子表面活性劑與甘草酸上的脫氫羥基形成的水不溶性的鹽； B1表示氫還原后的原甘草酸A表示被Cl—離子還原后的低溫下水不溶性的十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物；
反應(yīng)式②A2+HCl — B2 I +C2 I
在這里A2表示陰離子表面活性劑與陽離子表面活性劑的水不溶性的化合物。B2 表示陰離子表面活性劑與H+離子化合的水不溶性的化合物。C2表示陽離子表面活性劑與 CF離子化合形成的低溫下水不溶性的十八烷基三甲基氯化銨絮狀沉淀物或懸浮物；
反應(yīng)式！③A3+HC1 — B3 I +H2O
在這里A3表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的0H_根化合生成的水不溶性的堿。B3表示陽離子表面活性劑被Cl—離子還原后的十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物；
(10)將上述反應(yīng)物過濾，得到只含B1的水溶性，真空冷凍干燥，得到甘草酸干品， 其中稍微過量的鹽酸(HCl氣體)被回收；干燥時間24小時，冷凍溫度_40°C，壓力15Pa ；
二、蘆丁苷元的提取
(I)植物加食用軟水或去離子水粉碎；
(2)將上述產(chǎn)物加入水溶液O. 3%的脂肪酸鈉鹽，以提高蘆丁苷在水溶液中的溶解度，溫度50°C ；
(3)加熱攪拌，溫度70°C，攪拌速度100轉(zhuǎn)/分鐘，以提高蘆丁苷在水中的溶解率；
(4)壓榨過濾，得含蘆丁苷的水溶液，加碳酸氫鈣攪拌去除上述陰離子表面活性劑，備用;
(5)將上述產(chǎn)物在攪拌中以葡萄糖苷酶降解，裂解糖苷鍵脫糖得蘆丁苷元，溫度50°C，ΡΗ5，轉(zhuǎn)速50轉(zhuǎn)，時間10小時；針對C-O糖苷鍵；
(6)將上述含蘆丁苷元的水溶液加入適量的NaOH，使其苷元上的一OH羥基被部分或完全中和，生成水溶性的鹽；鹽水溶液PH值為PH8 ；
(7)將上述水溶液再加入陽離子表面活性劑十六烷基三甲基氯化銨，再攪拌，使陽離子表面活性劑與水溶液中的蘆丁苷元鹽充分反應(yīng)；陽離子表面活性劑分子接在蘆丁苷元分子上的一0_脫氫羥基上，得到水不溶性的鹽；溫度50°C，轉(zhuǎn)速100轉(zhuǎn)/分，時間30分鐘；
(8)將上述產(chǎn)物降溫至2V，使全部反應(yīng)物沉淀或懸?。?br> (9)提取上述沉淀或懸浮物質(zhì)，與10%的鹽酸在攪拌條件下置換反應(yīng)，轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn) /分鐘，反應(yīng)時間30分鐘，溫度30°C，注意鹽酸只稍微過量，使所加入的陽離子表面活性劑被完全反應(yīng)；恢復(fù)蘆丁苷元的生物活性；反應(yīng)結(jié)束時水溶液PH值為PH5 ；
反應(yīng)式?、貯i+HCl — B1 +C1
在這里,A1表示陽離子表面活性劑與蘆丁苷元上的一0_脫氫羥基形成的水不溶性的鹽A1表示氫還原后的原蘆丁苷元K1表示被Cl—離子還原后的低溫下水溶性的十六烷基三甲基氯化銨；
反應(yīng)式②A2+HCl — Β2+Η20
在這里A2表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的OH—根化合生成的水不溶性的假堿。B2表示陽離子表面活性劑被Cr離子還原后的低溫下水溶性的十六烷基三甲基氯化銨；B2和上述C1相同;
(10)將上述產(chǎn)物直接過濾，得到目標(biāo)產(chǎn)物B1并用飲用水或去離子水清洗此目標(biāo)產(chǎn)物中少量的陽離子表面活性劑，含陽離子表面活性劑的水溶液可循環(huán)重復(fù)利用，極大地節(jié)約了陽離子表面活性劑原材料；
(11)將上述B1真空冷凍干燥，得到蘆丁苷元干品，干燥時間4小時，冷凍溫度-40°C，壓力 15Pa ；
三、白藜蘆醇苷元的提取
(I)植物加食用軟水或去離子水粉碎；
(2)以纖維素酶降解破壞植物細(xì)胞壁或用冷凍再加熱解凍方法破壞植物細(xì)胞壁；
(3)將上述產(chǎn)物加入水溶液O. 3%的脂肪酸鈉鹽，以提高白藜蘆醇苷在水溶液中的溶解度，溫度50°C ；
(4)加熱攪拌，溫度50°C，攪拌速度200轉(zhuǎn)/分鐘，提高白藜蘆醇苷在水中的溶解率；
(5)壓榨過濾，得含白藜蘆醇苷的水溶液，加碳酸氫鈣去除上述陰離子表面活性劑，備用;
(6)將上述產(chǎn)物在攪拌中以葡萄糖苷酶降解，裂解糖苷鍵，脫糖得白藜蘆醇苷元，溫度50°C，ΡΗ5，轉(zhuǎn)速50轉(zhuǎn)/分，時間10小時；針對C-O糖苷鍵；
(7)將上述含白藜蘆醇苷元的水溶液加入適量的NaOH，使白藜蘆醇苷元上的羥基被部分或完全中和，生成水溶性的鹽；鹽水溶液PH8 ；
(8)將上述水溶液再加入陽離子表面活性劑十六烷基三甲基氯化銨，再攪拌，使陽離子表面活性劑與水溶液中的白藜蘆醇苷元鹽充分反應(yīng)；陽離子表面活性劑分子接在白藜蘆醇分子上的一0_脫氫羥基上，得到水不溶性的鹽；溫度50°C，轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)/分，時間60分鐘；
(9)將上述產(chǎn)物降溫至2V，使全部反應(yīng)物沉淀或懸浮；
(10)提取上述沉淀或懸浮物質(zhì)，與10%的鹽酸在攪拌條件下置換反應(yīng)，轉(zhuǎn)速100 轉(zhuǎn)/分鐘，反應(yīng)時間30分鐘，溫度30°C，注意鹽酸只稍微過量，反應(yīng)結(jié)束時水溶液PH值為 PH5 ;使所加入的陽離子表面活性劑被完全反應(yīng)；恢復(fù)白藜蘆醇的生物活性；
反應(yīng)式?、貯i+HCl — B1 I +C1
在這里,A1表示陽離子表面活性劑與白藜蘆醇苷元上的一0_脫氫羥基形成的水不溶性的鹽A1表示氫還原后的原白藜蘆醇苷元K1表示被Cl—離子還原后的低溫下水溶性的十六烷基三甲基氯化銨；
反應(yīng)式②A2+HCl — Β2+Η20
在這里A2表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的OH—根化合生成的水不溶性的假堿。B2表示陽離子表面活性劑被Cr離子還原后的低溫下水溶性的十六烷基三甲基氯化銨；B2和上述C1相同;
(11)將上述產(chǎn)物直接過濾，得到目標(biāo)產(chǎn)物B1并用飲用水或去離子水清洗此目標(biāo)產(chǎn)物中少量的陽離子表面活性劑，含陽離子表面活性劑的水溶液可循環(huán)重復(fù)利用，極大地節(jié)約了陽離子表面活性劑原材料；
(12)將上述B1真空冷凍干燥，得到白藜蘆醇苷元干品，干燥時間5小時，冷凍溫度-40°C，壓力 15Pa。
權(quán)利要求
1.天然含羥基或/和羧基化合物的提取方法，其特征主要在于它是由下列步驟組成的 一、三萜皂苷類的提取 (1)植物加食用軟水或去離子水粉碎； (2)以纖維素酶降解破壞植物細(xì)胞壁或用冷凍再加熱解凍方法破壞植物細(xì)胞壁； (3)將上述產(chǎn)物加入0.2% -0. 5%的對陽離子物質(zhì)敏感、含直鏈親油基的水溶性陰離子表面活性劑，以提高三萜皂苷在水溶液中的溶解度，溫度30°C -60°C ； (4)將上述產(chǎn)物加熱攪拌，溫度25°C_80°C，攪拌速度50-200轉(zhuǎn)/分鐘，以提高三萜皂苷在水中的溶解率； (5)壓榨過濾，得含三萜皂苷的水溶液備用； (6)將上述含三萜皂苷的水溶液加入適量的NaOH，使三萜皂苷被完全中和，生成水溶性的鹽；鹽水溶液PH7-12 ； (7)將上述水溶液再加入陽離子表面活性劑十八烷基三甲基氯化銨或十八烷基三甲基溴化銨，再攪拌，使陽離子表面活性劑與水溶液中的三萜皂苷鹽充分反應(yīng)；陽離子表面活性劑分子連接在三萜皂苷分子上的一C00_脫氫羧基上或一0_脫氫羥基上，得到水不溶性的鹽；其中陽離子表面活性劑和陰離子表面活性劑也化合沉淀；并促進(jìn)陽離子表面活性劑與三萜皂苷的水不溶性的化合物與水的沉淀或懸浮分離；溫度30°C -70°C，轉(zhuǎn)速100-600轉(zhuǎn)/分，時間30-60分鐘； (8)將上述產(chǎn)物降溫至1°C_30°C，使全部反應(yīng)物沉淀或懸??； (9)提取上述沉淀或懸浮物質(zhì)，與2% -30 %的鹽酸在攪拌條件下置換反應(yīng)，轉(zhuǎn)速50-600轉(zhuǎn)/分鐘，反應(yīng)時間10-30分鐘，溫度1°C _30°C，注意鹽酸只稍微過量，將反應(yīng)結(jié)束時水溶液控制在PH4-6. 9之間，使所加入的陽離子表面活性劑等被完全反應(yīng)沉淀或懸浮分離；恢復(fù)三萜皂苷的生物活性和水溶性； 反應(yīng)式:①AJHCl — B^C1 I 在這里，A1表示陽離子表面活性劑與三萜皂苷上的脫氫羧基形成的水不溶性的鹽表示氫還原后的原三萜皂苷K1表示被Cl—離子還原后的低溫下水不溶性的十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物；反應(yīng)式② A2+HC1 — B2 I +C2 I 在這里A2表示陰離子表面活性劑與陽離子表面活性劑的水不溶性的化合物。B2表示陰離子表面活性劑與H+離子化合的水不溶性的化合物。C2表示陽離子表面活性劑與Cl—離子化合形成的低溫下水不溶性的十八烷基三甲基氯化銨絮狀沉淀物或懸浮物； 反應(yīng)式③ A3+HC1 — B3 I +H2O 在這里A3表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的0H—根化合生成的水不溶性的假堿。B3表示陽離子表面活性劑被Cl—離子還原后的十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物； (10)將上述反應(yīng)物過濾，得到只含B1的水溶性水溶液，真空冷凍干燥，得到三萜皂苷干品，其中稍微過量的鹽酸(HCl氣體)被回收；干燥時間10-24小時，冷凍溫度_40°C至_20°C，壓力彡25Pa ； 二、黃酮類苷元的提取 (I)植物加食用軟水或去離子水粉碎；(2)將上述產(chǎn)物以纖維素酶降解破壞植物細(xì)胞壁或用冷凍再加熱解凍方法破壞植物細(xì)胞壁； (3)將上述產(chǎn)物加入0.2% -0. 5%對陽離子物質(zhì)敏感，含直鏈親油基的水溶性陰離子表面活性劑，以提高黃酮苷在水溶液中的溶解度，溫度30°C -60°C ； (4)加熱攪拌，溫度25°C_80°C，攪拌速度50-200轉(zhuǎn)/分鐘，以提高黃酮苷在水中的溶解率； (5)壓榨過濾，得含黃酮苷的水溶液，加水溶性鈣鹽或鎂鹽與上述陰離子表面活性劑化合成水不溶性的鹽以除去陰離子表面活性劑，備用； (6)將上述產(chǎn)物在攪拌中以3_葡萄糖苷酶降解，裂解糖苷鍵脫糖得黃酮苷元，溫度400C -500C，PH4-6. 9，轉(zhuǎn)速30-100轉(zhuǎn)/分，時間10-24小時；針對C-O糖苷鍵； (7)將上述含黃酮苷元的水溶液加入適量的NaOH，使黃酮苷元上的一OH羥基被部分或完全中和，生成水溶性的鹽；鹽水溶液PH值為PH7-12 ； (8)將上述水溶液再加入陽離子表面活性劑十八烷基三甲基氯化銨或十八烷基三甲基溴化銨或十六烷基三甲基氯化銨或十六烷基三甲基溴化銨，再攪拌，使陽離子表面活性劑與水溶液中的黃酮苷元鹽充分反應(yīng)；陽離子表面活性劑分子接在黃酮苷元分子上的一0_脫氫羥基上，得到水不溶性的鹽；溫度40°C -80°C，轉(zhuǎn)速100-600轉(zhuǎn)/分，時間30-60分鐘； (9)將上述產(chǎn)物降溫至1°C_30°C，使全部反應(yīng)物沉淀或懸??； (10)提取上述沉淀或懸浮物質(zhì)，與2%-30%的鹽酸在攪拌條件下置換反應(yīng)，轉(zhuǎn)速50-600轉(zhuǎn)/分鐘，反應(yīng)時間10-30分鐘，溫度1°C _30°C，注意鹽酸只稍微過量，將反應(yīng)結(jié)束時水溶液控制在PH4-6. 9之間，使所加入的陽離子表面活性劑被完全反應(yīng)/沉淀或懸浮；恢復(fù)黃酮苷元的生物活性；.1.十八烷基三甲基氯化銨或十八烷基三甲基溴化銨、鹽酸反應(yīng)式 反應(yīng)式AJHCl — B1 I +C1 I 在這里，A1表示陽離子表面活性劑與黃酮苷元上的一0_脫氫羥基形成的水不溶性的鹽A1表示氫還原后的原黃酮苷元K1表示被Cl—離子還原后的低溫下水不溶性的十八烷基三甲基氯化銨絮狀沉淀物或懸浮物； 反應(yīng)式② A2+HC1 — B2 I +H2O 在這里A2表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的0H—根化合生成的水不溶性的假堿。B2表示陽離子表面活性劑被Cl—離子還原后的十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物；B2和上述C1相同；.2.十六烷基三甲基氯化銨或十六烷基三甲基溴化銨、鹽酸反應(yīng)式 反應(yīng)式 .①AAHCl — B1丨+C1 在這里，A1表示陽離子表面活性劑與黃酮苷元上的一0_脫氫羥基形成的水不溶性的鹽A1表示氫還原后的原黃酮苷元K1表示被Cl—離子還原后的低溫下水溶性的十六烷基三甲基氯化銨； 反應(yīng)式② A2+HC1 — B2+H20 在這里A2表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的0H—根化合生成的水不溶性的假堿。B2表示陽離子表面活性劑被Cr離子還原后的水溶性的十六烷基三甲基氯化銨；b2和上述C1相同；(11)將上述(10). I中的產(chǎn)物加入NaOH、苯甲酸鈉和陰離子表面活性劑脂肪酸鈉鹽，并加熱到40°C -60°C ;在將水溶液PH值調(diào)節(jié)到PH8-10之間，后再加入水溶液I % _2%的苯甲酸鈉和相對于十八烷基三甲基氯化銨稍微過量的脂肪酸鈉鹽，脂肪酸鈉鹽的過量程度為水溶液的0. 2% -0. 3% ;再攪拌，速度50-200轉(zhuǎn)/分，時間10-30分鐘；再將上述C1與脂肪酸鈉鹽化合的水不溶性的化合物過濾去除，這其中也存在十八烷基三甲基氯化銨與水溶液中的氫氧根(-OHO負(fù)離子化合的水不溶性的假堿化合物而被同時去除；再加水溶性鈣鹽或鎂鹽充分?jǐn)嚢瑁D(zhuǎn)速100-200轉(zhuǎn)/分，使鈣鹽或鎂鹽與上述過量的脂肪酸鈉鹽化合，生成水不溶性的化合物而被過濾去除；這樣水溶液中只有苯甲酸鈉和目標(biāo)產(chǎn)物B1，再降溫至I0C _30°C，并用鹽酸調(diào)節(jié)水溶液PH值至PH7，這樣目標(biāo)產(chǎn)物B1大部分從水溶液中沉淀析出；在這里苯甲酸鈉的作用是協(xié)同增加目標(biāo)產(chǎn)物B1在水溶液中的溶解度，便于B1與其它物質(zhì)分離；苯甲酸鈉水溶液可循環(huán)重復(fù)利用；當(dāng)回收重復(fù)利用的苯甲酸鈉水溶液中氯化鈉含量過高時，可調(diào)節(jié)水溶液至酸性，回收苯甲酸再蒸發(fā)濃縮得NaCl干品；此步驟分離最終目標(biāo)產(chǎn)物B1也可以采用以下步驟，先加入適量的NaOH，使水溶液PH值為PH8-12、水溶液溫度為I°C _30°C，這樣只有目標(biāo)產(chǎn)物B1溶于低溫堿性水溶液而與十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物分離，得到目標(biāo)產(chǎn)物B1水溶液，再用鹽酸調(diào)節(jié)水溶液PH值至PH7，這樣目標(biāo)產(chǎn)物B1大部分從水溶液中沉淀析出，因?yàn)榇四繕?biāo)產(chǎn)物不溶于水或中性水溶液； 將上述(10). 2中的產(chǎn)物直接過濾，得到目標(biāo)產(chǎn)物B1并用飲用水或去離子水清洗其中少量的陽離子表面活性劑；含陽離子表面活性劑的水溶液可循環(huán)重復(fù)利用；(12)將上述B1真空冷凍干燥，得到黃酮苷元干品，干燥時間1-24小時，冷凍溫度-40°C至-rC，壓力(25Pa ； 三、白藜蘆醇苷元的提取 (1)植物加食用軟水或去離子水粉碎； (2)以纖維素酶降解破壞植物細(xì)胞壁或用冷凍再加熱解凍方法破壞植物細(xì)胞壁； (3)將上述產(chǎn)物加入0.2% -0. 5%對陽離子物質(zhì)敏感，含直鏈親油基的水溶性陰離子表面活性劑，以提高白藜蘆醇苷在水溶液中的溶解度，溫度30°C -60°C ； (4)加熱攪拌，溫度25°C_80°C，攪拌速度50-200轉(zhuǎn)/分鐘，提高白藜蘆醇在水中的溶解率； (5)壓榨過濾，得含白藜蘆醇苷的水溶液，再加水溶性鈣鹽或鎂鹽與上述陰離子表面活性劑化合成水不溶性的鹽以去除陰離子表面活性劑，備用； (6)將上述產(chǎn)物在攪拌中以￠-葡萄糖苷酶降解，裂解糖苷鍵，脫糖得白藜蘆醇苷元，溫度400C -50°C，PH4-6. 9，轉(zhuǎn)速30-100轉(zhuǎn)/分，時間10-24小時；針對C-O糖苷鍵； (7)將上述含白藜蘆醇苷元的水溶液加入適量的NaOH，使白藜蘆醇苷元上的羥基被部 分或完全中和，生成水溶性的鹽；鹽水溶液PH7-12 ； (8)將上述水溶液再加入陽離子表面活性劑十八烷基三甲基氯化銨或十八烷基三甲基溴化銨或十六烷基三甲基氯化銨或十六烷基三甲基溴化銨，再攪拌，使陽離子表面活性劑與水溶液中的白藜蘆醇苷元鹽充分反應(yīng)；陽離子表面活性劑分子接在白藜蘆醇分子上的一0_脫氫羥基上，得到水不溶性的鹽；溫度40°C -70°C，轉(zhuǎn)速100-600轉(zhuǎn)/分，時間30-60分鐘； (9)將上述產(chǎn)物降溫至1°C-30°C，使全部反應(yīng)物沉淀或懸?。?10)提取上述沉淀或懸浮物質(zhì)，與2%-30%的鹽酸在攪拌條件下置換反應(yīng)，轉(zhuǎn)速50-600轉(zhuǎn)/分鐘，反應(yīng)時間10-30分鐘，溫度1°C _30°C，注意鹽酸只稍微過量，將反應(yīng)結(jié)束時水溶液控制在PH4-6. 9，使所加入的陽離子表面活性劑被完全反應(yīng)/沉淀或懸浮； 恢復(fù)白藜蘆醇的生物活性；.1.十八烷基三甲基氯化銨或十八烷基三甲基溴化銨、鹽酸反應(yīng)式 反應(yīng)式AJHCl — B1 I +C1 I 在這里,A1表示陽離子表面活性劑與白藜蘆醇苷元上的一0_脫氫羥基形成的水不溶性的鹽辦表示氫還原后的原白藜蘆醇苷元A表示被Cr離子還原后的低溫下水不溶性的十八烷基三甲基氯化銨絮狀沉淀物或懸浮物； 反應(yīng)式@A2+HC1 — B2 I +H2O 在這里A2表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的0H—根化合生成的水不溶性的假堿。B2表示陽離子表面活性劑被Cl—離子還原后的十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物； .2.十六烷基三甲基氯化銨或十六烷基三甲基溴化銨、鹽酸反應(yīng)式 反應(yīng)式 .①AAHCl — B1丨+C1 在這里,A1表示陽離子表面活性劑與白藜蘆醇苷元上的一0_脫氫羥基形成的水不溶性的鹽A1表示氫還原后的原白藜蘆醇苷元K1表示被Cl—離子還原后的低溫下水溶性的十六烷基三甲基氯化銨； 反應(yīng)式② a2+hci — b2+h2o 在這里A2表示陽離子表面活性劑與堿性水溶液中的0H—根化合生成的水不溶性的假堿。B2表示陽離子表面活性劑被Cr離子還原后的水溶性的十六烷基三甲基氯化銨；b2和上述C1相同； (11)將上述(10).I的產(chǎn)物加入NaOH、苯甲酸鈉和陰離子表面活性劑脂肪酸鈉鹽，并加熱到40°C -60°C;在將水溶液PH值調(diào)節(jié)到PH8-10之間，后再加入水溶液1% _2%的苯甲酸鈉和相對于十八烷基三甲基氯化銨稍微過量的脂肪酸鈉鹽，脂肪酸鈉鹽的過量程度為水溶液的0. 2%-0. 3%;再攪拌，速度50-200轉(zhuǎn)/分，時間10-30分鐘；再將上述仏與脂肪酸鈉鹽化合的水不溶性的化合物過濾去除，這其中也存在十八烷基三甲基氯化銨與水溶液中的氫氧根(-0H—)負(fù)離子化合的水不溶性的假堿化合物而被同時去除；再加水溶性鈣鹽或鎂鹽充分?jǐn)嚢?，轉(zhuǎn)速100-200轉(zhuǎn)/分，使鈣鹽或鎂鹽與上述過量的脂肪酸鈉鹽化合，生成水不溶性的化合物而被過濾去除；這樣水溶液中只有苯甲酸鈉和目標(biāo)產(chǎn)物B1，再降溫至1°C -30 °C,并用鹽酸調(diào)節(jié)水溶液PH值至PH7，這樣目標(biāo)產(chǎn)物B1大部分從水溶液中沉淀析出；在這里苯甲酸鈉的作用是協(xié)同增加目標(biāo)產(chǎn)物B1在水溶液中的溶解度，便于B1與其它物質(zhì)分離；苯甲酸鈉水溶液可循環(huán)重復(fù)利用；當(dāng)回收重復(fù)利用的苯甲酸鈉水溶液中氯化鈉含量過高時，可調(diào)節(jié)水溶液至酸性，回收苯甲酸再蒸發(fā)濃縮得NaCl干品；此步驟分離最終目標(biāo)產(chǎn)物B1也可以采用以下步驟，先加入適量的NaOH，使水溶液PH值為PH8-12、水溶液溫度為1°C -30°C,這樣只有目標(biāo)產(chǎn)物B1溶于低溫堿性水溶液而與十八烷基三甲基氯化銨沉淀物或懸浮物分離，得到目標(biāo)產(chǎn)物B1水溶液，再用鹽酸調(diào)節(jié)水溶液PH值至PH7，這樣目標(biāo)產(chǎn)物B1大部分從水溶液中沉淀析出，因?yàn)榇四繕?biāo)產(chǎn)物不溶于水或中性水溶液； 將上述(10). 2中的產(chǎn)物直接過濾，得到目標(biāo)產(chǎn)物B1并用飲用水或去離子水清洗其中少量的陽離子表面活性劑；含陽離子表面活性劑的水溶液可循環(huán)重復(fù)利用；(12)將上述B1真空冷凍干燥，得到白藜蘆醇苷元干品，干燥時間1-24小時， 冷凍溫度-40°C至_1°C，壓力彡25Pa。
全文摘要
本發(fā)明涉及天然含羥基或/和羧基化合物的提取方法，它屬生物工程技術(shù)領(lǐng)域。它是由下列步驟組成的天然含羥基或/和羧基化合物植物的加水粉碎，破壞植物細(xì)胞壁，β-葡萄糖苷酶降解脫糖，熱堿性水溶解，加陽離子表面活性劑化合反應(yīng)攪拌，冷卻，鹽酸反應(yīng)還原，冷凍干燥。本發(fā)明技術(shù)可得到真實(shí)含量為95％以上的天然含羥基或/和羧基化合物干品，可用于醫(yī)療、保健、生物農(nóng)藥。
文檔編號C07J75/00GK102977179SQ20121043695
公開日2013年3月20日 申請日期2012年10月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月28日
發(fā)明者耿兆翔 申請人:耿兆翔