一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法
【專利摘要】本發(fā)明一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法，相比于傳統(tǒng)熱水浸提法提取得率為8.2%，本發(fā)明一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法，瑪咖多糖得率最高可達(dá)15.5%。本發(fā)明一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法，采用亞臨界水提取瑪咖多糖，提取得率明顯高于傳統(tǒng)熱水浸提法，提取時(shí)間短，效率高，綠色無污染，且設(shè)備要求低。同時(shí)，抗氧化活性實(shí)驗(yàn)表明，在該條件下亞臨界水提取物抗氧化活性高于傳統(tǒng)熱水浸提提取物的抗氧化活性。
【專利說明】一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物活性成分提取領(lǐng)域，涉及一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]瑪咖(Lepidium meyenii Walp.)為十字花科獨(dú)行菜屬植物,原產(chǎn)于海拔3500~4500米的安第斯山脈，主要分布在秘魯，有“秘魯人參”之稱，地下部分可食，在南美已有5800多年的食用歷史。我國于2003年引入該種，在云南和新疆地區(qū)已有種植，2011年批準(zhǔn)瑪咖作為新資源食品?，斂且环N藥食兩用植物，富含蛋白質(zhì)、糖類、氨基酸、常量和微量元素等多種營養(yǎng)成分，脂肪含量較低(瑪咖營養(yǎng)成分分析[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41 (4): 285-286)，傳統(tǒng)用于治療人畜性功能障礙和不育。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，瑪咖具有提高性能力和生育能力、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌、抗疲勞、抗腫瘤、抗衰老等藥理作用(南美高原植物瑪咖的研究進(jìn)展[J].中醫(yī)臨床研究，2011，3(19): 116-117)?，斂Ш邪被?、生物堿、多糖、留醇、酚類等多種活性成分，其中瑪咖生物堿和多糖為主要的活性成分(藥食兩用植物瑪咖(Lepidium meyenii)的功效物質(zhì)研究[D].華中科技大學(xué)，2006)。
[0003]亞臨界水又稱超加熱水、高壓熱水或熱液態(tài)水，是指在一定的壓力下，將水加熱到IOO0C以上，臨界溫度374°C以下的高溫，水體仍然保持在液體狀態(tài)。亞臨界狀態(tài)下流體微觀結(jié)構(gòu)的氫鍵、離子水合、離子締合、簇狀結(jié)構(gòu)等發(fā)生了變化，改變溫度和壓力，可以改變水的極性、表面張力和粘度，使得亞臨界水對活性成分的溶解能力很大的提高，從而提高其提取效率。亞臨界水提取技術(shù)是利用亞臨界水作為提取溶劑，該技術(shù)具有提取時(shí)間短、萃取率高、環(huán)境友好等技術(shù)優(yōu)勢，是一種易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)的綠色提取技術(shù)。
[0004]目前瑪咖多糖的提取方法主要是采用傳統(tǒng)熱水浸提法、超聲輔助提取、微波輔助提取和超高壓提取等。陳燕青等采用傳統(tǒng)熱水浸提法從瑪咖干根粉中提取瑪咖多糖，正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化得到水提瑪咖多糖在`100°C、120min、料液比1:40，瑪咖多糖提取率(提取液中多糖質(zhì)量/瑪咖干粉質(zhì)量)為12.32%(瑪咖多糖提取技術(shù)研究[J].食品科技，2008(9):156-158)。郝利民等采用傳統(tǒng)熱水浸提法在100°C、120min、料液比1:20,?咖多糖提取率(提取液中多糖質(zhì)量/瑪咖干粉質(zhì)量)為15.9% (云南種植瑪咖中多糖提取工藝的優(yōu)化研究[J].食品工業(yè)科技，2013 (03):262-268)。王金全等采用超聲輔助和微波輔助提取瑪咖多糖，得到瑪咖多糖在30min，50°C，功率160W，料液比1: 20超聲處理后，提取液除淀粉，離心、定容后，按苯酚硫酸法測多糖含量，提取率為74.4% ;在6min，50°C，功率340W，料液比1: 70微波處理后，提取液除淀粉，離心、定容后，按苯酚硫酸法測定多糖含量，提取率為68.8%，但其提取率文中未見準(zhǔn)確定義。發(fā)明專利(CN102898534A)公開了一種采用200~500MPa超高壓條件提取和吸水樹脂濃縮結(jié)合提取精制瑪咖多糖的方法，但此法對設(shè)備的耐壓要求很高。綜上，現(xiàn)有的瑪咖多糖提取方法存在著提取時(shí)間長，耗損大，設(shè)備要求高的缺點(diǎn)。有關(guān)采用亞臨界水提取瑪咖多糖的方法至今未見國內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道，也未見相應(yīng)專利公開。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是為解決上述【背景技術(shù)】中存在的不足，提供一種瑪咖多糖提取的新方法和工藝。本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下:
[0006]一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法，其中，制作方法步驟如下:
[0007]1、將瑪咖干根粉碎，過200目篩，得馬咖粉末；
[0008]2、將制得的粉末裝入亞臨界萃取釜，粉末與亞臨界水的料液比為1:10~l:30g/ml，提取壓力為3~lOMPa，提取溫度為120~200°C，提取時(shí)間為30~60min，得提取液；
[0009]3、將提取液過濾，濾液在減壓濃縮后體積為原來的33%，使用三氯乙酸溶液調(diào)節(jié)PH值至I，再將其冷藏，冷藏時(shí)間:4小時(shí)，冷藏溫度:4°C，得冷藏液；
[0010]4、將冷藏液離心，分離上清液，在上清液中加入乙醇使溶液中乙醇含量達(dá)到80%，將溶液冷藏，冷藏時(shí)間:12小時(shí)，冷藏溫度:4°C ;過濾，得沉淀物；
[0011]5、在沉淀物中加水直至沉淀物溶解，得溶解液，將溶解液冷凍干燥，冷凍時(shí)間:48小時(shí)，冷凍溫度:-50°C，冷凍后即得瑪咖多糖。
[0012]上述一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法，其中，優(yōu)選地，所述粉末與亞臨界水的料液比為1:20g/ml。
[0013]上述一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法，其中，優(yōu)選地，所述亞臨界萃取釜提取壓力為5MPa，提取溫度為15 0°C，提取時(shí)間為40min。
[0014]上述一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法，其中，所述三氯乙酸溶液濃度為15%。
[0015]上述一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法，其中，所述乙醇為無水乙醇。
[0016]相比于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)如下:相比于傳統(tǒng)熱水浸提法提取得率為8.2%，本發(fā)明一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法，瑪咖多糖得率最高可達(dá)15.5%。本發(fā)明一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法，采用亞臨界水提取瑪咖多糖，提取得率明顯高于傳統(tǒng)熱水浸提法，提取時(shí)間短，效率高，綠色無污染，且設(shè)備要求低。同時(shí)，抗氧化活性實(shí)驗(yàn)表明，在該條件下亞臨界水提取物抗氧化活性高于傳統(tǒng)熱水浸提提取物的抗氧化活性。
【專利附圖】

【附圖說明】
圖1為瑪咖多糖對DPPH自由基的清除能力對比圖。
其中，SWMP:亞臨界水提瑪咖多糖；WMP:水提瑪咖多糖；Vc:抗壞血酸
【具體實(shí)施方式】
[0017]為了更清楚地說明本
【發(fā)明內(nèi)容】
，用具體實(shí)施例說明如下，具體實(shí)施例不限定本
【發(fā)明內(nèi)容】
范圍。
[0018]實(shí)施例1:
[0019]一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法，其中，制作方法步驟如下:將瑪咖干根粉碎，過200目篩，得馬咖粉末；將制得的粉末裝入亞臨界萃取釜，粉末與亞臨界水的料液比為l:10g/ml，提取壓力為3MPa，提取溫度為120°C，提取時(shí)間為30min，得提取液；將提取液過濾，濾液在減壓濃縮后體積為原來的33%，使用濃度為15%的三氯乙酸溶液調(diào)節(jié)PH值至1，再將其冷藏，冷藏時(shí)間:4小時(shí)，冷藏溫度:4°C，得冷藏液；將冷藏液離心，分離上清液，在上清液中加入乙醇使溶液中乙醇含量達(dá)到80%，將溶液冷藏，冷藏時(shí)間:12小時(shí)，冷藏溫度:4°C ;過濾，得沉淀物；在沉淀物中加水直至沉淀物溶解，得溶解液，將溶解液冷凍干燥，冷凍時(shí)間:48小時(shí)，冷凍溫度:-50°C，冷凍后即得瑪咖多糖。
[0020]技術(shù)效果:所提取的瑪咖多糖提取得率為12.7%。
[0021]實(shí)施例2:
[0022]一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法，其中，制作方法步驟如下:將瑪咖干根粉碎，過200目篩，得馬咖粉末；將制得的粉末裝入亞臨界萃取釜，粉末與亞臨界水的料液比為l:20g/ml，提取壓力為5MPa，提取溫度為150°C，提取時(shí)間為40min，得提取液；將提取液過濾，濾液在減壓濃縮后體積為原來的33%，使用濃度為15%的三氯乙酸溶液調(diào)節(jié)PH值至1，再將其冷藏，冷藏時(shí)間:4小時(shí)，冷藏溫度:4°C，得冷藏液；將冷藏液離心，分離上清液，在上清液中加入乙醇使溶液中乙醇含量達(dá)到80%，將溶液冷藏，冷藏時(shí)間:12小時(shí)，冷藏溫度:40C ;過濾，得沉淀物；在沉淀物中加水直至沉淀物溶解，得溶解液，將溶解液冷凍干燥，冷凍時(shí)間:48小時(shí)，冷凍溫度:-50°C，冷凍后即得瑪咖多糖。
[0023]技術(shù)效果:所提取的瑪咖多糖提取得率為15.4%。
[0024]實(shí)施例3:
[0025]一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法，其中，制作方法步驟如下:將瑪咖干根粉碎，過200目篩，得馬咖粉末；將制得的粉末裝入亞臨界萃取釜，粉末與亞臨界水的料液比為l:30g/ml，提取壓力為lOMPa，提取溫度為200°C，提取時(shí)間為60min，得提取液；將提取液過濾，濾液在減壓濃縮后體積為原來的33%，使用濃度為15%的三氯乙酸溶液調(diào)節(jié)PH值至I，再將其冷藏，冷藏時(shí)間:4小時(shí)，冷藏溫度:4°C，得冷藏液；將冷藏液離心，分離上清液，在上清液中加入乙醇使溶液中乙醇含量達(dá)到80%，將溶液冷藏，冷藏時(shí)間:12小時(shí)，冷藏溫度:40C ;過濾，得沉淀物；在沉淀物中加水直至沉淀物溶解，得溶解液，將溶解液冷凍干燥，冷凍時(shí)間:48小時(shí)，冷凍溫度:-50°C，冷凍后即得瑪咖多糖。
`[0026]技術(shù)效果:所提取的瑪咖多糖提取得率為13.2%。
[0027]亞臨界水提瑪咖多糖抗氧化活性測定
[0028]本發(fā)明亞臨界水提瑪咖多糖清除DPPH自由基作用:取實(shí)施例2中的瑪咖多糖配成 100、200、400、600、800、1000ug/ml 的樣品溶液，再準(zhǔn)確稱取 7.9mg DPPH.(I, 1- 二苯基苦基苯肼)標(biāo)準(zhǔn)品，用無水乙醇溶液溶解并定容至IOOmL棕色容量瓶中，配成0.2mmol/L的DPPH.乙醇溶液，量取2mL樣品溶液于試管中，加入2mL的DPPH.乙醇溶液，混合均勻后，置于暗處反應(yīng)30min，然后于517nm處測定其吸光度(Ai),以試樣溶劑代替樣品溶液測定空白吸光度(Atl),以無水乙醇代替DPPH.溶液測定吸光度(Aj),根據(jù)公式計(jì)算清除率，實(shí)施例2中的瑪咖多糖和Vc (抗壞血酸)按照上述方法測定清除率，比較三種樣品的清除率，結(jié)果見附圖1，由圖可知，以Vc (抗壞血酸)為陽性對照，亞臨界水提瑪咖多糖對DPPH自由基有很好的清除能力，當(dāng)提取物濃度為800ug/mL時(shí)，對DPPH自由基的清除力可達(dá)85.1%，亞臨界水提瑪咖多糖對DPPH自由基的清除能力明顯高于傳統(tǒng)水提取物，其抗氧化活性優(yōu)于傳統(tǒng)水提取物。
[0029]

(A-A)
清除率(%)= 1-^——】丄X 100
【權(quán)利要求】
1.一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法，其特征在于，制作方法步驟如下: 將瑪咖干根粉碎，過200目篩，得馬咖粉末； 將制得的粉末裝入亞臨界萃取釜，粉末與亞臨界水的料液比為1: l(Tl: 30g/ml，提取壓力為3~10 MPa，提取溫度為12(T200°C，提取時(shí)間為30~60 min，得提取液； 將提取液過濾，濾液在減壓濃縮后體積為原來的33%，使用三氯乙酸溶液調(diào)節(jié)PH值至I，再將其冷藏，冷藏時(shí)間:4小時(shí)，冷藏溫度:4°C，得冷藏液； 將冷藏液離心，分離上清液，在上清液中加入乙醇使溶液中乙醇含量達(dá)到80%，將溶液冷藏,冷藏時(shí)間:12小時(shí)，冷藏溫度:4°C ;過濾，得沉淀物； 在沉淀物中加水直至沉淀物溶解，得溶解液，將溶解液冷凍干燥，冷凍時(shí)間:48小時(shí)，冷凍溫度:-50°C，冷凍后即得瑪咖多糖。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法，其特征在于，優(yōu)選地，所述粉末與亞臨界水的料液比為1:20g/ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法，其特征在于，優(yōu)選地，所述亞臨界萃取釜提取壓力為5 MPa，提取溫度為150°C，提取時(shí)間為40 min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種亞臨界水提取瑪咖多糖的方法，其特征在于，所述三氯乙酸溶液濃度為15%。
【文檔編號】C08B37/00GK103819570SQ201310611656
【公開日】2014年5月28日 申請日期:2013年11月27日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月27日
【發(fā)明者】王未, 毛日文 申請人:江蘇江大源生態(tài)生物科技有限公司