一種枸杞多糖的提取方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于多糖提取【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種枸杞多糖的提取方法。一種枸杞多糖的提取方法，包括下述的步驟：選擇曬干的枸杞，粉碎后過40-80目篩，得枸杞粉，在枸杞粉中加水并攪拌均勻，枸杞粉與水的重量比例為1：5-10，在水中浸泡8-16小時，加入活性炭脫色，加入纖維素酶酶解，再加入堿性蛋白酶和無花果蛋白酶，在微波條件下酶解，酶解后濃縮并脫色，離心，取上清液濃縮醇沉，再離心，采用乙醇清洗沉淀，冷凍干燥后并粉碎，得枸杞多糖。采用本發(fā)明的方法從枸杞中提取多糖，采用酶作用條件溫和，采用各種不同的酶將枸杞中的脂肪、纖維素酶解，將其中的多糖提取出來，提高了枸杞的利用率，采用本發(fā)明的方法得到多糖不僅得率高，而且純度也高。
【專利說明】一種枸杞多糖的提取方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于多糖提取【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種枸杞多糖的提取方法。
[0002]

【背景技術(shù)】
枸杞多糖是從枸杞中提取而得的一種水溶性多糖。已明確該多糖系蛋白多糖，由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、鼠李糖6種單糖成分組成。經(jīng)研究表明，枸杞多糖是枸杞子調(diào)節(jié)免疫、延緩衰老的主要活性成分，可改善老年人易疲勞、食欲不振和視力模糊等癥狀，并具有降血脂、抗脂肪肝、抗衰老等作用。
[0003]現(xiàn)有枸杞多糖的提取工藝多為傳統(tǒng)的熱水浸提法或有機溶劑(乙醚、乙醇、石油醚等)脫脂后熱水浸提法，這些常規(guī)方法中溶劑用量大、耗時長且提取率低，為提高枸杞子的經(jīng)濟效益，提高枸杞子中有效成發(fā)的提取率，尋找快速而有效的枸杞多糖提取方法是枸杞產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的一個重要研究課題?，F(xiàn)有枸杞多糖的提取工藝多為傳統(tǒng)的熱水浸提法或有機溶劑(乙醚、乙醇、石油醚等)脫脂后熱水浸提法，這些常規(guī)方法中溶劑用量大、耗時長且提取率低，為提高枸杞子的經(jīng)濟效益，提高枸杞子中有效成發(fā)的提取率，尋找快速而有效的枸杞多糖提取方法是枸杞產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的一個重要研究課題。
[0004]CN102887960披露了一種提取枸杞多糖的工藝，其特征在于工藝流程為:
枸杞經(jīng)過除雜、干燥、粉碎后，用功能提取器在石油醚脫脂脫色，濾去石油醚，再經(jīng)微波提取，溶液過濾，取濾液加入無水乙醇醇沉，溶液在8000r/min轉(zhuǎn)速下離心1min,棄去上層清液得到沉淀，用蒸餾水溶解沉淀，準(zhǔn)確吸取該溶液，進行顯色，測定其吸光值，根據(jù)所得回歸線方程計算多糖含量。最佳工藝參數(shù)為最終選擇料液質(zhì)量體積比1: 10、提取功率2200W、提取時間25min，在此優(yōu)化條件下多糖得率為6.11%。
[0005]上述的工藝提取枸杞多糖的得率并不高，因此需針對上述的方法進行改進，設(shè)計一種高得率的枸杞多糖的提取方法。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為了解決上述的技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種得率較高的枸杞多糖的提取方法。
[0007]本發(fā)明枸杞多糖的提取方法是通過下述的技術(shù)方案來實現(xiàn)的:
一種枸杞多糖的提取方法，包括下述的步驟:
選擇曬干的枸杞，粉碎后過40-80目篩，得枸杞粉，在枸杞粉中加水并攪拌均勻，枸杞粉與水的重量比例為1:5-10，在水中浸泡8-16小時，在上述的溶液中加入活性炭，所述的活性炭占枸杞粗多糖濃縮液重量的2-6%，攪拌0.2-0.5h，過濾濾出活性炭；加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.5-0.9%、酶解溫度45°C、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h ；
再加入堿性蛋白酶和無花果蛋白酶，堿性蛋白酶的加入量為0.2-0.6%，無花果蛋白酶的加入量為0.2-0.5%，酶解溫度50°C、pH值6.8-7.5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h，酶解后在100_105°C下滅酶5-10min,得酶解液； 將上述的酶解液置于真空濃縮器中濃縮，減壓低溫濃縮至酶解液至原體積的1/3，得枸杞粗多糖濃縮液；
將上述的枸杞粗多糖濃縮離心10-20 min，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，將上清液與沉淀分別收集；
取上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在60-70°C下濃縮，濃縮至其濃度為60-70%，濃縮液按1:4比例加入95%乙醇沉淀靜置10-20小時、離心10-20 min，離心轉(zhuǎn)速為4500rpm，收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗2-3次，冷凍干燥至水分含量為4_6%后，再在_1_4°C下進行粉碎，得可溶性多糖；
上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的枸杞的重量百分比。
[0008]優(yōu)選的，枸杞與水的重量比例為1:9 ；
優(yōu)選的，堿性蛋白酶的用量是0.45% ；
無花果蛋白酶的添加量為0.4%。
[0009]優(yōu)選的，一種枸杞多糖的提取方法，該方法包括下述的步驟:
選擇曬干的枸杞，粉碎后過60目篩，得枸杞粉，在枸杞粉中加水并攪拌均勻，枸杞粉與水的重量比例為1:7.5，在水中浸泡10小時，在上述的溶液中加入活性炭，所述的活性炭占枸杞粗多糖濃縮液重量的4%，攪拌0.3h，過濾濾出活性炭；加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.75%、酶解溫度45°C、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為 400-600W,頻率為 800MHZ,酶解 0.1-0.5h ；
再加入堿性蛋白酶和無花果蛋白酶，堿性蛋白酶的加入量為0.45%，無花果蛋白酶的加入量為0.4%，酶解溫度45°C、pH值6.0，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.3h，酶解后在100°C下滅酶6min，得酶解液；
將上述的酶解液置于真空濃縮器中濃縮，減壓低溫濃縮至酶解液至原體積的1/3，得枸杞粗多糖濃縮液；
將上述的枸杞粗多糖濃縮液離心15 min，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，將上清液與沉淀分別收集；
取上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在65°C下濃縮，濃縮至其濃度為65%，濃縮液按I:4比例加入95%乙醇沉淀靜置10-20小時、離心15 min，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗2-3次，冷凍干燥至水分含量為5%后，再在-1-4°C下進行粉碎，得可溶性多糖；
上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的枸杞的重量百分比。
[0010]本發(fā)明的方法中，冷凍粉碎原理冷凍粉碎是利用物料在低溫狀態(tài)下的“低溫脆性”，即物料隨著溫度的降低，其硬度和脆性增加，而塑性及韌性降低，在一定溫度下，用一個很小的力就能將其粉碎。經(jīng)冷凍粉碎的物料，其粒度可達到“超細微”的程度，因此可以生產(chǎn)“超細微食品”。
[0011]物料的“低溫脆性”是與一種稱為玻璃化轉(zhuǎn)變的現(xiàn)象密切相關(guān)的。所謂玻璃化轉(zhuǎn)變原本是指非晶態(tài)聚合物在溫度變化時會出現(xiàn)力學(xué)性質(zhì)的變化，形成橡膠態(tài)和玻璃態(tài)兩種物理狀態(tài)；而且溫度變化過程可以產(chǎn)生由橡膠態(tài)向玻璃態(tài)的轉(zhuǎn)變。在橡膠態(tài)時，物料的韌性大，變形能力強；而在玻璃態(tài)時，物料硬度和脆性大，變形能力很小。其實玻璃化轉(zhuǎn)變現(xiàn)象并非聚合物所特有，食品和農(nóng)產(chǎn)品同樣會出現(xiàn)玻璃化轉(zhuǎn)變過程。不過，因為食品和農(nóng)產(chǎn)品的組成結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，所以其玻璃化轉(zhuǎn)變要復(fù)雜得多，如可能存在多級玻璃化轉(zhuǎn)變過程和反玻璃化轉(zhuǎn)變現(xiàn)象。一般地，我們稱物料由橡膠態(tài)向玻璃態(tài)轉(zhuǎn)變時所要求的溫度為玻璃化轉(zhuǎn)變溫度。根據(jù)前面提到的橡膠態(tài)和玻璃態(tài)的性質(zhì)，可以認為物料的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度對應(yīng)著物料的“脆化溫度”。
[0012]因此，食品和農(nóng)產(chǎn)品的冷凍粉碎原理就是:首先使物料低溫冷凍到玻璃化轉(zhuǎn)變溫度或脆化溫度以下，再用粉碎機將其粉碎。在食品和農(nóng)產(chǎn)品快速降溫過程中，會造成內(nèi)部各部位不均勻的收縮而產(chǎn)生內(nèi)應(yīng)力，在此應(yīng)力的作用下，物料內(nèi)部薄弱部位產(chǎn)生微裂紋并導(dǎo)致內(nèi)部組織的結(jié)合力降低。在外部較小作用力就使內(nèi)部裂紋迅速擴大而破碎。
[0013]冷凍粉碎機系統(tǒng)在物料粉碎過程中，其冷源形成一個閉路循環(huán)系統(tǒng)，使能源得到充分利用，節(jié)省能耗:粉碎用的冷源溫度可降至負196度，根據(jù)物料的脆化點溫度，在粉碎過程中其溫度可調(diào)控，選擇最佳粉碎溫度，降低能耗:粉碎細度可達到10-700目，甚至達到微米μ等細度:使用液氮作為研磨介質(zhì)，實現(xiàn)超低溫粉碎，物料的防爆，防氧化等綜合效果O
[0014]冷凍粉碎適用于多糖，因為多糖在常溫粉碎時容易產(chǎn)生粘結(jié)、堵塞和性質(zhì)變化等問題，并且效果和效率差。
[0015]因此，本發(fā)明中采用冷凍粉碎的方法對提取得到的多糖，保持了多糖的質(zhì)量不受影響。
[0016]本發(fā)明的有益效果在于，采用酶作用條件溫和，采用各種不同的酶將枸杞中的脂肪、纖維素酶解，同時從枸杞中提取多糖，最大限度的利用枸杞，而且采用本發(fā)明的方法得到的多糖，其得率和純度高。

【具體實施方式】
[0017]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作更進一步的說明，以便本領(lǐng)域的技術(shù)人員更了解本發(fā)明，但并不因此限制本發(fā)明。
[0018]以下的檢測方法，如無特殊說明；采用苯酚-硫酸法測多糖的含量。
[0019]實施例1
一種枸杞多糖的提取方法，該方法包括下述的步驟:
選擇曬干的枸杞，粉碎后過60目篩，得枸杞粉，在枸杞粉中加水并攪拌均勻，枸杞粉與水的重量比例為1:7.5，在水中浸泡10小時，在上述的溶液中加入活性炭，所述的活性炭占枸杞粗多糖濃縮液重量的2-6%，攪拌0.3h，過濾濾出活性炭；入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.75%、酶解溫度45°C、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為500W,頻率為800MHZ,酶解0.3h ；
再加入堿性蛋白酶和無花果蛋白酶，堿性蛋白酶的加入量為0.45%，無花果蛋白酶的加入量為0.4%，酶解溫度50°C、pH值7.2，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.3h，酶解后在100°C下滅酶6min，得酶解液；
將上述的酶解液置于真空濃縮器中濃縮，減壓低溫濃縮至酶解液至原體積的1/3，得枸杞粗多糖濃縮液；
在枸杞粗多糖的濃縮液中加入活性炭，活性炭占枸杞粗多糖濃縮液重量的4 %，攪拌
0.3h，過濾濾出活性炭； 離心15 min ,離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm,將上清液與沉淀分別收集；
取上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在65°C下濃縮，濃縮至其濃度為65%，濃縮液按I:4比例加入95%乙醇沉淀靜置15小時、離心15 min，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗2-3次，冷凍干燥至水分含量為5%后，再在-1-4°C下進行粉碎，得可溶性多糖；
上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的枸杞的重量百分比。
[0020]多糖的提取率為:14.52%，純度為90.23%。
[0021]實施例2
一種枸杞多糖的提取方法，該方法包括下述的步驟:
選擇曬干的枸杞，粉碎后過40目篩，得枸杞粉，在枸杞粉中加水并攪拌均勻，枸杞粉與水的重量比例為1:5，在水中浸泡8小時，加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.5%、酶解溫度45°C、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400W，頻率為800MHZ，酶解 0.1h ；
再加入堿性蛋白酶和無花果蛋白酶，堿性蛋白酶的加入量為0.2%，無花果蛋白酶的加入量為0.2%，酶解溫度50°C、pH值6.8，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400W，頻率為800MHZ，酶解0.3h，酶解后在100°C下滅酶5min，得酶解液；
將上述的酶解液置于真空濃縮器中濃縮，減壓低溫濃縮至酶解液至原體積的1/3，得枸杞粗多糖濃縮液；
在枸杞粗多糖的濃縮液中加入活性炭，活性炭占枸杞粗多糖濃縮液重量的4 %，攪拌0.3h，過濾濾出活性炭；
離心15 min ,離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm,將上清液與沉淀分別收集；
取上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在65°C下濃縮，濃縮至其濃度為65%，濃縮液按I:4比例加入95%乙醇沉淀靜置10小時、離心15 min，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗2-3次，冷凍干燥至水分含量為5%后，再在-1-4°C下進行粉碎，得可溶性多糖；
上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的枸杞的重量百分比。
[0022]多糖的提取率為:14.21%，純度為90.17%。
[0023]實施例3
一種枸杞多糖的提取方法，該方法包括下述的步驟:
選擇曬干的枸杞，粉碎后過80目篩，得枸杞粉，在枸杞粉中加水并攪拌均勻，枸杞粉與水的重量比例為1: 10，在水中浸泡16小時，加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.9%,酶解溫度45°C、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為600W，頻率為 800MHZ，酶解 0.5h ；
再加入堿性蛋白酶和無花果蛋白酶，堿性蛋白酶的加入量為0.6%，無花果蛋白酶的加入量為0.5%，酶解溫度50°C、pH值7.5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.3h，酶解后在100°C下滅酶6min，得酶解液；
將上述的酶解液置于真空濃縮器中濃縮，減壓低溫濃縮至酶解液至原體積的1/3，得枸杞粗多糖濃縮液；
在枸杞粗多糖的濃縮液中加入活性炭，活性炭占枸杞粗多糖濃縮液重量的4 %，攪拌0.3h，過濾濾出活性炭；
離心15 min ,離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm,將上清液與沉淀分別收集；
取上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在65°C下濃縮，濃縮至其濃度為65%，濃縮液按I:4比例加入95%乙醇沉淀靜置20小時、離心15 min，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗2-3次，冷凍干燥至水分含量為5%左右后，再在-1-4°C下進行粉碎，得可溶性多糖；
上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的枸杞的重量百分比。
[0024] 多糖的提取率為:14.37%，純度為90.66%。
【權(quán)利要求】
1.一種枸杞多糖的提取方法，包括下述的步驟: 選擇曬干的枸杞，粉碎后過40-80目篩，得枸杞粉，在枸杞粉中加水并攪拌均勻，枸杞粉與水的重量比例為1:5-10，在水中浸泡8-16小時，在上述的溶液中加入活性炭，所述的活性炭占枸杞粗多糖濃縮液重量的2-6%，攪拌0.2-0.5h，過濾濾出活性炭； 加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.5-0.9%、酶解溫度45°C、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h ； 再加入堿性蛋白酶和無花果蛋白酶，堿性蛋白酶的加入量為0.2-0.6%，無花果蛋白酶的加入量為0.2-0.5%，酶解溫度50°C、pH值6.8-7.5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h，酶解后在100_105°C下滅酶5-10min,得酶解液； 將上述的酶解液置于真空濃縮器中濃縮，減壓低溫濃縮至酶解液至原體積的1/3，得枸杞粗多糖濃縮液； 將上述的枸杞粗多糖濃縮液離心10-20 min，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，將上清液與沉淀分別收集； 取上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在60-70°C下濃縮，濃縮至其濃度為60-70%，濃縮液按1:4比例加入95%乙醇沉淀靜置10-20小時、離心10-20 min，離心轉(zhuǎn)速為4500rpm，收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗2-3次，冷凍干燥至水分含量為4_6%后，再在_1_4°C下進行粉碎，得可溶性多糖； 上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的枸杞的重量百分比。
2.如權(quán)利要求1所述一種枸杞多糖的提取方法，其特征在于，所述的枸杞與水的重量比例為1:9。
3.如權(quán)利要求1所述的一種枸杞多糖的提取方法，其特征在于，所述的堿性蛋白酶的用量是0.45%。
4.如權(quán)利要求1所述的一種枸杞多糖的提取方法，其特征在于，所述的無花果蛋白酶的添加量為0.4%。
5.如權(quán)利要求1-4中任一項所述的一種枸杞多糖的提取方法,其特征在于,所述的方法包括下述的步驟: 選擇曬干的枸杞，粉碎后過60目篩，得枸杞粉，在枸杞粉中加水并攪拌均勻，枸杞粉與水的重量比例為1:7.5，在水中浸泡10小時，在上述的溶液中加入活性炭，所述的活性炭占枸杞粗多糖濃縮液重量的4%，攪拌0.3h，過濾濾出活性炭； 加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.75%、酶解溫度45°C、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.3h ； 再加入堿性蛋白酶和無花果蛋白酶，堿性蛋白酶的加入量為0.45%，無花果蛋白酶的加入量為0.4%，酶解溫度50°C、pH值7.2，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.3h，酶解后在100°C下滅酶6min，得酶解液； 將上述的酶解液置于真空濃縮器中濃縮，減壓低溫濃縮至酶解液至原體積的1/3，得枸杞粗多糖濃縮液； 將上述的枸杞粗多糖濃縮液離心15 min，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，將上清液與沉淀分別收集； 取上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在65°C下濃縮，濃縮至其濃度為65%，濃縮液按I:4比例加入95%乙醇沉淀靜置10-20小時、離心15 min，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗2-3次，冷凍干燥至水分含量為5%后，再在-1-4°C下進行粉碎，得可溶性多糖； 上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的枸杞的重量百分比。
【文檔編號】C08B37/00GK104311690SQ201410628540
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年11月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月11日
【發(fā)明者】遲宗磊, 藏偉功, 丁振洋 申請人:濟南凱因生物科技有限公司