一種生物酶法從菜籽餅粕中提取菜籽多糖的方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于多糖提取【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種生物酶法從菜籽餅粕中提取菜籽多糖的方法。一種生物酶法從菜籽餅粕中提取菜籽多糖的方法，包括下述的步驟：（1）原料預(yù)處理；（2）酶解；（3）非水溶性多糖轉(zhuǎn)化；（4）離心分離；（5）可溶性多糖提取。采用酶作用條件溫和，采用各種不同的酶將菜籽餅粕中的脂肪、纖維素酶解，將其中的多糖提取出來，提高了菜籽餅粕的利用率，采用本發(fā)明的方法得到菜籽多糖不僅得率高，而且純度也高。
【專利說明】 一種生物酶法從菜籽餅粕中提取菜籽多糖的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于多糖提取【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種生物酶法從菜籽餅柏中提取菜籽多糖的方法。
[0002]

【背景技術(shù)】
為了提高油菜籽生產(chǎn)的經(jīng)濟效益和社會效益，應(yīng)對菜籽餅柏進(jìn)行綜合利用，菜籽餅柏中可利用的成分主要有蛋白質(zhì)，碳水化合物等成分，而其中硫甙、芥子酸、植酸、多酚化合物及多糖類成分，如非淀粉多糖，一直被視為抗?fàn)I養(yǎng)成分，認(rèn)為它們高溫預(yù)榨時引起蛋白質(zhì)的變化性，使蛋白質(zhì)的生物效價大大降低，因而在實際生產(chǎn)中未發(fā)揮積極作用，目前已有研究初步表明，菜籽多糖作為植物多糖的一種，可以通過自身的還原性保護生物體內(nèi)的其它還原性成分而發(fā)揮抗氧化的作用。
[0003]植物多糖的傳統(tǒng)提取方法有熱水浸提、稀酸浸提，稀堿浸提，隨著技術(shù)的進(jìn)步，近年來在提取工藝方面引入了一些新技術(shù)，新方法，如酶法提取，微波提取，超聲波提取等。
[0004]如果能將菜籽餅柏中的活性多糖提取出來并充分利用，將帶來良好的經(jīng)濟效益和社會效益，但是目前對于菜籽多糖的報道尚不多見，因此，選擇一種簡單、快速、高效的提取菜籽多糖的最佳方法，將具有十分重要的意義。
[0005]目前主要的提取方法是熱水浸提，由于分子質(zhì)量較大的多糖和酸性多糖在熱水中溶解度較小，而采用堿提取效率較高，可以把水提難以分出的酸性多糖和黏多糖提取出來。嚴(yán)奉偉等在菜籽餅柏綜合提取多酚、植酸和蛋白質(zhì)的同時，又從多酚提取液中分離得到了菜籽多糖粗品，并從化學(xué)模擬體系、亞細(xì)胞器、組織及動物體水平上評價了菜籽多糖粗品的抗氧化作用，證明菜籽多糖在體內(nèi)外都具有較強的抗氧化作用。按自由基理論，菜籽多糖的開發(fā)利用開辟了一個極具有價值的方向，并大大提高了菜籽餅柏的綜合利用率。采用堿提取的方法作用條件強烈，其提取率并不高，在7.6%左右。
[0006]因此需對上述的方法進(jìn)行改進(jìn)，研究一種可以最大限度的將菜籽餅柏利用起來，比如高效的將菜籽餅柏中所含的菜籽多糖提取出來的方法，且提取率高。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]為了解決上述的技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種得率和純度較高的生物酶法從菜籽餅柏中提取菜籽多糖的方法。
[0008]本發(fā)明生物酶法從菜籽餅柏中提取菜籽多糖的方法是通過下述的技術(shù)方案來實現(xiàn)的:
一種生物酶法從菜籽餅柏中提取菜籽多糖的方法，包括下述的步驟:
(I)原料預(yù)處理
菜籽餅柏用粉碎機粉碎至40目，裝萃取釜，所述的菜籽餅柏是牡丹籽仁初榨后剩下的殘留柏渣；
b.用食品級C02，其純度為99.99%，流量為12L/小時，設(shè)定萃取壓力為20MPa、溫度為25°C，分離條件是:分離器I壓力lOKPa、溫度50°C，分離器II壓力4KPa、溫度40°C，萃取時間0.5小時；
c.提取完畢，收集萃取物，得到牡丹籽油；
d.取步驟C中剩下的殘渣脫水處理至其水分含量為20%，得菜籽餅柏；
將步驟d中的菜籽餅柏經(jīng)烘干至其水分含量為2-4%，再粉碎至80-200目；
(2)酶解
將粉碎后的菜籽餅柏，加水混勻，菜籽餅柏與水的重量比例為1:6-12，并加入脂肪酶，脂肪酶的添加量0.3-0.5%，酶解溫度45°C，調(diào)pH 5.5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h ；
再加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.4-0.6%、酶解溫度40°C、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h ；
再加入酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶，酸性蛋白酶的添加量為0.5-1.2%，木瓜蛋白酶的添加量為0.3-0.6%，酶解溫度為45°C，pH值5.0,將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h，酶解后在100-105°C下滅酶5-10min ；
(3)非水溶性多糖轉(zhuǎn)化
淀粉酶的添加量為1.0-1.2%、酶解溫度40°C、pH值5，酶解1.5-2.0h后，100_105°C滅酶 5-10min ；
(4)離心分離
將酶解后的菜籽餅柏，離心10-20 min，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，將上清液與沉淀分別收集;
(5)可溶性多糖的提取
取步驟(4)中的上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在60-70°C下濃縮，濃縮至其濃度為60-70%，濃縮液按1:4比例加入95%乙醇沉淀靜置10-20小時、離心10-20 min，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm,收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗2_3次，冷凍干燥至水分含量為4_6%后，再在-1-4°C下進(jìn)行粉碎，得可溶性多糖；
上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的菜籽餅柏的重量百分比。
[0009]優(yōu)選的，脂肪酶的用量為0.4%。
[0010]優(yōu)選的，纖維素酶的用量是0.5%。
[0011]優(yōu)選的，淀粉酶的添加量為1.0%。
[0012]優(yōu)選的，一種生物酶法從菜籽餅柏中提取菜籽多糖的方法，包括下述的步驟:
(I)原料預(yù)處理
菜籽餅柏用粉碎機粉碎至40目，裝萃取釜，所述的菜籽餅柏是牡丹籽仁初榨后剩下的殘留柏渣；
b.用食品級C02，其純度為99.99%，流量為12L/小時，設(shè)定萃取壓力為20MPa、溫度為25°C，分離條件是:分離器I壓力lOKPa、溫度50°C，分離器II壓力4KPa、溫度
40°C，萃取時間0.5小時；
c.提取完畢，收集萃取物，得到牡丹籽油；
d.取步驟C中剩下的殘渣脫水處理至其水分含量為20%，得菜籽餅柏；
將步驟d中的菜籽餅柏經(jīng)烘干至其水分含量為2-4%，再粉碎至80-200目； (2)酶解
將粉碎后的菜籽餅柏，加水混勻，菜籽餅柏與水的重量比例為1:8，并加入脂肪酶，月旨肪酶的添加量0.4%，酶解溫度45°C，調(diào)pH 5.5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.2h ；
再加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.5%、酶解溫度40°C、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.2h ；
再加入酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶，酸性蛋白酶的添加量為0.8%，木瓜蛋白酶的添加量為0.5%，酶解溫度為45°C，pH值5.0，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.2h，酶解后在100°C下滅酶8min ；
(3)非水溶性多糖轉(zhuǎn)化
淀粉酶的添加量為I %、酶解溫度40°C、pH值5，酶解1.8h后，100°C滅酶6min ；
(4)離心分離
將酶解后的菜籽餅柏，離心15 min，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，將上清液與沉淀分別收集;
(5)可溶性多糖的提取
取步驟(4)中的上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在65°C下濃縮，濃縮至其濃度為65%，濃縮液按1:4比例加入95%乙醇沉淀靜置15小時、離心15 min，離心轉(zhuǎn)速為4500rpm，收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗2-3次，冷凍干燥至水分含量為5%后，再在_1_4°C下進(jìn)行粉碎，得可溶性多糖；
上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的菜籽餅柏的重量百分比。
[0013]本發(fā)明中，將菜籽柏通過超臨界二氧化碳萃取，進(jìn)一步提取菜籽餅柏中的油脂，不僅獲得了油脂，而且也有利于后續(xù)菜籽多糖的提取。
[0014]酶解脂肪、纖維順序也是本發(fā)明的創(chuàng)新之處，由于將脂肪酶解以后，油脂不會包裹在菜籽餅柏外，從而有利于各種成分與酶相接觸，從而提高酶解的效率；因此，先酶解脂肪再酶解纖維素有利于脂肪和纖維的去除；
普通方法中對脂肪的處理方法一般是采用加有機溶劑的方式，有機溶劑雖然對油脂的去除也較為徹底，但是其作用的條件較強烈，而且后續(xù)的回收過程也較復(fù)雜，另外還容易造成有機溶劑危害環(huán)境的問題；另外采用有機溶劑去除油脂其成本也較高；
本發(fā)明采用酶作用于殘留在菜籽餅柏中的油脂上，作用條件溫和，而且對油脂的去除也較為徹底，并且不存在后續(xù)的有機溶劑回收及帶來環(huán)境污染的問題；
再加入纖維素酶將菜籽餅柏中的纖維素降解生成溶于水的葡萄糖；
將非可溶性的多糖酶解為可溶性多糖之后，糖類溶于水中，再取上清液，過濾，濃縮，醇沉，將其中的多糖提取出來。
[0015]本發(fā)明的酶的種類及用量的選擇及酶解順序的選擇并不是偶然的，而是發(fā)明人付出了創(chuàng)造性的勞動得到了，酶及各種比例的調(diào)整均會影響最終多糖的提取效果，只有采用本發(fā)明所給的酶及酶的相應(yīng)比例對菜籽餅柏進(jìn)行處理，而且按照本發(fā)明的順序進(jìn)行，才能得到本發(fā)明的結(jié)果，將酶進(jìn)行替換或者是加酶順序替換，均得不到最大的多糖提取率。
[0016]因此，本發(fā)明中采用冷凍粉碎的方法對提取得到的多糖，保持了多糖的質(zhì)量不受影響。
[0017]本發(fā)明的有益效果在于，采用酶作用條件溫和，采用各種不同的酶將菜籽餅柏中的脂肪、纖維素酶解，同時從菜籽餅柏中提取多糖，最大限度的利用菜籽餅柏，而且采用本發(fā)明的方法得到的多糖，其得率和純度高。

【具體實施方式】
[0018]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作更進(jìn)一步的說明，以便本領(lǐng)域的技術(shù)人員更了解本發(fā)明，但并不因此限制本發(fā)明。
[0019]以下的檢測方法，如無特殊說明，采用苯酚-硫酸法測多糖的含量。
[0020]實施例1
一種生物酶法從菜籽餅柏中提取菜籽多糖的方法，包括下述的步驟:
(1)原料預(yù)處理
菜籽餅柏用粉碎機粉碎至40目，裝萃取釜，所述的菜籽餅柏是牡丹籽仁初榨后剩下的殘留柏渣；
b.用食品級C02，其純度為99.99%，流量為12L/小時，設(shè)定萃取壓力為20MPa、溫度為25°C，分離條件是:分離器I壓力lOKPa、溫度50°C，分離器II壓力4KPa、溫度
40°C，萃取時間0.5小時；
c.提取完畢，收集萃取物，得到牡丹籽油；
d.取步驟C中剩下的殘渣脫水處理至其水分含量為20%，得菜籽餅柏；
將步驟d中的菜籽餅柏經(jīng)烘干至其水分含量為3%，再粉碎至100目；
(2)酶解
將粉碎后的菜籽餅柏，加水混勻，菜籽餅柏與水的重量比例為1:8，并加入脂肪酶，月旨肪酶的添加量0.4%，酶解溫度45°C，調(diào)pH 5.5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.2h ；
再加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.5%、酶解溫度40°C、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.2h ；
再加入酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶，酸性蛋白酶的添加量為0.8%，木瓜蛋白酶的添加量為0.5%，酶解溫度為45°C，pH值5.0，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.2h，酶解后在100°C下滅酶8min ；
(3)非水溶性多糖轉(zhuǎn)化
淀粉酶的添加量為I %、酶解溫度40°C、pH值5，酶解1.8h后，100°C滅酶6min ；
(4)離心分離
將酶解后的菜籽餅柏，離心15 min，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，將上清液與沉淀分別收集;
(5)可溶性多糖的提取
取步驟(4)中的上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在65°C下濃縮，濃縮至其濃度為65%，濃縮液按1:4比例加入95%乙醇沉淀靜置15小時、離心15 min，離心轉(zhuǎn)速為4500rpm,收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗2-3次，冷凍干燥至水分含量為5%后，再在_1_4°C下進(jìn)行粉碎，得可溶性多糖；
上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的菜籽餅柏的重量百分比。
[0021]采用苯酚-硫酸法測得其中多糖的含量為6.72%左右。
[0022]實施例2
一種生物酶法從菜籽餅柏中提取菜籽多糖的方法，包括下述的步驟:
(1)原料預(yù)處理
菜籽餅柏用粉碎機粉碎至40目，裝萃取釜，所述的菜籽餅柏是牡丹籽仁初榨后剩下的殘留柏渣；
b.用食品級C02，其純度為99.99%，流量為12L/小時，設(shè)定萃取壓力為20MPa、溫度為25°C，分離條件是:分離器I壓力lOKPa、溫度50°C，分離器II壓力4KPa、溫度
40°C，萃取時間0.5小時；
c.提取完畢，收集萃取物，得到牡丹籽油；
d.取步驟C中剩下的殘渣脫水處理至其水分含量為20%，得菜籽餅柏；
將步驟d中的菜籽餅柏經(jīng)烘干至其水分含量為2%，再粉碎至80目；
(2)酶解
將粉碎后的菜籽餅柏，加水混勻，菜籽餅柏與水的重量比例為1:6，并加入脂肪酶，月旨肪酶的添加量0.3%，酶解溫度45°C，調(diào)pH 5.5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400W，頻率為800MHZ，酶解0.1h ；
再加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.4%、酶解溫度40°C、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h ；
再加入酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶，酸性蛋白酶的添加量為0.5%，木瓜蛋白酶的添加量為0.3%，酶解溫度為45°C，pH值5.0，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400W，頻率為800MHZ，酶解0.1h,酶解后在100°C下滅酶5min ；
(3)非水溶性多糖轉(zhuǎn)化
淀粉酶的添加量為0.8%、酶解溫度40°C、pH值5，酶解1.8h后，100°C滅酶6min ；
(4)離心分離
將酶解后的菜籽餅柏，離心15 min，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，將上清液與沉淀分別收集;
(5)可溶性多糖的提取
取步驟(4)中的上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在65°C下濃縮，濃縮至其濃度為65%，濃縮液按1:4比例加入95%乙醇沉淀靜置15小時、離心15 min，離心轉(zhuǎn)速為4500rpm,收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗2-3次，冷凍干燥至水分含量為5%后，再在_1_4°C下進(jìn)行粉碎，得可溶性多糖；
上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的菜籽餅柏的重量百分比。
[0023]采用苯酚-硫酸法測得所得的多糖含量為6.06%。
[0024]實施例3
一種生物酶法從菜籽餅柏中提取菜籽多糖的方法，包括下述的步驟:
(I)原料預(yù)處理
菜籽餅柏用粉碎機粉碎至40目，裝萃取釜，所述的菜籽餅柏是牡丹籽仁初榨后剩下的殘留柏渣；
b.用食品級C02，其純度為99.99%，流量為12L/小時，設(shè)定萃取壓力為20MPa、溫度為25°C，分離條件是:分離器I壓力lOKPa、溫度50°C，分離器II壓力4KPa、溫度40°C，萃取時間0.5小時；
c.提取完畢，收集萃取物，得到牡丹籽油；
d.取步驟C中剩下的殘渣脫水處理至其水分含量為20%，得菜籽餅柏；
將步驟d中的菜籽餅柏經(jīng)烘干至其水分含量為4%，再粉碎至200目；
(2)酶解
將粉碎后的菜籽餅柏，加水混勻，菜籽餅柏與水的重量比例為1: 12，并加入脂肪酶，脂肪酶的添加量0.5%，酶解溫度45°C，調(diào)pH 5.5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為600W，頻率為800MHZ，酶解0.5h ；
再加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.6%、酶解溫度40°C、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為600W，頻率為800MHZ，酶解0.5h ；
再加入酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶，酸性蛋白酶的添加量為1.2%，木瓜蛋白酶的添加量為0.6%，酶解溫度為45°C，pH值5.0，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為600W，頻率為800MHZ，酶解0.5h,酶解后在100°C下滅酶5-10min ；
(3)非水溶性多糖轉(zhuǎn)化
淀粉酶的添加量為1.2%、酶解溫度40°C、pH值5，酶解1.8h后，100°C滅酶6min ；
(4)離心分離
將酶解后的菜籽餅柏，離心15 min，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，將上清液與沉淀分別收集;
(5)可溶性多糖的提取
取步驟(4)中的上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在65°C下濃縮，濃縮至其濃度為65%，濃縮液按1:4比例加入95%乙醇沉淀靜置15小時、離心15 min，離心轉(zhuǎn)速為4500rpm,收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗2-3次，冷凍干燥至水分含量為5%后，再在_1_4°C下進(jìn)行粉碎，得可溶性多糖；
上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的菜籽餅柏的重量百分比。
[0025]采用苯酚-硫酸法測得所得的多糖中糖的含量為6.21%。
【權(quán)利要求】
1.一種生物酶法從菜籽餅柏中提取菜籽多糖的方法，包括下述的步驟: (1)原料預(yù)處理 a.菜籽餅柏用粉碎機粉碎至40目，裝萃取釜，所述的菜籽餅柏是牡丹籽仁初榨后剩下的殘留柏渣； b.用食品級C02，其純度為99.99%，流量為12L/小時，設(shè)定萃取壓力為20MPa、溫 度為25°C，分離條件是:分離器I壓力lOKPa、溫度50°C，分離器II壓力4KPa、溫度40°C，萃取時間0.5小時； c.提取完畢，收集萃取物，得到牡丹籽油； d.取步驟C中剩下的殘渣脫水處理至其水分含量為20%，得菜籽餅柏； 將步驟d中的菜籽餅柏經(jīng)烘干至其水分含量為2-4%，再粉碎至80-200目； (2)酶解 將粉碎后的菜籽餅柏，加水混勻，菜籽餅柏與水的重量比例為1:6-12，并加入脂肪酶，脂肪酶的添加量0.3-0.5%，酶解溫度45°C，調(diào)pH 5.5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h ； 再加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.4-0.6%、酶解溫度40°C、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h ； 再加入酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶，酸性蛋白酶的添加量為0.5-1.2%，木瓜蛋白酶的添加量為0.3-0.6%，酶解溫度為45°C，pH值5.0，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h，酶解后在100_105°C下滅酶5-10min ； (3)非水溶性多糖轉(zhuǎn)化 淀粉酶的添加量為0.8-1.2%、酶解溫度40°C、pH值5，酶解1.5-2.0h后，100-105°C滅酶5-10min ;將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ,酶解 0.1-0.5h,酶解后在 100_105°C下滅酶 5-lOmin ； (4)離心分離 將酶解后的菜籽餅柏，離心10-20 min，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，將上清液與沉淀分別收集; (5)可溶性多糖的提取 取步驟(4)中的上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在60-70°C下濃縮，濃縮至其濃度為60-70%，濃縮液按1:4比例加入95%乙醇沉淀靜置10-20小時、離心10-20 min，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm,收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗2_3次，冷凍干燥至水分含量為4_6%后，再在-1-4°C下進(jìn)行粉碎，得可溶性多糖； 上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的菜籽餅柏的重量百分比。
2.如權(quán)利要求1所述一種生物酶法從菜籽餅柏中提取菜籽多糖的方法，其特征在于，所述的脂肪酶的用量為0.4%。
3.如權(quán)利要求1所述的一種生物酶法從菜籽餅柏中提取菜籽多糖的方法，其特征在于，所述的纖維素酶的用量是0.5%。
4.如權(quán)利要求1所述的一種生物酶法從菜籽餅柏中提取菜籽多糖的方法，其特征在于，所述的淀粉酶的添加量為1.0%。
5.如權(quán)利要求1-4中任一項所述的一種生物酶法從菜籽餅柏中提取菜籽多糖的方法，其特征在于，所述的方法包括下述的步驟: (1)原料預(yù)處理 菜籽餅柏用粉碎機粉碎至40目，裝萃取釜，所述的菜籽餅柏是牡丹籽仁初榨后剩下的殘留柏渣； b.用食品級C02，其純度為99.99%，流量為12L/小時，設(shè)定萃取壓力為20MPa、溫 度為25°C，分離條件是:分離器I壓力lOKPa、溫度50°C，分離器II壓力4KPa、溫度40°C，萃取時間0.5小時； c.提取完畢，收集萃取物，得到牡丹籽油； d.取步驟C中剩下的殘渣脫水處理至其水分含量為20%，得菜籽餅柏； 將步驟d中的菜籽餅柏經(jīng)烘干至其水分含量為2-4%，再粉碎至80-200目； (2)酶解 將粉碎后的菜籽餅柏，加水混勻，菜籽餅柏與水的重量比例為1:8，并加入脂肪酶，月旨肪酶的添加量0.4%，酶解溫度45°C，調(diào)pH 5.5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.2h ； 再加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.5%、酶解溫度40°C、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.2h ； 再加入酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶，酸性蛋白酶的添加量為0.8%，木瓜蛋白酶的添加量為0.5%，酶解溫度為45°C，pH值5.0，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.2h，酶解后在100°C下滅酶8min ； (3)非水溶性多糖轉(zhuǎn)化 淀粉酶的添加量為I %、酶解溫度40°C、pH值5，酶解1.8h后，100°C滅酶6min ； (4)離心分離 將酶解后的菜籽餅柏，離心15 min，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，將上清液與沉淀分別收集; (5)可溶性多糖的提取 取步驟(4)中的上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在65°C下濃縮，濃縮至其濃度為65%，濃縮液按1:4比例加入95%乙醇沉淀靜置15小時、離心15 min，離心轉(zhuǎn)速為4500rpm，收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗2-3次，冷凍干燥至水分含量為5%后，再在_1_4°C下進(jìn)行粉碎，得可溶性多糖； 上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的菜籽餅柏的重量百分比。
【文檔編號】C08B37/00GK104387484SQ201410628551
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2014年11月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月11日
【發(fā)明者】遲宗磊, 藏偉功, 丁振洋 申請人:濟南凱因生物科技有限公司