本發(fā)明涉及化學(xué)合成領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及純化奧貝膽酸中間體的方法。

背景技術(shù)：

奧貝膽酸(oca)屬法尼醇x受體激動(dòng)劑，能夠選擇性激活膽汁酸核受體fxr。臨床前和臨床研究提示，其具有較好的抗膽汁淤積、抗炎癥和抗纖維化的作用。奧貝膽酸是一種半合成的初級(jí)膽汁酸鵝去氧膽酸(cdca)的類似物，其合成起始原料鵝去氧膽酸的純度難以保證。膽酸類化合物的合成復(fù)雜性，以及合成各步中間體的相似性，導(dǎo)致其部分殘留雜質(zhì)極難純化，其中殘留的中間體klca(式2所示化合物)對(duì)后續(xù)步驟影響較大，而且大部分市場(chǎng)購(gòu)買和目前工藝合成的奧貝膽酸中間體中klca的含量高達(dá)5％左右，以致衍生反應(yīng)到最終奧貝膽酸產(chǎn)品時(shí)，klca及其衍生雜質(zhì)均很難純化和除去，所以需要在中間體的制備過程中就嚴(yán)格控制雜質(zhì)含量，以便使得終產(chǎn)品中klca及其衍生雜質(zhì)能夠控制在0.15％以下，以達(dá)到藥品質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。

3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸(式1所示化合物，oca-e)作為奧貝膽酸合成的重要中間體，其良好的純度對(duì)保證最終活性化合物奧貝膽酸的純度具有十分重要的意義。

現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸的純化有用乙酸乙酯進(jìn)行純化的，然而對(duì)很多雜質(zhì)和klca無(wú)法達(dá)到預(yù)期效果。

因此，目前3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸的純化方法仍有待改進(jìn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明旨在至少在一定程度上解決相關(guān)技術(shù)中的技術(shù)問題之一或提供一種有用的商業(yè)選擇。為此，本發(fā)明的一個(gè)目的在于提出一種純化式1所示奧貝膽酸中間體的方法。利用 該方法可以高效的純化奧貝膽酸中間體3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸，能有效控制3α-羥基-7-氧代-5β-膽烷酸(klca)雜質(zhì)(式2所示化合物)的含量以及減少其他未知雜質(zhì)的含量，從而為奧貝膽酸的合成提供合格的原料。

根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)發(fā)面，本發(fā)明提出一種純化式1所示奧貝膽酸中間體的方法，包括將低級(jí)醇和水的混合溶液與式1所示化合物粗品進(jìn)行接觸。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，本發(fā)明采用的操作步驟少，純化工藝簡(jiǎn)潔，效果明顯，所用溶劑量少，生產(chǎn)效率高，成本低，且所得終產(chǎn)品收率、純度高，副產(chǎn)物極少，工業(yè)三廢容易處理，安全環(huán)保。有利于式1所示化合物純品的工業(yè)化生產(chǎn)。根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的方法，純化式1所示化合物的總收率可以達(dá)到70％左右，產(chǎn)品純度可以達(dá)到99.5～99.7％，klca含量控制在0.3％左右，由此在后續(xù)反應(yīng)之后，可使得終產(chǎn)品中klca及其衍生雜質(zhì)控制到0.15％以下，達(dá)到藥品質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。相比之下，現(xiàn)有技術(shù)中的乙酸乙酯重結(jié)晶的工藝，收率僅在60％，純度也僅為98～99％之間，klca含量在1.5％左右，在后續(xù)反應(yīng)這后，很難將終產(chǎn)品中klca及其衍生雜質(zhì)控制到0.15％以下，不能達(dá)到藥品控制標(biāo)準(zhǔn)。

本文中所使用的術(shù)語(yǔ)“接觸”應(yīng)做廣義理解，其可以是任何能使得至少兩種反應(yīng)物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的方式，例如可以是將兩種反應(yīng)物在適當(dāng)?shù)臈l件下進(jìn)行混合。在本文中，“化合物n”在本文中有時(shí)也稱為“式n所示化合物”，在本文中n為1～2的任意整數(shù)，例如“化合物2”在本文中也可以稱為“式2所示化合物”。

在本發(fā)明的描述中，需要理解的是，術(shù)語(yǔ)“第一”、“第二”僅用于描述目的，而不能理解為指示或暗示相對(duì)重要性或者隱含指明所指示的技術(shù)特征的數(shù)量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隱含地包括一個(gè)或者更多個(gè)該特征。在本發(fā)明的描述中，“多個(gè)”的含義是兩個(gè)或兩個(gè)以上，除非另有明確具體的限定。

下面詳細(xì)描述本發(fā)明的實(shí)施例的純化式1所示化合物的方法。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，所述純化方法包括：

(1)將所述式1所示化合物粗品與所述低級(jí)醇和水的混合溶液、脫色劑接觸，攪拌加熱、回流；

(2)趁熱濾去脫色劑，向所得濾液緩慢滴加純化水；

(3)攪拌，緩慢降溫，加入晶種，析晶；

(4)繼續(xù)攪拌降溫，過濾，得式1所示化合物純品。

由此可以制得高純度的式1所示化合物。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，所述低級(jí)醇為選自乙醇、異丙醇和丁醇中的至少一種，優(yōu)選為乙醇。由此可以制得高純度的式1所示化合物。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，所述低級(jí)醇和水的混合溶液與所述式1所示化合物粗品的體積/質(zhì)量比為4.4ml/g～6ml/g，優(yōu)選為5ml/g。由此可以充分溶解，并同時(shí)抑制低級(jí)醇與式1所示化合物生成酯雜質(zhì)，又不至過量而影響后續(xù)純化純度和收率。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，所述低級(jí)醇和水的混合溶液中低級(jí)醇與所述水的體積比為2:1～10:1，優(yōu)選為4:1。由此可以充分溶解，并同時(shí)抑制酯雜質(zhì)的生成，又不至過量而影響后續(xù)純化純度和收率。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，所述步驟(1)中所述脫色劑與所述式1所示化合物粗品的質(zhì)量比為1:10～1:25，優(yōu)選為1:20。由此可以達(dá)到脫色和吸附的功效，同時(shí)又不會(huì)影響收率。

根據(jù)本發(fā)明的具體實(shí)施例，所述脫色劑為選自活性炭、硅藻土、分子篩、活性白土中的至少一種，優(yōu)選為活性炭。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，所述步驟(2)中滴加的純化水的量與所述式1所示化合物粗品的體積/質(zhì)量比為1ml/g～2ml/g，優(yōu)選為1.5ml/g。由此可以滿足達(dá)到過飽和臨界點(diǎn)，同時(shí)又不會(huì)造成過快析晶而影響純度。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，所述步驟(2)緩慢滴加純化水的速率為1ml/min～4ml/min，優(yōu)選為1.5ml/min～3ml/min。。由此可以防止水滴加速度過快而導(dǎo)致局部降溫并達(dá)到過飽和，使產(chǎn)品過早析出。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，所述步驟(3)緩慢降溫的速率為0.2℃/min～1.2℃/min，優(yōu)選為0.4℃/min。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，步驟(3)緩慢降溫到65～80攝氏度，優(yōu)選70攝氏度，此時(shí)方加入晶種。由此可以為晶種的加入和析晶創(chuàng)造合適的條件。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，所述步驟(4)繼續(xù)攪拌降溫至10～30攝氏度，優(yōu)選為20～30攝氏度。由此可以保證濾出固體的收率，同時(shí)降低雜質(zhì)含量。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，所述步驟(4)過濾得固體后，進(jìn)一步用乙酸乙酯進(jìn)行洗滌。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，進(jìn)一步對(duì)式1所示化合物純品進(jìn)行真空干燥。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，真空干燥的溫度為30～50攝氏度，優(yōu)選為45攝氏度。由此可以充分干燥同時(shí)不影響產(chǎn)品性質(zhì)。

根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，真空干燥的時(shí)間為8～16小時(shí)，優(yōu)選為12小時(shí)。由此可以 充分干燥同時(shí)不影響產(chǎn)品性質(zhì)。

根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的純化式1所示化合物的方法可以實(shí)現(xiàn)下列優(yōu)點(diǎn)至少之一：

1、根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的純化式1所示化合物的方法，可以高效地制備式1所示化合物純品；

2、本發(fā)明實(shí)施例的純化式1所示化合物的方法的操作工藝簡(jiǎn)潔，步驟少，易控制，可提高生產(chǎn)效率，成本低，且安全環(huán)保，有利于工業(yè)化大批量生產(chǎn)；

3、根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的純化式1所示化合物的方法制備得到的產(chǎn)品色澤好，收率和純度大大提高，雜質(zhì)極少，有利于該產(chǎn)品的工業(yè)化生產(chǎn)，并具有很高的市場(chǎng)價(jià)值；

4、本發(fā)明實(shí)施例的純化式1所示化合物的方法通過高效去除式2雜質(zhì)，解決現(xiàn)有技術(shù)難題，推動(dòng)技術(shù)進(jìn)步；

5、本發(fā)明實(shí)施例的純化式1所示化合物的方法用低級(jí)醇和純化水的混合溶液替代乙酸乙酯，打破了3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸純化難的僵局，并有效降低了3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸產(chǎn)品中的雜質(zhì)成分。

6、本發(fā)明實(shí)施例的純化式1所示化合物的方法提供了非常高純度的目標(biāo)產(chǎn)品，為其生產(chǎn)新藥時(shí)，減少產(chǎn)品中雜質(zhì)，控制藥物質(zhì)量提供保障。

本發(fā)明的附加方面和優(yōu)點(diǎn)將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變得明顯，或通過本發(fā)明的實(shí)踐了解到。

附圖說(shuō)明

本發(fā)明的上述和/或附加的方面和優(yōu)點(diǎn)從結(jié)合下面附圖對(duì)實(shí)施例的描述中將變得明顯和容易理解，其中：

圖1為根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例1純化前的3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸粗品的檢測(cè)圖譜；

圖2為根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例1純化后的3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸的檢測(cè)圖譜；

圖3為根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例3純化后的3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸的檢測(cè)圖譜。

具體實(shí)施方式

下面詳細(xì)描述本發(fā)明的實(shí)施例。下面描述的實(shí)施例是示例性的，僅用于解釋本發(fā)明，而不能理解為對(duì)本發(fā)明的限制。實(shí)施例中未注明具體技術(shù)或條件的，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻(xiàn)所描述的技術(shù)或條件或者按照產(chǎn)品說(shuō)明書進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市購(gòu)獲得的常規(guī)產(chǎn)品。

原材料：

3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸粗品(純度95％左右，檢測(cè)klca含量4.2％左右)，自制；

乙醇(工業(yè)藥用級(jí))；

水(純化水)；

活性炭(工業(yè)藥用級(jí))。

分析測(cè)試儀器：

agilent1260hplc帶elsd380檢測(cè)器

色譜柱：thermobdsc18(4.6×150mm,5um),004the001

實(shí)施例13α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸的純化工藝

在裝有攪拌機(jī)、溫度計(jì)、滴液漏斗的100ml三口燒瓶中，加入藥用乙醇40ml和10ml純化水，于攪拌下加入3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸粗品10g，加熱攪拌回流至溶清，加入活性炭0.5g，攪拌15分鐘，趁熱過濾去除活性炭。濾液放置在裝有攪拌機(jī)、溫度計(jì)、滴液漏斗的100ml三口燒瓶中，于加熱攪拌回流下，用滴液漏斗慢慢加入純化水約15ml到燒瓶中，保溫?cái)嚢?5分鐘后，繼續(xù)攪拌，緩慢降溫，降溫至70℃時(shí)加入晶種，繼續(xù)攪拌降溫至25℃，過濾出固體，使用少量乙酸乙酯洗滌，45℃干燥12h，得到6.8g純化產(chǎn)品，收率68％，產(chǎn)品純度99.7％，其中klca雜質(zhì)含量為0.29％。

實(shí)施例23α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸的純化工藝

在裝有攪拌機(jī)、溫度計(jì)、滴液漏斗的1000ml三口燒瓶中，加入藥用乙醇400ml和100ml純化水，于攪拌下加入3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸粗品100g，加熱攪拌回流至溶清，加入活性炭5g，攪拌15分鐘，趁熱過濾去除活性炭。濾液放置在裝有攪拌機(jī)、溫度計(jì)、滴液漏斗的1000ml三口燒瓶中，于加熱攪拌回流下，用滴液漏斗慢慢加入純化水約150ml到燒瓶中，保溫?cái)嚢?5分鐘后，繼續(xù)攪拌，緩慢降溫，降溫至70℃時(shí)加入晶種，繼續(xù)攪拌降溫至25℃，過濾出固體，使用少量乙酸乙酯洗滌，45℃干燥12h，得到69.2g純化產(chǎn)品，收率69％，產(chǎn)品純度99.6％，其中klca雜質(zhì)含量為0.36％。

對(duì)比例13α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸的純化工藝

在裝有攪拌機(jī)、溫度計(jì)的1000ml三口燒瓶中，加入乙酸乙酯800ml，于攪拌下加入3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸粗品100g，加熱攪拌回流至溶清，加入活性炭5g，攪拌15分鐘，趁熱過濾去除活性炭。濾液放置在裝有攪拌機(jī)、溫度計(jì)的1000ml三口燒瓶中，繼續(xù)攪拌，緩慢降溫，降溫至65℃時(shí)加入晶種，繼續(xù)攪拌降溫至25℃，過濾出固體，使用 少量乙酸乙酯洗滌，45℃干燥12h，得到61.1g純化產(chǎn)品，收率61％，產(chǎn)品純度98.3％，其中klca含量為1.6％。

實(shí)驗(yàn)證明，相較于現(xiàn)有技術(shù)，本申請(qǐng)方法可以高效地純化奧貝膽酸中間體3α-羥基-6-亞乙基-7-氧代-5β-膽烷酸，能有效控制3α-羥基-7-氧代-5β-膽烷酸雜質(zhì)的含量以及減少其他未知雜質(zhì)的含量，從而為奧貝膽酸的合成提供合格的原料。

在本說(shuō)明書的描述中，參考術(shù)語(yǔ)“一個(gè)實(shí)施例”、“一些實(shí)施例”、“示例”、“具體示例”、或“一些示例”等的描述意指結(jié)合該實(shí)施例或示例描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點(diǎn)包含于本發(fā)明的至少一個(gè)實(shí)施例或示例中。在本說(shuō)明書中，對(duì)上述術(shù)語(yǔ)的示意性表述不必須針對(duì)的是相同的實(shí)施例或示例。而且，描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點(diǎn)可以在任一個(gè)或多個(gè)實(shí)施例或示例中以合適的方式結(jié)合。此外，在不相互矛盾的情況下，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以將本說(shuō)明書中描述的不同實(shí)施例或示例以及不同實(shí)施例或示例的特征進(jìn)行結(jié)合和組合。

盡管上面已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實(shí)施例，可以理解的是，上述實(shí)施例是示例性的，不能理解為對(duì)本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員在本發(fā)明的范圍內(nèi)可以對(duì)上述實(shí)施例進(jìn)行變化、修改、替換和變型。