本發(fā)明涉及一種新穎陽離子性脂質(zhì)。本申請是基于2014年12月26日在日本提出申請的日本專利特許2014-266548號而主張優(yōu)先權(quán)，并將其內(nèi)容引用到本文中。
背景技術(shù)：
：sirna(小干擾rna)、mirna(微小rna)、shrna(短發(fā)夾rna、或小發(fā)夾rna)表達載體、反義寡核苷酸等核酸是在活體內(nèi)誘導(dǎo)序列特異性基因表達抑制的核酸，其作為核酸醫(yī)藥而為公眾所知。在這些核酸醫(yī)藥中，特別是sirna備受矚目。sirna是包含19～23個堿基對的雙鏈rna，其會誘導(dǎo)稱為rna干擾(rnainterference，rnai)的序列特異性基因表達抑制。sirna雖化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，但在治療用途中存在如下問題：容易被血漿中的rnase(核糖核酸酶，ribonuclease)分解、及當(dāng)單獨存在時難以透過細胞膜等(例如，參照專利文獻1)。針對所述問題，已知有通過將sirna封入到含有陽離子性脂質(zhì)的微粒子內(nèi)，而保護所封入的sirna免于在血漿中發(fā)生分解，且可使sirna透過脂溶性細胞膜(例如，參照專利文獻1)。另外，專利文獻2～4記載了用于傳遞sirna等核酸醫(yī)藥的陽離子性脂質(zhì)，其生物降解性得到提高。另外，含有陽離子性脂質(zhì)的微粒子存在保管期間容易發(fā)生凝聚的穩(wěn)定性問題，已知有使聚乙二醇修飾脂質(zhì)(peg脂質(zhì))包含于該微粒子中而抑制凝聚的方法。此外，專利文獻5中記載了如下方法，即，通過將特定peg脂質(zhì)peg-dpg設(shè)為微粒子的構(gòu)成成分，或制成包含該微粒子與經(jīng)過脫離子化的溶劑的制劑，而改善凝聚抑制及核酸的傳遞效率。先前技術(shù)文獻專利文獻專利文獻1：日本專利特許2012-530059號公報專利文獻2：國際公開第2011/153493號手冊專利文獻3：國際公開第2013/086354號手冊專利文獻4：國際公開第2013/158579號手冊專利文獻5：國際公開第2014/089239號手冊技術(shù)實現(xiàn)要素：發(fā)明所要解決的問題然而，盡管最近有所進展，但業(yè)界仍然在尋求可利用于向細胞質(zhì)傳遞核酸的陽離子性脂質(zhì)。解決問題的技術(shù)手段本發(fā)明涉及以下的[1]至[8]。[1]一種化合物或其藥學(xué)上所容許的鹽，該化合物是選自由下述式(1)～(11)所表示的化合物所組成的族群中。[化1][化2][化3][化4][化5][化6][化7][化8][化9][化10][化11][2]根據(jù)[1]所述的化合物或其藥學(xué)上所容許的鹽，該化合物是選自由下述式(1)及(6)～(9)所表示的化合物所組成的族群中。[化12][化13][化14][化15][化16][3]根據(jù)[1]或[2]所述的化合物或其藥劑學(xué)上所容許的鹽，該化合物是以下述式(1)表示。[化17]所述式(1)所表示的化合物為陽離子性脂質(zhì)。[4]根據(jù)[1]或[2]所述的化合物或其藥劑學(xué)上所容許的鹽，該化合物是以下述式(6)表示。[化18]所述式(6)所表示的化合物為陽離子性脂質(zhì)。[5]根據(jù)[1]或[2]所述的化合物或其藥劑學(xué)上所容許的鹽，該化合物是以下述式(8)表示。[化19]所述式(8)所表示的化合物為陽離子性脂質(zhì)。[6]一種脂質(zhì)復(fù)合物，其含有(i)[1]至[5]中任一項所述的化合物或其藥學(xué)上所容許的鹽和(ii)選自由中性脂質(zhì)、聚乙二醇修飾脂質(zhì)及固醇所組成的族群中的至少一種脂質(zhì)。[7]一種組合物，其含有(i)[1]至[5]中任一項所述的化合物或其藥學(xué)上所容許的鹽、(ii)選自由中性脂質(zhì)、聚乙二醇修飾脂質(zhì)及固醇所組成的族群中的至少一種脂質(zhì)及(iii)核酸。[8]一種組合物的制造方法，其包括如下步驟：將含有(i)[1]至[5]中任一項所述的化合物或其藥學(xué)上所容許的鹽和(ii)選自由中性脂質(zhì)、聚乙二醇修飾脂質(zhì)及固醇所組成的族群中的至少一種脂質(zhì)的含極性有機溶劑的水溶液、與含有(iii)核酸的水溶液進行混合，而獲得混合液的步驟；以及，使混合液中的極性有機溶劑的含量減少的步驟。發(fā)明效果根據(jù)本發(fā)明的陽離子性脂質(zhì)，可向細胞質(zhì)高效率地釋放核酸。因此，本發(fā)明的陽離子性脂質(zhì)具有作為用于向細胞質(zhì)傳遞核酸的脂質(zhì)的可利用性。附圖說明圖1是表示動物實驗(4)的結(jié)果的圖表。圖2是表示動物實驗(5)的結(jié)果的圖表。具體實施方式<陽離子性脂質(zhì)>在一個實施方式中，本發(fā)明為所述式(1)～(11)中的任一個式所表示的化合物或其藥劑學(xué)上所容許的鹽，其可用作陽離子性脂質(zhì)。陽離子性脂質(zhì)也可以是所述鹽的水合物或所述鹽的溶劑合物。在本說明書中，所謂陽離子性脂質(zhì)是指具有脂質(zhì)親和性區(qū)域和親水性區(qū)域的兩親分子，該脂質(zhì)親和性區(qū)域包含一個以上的烴基，該親水性區(qū)域包含在生理ph值下會質(zhì)子化的極性基。即，本發(fā)明的陽離子性脂質(zhì)能夠發(fā)生質(zhì)子化而形成陽離子。作為與所述陽離子成對，且本實施方式的陽離子性脂質(zhì)可含有的陰離子，只要為藥劑學(xué)上所容許的陰離子，則沒有特別限定，例如可列舉：氯化物離子、溴化物離子、硝酸根離子、硫酸根離子、磷酸根離子等無機離子；醋酸根離子、草酸根離子、馬來酸根離子、富馬酸根離子、檸檬酸根離子、苯甲酸根離子、甲磺酸根離子等有機酸根離子等。<陽離子性脂質(zhì)的制造方法>對本發(fā)明的陽離子性脂質(zhì)的制造方法進行說明。下述式(12)中表示陽離子性脂質(zhì)的合成流程的一個實施方式。[化20]所述式(12)中，r3表示碳數(shù)4～12的烷撐，r4表示碳數(shù)7～12的烷基，r8表示下述式(13)所表示的結(jié)構(gòu)，r9表示下述式(14)所表示的結(jié)構(gòu)。[化21][式(13)中，r1表示可具有由碳鏈的一部分縮合而形成的1個以上的環(huán)丙烷或者環(huán)丁烷的碳數(shù)4～10的烷基、或碳數(shù)4～10的烯基，r2表示氫原子或碳數(shù)2～8的烷基，m表示0～5的整數(shù)。][化22][式(14)中，r5、r6及r7分別獨立表示氫原子或碳數(shù)1～10的烷基，n表示0～5的整數(shù)；r5及r6也可一并形成單環(huán)式雜環(huán)，r6及r7也可一并形成單環(huán)式雜環(huán)。]在本實施方式的合成流程中，陽離子性脂質(zhì)(1-7)可通過如下方式合成。首先，例如將式(1-1)所表示的二羧酸二烷基酯水解，而獲得式(1-2)所表示的單酯體。此處，披露了式(1-1)中二羧酸二烷基酯的烷基為甲基的例子，但二羧酸二烷基酯的烷基并不限于甲基，可選擇適當(dāng)?shù)耐榛?。接著，將?1-2)所表示的化合物酰氯化，而獲得式(1-3)所表示的化合物。接著，通過使式(1-3)所表示的化合物與格氏試劑進行反應(yīng)，而獲得式(1-4)所表示的化合物。接著，通過酯交換反應(yīng)而獲得式(1-5)所表示的化合物，再將其還原，由此獲得式(1-6)所表示的化合物。接著，可通過使式(1-6)所表示的化合物與羧酸進行縮合，而合成陽離子性脂質(zhì)(1-7)。<脂質(zhì)復(fù)合物>本發(fā)明提供一種脂質(zhì)復(fù)合物，其含有(i)所述陽離子性脂質(zhì)和(ii)選自由中性脂質(zhì)、聚乙二醇修飾脂質(zhì)及固醇所組成的族群中的至少一種脂質(zhì)。作為本發(fā)明的一個實施方式，脂質(zhì)復(fù)合物含有(i)所述陽離子性脂質(zhì)、(ii)選自由中性脂質(zhì)、聚乙二醇修飾脂質(zhì)及固醇所組成的族群中的至少一種脂質(zhì)及(iii)核酸。本實施方式的脂質(zhì)復(fù)合物能夠?qū)崿F(xiàn)將核酸高效率地釋放到細胞質(zhì)中。關(guān)于本實施方式的脂質(zhì)復(fù)合物，以脂質(zhì)復(fù)合物所含有的全部脂質(zhì)為基準，所述陽離子性脂質(zhì)的含量為例如10～100摩爾％、例如20～90摩爾％、例如40～70摩爾％。陽離子性脂質(zhì)可單獨使用1種，或者將2種以上混合使用。作為核酸，可列舉：sirna、mirna、shrna表達載體、反義寡核苷酸、核酶等。核酸也可為sirna、mirna。本實施方式的脂質(zhì)復(fù)合物含有例如0.01～50重量％、例如0.1～30重量％、例如1～10重量％的核酸。本實施方式的脂質(zhì)復(fù)合物，作為脂質(zhì)成分，含有(i)所述陽離子性脂質(zhì)和(ii)選自由中性脂質(zhì)、聚乙二醇修飾脂質(zhì)及固醇所組成的族群中的至少一種脂質(zhì)。作為中性脂質(zhì)，可列舉：二油酰磷脂酰乙醇胺(dope)、棕櫚酰油酰磷脂酰膽堿(popc)、卵磷脂酰膽堿(epc)、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿(dmpc)、二棕櫚酰磷脂酰膽堿(dppc)、二硬脂酰磷脂酰膽堿(dspc)、二花生酰磷脂酰膽堿(dapc)、二山崳酰磷脂酰膽堿(dbpc)、二(二十四酰)磷脂酰膽堿(dlpc)、二油酰磷脂酰膽堿(dopc)、鞘磷脂、神經(jīng)酰胺、二油酰磷脂酰甘油(dopg)、二棕櫚酰磷脂酰甘油(dppg)、磷脂酰乙醇胺(pope)、二油酰-磷脂酰乙醇胺4-(n-馬來酰亞胺甲基)-環(huán)己烷-1-羧酸酯(dope-mal)等。中性脂質(zhì)可單獨使用1種，或者將2種以上混合使用。本實施方式的脂質(zhì)復(fù)合物中，以脂質(zhì)復(fù)合物所含有的全部脂質(zhì)為基準，也可含有例如0～50摩爾％、例如0～40摩爾％、例如0～30摩爾％的中性脂質(zhì)。作為聚乙二醇修飾脂質(zhì)，可列舉：peg2000-dmg(peg2000-二肉豆蔻基甘油、peg2000-dpg(peg2000-二棕櫚酰甘油)、peg2000-dsg(peg2000-二硬脂酰甘油)、peg5000-dmg(peg5000-二肉豆蔻基甘油)、peg5000-dpg(peg5000-二棕櫚酰甘油)、peg5000-dsg(peg5000-二硬脂酰甘油)、peg-cdma(n-[(甲氧基聚(乙二醇)2000)氨基甲?；鵠-1，2-二肉豆蔻基氧基丙基-3-胺)、peg-c-domg(r-3-[(ω-甲氧基-聚(乙二醇)2000)氨基甲酰基)]-1，2-二肉豆蔻基氧基丙基-3-胺)、聚乙二醇(peg)-二酰甘油(dag)、peg-二烷氧基丙基(daa)、peg-磷脂質(zhì)、peg-神經(jīng)酰胺(cer)等。作為peg-二烷氧基丙基，可列舉：peg-二月桂氧基丙基、peg-二肉豆蔻氧基丙基、peg-二棕櫚氧基丙基、peg-二硬脂氧基丙基等。聚乙二醇修飾脂質(zhì)可單獨使用1種，或者將2種以上混合使用。本實施方式的脂質(zhì)復(fù)合物中，以脂質(zhì)復(fù)合物所含有的全部脂質(zhì)為基準，也可含有例如0～30摩爾％、例如0～20摩爾％、例如0～10摩爾％的聚乙二醇修飾脂質(zhì)。作為固醇，可列舉：膽固醇、二氫膽固醇、羊毛固醇、β-谷固醇、菜油固醇、豆固醇、菜籽固醇、麥角固醇、巖藻固醇、3β-[n-(n′，n′-二甲基氨基乙基)氨基甲?；鵠膽固醇(dc-chol)等。固醇可單獨使用1種，或者將2種以上混合使用。本實施方式的脂質(zhì)復(fù)合物中，以脂質(zhì)復(fù)合物所含有的全部脂質(zhì)為基準，也可含有例如0～90摩爾％、例如10～80摩爾％、例如20～50摩爾％的固醇。本實施方式的脂質(zhì)復(fù)合物中的脂質(zhì)成分的組合沒有特別限定，例如可列舉：所述的陽離子性脂質(zhì)、中性脂質(zhì)及固醇的組合，所述的陽離子性脂質(zhì)、中性脂質(zhì)、聚乙二醇修飾脂質(zhì)及固醇的組合等。<組合物>在一個實施方式中，本發(fā)明提供一種組合物，其含有(i)所述陽離子性脂質(zhì)、(ii)選自由中性脂質(zhì)、聚乙二醇修飾脂質(zhì)及固醇所組成的族群中的至少一種脂質(zhì)及(iii)核酸。本實施方式的組合物能夠?qū)崿F(xiàn)將核酸高效率地釋放到細胞質(zhì)中。本實施方式的組合物也可為包含所述脂質(zhì)復(fù)合物、藥學(xué)上所容許的介質(zhì)、及根據(jù)需要的其他添加劑的組合物。關(guān)于藥學(xué)上所容許的介質(zhì)、其他添加劑，在下文進行說明。本實施方式的組合物中，以組合物所含有的全部脂質(zhì)為基準，含有例如10～100摩爾％、例如20～90摩爾％、例如40～70摩爾％的所述陽離子性脂質(zhì)。陽離子性脂質(zhì)可單獨使用1種，或者將2種以上混合使用。作為核酸，可列舉與所述相同的核酸。本實施方式的組合物含有例如0.01～50重量％、例如0.1～30重量％、例如1～10重量％的核酸。本實施方式的組合物含有(i)所述陽離子性脂質(zhì)和(ii)選自由中性脂質(zhì)、聚乙二醇修飾脂質(zhì)及固醇所組成的族群中的至少一種脂質(zhì)作為脂質(zhì)成分。作為中性脂質(zhì)，可列舉與所述相同的中性脂質(zhì)。本實施方式的組合物中，以組合物所含有的全部脂質(zhì)為基準，也可含有例如0～50摩爾％、例如0～40摩爾％、例如0～30摩爾％的中性脂質(zhì)。作為聚乙二醇修飾脂質(zhì)，可列舉與所述相同的聚乙二醇修飾脂質(zhì)。本實施方式的組合物中，以組合物所含有的全部脂質(zhì)為基準，也可含有例如0～30摩爾％、例如0～20摩爾％、例如0～10摩爾％的聚乙二醇修飾脂質(zhì)。作為固醇，可列舉與所述相同的固醇。本實施方式的組合物中，以組合物所含有的全部脂質(zhì)為基準，也可含有例如0～90摩爾％、例如10～80摩爾％、例如20～50摩爾％的固醇。本實施方式的組合物中的脂質(zhì)成分的組合沒有特別限定，例如可列舉：所述的陽離子性脂質(zhì)、中性脂質(zhì)及固醇的組合，所述的陽離子性脂質(zhì)、中性脂質(zhì)、聚乙二醇修飾脂質(zhì)及固醇的組合等。本實施方式的組合物中，除了所述成分以外，作為其他添加劑，也可含有：蔗糖、葡萄糖、山梨糖醇、乳糖等糖；谷氨酰胺、谷氨酸、谷氨酸鈉、組氨酸等氨基酸；檸檬酸、磷酸、醋酸、乳酸、碳酸、酒石酸等酸的鹽等。本實施方式的組合物也可制劑化為醫(yī)藥組合物。作為醫(yī)藥組合物的劑型，例如可列舉注射劑。本實施方式的組合物例如可為通過冷凍干燥等而去除了溶劑的粉末狀態(tài)，也可為液體狀態(tài)。在組合物為粉末狀態(tài)的情況下，可在使用前懸濁或溶解到藥學(xué)上所容許的介質(zhì)中制成注射劑而使用。在組合物為液體狀態(tài)的情況下，可直接使用或者懸濁或溶解到藥學(xué)上所容許的介質(zhì)中制成注射劑而使用。作為藥學(xué)上所容許的介質(zhì)，可列舉：無菌水；生理鹽水；含有葡萄糖、d-山梨糖醇、d-甘露糖、d-甘露糖醇、氯化鈉等輔助藥的等滲液等。本實施方式的組合物還可含有乙醇、丙二醇、聚乙二醇等醇等溶解輔助劑，穩(wěn)定劑、抗氧化劑、防腐劑等添加劑。對患者投予組合物例如可通過動脈內(nèi)注射、靜脈內(nèi)注射、皮下注射等而進行。組合物的投予量根據(jù)投予對象、對象臟器、癥狀、投予方法而異。本實施方式的組合物是形成由含有陽離子性脂質(zhì)的脂質(zhì)所構(gòu)成的微粒子內(nèi)封入了核酸的脂質(zhì)復(fù)合物。脂質(zhì)復(fù)合物的“平均粒徑”可通過體積平均、數(shù)量平均、z-平均的任一種方法算出。在本實施方式的組合物中，脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑(z-平均)可為例如10～1000nm、例如30～500nm、例如30～200nm。關(guān)于本實施方式的組合物，就抑制非特異性吸附或免疫反應(yīng)的觀點而言，例如優(yōu)選在血液中等ph值約7.4的環(huán)境下表面幾乎無電荷。另外，就因內(nèi)吞作用而被吞入到細胞內(nèi)時提高內(nèi)吞體膜的融合效率的觀點而言，優(yōu)選在低ph值環(huán)境下帶正電。<組合物的制造方法>在一個實施方式中，本發(fā)明提供一種組合物的制造方法，其包括步驟(a)及步驟(b)，步驟(a)是將含有(i)所述陽離子性脂質(zhì)和(ii)選自由中性脂質(zhì)、聚乙二醇修飾脂質(zhì)及固醇所組成的族群中的至少一種脂質(zhì)的含極性有機溶劑的水溶液、與含有(iii)核酸的水溶液加以混合而獲得混合液，步驟(b)是使混合液中的極性有機溶劑的含量減少。根據(jù)本實施方式的制造方法，可制造能夠?qū)⒑怂岣咝实蒯尫诺郊毎|(zhì)中的組合物。通過水溶性核酸和所述陽離子性脂質(zhì)的靜電相互作用、及脂質(zhì)間的疏水相互作用，可形成由脂質(zhì)構(gòu)成的微粒子內(nèi)封入了核酸的脂質(zhì)復(fù)合物。例如，通過改變含有(i)所述陽離子性脂質(zhì)和(ii)選自由中性脂質(zhì)、聚乙二醇修飾脂質(zhì)及固醇所組成的族群中的至少一種脂質(zhì)的脂質(zhì)成分在含極性有機溶劑的水溶液中的溶解度，可形成脂質(zhì)復(fù)合物。作為極性有機溶劑，可列舉乙醇等醇。首先，在步驟(a)中，將溶解了(i)所述陽離子性脂質(zhì)和(ii)選自由中性脂質(zhì)、聚乙二醇修飾脂質(zhì)及固醇所組成的族群中的至少一種脂質(zhì)的含極性有機溶劑的水溶液、與含有(iii)核酸的水溶液加以混合而獲得混合液。含極性有機溶劑的水溶液中的極性有機溶劑的濃度只要在與核酸的水溶液混合后仍然滿足溶解脂質(zhì)分子的條件，則沒有特別限定。接著，在步驟(b)中，通過向所述混合液中添加水等，而使極性有機溶劑的含量減少。由此，可形成脂質(zhì)復(fù)合物。為了高效率地形成脂質(zhì)復(fù)合物，優(yōu)選使極性有機溶劑的含量急劇降低。根據(jù)本實施方式的組合物的制造方法，可獲得核酸被高效率地封入到微粒子內(nèi)部的脂質(zhì)復(fù)合物。在封入到組合物中的核酸為核酸醫(yī)藥的情況下，可將組合物作為醫(yī)藥組合物而使用。實施例以下，列舉實施例更詳細地說明本發(fā)明，但本發(fā)明并不限定于這些實施例。另外，實施例中的化合物名是使用軟件(商品名“chemdrawultraver.12.0”、珀金埃爾默(perkinelmer)公司制造)進行命名。實施例中所使用的簡稱是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的慣用簡稱。以下披露若干簡稱。dmf：n，n-二甲基甲酰胺tfa：三氟醋酸wsc：1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二酰亞胺鹽酸鹽dmap：n，n-二甲基-4-氨基吡啶thf：四氫呋喃lc-ms：液相色譜法-質(zhì)譜聯(lián)用(liquidchromatography-massspectrometry)esi-ms：電噴霧電離質(zhì)譜法(electrosprayionizationmassspectrometry)質(zhì)子核磁共振波譜的化學(xué)位移是以相對于四甲基硅烷的δ單位(ppm)進行記錄。圖案的簡稱如下。s：單峰、d：二重峰、t：三重峰、q：四重峰、dd：雙二重峰、ddd：雙雙二重峰、dt：雙三重峰、tt：三重三重峰、m：多重峰。<陽離子性脂質(zhì)的合成>[實施例1](1-甲基哌啶-4-羧酸1-((2-己基環(huán)丙基)甲氧基)-1-氧代十九烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-102”)的合成)以下披露ys-102的合成流程。[化23](第1步驟：水解)將在乙醇(868ml)中溶解有癸二酸二甲酯(200g、868.4mmol)的溶液冷卻到0℃。向該溶液中滴加氫氧化鉀(48.73g、868.4mmol)的乙醇(300ml)溶液，滴加后在0℃下攪拌12小時。反應(yīng)完畢后，添加醋酸乙酯和水，通過將未反應(yīng)物萃取到有機層中而去除。利用鹽酸使水層成為酸性，添加醋酸乙酯而萃取目標(biāo)物。利用水、食鹽水將有機層洗凈，并進行濃縮。對于第1步驟品單酯體(150.3g、652.6mmol、75％)，不進行純化而用于下一步驟。(第2步驟：酰氯化)向第1步驟品單酯體(50.0g、231.2mmol)與催化劑量的dmf(23ml)的懸濁液中滴加亞硫酰氯(41.3g、346.8mmol)。反應(yīng)完畢后，在減壓下將亞硫酰氯蒸餾去除后，進行蒸餾純化，而獲得第2步驟品(25.8g、109.9mmol、48％)。(第3步驟：與格氏試劑的反應(yīng))使氯化鋅(2.7g、20.1mmol)溶解到thf(61ml)中，并冷卻到-78℃。向該溶液中在氮氣環(huán)境下且在-78℃下滴加1m的溴化壬基鎂(40.2ml、40.2mmol)。滴加后，升溫到0℃，在0℃下攪拌30分鐘后，投入四(三苯基膦)鈀(0.58mg、0.5mmol)，接著滴加第2步驟品(5.0g、20.1mmol)。在0℃下進一步攪拌1小時后，加入1m鹽酸水溶液進行淬滅。從反應(yīng)溶液中過濾分離析出物，利用醋酸乙酯對濾液進行萃取，利用水、食鹽水將有機層洗凈后，利用無水硫酸鎂進行干燥。通過過濾而去除干燥劑，將濾液在減壓下加以濃縮。通過硅膠柱色譜法進行純化，而獲得第3步驟品(5.0g、14.7mmol、73％)。(第4步驟：酯交換)一邊對第3步驟品(2.0g、5.9mmol)、2-壬烯醇(4.2g、29.4mmol)、四丙醇鈦(0.2g、0.6mmol)的混合液進行攪拌，一邊將外浴升溫到110℃。一邊去除所產(chǎn)生的餾出液一邊繼續(xù)攪拌，將不再見到餾出的時刻設(shè)為反應(yīng)終點，在冷卻后添加水進行淬滅。利用醋酸乙酯對反應(yīng)液進行萃取，并利用水、食鹽水進行洗凈后，利用無水硫酸鎂進行干燥。通過過濾而去除干燥劑，將濾液在減壓下加以濃縮。通過硅膠柱色譜法進行純化，而獲得第4步驟品(2.6g、5.8mmol、99％)。(第5步驟：環(huán)丙烷化)使二乙基鋅(8.3ml、8.3mmol)溶解到二氯甲烷(15ml)中，并冷卻到0℃。向其中滴加三氟甲磺酸(0.9g、8.3mmol)，接著滴加二碘甲烷(2.2g、8.3mmol)后，在0℃下攪拌1小時。向該溶液中滴加第4步驟品(1.2g、2.8mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液，并升溫到室溫。通過tlc(thinlayerchromatography，薄層色譜法)確認反應(yīng)，將原料消失設(shè)為終點，利用水進行淬滅。將所析出的固體過濾分離，利用醋酸乙酯對濾液進行萃取，利用水、食鹽水進行洗凈后，利用無水硫酸鎂進行干燥。通過過濾而去除干燥劑，將濾液在減壓下加以濃縮。通過硅膠柱色譜法進行純化，而獲得第4步驟品(1.2g、2.7mmol、99％)。(第6步驟：還原)向在乙醇(22ml)中溶解了第5步驟品(1.0g、2.2mmol)的溶液中，添加硼氫化鈉(0.08g、2.2mmol)使之反應(yīng)10分鐘。反應(yīng)完畢后，利用1n鹽酸進行淬滅。利用醋酸乙酯進行萃取，并利用水、食鹽水進行洗凈后，將有機層在減壓下加以濃縮。通過硅膠柱色譜法進行純化，而獲得第6步驟品(0.3g、0.7mmol、30％)。(第7步驟：縮合)向在二氯甲烷(7ml)中溶解了第6步驟品(0.8g、1.8mmol)的溶液中，添加wsc(0.7g、3.7mmol)、二甲基氨基吡啶(0.04g、0.4mmol)、1-甲基哌啶-4-羧酸(0.5g、3.7mmol)。在室溫下攪拌到次日后，添加水，使有機層分液。將有機層利用水洗凈5次后，利用1n氫氧化鈉水溶液洗凈1次，利用無水硫酸鎂進行干燥。通過過濾而去除干燥劑，將濾液在減壓下加以濃縮。通過硅膠柱色譜法進行純化，而獲得下述式(15)所表示的ys-102(0.12g、0.2mmol、12％)。[化24]在以下條件下利用hplc-lc/ms(highperformanceliquidchromatography-liquidchromatography/massspectrometry，高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用)對所獲得的化合物進行確認。色譜柱：ymc-triartc18、150-4.6mm、5μm、洗提液：meoh(均勻溶劑)、流速：1.0ml/分鐘、運行時間：15分鐘、柱溫：45℃、檢測：uv(215nm)、電噴霧電離質(zhì)譜(esi-ms)。hplc-lc/ms、rt6.24分鐘、esi-ms(m+h)計算值577.5、測量值578.6、1hnmr(400mhz、cdcl3)δ4.87(1h，q)、2.82(2h，d)、2.27(4h，m)、2.04(1h，m)、1.91(1h，m)、1.82(2h，m)、1.61(2h，m)、1.50(4h，m)、1.36(5h，m)、1.25(24h，m)、0.88(6h，m)[實施例2](1-甲基哌啶-4-羧酸(z)-1-(壬-2-烯-1-基氧基)-1-氧代十九烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-101”)的合成)除了不進行第5步驟的方面以外，和實施例1同樣地合成下述式(16)所表示的ys-101。[化25]hplc-lc/ms、rt5.51分鐘、esi-ms(m+h)計算值563.5、測量值564.5、1hnmr(400mhz、cdcl3)δ5.32(2h，m)、4.87(1h，q)、4.11(1h，dd)、4.05(2h，t)、2.82(2h，d)、2.27(7h，m)、2.04(8h，m)、1.89(2h，m)、1.79(2h，m)、1.61(4h，m)、1.49(4h，m)、1.36(5h，m)、1.25(30h，m)、0.95(3h，m)、0.88(3h，m)[實施例3](1-甲基哌啶-4-羧酸1-氧代-1-(十一烷-5-基氧基)十九烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-103”)的合成)在第4步驟中，使用2-丁基辛烷-1-醇代替2-壬烯醇進行反應(yīng)，且不進行第5步驟，除此以外，和實施例1同樣地合成下述式(2)所表示的ys-103。[化26]hplc-lc/ms、rt7.52分鐘、esi-ms(m+h)計算值593.5、測量值594.6、1hnmr(400mhz、cdcl3)δ4.86(1h，q)、4.06(2h，t)、2.82(2h，d)、2.27(7h，m)、1.99(2h，m)、1.88(2h，m)、1.79(2h，m)、1.60(4h，m)、1.49(4h，m)、1.38(7h，m)、1.25(30h，m)、0.97(3h，m)、0.88(3h，m)、0.64(2h，m)、0.59(1h，m)、-0.33(1h，dd)[實施例4](1-甲基哌啶-4-羧酸1-((2-丁基辛基)氧基)-1-氧代十九烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-119”)的合成)以下披露ys-119的合成流程。[化27](第1步驟到第3步驟)第1步驟到第3步驟是和所述ys-102的合成同樣地進行。(第4步驟：酯交換)一邊對第3步驟品(4.1g、12.0mmol)、2-丁基辛烷-1-醇(6.73g、36.12mmol)、四丙醇鈦(0.34g、1.2mmol)的混合液進行攪拌，一邊將外浴升溫到110℃。一邊去除所產(chǎn)生的餾出液一邊繼續(xù)攪拌，將不再見到餾出的時刻設(shè)為反應(yīng)終點，在冷卻后添加水進行淬滅。利用醋酸乙酯對反應(yīng)液進行萃取，利用水、食鹽水進行洗凈后，利用無水硫酸鎂進行干燥。通過過濾而去除干燥劑，將濾液在減壓下加以濃縮。通過硅膠柱色譜法進行純化，而獲得第4步驟品(4.5g、9.4mmol、78％)。(第5步驟：還原)向在thf(18.7ml)、甲醇(18.7ml)中溶解了第4步驟品(4.5g、9.4mmol)的溶液中，添加硼氫化鈉(1.8g、46.8mmol)，使之反應(yīng)一小時。反應(yīng)完畢后，利用1n鹽酸進行淬滅。利用醋酸乙酯進行萃取，利用水、食鹽水進行洗凈后，將有機層在減壓下加以濃縮。通過硅膠柱色譜法進行純化，而獲得第5步驟品(3.1g、6.42mmol、69％)。(第6步驟：縮合)向在二氯甲烷(8.28ml)中溶解了第5步驟品(2.0g、4.14mmol)的溶液中，添加wsc(1.59g、8.28mmol)、二甲基氨基吡啶(0.04g、0.4mmol)、1-甲基哌啶-4-羧酸(1.19g、8.28mmol)。在室溫下攪拌到次日后，添加水，使有機層分液。將有機層利用水洗凈5次后，利用1n氫氧化鈉水溶液洗凈1次，利用無水硫酸鎂進行干燥。通過過濾而去除干燥劑，將濾液在減壓下加以濃縮。通過硅膠柱色譜法進行純化，而獲得式(1)所表示的ys-119(1.9g、3.1mmol、74％)。[化28]hplc-lc/ms、rt8.01分鐘、esi-ms(m+h)計算值607.6、測量值608.6、1hnmr(400mhz、cdcl3)δ4.87(1h，q)、3.96(2h，d)、2.81(2h，d)、2.27(6h，m)、1.98(2h，m)、1.91(2h，m)、1.82(2h，m)、1.61(4h，m)、1.49(4h，m)、1.20(46h，m)、0.86(9h，m)[實施例5](1-甲基哌啶4-羧酸1-氧代-1-(十一烷-5-基氧基)十五烷-6-基酯(以下，有時稱為“ys-111”)的合成)在第1步驟中，使用己二酸二甲酯代替癸二酸二甲酯進行反應(yīng)，在第4步驟中，使用十一烷-5-醇代替2-丁基辛烷-1-醇進行反應(yīng)，除此以外，和實施例4同樣地合成下述式(17)所表示的ys-111。[化29]hplc-lc/ms、rt5.35分鐘、esi-ms(m+h)計算值537.5、測量值538.5、1hnmr(400mhz、cdcl3)δ4.87(2h，q)、2.81(2h，d)、2.27(6h，m)、1.98(2h，m)、1.91(2h，m)、1.82(2h，m)、1.62-1.50(10h，m)、1.24(28h，m)、0.87(9h，m)[實施例6](1-甲基哌啶4-羧酸1-氧代-1-(十一烷-5-基氧基)十七烷-8-基酯(以下，有時稱為“ys-112”)的合成)在第1步驟中，使用辛二酸二甲酯代替癸二酸二甲酯進行反應(yīng)，在第4步驟中，使用十一烷-5-醇代替2-丁基辛烷-1-醇進行反應(yīng)，除此以外，和實施例4同樣地合成下述式(4)所表示的ys-112。[化30]hplc-lc/ms、rt6.05分鐘、esi-ms(m+h)計算值565.5、測量值566.5、1hnmr(400mhz、cdcl3)δ4.87(2h，q)、2.81(2h，d)、2.27(6h，m)、1.98(2h，m)、1.91(2h，m)、1.82(2h，m)、1.62-1.50(10h，m)、1.24(32h，m)、0.87(9h，m)[實施例7](1-甲基哌啶4-羧酸21-氧代-21-(十一烷-5-基氧基)二十一烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-113”)的合成)在第1步驟中，使用十二烷二酸二甲酯代替癸二酸二甲酯進行反應(yīng)，在第4步驟中，使用十一烷-5-醇代替2-丁基辛烷-1-醇進行反應(yīng)，除此以外，和實施例4同樣地合成下述式(5)所表示的ys-113。[化31]hplc-lc/ms、rt8.95分鐘、esi-ms(m+h)計算值621.6、測量值622.6、1hnmr(400mhz、cdcl3)δ4.87(2h，q)、2.81(2h，d)、2.27(6h，m)、1.98(2h，m)、1.91(2h，m)、1.82(2h，m)、1.62-1.50(10h，m)、1.24(40h，m)、0.87(9h，m)[實施例8](1-甲基哌啶4-羧酸23-氧代-23-(十一烷-5-基氧基)二十三烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-114”)的合成)在第1步驟中，使用十四烷二酸二甲酯代替癸二酸二甲酯進行反應(yīng)，在第4步驟中，使用十一烷-5-醇代替2-丁基辛烷-1-醇進行反應(yīng)，除此以外，和實施例4同樣地合成下述式(18)所表示的ys-114。[化32]hplc-lc/ms、rt11.1分鐘、esi-ms(m+h)計算值649.6、測量值650.6、1hnmr(400mhz、cdcl3)δ4.87(2h，q)、2.81(2h，d)、2.27(6h，m)、1.98(2h，m)、1.91(2h，m)、1.82(2h，m)、1.62-1.50(10h，m)、1.24(44h，m)、0.87(9h，m)[實施例9](1-甲基哌啶-4-羧酸1-((2-丁基辛基)氧基)-1-氧代十七烷-8-基酯(以下，有時稱為“ys-115”)的合成)在第1步驟中，使用辛二酸二甲酯代替癸二酸二甲酯進行反應(yīng)，除此以外，和實施例4同樣地合成下述式(19)所表示的ys-115。[化33]hplc-lc/ms、rt6.72分鐘、esi-ms(m+h)計算值579.5、測量值580.7、1hnmr(400mhz、cdcl3)δ4.87(2h，q)、3.96(2h，d)、2.81(2h，d)、2.27(6h，m)、1.98(2h，m)、1.91(2h，m)、1.82(2h，m)、1.62-1.50(10h，m)、1.24(32h，m)、0.87(9h，m)[實施例10](1-甲基哌啶-4-羧酸21-((2-丁基辛基)氧基)-21-氧代二十一烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-116”)的合成)在第1步驟中，使用辛二酸二甲酯代替癸二酸二甲酯進行進行反應(yīng)，除此以外，和實施例4同樣地合成下述式(20)所表示的ys-116。[化34]hplc-lc/ms、rt10.0分鐘、esi-ms(m+h)計算值635.6、測量值636.7、1hnmr(400mhz、cdcl3)δ4.87(2h，q)、3.96(2h，d)、2.81(2h，d)、2.27(6h，m)、1.98(2h，m)、1.91(2h，m)、1.82(2h，m)、1.62-1.50(10h，m)、1.24(40h，m)、0.87(9h，m)[實施例11](1-甲基哌啶-4-羧酸1-(辛烷-3-基氧基)-1-氧代十七烷-8-基酯(以下，有時稱為“ys-117”)的合成)在第1步驟中，使用辛二酸二甲酯代替癸二酸二甲酯進行反應(yīng)，在第4步驟中，使用辛烷-3-醇代替2-丁基辛烷-1-醇進行反應(yīng)，除此以外，和實施例4同樣地合成下述式(21)所表示的ys-117。[化35]hplc-lc/ms、rt4.71分鐘、esi-ms(m+h)計算值523.5、測量值524.6、1hnmr(400mhz、cdcl3)δ4.87(1h，q)、4.80(1h，q)、2.82(2h，d)、2.27(6h，m)、1.98(2h，m)、1.91(2h，m)、1.82(2h，m)、1.62-1.29(10h，m)、1.24(26h，m)、0.87(9h，m)[實施例12](1-甲基哌啶-4-羧酸1-((s)辛烷-3-基氧基)-1-氧代十七烷-8-基酯(以下，有時稱為“ys-117s”)的合成)在第1步驟中，使用辛二酸二甲酯代替癸二酸二甲酯進行反應(yīng)，在第4步驟中，使用(s)-辛烷-3-醇代替2-丁基辛烷-1-醇進行反應(yīng)，除此以外，和實施例4同樣地合成下述式(22)所表示的ys-117s。[化36]hplc-lc/ms、rt4.70分鐘、esi-ms(m+h)計算值523.5、測量值524.6、1hnmr(400mhz、cdcl3)δ4.87(1h，q)、4.80(1h，q)、2.82(2h，d)、2.27(6h，m)、1.98(2h，m)、1.91(2h，m)、1.82(2h，m)、1.62-1.29(10h，m)、1.24(26h，m)、0.86(9h，m)[實施例13](1-甲基哌啶-4-羧酸21-(辛烷-3-基氧基)-21-氧代二十一烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-118”)的合成)在第1步驟中，使用十二烷二酸二甲酯代替癸二酸二甲酯進行反應(yīng)，在第4步驟中，使用辛烷-3-醇代替2-丁基辛烷-1-醇進行反應(yīng)，除此以外，和實施例4同樣地合成下述式(3)所表示的ys-118。[化37]hplc-lc/ms、rt6.55分鐘、esi-ms(m+h)計算值579.5、測量值580.6、1hnmr(400mhz、cdcl3)δ4.87(1h，q)、4.80(1h，q)、2.82(2h，d)、2.27(6h，m)、1.98(2h，m)、1.91(2h，m)、1.82(2h，m)、1.62-1.29(10h，m)、1.24(30h，m)、0.86(9h，m)[實施例14](1-甲基哌啶-4-羧酸21-((s)-辛烷-3-基氧基)-21-氧代二十一烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-118s”)的合成)在第1步驟中，使用十二烷二酸二甲酯代替癸二酸二甲酯進行反應(yīng)，在第4步驟中，使用(s)-辛烷-3-醇代替2-丁基辛烷-1-醇進行反應(yīng)，除此以外，和實施例4同樣地合成下述式(23)所表示的ys-118s。[化38]hplc-lc/ms、rt6.54分鐘、esi-ms(m+h)計算值579.5、測量值580.6、1hnmr(400mhz、cdcl3)δ4.87(1h，q)、4.80(1h，q)、2.82(2h，d)、2.27(6h，m)、1.98(2h，m)、1.91(2h，m)、1.82(2h，m)、1.62-1.29(10h，m)、1.24(30h，m)、0.86(9h，m)[實施例15](1-甲基哌啶-4-羧酸1-((2-丁基辛基)氧基)-1-氧代二十烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-120”)的合成)在第3步驟中，使用溴化癸基鎂代替溴化壬基鎂進行反應(yīng)，除此以外，和實施例4同樣地合成下述式(6)所表示的ys-120。[化39]hplc-lc/ms、rt8.70分鐘、esi-ms(m+h)計算值621.6、測量值622.7、1hnmr(400mhz，cdcl3)δ4.86(1h，ddd)、3.96(2h，d)、2.81(2h，d)、2.27(6h，m)、2.03(2h，m)、1.98(1h，d)、1.90(1h，m)、1.78(4h，m)、1.61(4h，m)、1.49(4h，m)、1.27-1.21(41h，m)、0.87(9h，m)如下所述，如果利用所述式(6)所表示的化合物形成脂質(zhì)復(fù)合物，則在保管一定時間的情況下的脂質(zhì)復(fù)合物的粒徑增大得到抑制，而穩(wěn)定性高。[實施例16](1-甲基哌啶-4-羧酸1-((2-丁基辛基)氧基)-1-氧代二十烷-10-基酯(“ys-120”)的合成)以下披露ys-120的另一合成流程。[化40](第1步驟到第3步驟)第1步驟到第3步驟是和所述ys-102的合成同樣地進行。(第4步驟：酯交換)一邊對第3步驟品(150.0g、440.5mmol)、芐醇(142.9g、1321.4mmol)、四丙醇鈦(12.5g、44.5mmol)的混合液進行攪拌，一邊將外浴升溫到130℃。一邊去除所產(chǎn)生的餾出液一邊繼續(xù)攪拌，將不再見到餾出的時刻設(shè)為反應(yīng)終點，在冷卻后添加水進行淬滅。利用醋酸乙酯對反應(yīng)液進行萃取，利用水、食鹽水進行洗凈后，利用無水硫酸鎂進行干燥。通過過濾而去除干燥劑，將濾液在減壓下加以濃縮。通過硅膠柱色譜法進行純化，而獲得第4步驟品(146.2g、350.9mmol)。(第5步驟：還原)向在thf(480.0ml)、甲醇(480.0ml)中溶解了第4步驟品(100.0g、240.0mmol)的溶液中，添加硼氫化鈉(10.9g、288.0mmol)，使之反應(yīng)10分鐘。反應(yīng)完畢后，利用1n鹽酸進行淬滅。利用醋酸乙酯進行萃取，利用水、食鹽水進行洗凈后，將有機層在減壓下加以濃縮。通過硅膠柱色譜法進行純化，而獲得第5步驟品(70.0g、167.2mmol)。(第6步驟：縮合)向在thf(480.0ml)中溶解了第5步驟品(50.0g、119.4mmol)的溶液中，添加wsc(45.8g、238.9mmol)、二甲基氨基吡啶(2.92g、23.9mmol)、1-甲基哌啶-4-羧酸(34.2g、238.9mmol)。在室溫下攪拌到次日后，添加水，使有機層分液。將有機層利用水洗凈5次后，利用1n氫氧化鈉水溶液洗凈1次，利用無水硫酸鎂進行干燥。通過過濾而去除干燥劑，將濾液在減壓下加以濃縮。通過硅膠柱色譜法進行純化，而獲得第6步驟品(37.2g、68.4mmol)。(第7步驟：接觸還原)使第6步驟品(37.2g、68.4mmol)、鈀/碳(4.9ml)懸濁在醋酸乙酯(136.8ml)中，并在氫氣環(huán)境下攪拌一晚。將反應(yīng)液過濾分離，去除鈀/碳進行濃縮。通過硅膠色譜法進行純化，而獲得第7步驟品(26.8g、59.1mmol)。(第8步驟：縮合)向在二氯甲烷(220.0ml)中溶解了第7步驟品(20.0g、44.1mmol)的溶液中，添加wsc(8.9g、46.3mmol)、二甲基氨基吡啶(1.08g、0.4mmol)、2-丁基辛烷-1-醇(16.4g、88.2mmol)。在室溫下攪拌到次日后，添加水，使有機層分液。將有機層利用水洗凈5次后，利用無水硫酸鎂進行干燥。通過過濾而去除干燥劑，將濾液在減壓下加以濃縮。通過硅膠柱色譜法進行純化，而獲得式(6)所表示的ys-120(22.0g、35.4mmol)。[實施例17](1-甲基哌啶-4-羧酸1-((2z，5z)-癸-2，5-二烯-1-基氧基)-1-氧代二十烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-121”)的合成)在第8步驟中，使用(2z，5z)-癸-2，5-二烯-1-醇代替2-丁基辛烷-1-醇進行反應(yīng)，除此以外，和實施例16同樣地合成下述式(24)所表示的ys-121。[化41]esi-ms(m+h)計算值589.5、測量值590.7、1hnmr(400mhz，cdcl3)δ5.60(1h，m)、5.36(1h，m)、4.87(1h，tt)、4.64(1h，d)、2.86(2h，m)、2.36(3h，s)2.32(2h，t)、2.22(1h，m)、2.02(2h，m)、1.97(2h，m)、1.61(2h，m)、1.50(3h，m)、1.27(40h，m)、0.88(6h，m)[實施例18](1-甲基哌啶-4-羧酸(z)-1-((2-丁基壬-3-烯-1-基)氧基)-1-氧代二十烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-122”)的合成)在第8步驟中，使用(z)-2-丁基壬-3-烯-1-醇代替2-丁基辛烷-1-醇進行反應(yīng)，除此以外，和實施例16同樣地合成下述式(25)所表示的ys-122。[化42]esi-ms(m+h)計算值633.6、測量值634.7、1hnmr(400mhz，cdcl3)δ5.60(1h，m)、5.36(1h，m)、4.87(1h，tt)、4.64(1h，d)、2.86(2h，m)、2.36(3h，s)、2.32(2h，t)、2.22(1h，m)、2.02(2h，m)、1.97(2h，m)、1.61(2h，m)、1.50(3h，m)、1.27(48h，m)、0.88(6h，m)如下所述，如果利用所述式(25)所表示的化合物形成脂質(zhì)復(fù)合物，則在保管一定時間的情況下的脂質(zhì)復(fù)合物的粒徑增大得到抑制，而穩(wěn)定性高。[實施例19](1-甲基哌啶-4-羧酸(z)-1-氧代-1-((5-丙基壬-2-烯-1-基)氧基)二十烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-123”)的合成)在第8步驟中，使用(z)-5-丙基壬-2-烯-1-醇代替2-丁基辛烷-1-醇進行反應(yīng)，除此以外，和實施例16同樣地合成下述式(26)所表示的ys-123。[化43]esi-ms(m+h)計算值619.6、測量值620.7、1hnmr(400mhz，cdcl3)δ5.60(2h，m)、4.87(1h，tt)、4.61(2h，d)、2.93(2h，d)、2.42(3h，s)、2.31(2h，t)、2.29(2h，t)、2.05(4h，t)、1.93(2h，m)、1.61(2h，m)、1.50(4h，m)、1.27(43h，m)、0.88(6h，m)如下所述，如果利用所述式(26)所表示的化合物形成脂質(zhì)復(fù)合物，則在保管一定時間的情況下的脂質(zhì)復(fù)合物的粒徑增大得到抑制，而穩(wěn)定性高。[實施例20](1-甲基哌啶-4-羧酸1-氧代-1-((3-戊基辛基)氧基)二十烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-124”)的合成)在第8步驟中，使用3-戊基辛烷-1-醇代替2-丁基辛烷-1-醇進行反應(yīng)，除此以外，和實施例16同樣地合成下述式(27)所表示的ys-124。[化44]esi-ms(m+h)計算值635.6、測量值636.7、1hnmr(400mhz，cdcl3)δ4.87(1h，tt)、4.06(2h，m)、2.81(2h，d)、2.27(6h，m)、2.02(2h，m)、1.97(2h，m)、1.77(4h，m)、1.61(2h，m)、1.50(3h，m)、1.43(1h，m)、1.27(43h，m)、0.88(9h，m)如下所述，如果利用所述式(27)所表示的化合物形成脂質(zhì)復(fù)合物，則在保管一定時間的情況下的脂質(zhì)復(fù)合物的粒徑增大得到抑制，而穩(wěn)定性高。[實施例21](1-甲基哌啶-4-羧酸1-((2，4-二丙基庚基)氧基)-1-氧代二十烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-125”)的合成)在第8步驟中，使用2，4-二丙基庚烷-1-醇代替2-丁基辛烷-1-醇進行反應(yīng)，除此以外，和實施例16同樣地合成下述式(28)所表示的ys-125。[化45]esi-ms(m+h)計算值635.6、測量值636.7、1hnmr(400mhz，cdcl3)δ4.87(1h，tt)、3.95(1h，d)、3.55(2h，t)、2.96(2h，m)、2.45(3h，s)、2.32(2h，t)、2.22(1h，m)、2.02(2h，m)、1.97(2h，m)、1.61(2h，m)、1.50(3h，m)、1.27(49h，m)、0.88(12h，m)如下所述，如果利用所述式(28)所表示的化合物形成脂質(zhì)復(fù)合物，則在保管一定時間的情況下的脂質(zhì)復(fù)合物的粒徑增大得到抑制，而穩(wěn)定性高。[實施例22](1-甲基哌啶-4-羧酸1-((3，4-二丙基庚基)氧基)-1-氧代二十烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-126”)的合成)在第8步驟中，使用3，4-二丙基庚烷-1-醇代替2-丁基辛烷-1-醇進行反應(yīng)，除此以外，和實施例16同樣地合成下述式(29)所表示的ys-126。[化46]esi-ms(m+h)計算值635.6、測量值636.7、1hnmr(400mhz，cdcl3)δ4.87(1h，tt)、4.06(2h，m)、3.00(2h，m)、2.45(5h，m)、2.27(2h，t)、2.02(2h，m)、1.97(2h，m)、1.61(2h，m)、1.50(3h，m)、1.43(2h，m)、1.27(42h，m)、0.88(12h，m)如下所述，如果利用所述式(29)所表示的化合物形成脂質(zhì)復(fù)合物，則在保管一定時間的情況下的脂質(zhì)復(fù)合物的粒徑增大得到抑制，而穩(wěn)定性高。[實施例23](1-甲基哌啶-4-羧酸1-(4-(己基雙硫基)-3-((己基雙硫基)甲基)丁氧基)-1-氧代二十烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-127”)的合成)在第8步驟中，使用4-(己基雙硫基)-3-((己基雙硫基)甲基)丁烷-1-醇代替2-丁基辛烷-1-醇進行反應(yīng)，除此以外，和實施例16同樣地合成下述式(30)所表示的ys-127。[化47]esi-ms(m+h)計算值819.5、測量值820.6、1hnmr(400mhz，cdcl3)δ4.86(1h，tt)、4.13(2h，t)、2.81(6h，d)、2.67(2h，t)、2.29(3h，t)、2.27(3h，s)、1.99(2h，m)、1.90(2h，dd)、1.79(2h，dt)、1.68(12h，m)、1.50(6h，m)、1.42(6h，m)、1.24(29h，m)、0.88(9h，m)[實施例24](1-甲基哌啶-4-羧酸1-((6-(丁基雙硫基)-3-(3-(丁基雙硫基)丙基)己基)氧基)-1-氧代二十烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-128”)的合成)在第8步驟中，使用6-(丁基雙硫基)-3-(3-(丁基雙硫基)丙基)己烷-1-醇代替2-丁基辛烷-1-醇進行反應(yīng)，除此以外，和實施例16同樣地合成下述式(31)所表示的ys-128。[化48]esi-ms(m+h)計算值819.5、測量值821.0、1hnmr(400mhz，cdcl3)δ4.86(1h，tt)、4.08(2h，t)、2.81(2h，d)、2.67(8h，dd)、2.29(3h，t)、2.27(3h，s)、1.99(2h，m)、1.90(2h，dd)、1.79(2h，dt)、1.68(12h，m)、1.50(6h，m)、1.42(6h，m)、1.24(37h，m)、0.92-0.88(9h，m)[實施例25](1-甲基吡咯烷-3-羧酸1-((2-丁基辛基)氧基)-1-氧代二十烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-129”)的合成)在第6步驟中，使用1-甲基吡咯烷-3-羧酸代替1-甲基哌啶-4-羧酸進行反應(yīng)，除此以外，和實施例16同樣地合成下述式(32)所表示的ys-129。[化49]esi-ms(m+h)計算值607.6、測量值608.8、1hnmr(400mhz，cdcl3)δ4.86(1h，tt)、3.98(2h，d)、3.05(1h，tt)、2.86(1h，tt)、2.67(2h，m)、2.49(1h，tt)、2.35(3h，s)、2.29(2h，t)、2.17(2h，m)、1.72(2h，s)、1.60(3h，m)、1.50(4h，m)、1.24(44h，m)、0.92-0.88(9h，m)[實施例26](1-甲基吖丁啶-3-羧酸1-((2-丁基辛基)氧基)-1-氧代二十烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-131”)的合成)在第6步驟中，使用1-甲基吖丁啶-3-羧酸代替1-甲基哌啶-4-羧酸進行反應(yīng)，除此以外，和實施例16同樣地合成下述式(33)所表示的ys-131。[化50]esi-ms(m+h)計算值593.4、測量值594.7、1hnmr(400mhz，cdcl3)δ4.87(1h，tt)、3.96(2h，d)、3.57(2h，d)、3.25(2h，d)、3.23(1h，tt)、2.32(3h，s)、2.29(2h，t)、2.03(2h，m)、1.61(4h，m)、1.49(4h，m)、1.27-1.21(41h，m)、0.87(9h，m)[實施例27](1-乙基哌啶-4-羧酸1-((2-丁基辛基)氧基)-1-氧代二十烷-10-基酯(以下，有時稱為“ys-132”)的合成)在第6步驟中，使用1-乙基哌啶-4-羧酸代替1-甲基哌啶-4-羧酸進行反應(yīng)，除此以外，和實施例16同樣地合成下述式(34)所表示的ys-132。[化51]esi-ms(m+h)計算值636.0、測量值636.7、1hnmr(400mhz，cdcl3)δ4.87(1h，ddd)、3.96(2h，d)、2.91(2h，d)、2.40(2h，dd)、2.29(4h，m)、2.03-1.93(4h，m)、1.80(2h，m)、1.61(4h，m)、1.49(4h，m)、1.27-1.21(41h，m)、1.08(4h，t)、0.87(9h，m)[實施例28](10-((4-(二甲基氨基)丁?；?氧基)二十烷酸2-丁基辛酯(以下，有時稱為“ys-133”)的合成)在第6步驟中，使用4-(二甲基氨基)丁酸代替1-甲基哌啶-4-羧酸進行反應(yīng)，除此以外，和實施例16同樣地合成下述式(35)所表示的ys-133。[化52]esi-ms(m+h)計算值609.6、測量值610.7、1hnmr(400mhz，cdcl3)δ4.86(1h，tt)、3.96(2h，d)、2.33-2.26(6h，m)、2.21(6h，s)、2.03(2h，m)、1.80(2h，m)、1.61(4h，m)、1.49(4h，m)、1.27-1.21(41h，m)、0.87(9h，m)<組合物的制備(1)>[實施例29](ys-102)使用實施例1的陽離子性脂質(zhì)(ys-102)而制備組合物。作為核酸，使用包含有義鏈5′-ggafufcafufcfufcaagfufcfufuafct＊t-3′(序列編號1、t：dna、fu，fc＝2′-氟代rna、＊＝硫代磷酸酯連結(jié)子)、反義鏈5′-gfuaagafcfufugagafugafufcfct＊t-3′(序列編號2、t：dna、fu，fc＝2′-氟代rna、＊＝硫代磷酸酯連結(jié)子)的堿基序列的抑制factorvii(凝血因子7)基因的表達的sirna，且該sirna經(jīng)過退火(genedesign股份有限公司、以下有時稱為“factorviisirna”)。將factorviisirna在25mm醋酸鈉(ph值4.0)中溶解為216μg/ml，而制成sirna稀釋液。另外，將陽離子性脂質(zhì)(ys-102)、dspc(日本精化股份有限公司)、膽固醇(日本精化股份有限公司)、mpeg2000-dmg(日油股份有限公司)以60/8.5/30/1.5(摩爾比)的比例且以總脂質(zhì)濃度為15mm的方式溶解到乙醇中，而制成脂質(zhì)溶液。將sirna稀釋液與脂質(zhì)溶液分別以2.4ml/分鐘、1.29ml/分鐘的流速進行混合，進而將25mm醋酸鈉(ph值4.0)以9.25ml/分鐘的流速進行混合，由此獲得脂質(zhì)復(fù)合物水溶液。將所獲得的脂質(zhì)復(fù)合物水溶液供于使用透析膜(商品名“float-a-lyzerg2”、美國斯百全(spectrum)公司、50kmwco)的透析，將外液換成磷酸緩沖液(pbs、ph值7.5)。透析后，進行濃縮及過濾滅菌，而獲得實施例29的組合物。[實施例30](ys-101)使用實施例2的陽離子性脂質(zhì)(ys-101)代替ys-102作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例29同樣地獲得實施例30的組合物。[實施例31](ys-103)使用實施例3的陽離子性脂質(zhì)(ys-103)代替ys-102作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例29同樣地獲得實施例31的組合物。[參考例1](ys-021)使用下述式(36)所表示的1-甲基哌啶-4-羧酸1-(2-辛基環(huán)丙基)十七烷-8-基酯(以下，有時稱為“ys-021”)代替ys-102作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例29同樣地獲得參考例1的組合物。[化53]<組合物的分析(1)>針對實施例29～31及參考例1的組合物，測定sirna向脂質(zhì)復(fù)合物中的封入率。具體而言，利用無rna酶水(rnasefreewater)稀釋組合物，使用quant-itribogreenrna試劑(美國英杰(invitrogen)公司)進行測定，將所測得的sirna濃度(a)設(shè)為脂質(zhì)復(fù)合物外液中所存在的sirna。另外，將組合物利用1％tritonx-100進行稀釋并測定，將所測得的sirna濃度(b)設(shè)為組合物中的總sirna濃度。接著，根據(jù)下式(f1)算出核酸的封入率。封入率(％)＝100-(a/b)×100(f1)另外，利用粒徑測定裝置(商品名“zetasizernanozs”、英國馬爾文(malvern)公司制造)測定脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑。表1中表示sirna的封入率及脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑(z-平均)。[表1]組合物陽離子性脂質(zhì)封入率(％)平均粒徑(nm)實施例29ys-1029874實施例30ys-101＞9979實施例31ys-1039868參考例1ys-021＞9965<組合物的制備(2)>[實施例32](ys-111)使用實施例5的陽離子性脂質(zhì)(ys-111)而制備組合物。作為核酸，使用和實施例29的組合物所使用者相同的factorviisirna。將factorviisirna利用25mm醋酸鈉(ph值4.0)溶解為181μg/ml，而制成sirna稀釋液。另外，將陽離子性脂質(zhì)(ys-111)、dspc(日本精化股份有限公司)、膽固醇(日本精化股份有限公司)、mpeg2000-dmg(日油股份有限公司)以60/8.5/30/1.5(摩爾比)的比例且以總脂質(zhì)濃度為10mm的方式溶解到乙醇中，而制成脂質(zhì)溶液。將sirna稀釋液與脂質(zhì)溶液分別以2.4ml/分鐘、1.29ml/分鐘的流速進行混合，進而將25mm醋酸鈉(ph值4.0)以5.0ml/分鐘的流速進行混合，由此獲得脂質(zhì)復(fù)合物水溶液。將所獲得的脂質(zhì)復(fù)合物水溶液供于使用透析膜(商品名“float-a-lyzerg2”、美國斯百全(spectrum)公司、50kmwco)的透析，將外液換成磷酸緩沖液(pbs、ph值7.5)。透析后，進行濃縮及過濾滅菌，而獲得實施例32的組合物。[實施例33](ys-112)使用實施例6的陽離子性脂質(zhì)(ys-112)代替ys-111作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例32同樣地獲得實施例33的組合物。[實施例34](ys-113)使用實施例7的陽離子性脂質(zhì)(ys-113)代替ys-111作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例32同樣地獲得實施例34的組合物。[實施例35](ys-114)使用實施例8的陽離子性脂質(zhì)(ys-114)代替ys-111作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例32同樣地獲得實施例35的組合物。[實施例36](ys-115)使用實施例9的陽離子性脂質(zhì)(ys-115)代替ys-111作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例32同樣地獲得實施例36的組合物。[實施例37](ys-116)使用實施例10的陽離子性脂質(zhì)(ys-116)代替ys-111作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例32同樣地獲得實施例36的組合物。[比較例1](aln-319)使用專利文獻1中記載的下述式(32)所表示的9-((4-(二甲基氨基)丁酰基)氧基)十七烷二酸二((z)-壬-2-烯-1-基)酯(以下，有時稱為“aln-319”)代替ys-111作為陽離子性脂質(zhì)，依據(jù)專利文獻1中記載的方法進行合成并使用，除此以外，和實施例32同樣地獲得比較例1的組合物。[化54]<組合物的分析(2)>和實施例29的組合物同樣地，針對實施例32～37及比較例1的組合物，測定sirna向脂質(zhì)復(fù)合物中的封入率及脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑。表2中表示sirna的封入率及脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑(z-平均)。[表2]組合物陽離子性脂質(zhì)封入率(％)平均粒徑(nm)實施例32ys-1119578實施例33ys-1129471實施例34ys-1138870實施例35ys-1148673實施例36ys-1159568實施例37ys-1169172比較例1aln-3199677<組合物的制備(3)>[實施例38](ys-117)使用實施例11的陽離子性脂質(zhì)(ys-117)而制備組合物。作為核酸，使用和實施例29的組合物所使用者相同的factorviisirna。將factorviisirna利用25mm醋酸鈉(ph值4.0)溶解為108μg/ml，而制成sirna稀釋液。另外，將陽離子性脂質(zhì)(ys-111)、dspc(日本精化股份有限公司)、膽固醇(日本精化股份有限公司)、mpeg2000-dmg(日油股份有限公司)以60/8.5/30/1.5(摩爾比)的比例且以總脂質(zhì)濃度為6mm的方式溶解到乙醇中，而制成脂質(zhì)溶液。將sirna稀釋液與脂質(zhì)溶液分別以2.4ml/分鐘、1.29ml/分鐘的流速進行混合，進而將25mm醋酸鈉(ph值4.0)以9.25ml/分鐘的流速進行混合，由此獲得脂質(zhì)復(fù)合物水溶液。將所獲得的脂質(zhì)復(fù)合物水溶液供于使用透析膜(商品名“float-a-lyzerg2”、美國斯百全(spectrum)公司、50kmwco)的透析，將外液換成磷酸緩沖液(pbs、ph值7.5)。透析后，進行濃縮及過濾滅菌，而獲得實施例38的組合物。[實施例39](ys-117s)使用實施例12的陽離子性脂質(zhì)(ys-117s)代替ys-117作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例38同樣地獲得實施例39的組合物。[實施例40](ys-118)使用實施例13的陽離子性脂質(zhì)(ys-118)代替ys-117作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例38同樣地獲得實施例40的組合物。[實施例41](ys-118s)使用實施例14的陽離子性脂質(zhì)(ys-118s)代替ys-117作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例38同樣地獲得實施例41的組合物。[實施例42](ys-119)使用實施例4的陽離子性脂質(zhì)(ys-119)代替ys-117作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例38同樣地獲得實施例42的組合物。<組合物的分析(3)>和實施例29的組合物同樣地，針對實施例38～42的組合物，測定sirna向脂質(zhì)復(fù)合物中的封入率及脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑。表3中表示sirna的封入率及脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑(z-平均)。[表3]組合物陽離子性脂質(zhì)封入率(％)平均粒徑(nm)實施例38ys-11758110實施例39ys-117s65126實施例40ys-1187474實施例41ys-118s7371實施例42ys-1197772<組合物的制備(4)>[實施例43](ys-119)使用實施例4的陽離子性脂質(zhì)(ys-119)而制備組合物。作為核酸，使用和實施例29的組合物所使用者相同的factorviisirna。將factorviisirna利用25mm醋酸鈉(ph值4.0)溶解為108μg/ml，而制成sirna稀釋液。另外，將陽離子性脂質(zhì)(ys-119)、dspc(日本精化股份有限公司)、膽固醇(日本精化股份有限公司)、mpeg2000-dmg(日油股份有限公司)以60/8.5/30/1.5(摩爾比)的比例且以總脂質(zhì)濃度為6mm的方式溶解到乙醇中，而制成脂質(zhì)溶液。將sirna稀釋液與脂質(zhì)溶液分別以1.80ml/分鐘、0.97ml/分鐘的流速進行混合，進而將25mm醋酸鈉(ph值4.0)以6.94ml/分鐘的流速進行混合，由此獲得脂質(zhì)復(fù)合物水溶液。將所獲得的脂質(zhì)復(fù)合物水溶液供于使用透析膜(商品名“float-a-lyzerg2”、美國斯百全(spectrum)公司、50kmwco)的透析，將外液換成磷酸緩沖液(pbs、ph值7.5)。透析后，進行濃縮及過濾滅菌，而獲得實施例43的組合物。[比較例2](aln-319)使用所述aln-319代替ys-119作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例43同樣地獲得比較例2的組合物。<組合物的分析(4)>和實施例29的組合物同樣地，針對實施例43及比較例2的組合物，測定sirna向脂質(zhì)復(fù)合物中的封入率及脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑(z-平均)。表4中表示sirna的封入率及脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑。[表4]組合物陽離子性脂質(zhì)封入率(％)平均粒徑(nm)實施例43ys-1198894比較例2aln-3197595<組合物的制備(5)>[實施例44](ys-119)使用實施例4的陽離子性脂質(zhì)(ys-119)而制備組合物。作為核酸，使用和實施例29的組合物所使用者相同的factorviisirna。將factorviisirna利用25mm醋酸鈉(ph值4.0)溶解為216μg/ml，而制成sirna稀釋液。另外，將陽離子性脂質(zhì)(ys-119)、膽固醇(日本精化股份有限公司)、mpeg2000-dpg(日油股份有限公司)以60/38.5/1.5(摩爾比)的比例且以總脂質(zhì)濃度為6mm的方式溶解到乙醇中，而制成脂質(zhì)溶液。將sirna稀釋液與脂質(zhì)溶液分別以3.36ml/分鐘、1.81ml/分鐘的流速進行混合，進而將25mm醋酸鈉(ph值4.0)以12.95ml/分鐘的流速進行混合，由此獲得脂質(zhì)復(fù)合物水溶液。將所獲得的脂質(zhì)復(fù)合物水溶液供于使用透析膜(商品名“float-a-lyzerg2”、美國斯百全(spectrum)公司、50kmwco)的透析，將外液換成磷酸緩沖液(pbs、ph值7.5)。透析后，進行濃縮及過濾滅菌，而獲得實施例44的組合物。[實施例45](ys-120)使用實施例15的陽離子性脂質(zhì)(ys-120)代替ys-119作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例44同樣地獲得實施例45的組合物。<組合物的分析(5)>和實施例29的組合物同樣地，針對實施例44及45的組合物，測定sirna向脂質(zhì)復(fù)合物中的封入率及脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑(z-平均)。表5中表示sirna的封入率及脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑。[表5]組合物陽離子性脂質(zhì)封入率(％)平均粒徑(nm)實施例44ys-1199680實施例45ys-1209479<組合物的制備(6)>[實施例46](ys-120)使用實施例16的陽離子性脂質(zhì)(ys-120)而制備組合物。作為核酸，使用和實施例29的組合物所使用者相同的factorviisirna。將factorviisirna利用25mm醋酸鈉(ph值4.0)溶解為450μg/ml，而制成sirna稀釋液。另外，將陽離子性脂質(zhì)(ys-120)、dspc(日本精化股份有限公司)、膽固醇(日本精化股份有限公司)、mpeg2000-dmg(日油股份有限公司)以60/8.5/30/1.5(摩爾比)的比例且以總脂質(zhì)濃度為40mm的方式溶解到乙醇中，而制成脂質(zhì)溶液。將脂質(zhì)相對于sirna的比設(shè)為質(zhì)量比0.06，將sirna稀釋液與脂質(zhì)溶液分別以4.0ml/分鐘、1.3ml/分鐘的流速進行混合，由此獲得脂質(zhì)復(fù)合物水溶液。將所獲得的脂質(zhì)復(fù)合物水溶液供于使用透析膜(商品名“float-a-lyzerg2”、美國斯百全(spectrum)公司、50kmwco)的透析，將外液換成磷酸緩沖液(pbs、ph7.4)。透析后，進行濃縮及過濾滅菌，而獲得實施例46的組合物。[實施例47](ys-121)使用實施例17的陽離子性脂質(zhì)(ys-121)代替ys-120作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例46同樣地獲得實施例47的組合物。[實施例48](ys-122)使用實施例18的陽離子性脂質(zhì)(ys-122)代替ys-120作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例46同樣地獲得實施例48的組合物。[實施例49](ys-123)使用實施例19的陽離子性脂質(zhì)(ys-123)代替ys-120作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例46同樣地獲得實施例49的組合物。[實施例50](ys-124)使用實施例20的陽離子性脂質(zhì)(ys-124)代替ys-120作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例46同樣地獲得實施例50的組合物。[實施例51](ys-125)使用實施例21的陽離子性脂質(zhì)(ys-125)代替ys-120作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例46同樣地獲得實施例51的組合物。[實施例52](ys-126)使用實施例22的陽離子性脂質(zhì)(ys-126)代替ys-120作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例46同樣地獲得實施例52的組合物。<組合物的分析(6)>和實施例29的組合物同樣地，針對實施例46～52的組合物，測定sirna向脂質(zhì)復(fù)合物中的封入率及脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑(z-平均)。表6中表示sirna的封入率及脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑。[表6]組合物陽離子性脂質(zhì)封入率(％)平均粒徑(nm)實施例46ys-1209964實施例47ys-1218474實施例48ys-1229866實施例49ys-1239961實施例50ys-1249964實施例51ys-1249663實施例52ys-1259963<組合物的分析(7)>將實施例46～52的組合物在密閉的玻璃小瓶中在4℃下保管，和實施例29的組合物同樣地測定保管前、保管后第3個月及第6個月的粒徑(z-平均及多分散指數(shù))。表7中表示實施例46～52的組合物的平均粒徑的隨時間經(jīng)過而產(chǎn)生的變化及保管后第6個月和保管前的粒徑變化(d)。包含ys-121以外的陽離子性脂質(zhì)的組合物在保管期間顯示出脂質(zhì)復(fù)合物的粒徑的增大得到抑制。[表7]<組合物的制備(7)>[實施例53](ys-120)和“組合物的制備(6)”同樣地使用實施例16的陽離子性脂質(zhì)(ys-120)而制備組合物。[實施例54](ys-124)使用實施例23的陽離子性脂質(zhì)(ys-127)代替ys-120作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例53同樣地獲得實施例54的組合物。[比較例3](aln-319)使用所述aln-319代替ys-120作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例53同樣地獲得比較例3的組合物。<組合物的分析(8)>和實施例29的組合物同樣地，針對實施例53、54及比較例3的組合物，測定sirna向脂質(zhì)復(fù)合物中的封入率及脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑(z-平均)。表8中表示sirna的封入率及脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑。[表8]組合物陽離子性脂質(zhì)封入率(％)平均粒徑(nm)實施例53ys-1209766實施例54ys-1249667比較例3aln-3199895<組合物的分析(9)>針對實施例53、54及比較例3的組合物，在各組合物的制備中通過sirna稀釋液和脂質(zhì)溶液的混合而產(chǎn)生脂質(zhì)復(fù)合物后，立即將該脂質(zhì)復(fù)合物在pbs中進行透析后，在密閉的玻璃小瓶中在4℃下保管后，利用粒徑測定裝置(商品名“zetasizernanozs”、英國馬爾文(malvern)公司制造)測定第2個月及第6個月的粒徑(z-平均及多分散指數(shù))。表9中表示實施例53、54及比較例3的組合物的平均粒徑的隨時間經(jīng)過而產(chǎn)生的變化及保管后第6個月和剛混合后的粒徑變化(d)。包含ys-120或ys-124的陽離子性脂質(zhì)的組合物和比較例3的組合物相比，在保管期間中顯示出脂質(zhì)復(fù)合物的粒徑的增大得到抑制。[表9]<組合物的制備(8)>[實施例55](ys-120)和“組合物的制備(6)”同樣地使用實施例16的陽離子性脂質(zhì)(ys-120)而制備組合物。[實施例56](ys-127)使用實施例23的陽離子性脂質(zhì)(ys-127)代替ys-120作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例55同樣地獲得實施例56的組合物。[實施例57](ys-128)使用實施例24的陽離子性脂質(zhì)(ys-128)代替ys-120作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例55同樣地獲得實施例57的組合物。[實施例58](ys-129)使用實施例25的陽離子性脂質(zhì)(ys-129)代替ys-120作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例55同樣地獲得實施例58的組合物。<組合物的分析(10)>和實施例29的組合物同樣地，針對實施例55～58的組合物，測定sirna向脂質(zhì)復(fù)合物中的封入率及脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑(z-平均)。表10中表示sirna的封入率及脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑。[表10]組合物陽離子性脂質(zhì)封入率(％)平均粒徑(nm)實施例55ys-1208763實施例56ys-1277280實施例57ys-1288465實施例58ys-1297661<組合物的制備(9)>[實施例59](ys-101)和“組合物的制備(6)”同樣地使用實施例2的陽離子性脂質(zhì)(ys-101)而制備組合物。[實施例60](ys-131)使用實施例26的陽離子性脂質(zhì)(ys-131)代替ys-101作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例59同樣地獲得實施例60的組合物。[實施例61](ys-132)使用實施例27的陽離子性脂質(zhì)(ys-132)代替ys-101作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例59同樣地獲得實施例61的組合物。[實施例62](ys-133)使用實施例28的陽離子性脂質(zhì)(ys-133)代替ys-101作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例59同樣地獲得實施例62的組合物。[實施例63](ys-120)使用實施例16的陽離子性脂質(zhì)(ys-120)代替ys-101作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例59同樣地獲得實施例63的組合物。[比較例4](aln-319)使用所述aln-319代替ys-101作為陽離子性脂質(zhì)，除此以外，和實施例59同樣地獲得比較例4的組合物。<組合物的分析(11)>和實施例29的組合物同樣地，針對實施例59～63及比較例4的組合物，測定sirna向脂質(zhì)復(fù)合物中的封入率及脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑(z-平均)。表11中表示sirna的封入率及脂質(zhì)復(fù)合物的平均粒徑。[表11]組合物陽離子性脂質(zhì)封入率(％)平均粒徑(nm)實施例59ys-1019670實施例60ys-1319275實施例61ys-1329574實施例62ys-1339871實施例63ys-1209770比較例4aln-3199776<動物實驗(1)>將實施例29～31及參考例1的組合物以封入到脂質(zhì)復(fù)合物中的factorviisirna濃度為10μg/ml的方式利用pbs進行稀釋。將各組合物以10ml/kg的投予容量對c57/bl6小鼠(5周齡、雄性)進行尾靜脈內(nèi)投予，從投予起24小時后在麻醉下實施采血及肝臟的采集。通過離心將血漿從血液分離，利用市售的試劑盒(商品名“biophenfvii”、hyphenbiomed公司)對血漿中的factorvii蛋白質(zhì)濃度進行定量。作為陰性對照，對投予了pbs的組群進行相同處理。將pbs投予組的factorvii蛋白質(zhì)濃度設(shè)為100％，以相對值算出組合物投予組的factorvii蛋白質(zhì)濃度。另外，將肝臟均質(zhì)化，利用甲醇萃取構(gòu)成組合物的脂質(zhì)后，通過lc-ms對陽離子性脂質(zhì)進行定量。將所投予的陽離子性脂質(zhì)的量設(shè)為100％，以相對值算出肝臟中殘存的陽離子性脂質(zhì)的量。將結(jié)果示于表12。[表12]<動物實驗(2)>將實施例32～37及比較例1的組合物與“動物實驗(1)”同樣地進行稀釋，并對c57/bl6小鼠(5周齡、雄性)進行投予，算出投予24小時后的血漿中的factorvii蛋白質(zhì)濃度的相對值及肝臟中殘存的陽離子性脂質(zhì)量的相對值。將結(jié)果示于表13。[表13]<動物實驗(3)>將實施例38～42的組合物和“動物實驗(1)”同樣地進行稀釋，并對c57/bl6小鼠(5周齡、雄性)進行投予，算出投予24小時后的血漿中的factorvii蛋白質(zhì)濃度的相對值及肝臟中殘存的陽離子性脂質(zhì)量的相對值。將結(jié)果示于表14。[表14]<動物實驗(4)>將實施例43及比較例2的組合物以封入到脂質(zhì)復(fù)合物中的factorviisirna濃度為1μg/ml或5μg/ml的方式利用pbs進行稀釋。將各組合物以10ml/kg的投予容量對c57/bl6小鼠(5周齡、雄性)進行尾靜脈內(nèi)投予，從投予起24小時后在麻醉下實施采血及肝臟的采集。通過離心將血漿從血液分離，利用市售的試劑盒(商品名“biophenfvii”、hyphenbiomed公司)對血漿中的factorvii蛋白質(zhì)濃度進行定量。作為陰性對照，對投予了pbs的組群進行相同處理。將pbs投予組的factorvii蛋白質(zhì)濃度設(shè)為100％，以相對值算出組合物投予組的factorvii蛋白質(zhì)濃度。將結(jié)果示于表15及圖1。實施例43的組合物顯示出高于比較例2的組合物的factorvii蛋白質(zhì)的表達抑制效果。[表15]<動物實驗(5)>將實施例44及45的組合物以封入到脂質(zhì)復(fù)合物中的factorviisirna濃度為1μg/ml或5μg/ml的方式利用pbs進行稀釋。將各組合物以10ml/kg的投予容量對c57/bl6小鼠(5周齡、雄性)進行尾靜脈內(nèi)投予，從投予起24小時后在麻醉下實施采血及肝臟的采集。通過離心將血漿從血液分離，利用市售的試劑盒(商品名“biophenfvii”、hyphenbiomed公司)對血漿中的factorvii蛋白質(zhì)濃度進行定量。作為陰性對照，對投予了pbs的組群進行相同處理。將pbs投予組的factorvii蛋白質(zhì)濃度設(shè)為100％，以相對值算出組合物投予組的factorvii蛋白質(zhì)濃度。將結(jié)果示于表16及圖2。實施例44及45的組合物均顯示出較高的factorvii蛋白質(zhì)的表達抑制效果。[表16]<動物實驗(6)>將實施例46～52的組合物和“動物實驗(5)”同樣地進行稀釋，并對c57/bl6小鼠(5周齡、雄性)進行投予，算出投予24小時后的血漿中的factorvii蛋白質(zhì)濃度的相對值。將結(jié)果示于表17。[表17]<動物實驗(7)>將實施例53、54及比較例3的組合物以封入到脂質(zhì)復(fù)合物中的factorviisirna濃度為2μg/ml或10μg/ml的方式利用pbs進行稀釋。將各組合物以10ml/kg的投予容量對icr小鼠(6周齡、雌性)進行尾靜脈內(nèi)投予，從投予起24小時后在麻醉下實施采血及肝臟的采集。通過離心將血漿從血液分離，利用市售的試劑盒(商品名“biophenfvii”、hyphenbiomed公司)對血漿中的factorvii蛋白質(zhì)濃度進行定量。作為陰性對照，對投予了pbs的組群進行相同處理。將pbs投予組的factorvii蛋白質(zhì)濃度設(shè)為100％，以相對值算出組合物投予組的factorvii蛋白質(zhì)濃度。將結(jié)果示于表18。實施例53及54的組合物顯示出高于比較例3的組合物的factorvii蛋白質(zhì)的表達抑制效果。[表18]<動物實驗(8)>將實施例55～58的組合物和“動物實驗(7)”同樣地進行稀釋，并對icr小鼠(6周齡、雌性)進行投予，算出投予24小時后的血漿中的factorvii蛋白質(zhì)濃度的相對值。將結(jié)果示于表19。[表19]<動物實驗(9)>將實施例59～63及比較例4的組合物和“動物實驗(7)”同樣地進行稀釋，并對icr小鼠(5周齡、雌性)進行投予，算出投予24小時后的血漿中的factorvii蛋白質(zhì)濃度的相對值。將結(jié)果示于表20。[表20][產(chǎn)業(yè)上的利用可能性]根據(jù)本發(fā)明，可提供能夠?qū)⒑怂岣咝实蒯尫诺郊毎|(zhì)中的陽離子性脂質(zhì)。當(dāng)前第1頁12