本發(fā)明屬于生物工程技術領域,具體涉及一種抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方。
背景技術:
抗菌肽是生物體內(nèi)經(jīng)誘導產(chǎn)生的一種具有生物活性的小分子多肽,這類活性多肽多數(shù)具有堿性、熱穩(wěn)定性以及廣譜抗菌等特點。與抗生素相比,對人和動物正常細胞無傷害,無副作用、無殘留,在醫(yī)藥抗菌領域、食品防腐保鮮領域以及飼料添加劑領域中有著廣闊的應用前景。
但是,目前對于抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基在工業(yè)化生產(chǎn)過程中存在很多問題,如成本高,抗菌肽與培養(yǎng)基組分不易分離、發(fā)酵過程中產(chǎn)生的氣泡使發(fā)酵過程不易控制、培養(yǎng)基中的不溶性成分的存在消毒困難、發(fā)酵周期較長等問題,因此培養(yǎng)基的問題成為長期以來制約抗菌肽大規(guī)模應用的一個障礙,國內(nèi)外專家學者對研究開發(fā)新的抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基日趨關注。申請公布號為CN103333937A、公布日為2013年10月2日的專利公開了一種利用枯草芽抱桿菌制備抗菌肽的工藝方法。通過液體種子制備、發(fā)酵液制備、發(fā)酵液預處理、抗菌肽提取與精制、抗菌肽干粉制備等工藝方法制備高純抗菌肽成品,發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)基組成為:豆粕粉1-2g,玉米粉0.5-lg,麥芽糖0.5g,可溶性淀粉0.5-0.7g,葡萄糖0.7-lg,硫酸按0.3g,硝酸按0.2g,蛋白陳0.4-lg,牛肉膏0.5g,NaCl0.5g,KH2P040.1g, MgS04·7H2O 0.04g。其中的豆粕粉和玉米粉為不溶性物質,會引起培養(yǎng)基的渾濁,培養(yǎng)周期時間為60-62小時,培養(yǎng)周期較長。
技術實現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的在于提供一種抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方,該抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方解決現(xiàn)有培養(yǎng)基在發(fā)酵過程中易產(chǎn)生氣泡,成本高,不易滅菌、發(fā)酵周期長和含量低的問題。
為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用的技術方案如下:
本發(fā)明提供了一種抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方,它是由如下質量百分比的組分組成:豆粕0.5%-2%、玉米漿干粉0.1%-1%、蛋白胨1%-3%、生物氮源1%-3%、酵母膏1%-3%、蔗糖0.1%-1%、磷酸二氫鉀0.1%-0.5%,余量為水。
根據(jù)上述的抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方,它是由如下質量百分比的組分組成:豆粕0.5%-1.2%、玉米漿干粉0.45%-1%、蛋白胨1%-2%、生物氮源2.2%-3%、酵母膏1%-1.8%、蔗糖0.1%-0.6%、磷酸二氫鉀0.25%-0.5%,余量為水。
根據(jù)上述的抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方,它是由如下質量百分比的組分組成:豆粕1.21%-2%、玉米漿干粉0.1%-0.44%、蛋白胨2.1%-3%、生物氮源1%-2.1%、酵母膏1.9%-3%、蔗糖0.7%-1%、磷酸二氫鉀0.1%-0.2%,余量為水。
根據(jù)上述的抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方,它是由如下質量百分比的組分組成:豆粕1%、玉米漿干粉0.5%、蛋白胨2%、生物氮源2%、酵母膏2%、蔗糖0.5%、磷酸二氫鉀0.2%,余量為水。
根據(jù)上述的抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方,所述生物氮源主要由氨基酸、維生素和礦物質組成。
所述生物氮源的成分中干物質大于70%,總氮大于8%,氨基酸態(tài)氮大于2%,灰分小于15%,pH值 5.0-6.5。
與現(xiàn)有技術相比,本發(fā)明的有益效果:
該發(fā)酵生產(chǎn)處方使用的原材料成本低,便于滅菌,不易產(chǎn)生泡沫,發(fā)酵過程易控制,有利于抗菌肽提取,發(fā)酵菌含量提高了約20%以上,發(fā)酵周期縮短了6-8小時。
具體實施方式
以下實施例旨在進一步說明本發(fā)明的內(nèi)容,但不限制本發(fā)明的保護范圍。
以下原料豆粕、玉米漿干粉、蛋白胨、生物氮源、酵母膏、蔗糖、磷酸二氫鉀均為市售;生物氮源的廠家為徐州市為天科技有限公司,產(chǎn)品的型號:A型。
實施例1
將一種抗菌肽菌種接種于發(fā)酵培養(yǎng)基上,抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方,它是由如下質量百分比的組分組成:豆粕0.5%-2%、玉米漿干粉0.1%-1%、蛋白胨1%-3%、生物氮源1%-3%、酵母膏1%-3%、蔗糖0.1%-1%、磷酸二氫鉀0.1%-0.5%,余量為水。
工業(yè)上將菌種接種到本發(fā)明配方的培養(yǎng)基上進行發(fā)酵的工藝條件為:發(fā)酵溫度34-36℃,通氣比1:05、罐壓0.01-0.03MPa、攪拌轉速120-150轉/分、PH6-7.5、發(fā)酵周期16小時,可得抗菌肽含量2000微克/毫升-2510微克/毫升的發(fā)酵液。
實施例2
將一種抗菌肽菌種接種于發(fā)酵培養(yǎng)基上,抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方,它是由如下質量百分比的組分組成:豆粕1%、玉米漿干粉0.5%、蛋白胨2%、生物氮源2%、酵母膏2%、蔗糖0.5%、磷酸二氫鉀0.2%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例3
將一種抗菌肽菌種接種于發(fā)酵培養(yǎng)基上,抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方,它是由如下質量百分比的組分組成:豆粕0.5%、玉米漿干粉1%、蛋白胨1%、生物氮源3%、酵母膏1%、蔗糖1%、磷酸二氫鉀0.1%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例4
將一種抗菌肽菌種接種于發(fā)酵培養(yǎng)基上,抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方,它是由如下質量百分比的組分組成:豆粕0.6%、玉米漿干粉0.9%、蛋白胨1.2%、生物氮源2.8%、酵母膏1.5%、蔗糖0.8%、磷酸二氫鉀0.2%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例5
將一種抗菌肽菌種接種于發(fā)酵培養(yǎng)基上,抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方,它是由如下質量百分比的組分組成:豆粕0.7%、玉米漿干粉0.7%、蛋白胨1.8%、生物氮源2.5%、酵母膏1.6%、蔗糖0.6%、磷酸二氫鉀0.3%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例6
將一種抗菌肽菌種接種于發(fā)酵培養(yǎng)基上,抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方,它是由如下質量百分比的組分組成:豆粕0.9%、玉米漿干粉0.6%、蛋白胨2.0%、生物氮源2.2%、酵母膏1.8%、蔗糖0.7%、磷酸二氫鉀0.4%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例7
將一種抗菌肽菌種接種于發(fā)酵培養(yǎng)基上,抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方,它是由如下質量百分比的組分組成:豆粕1.0%、玉米漿干粉0.5%、蛋白胨2.2%、生物氮源2%、酵母膏1.9%、蔗糖0.8%、磷酸二氫鉀0.45%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例8
將一種抗菌肽菌種接種于發(fā)酵培養(yǎng)基上,抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方,它是由如下質量百分比的組分組成:豆粕1.2%、玉米漿干粉0.4%、蛋白胨2.4%、生物氮源1.8%、酵母膏2.1%、蔗糖0.9%、磷酸二氫鉀0.35%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例9
將一種抗菌肽菌種接種于發(fā)酵培養(yǎng)基上,抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方,它是由如下質量百分比的組分組成:豆粕1.4%、玉米漿干粉0.3%、蛋白胨2.6%、生物氮源1.6%、酵母膏2.3%、蔗糖1%、磷酸二氫鉀0.5%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例10
將一種抗菌肽菌種接種于發(fā)酵培養(yǎng)基上,抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方,它是由如下質量百分比的組分組成:豆粕1.5%、玉米漿干粉0.2%、蛋白胨2.8%、生物氮源1.5%、酵母膏2.5%、蔗糖0.8%、磷酸二氫鉀0.3%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例11
將一種抗菌肽菌種接種于發(fā)酵培養(yǎng)基上,抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方,它是由如下質量百分比的組分組成:豆粕1.8%、玉米漿干粉0.5%、蛋白胨2.9%、生物氮源1.3%、酵母膏2.7%、蔗糖0.6%、磷酸二氫鉀0.2%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例12
將一種抗菌肽菌種接種于發(fā)酵培養(yǎng)基上,抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基處方,它是由如下質量百分比的組分組成:豆粕2%、玉米漿干粉0.1%、蛋白胨3%、生物氮源1%、酵母膏3%、蔗糖0.1%、磷酸二氫鉀0.5%,余量為水。
本實施例的發(fā)酵工藝條件與實施例1相同。
實施例2~12培養(yǎng)得到的產(chǎn)品用于檢測,本發(fā)明的發(fā)酵液含量是用高效液相色譜儀檢測,每隔2個小時測試一次,直至抗菌肽含量不再增長為發(fā)酵的截止時間,可得抗菌肽含量2000微克/毫升-2510微克/毫升的發(fā)酵液。