1.一種鱘魚(yú)軟骨提取物的提取方法,其特征在于:包括以下步驟:
a、將鱘魚(yú)加水煮熟,剔除鱘魚(yú)上的魚(yú)肉雜質(zhì),烘干,將軟骨進(jìn)行粉碎,粉碎后軟骨粉末轉(zhuǎn)至燒杯中,加入95%乙醇浸泡24h,去乙醇,軟骨重復(fù)用95%乙醇浸泡一次;50℃鼓風(fēng)干燥脫脂后的鱘魚(yú)軟骨,備用;
b、將上述鱘魚(yú)軟骨進(jìn)行堿解,堿解溫度為40℃,堿解時(shí)間為3h,堿解溶液用量為鱘魚(yú)軟骨重量的6倍,堿解后將溶液調(diào)pH至中性,冷卻離心,獲得堿解液;
c、接著對(duì)堿解液進(jìn)行鹽解,鹽解時(shí)間20min,鹽解溫度90℃,鹽解后將其冷卻離心;
d、接著離心后的鹽解液進(jìn)行酶解,酶解pH8.5-8.9,酶解時(shí)間2.5h,酶解溫度40±2℃,酶解后,將酶解溫度調(diào)至80℃,加熱15min,使酶失活,冷卻離心,獲得酶解溶液;
e、將酶解溶液加入95%乙醇,體積比為酶解溶液:95%乙醇=1:3,邊加入邊攪拌;然后靜置沉淀1h,去除上清液,加入3wt.%NaCl至沉淀溶解,再按溶液:乙醇=1:3的體積比加入95%乙醇,邊加邊攪拌;然后靜置沉淀1h,去除上清液,所得沉淀物置于50℃減壓干燥箱干燥,粉碎,得到鱘魚(yú)軟骨提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鱘魚(yú)軟骨提取物提取方法,其特征在于:所述的步驟b、c、d中所用離心條件為3000rpm,10min。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鱘魚(yú)軟骨提取物提取方法,其特征在于:所述的步驟b中所用堿為NaOH,堿濃度為5wt.%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鱘魚(yú)軟骨提取物提取方法,其特征在于:所述的步驟c中所用鹽為NaCl,加入NaCl使溶液中的鹽質(zhì)量濃度為4%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鱘魚(yú)軟骨提取物提取方法,其特征在于:所述的步驟d中所用酶為胰酶,酶活力為200U,加入胰蛋白酶粉使溶液中的胰蛋白酶質(zhì)量濃度為0.4%。
6.如權(quán)利要求1所述的方法制備獲得的鱘魚(yú)軟骨提取物。
7.如權(quán)利要求6所述的鱘魚(yú)軟骨提取物在制備促創(chuàng)面愈合藥物中的應(yīng)用。