1.一種放線菌素衍生物新放線菌素A,其結(jié)構(gòu)如式Ⅰ所示:
2.權(quán)利要求1所述新放線菌素A的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)將生物保藏編號(hào)為CGMCC No.13680的海洋放線菌鏈霉菌IMB094菌種接種于配方為淀粉-葡萄糖-棉籽餅粉-蛋白胨-無機(jī)鹽的發(fā)酵培養(yǎng)基,在搖瓶中,28℃,搖床培養(yǎng)120h;
(2)鏈霉菌IMB094發(fā)酵液經(jīng)固液分離后得到濾液和菌絲體;菌絲體用丙酮超聲提取,得到菌絲體丙酮提取物;濾液經(jīng)過大孔吸附樹脂柱吸附,依次用水、丙酮洗脫;丙酮洗脫部分與菌絲體丙酮提取物合并,減壓濃縮除去丙酮后得到發(fā)酵液浸膏;
(3)取發(fā)酵液浸膏,經(jīng)正相硅膠柱色譜分離,依次用二氯甲烷-甲醇=50:1-0:100進(jìn)行梯度洗脫,得到10個(gè)組分F1-F10;取餾分F5(20:1洗脫),F(xiàn)6(9:1洗脫)和F7(9:1洗脫)分別經(jīng)過色譜柱色譜分離,用甲醇洗脫,然后經(jīng)HPLC制備得到含有式Ⅰ所示化合物的混合物,混合物經(jīng)過HPLC進(jìn)行純化得到式I所示化合物。
3.權(quán)利要求1所述新放線菌素A的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)將生物保藏編號(hào)為CGMCC 13680的海洋放線菌鏈霉菌IMB094菌種接種于配方為淀粉-葡萄糖-棉籽餅粉-蛋白胨-無機(jī)鹽的發(fā)酵培養(yǎng)基,在搖瓶中,28℃,搖床培養(yǎng)120h;
(2)鏈霉菌IMB094發(fā)酵液經(jīng)固液分離后得到濾液和菌絲體;菌絲體用丙酮超聲提取,得到菌絲體丙酮提取物;濾液經(jīng)過XAD-7HP大孔吸附樹脂柱吸附,依次用水、50%、90%丙酮洗脫;50%、90%丙酮洗脫部分與菌絲體丙酮提取物合并,減壓濃縮除去丙酮后得到發(fā)酵液浸膏;
(3)取發(fā)酵液浸膏,經(jīng)正相硅膠柱色譜分離,依次用二氯甲烷-甲醇(50:1-0:100)梯度洗脫,得到10個(gè)組分F1-F10;取餾分F5,F(xiàn)6和F7分別經(jīng)過Sephadex LH-20柱色譜柱色譜分離,用90%甲醇洗脫,然后經(jīng)HPLC分離得到混合物,將混合物經(jīng)HPLC進(jìn)行純化,收集高分辨電噴霧質(zhì)譜準(zhǔn)分子離子峰m/z1339.6542的峰得到式I所示化合物。
4.權(quán)利要求1所述新放線菌素A的制備方法,其特征在于,
步驟(3)中:
餾分F4、F5為二氯甲烷-甲醇(20:1)依次洗脫4.0L得到,餾分F6、F7為二氯甲烷-甲醇(9:1)依次洗脫4.5L得到。
5.權(quán)利要求1所述新放線菌素A的制備方法,其特征在于,
步驟(3)中,第1次HPLC分離純化過程如下:
C-18色譜柱,20mm×250mm,75-100%MeOH線性梯度60min洗脫,10mL/min。
第2次HPLC分離純化過程如下:
C-18色譜柱,10mm×250mm,58%MeCN含0.5%甲酸洗脫,2mL/min。
6.權(quán)利要求1所述新放線菌素A的合成方法,其特征在于,包括以下步驟:
將式III所示的放線菌素D與α-酮戊二酸分別溶解在溶劑中,以水或含水溶劑為反應(yīng)介質(zhì),反應(yīng)得到式Ⅰ所示的化合物,
其中,所述溶劑選自:水、DMSO或甲醇、乙醇等碳鏈≤4的醇類,
其中,反應(yīng)介質(zhì)溶劑選自:水、含水量大于10%以上的混合溶劑,包括但不限于丙酮水溶液、碳鏈≤4的醇溶液、乙腈水溶液。
7.權(quán)利要求1所述新放線菌素A或以其為活性成分的藥物組合物在制備抗耐藥菌中的應(yīng)用。
8.權(quán)利要求1所述新放線菌素A或以其為活性成分的藥物組合物在抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
9.以權(quán)利要求1所述新放線菌素A為活性成分的藥物組合物。
10.一株產(chǎn)生放線菌素衍生物新放線菌素A的產(chǎn)生菌:海洋放線菌鏈霉菌,生物保藏編號(hào)為CGMCC 13680。