海研站菌及其篩選方法與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及廢水處理，尤其是涉及海研站菌及其篩選方法與應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 鉻是一種廣泛應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)的重金屬元素。據(jù)中華人民共和國環(huán)境保護(hù)部公布 的2012年中國環(huán)境統(tǒng)計(jì)年報(bào)顯示，2012年，工業(yè)廢水中六價(jià)鉻及總鉻的排放量分別為70. 4 噸和188. 6噸。六價(jià)鉻因具有強(qiáng)氧化性和腐蝕性，又有透過生物膜的作用，容易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi) 對(duì)人體有很強(qiáng)的毒性作用，其毒性比三價(jià)鉻毒性大100倍。國際癌癥研宄機(jī)構(gòu)（IARC)及美 國政府工業(yè)衛(wèi)生學(xué)家協(xié)會(huì)（ACGIH)均已經(jīng)確定六價(jià)鉻化合物具有致癌性。因此，研宄其處 理技術(shù)對(duì)生態(tài)環(huán)境保護(hù)和人類健康意義重大。
[0003] 傳統(tǒng)的物理化學(xué)處理廢水方法主要有沉淀、吸附、電解、膜分離等。但這些方法普 遍存在投資成本高、二次污染、對(duì)痕量重金屬處理效果差等缺點(diǎn)。隨著分子生物學(xué)、基因工 程技術(shù)的發(fā)展，在重金屬廢水治理應(yīng)用中，生物技術(shù)顯現(xiàn)出巨大發(fā)展?jié)摿Γ揖哂谐杀镜汀?效益尚、不造成 >次污染等優(yōu)點(diǎn)。
[0004] 研宄表明，微生物能通過各種機(jī)制達(dá)到對(duì)重金屬的抗性和去除作用。當(dāng)海洋環(huán)境 中存在高濃度重金屬的情況下，某些微生物仍能夠存活并生長，表現(xiàn)出對(duì)重金屬的抗性；有 些微生物還能通過轉(zhuǎn)化或者生理代謝活動(dòng)使重金屬從高毒狀態(tài)變?yōu)榈投緺顟B(tài)，這種行為稱 為微生物對(duì)重金屬的抗性和解毒機(jī)制。因此采用微生物技術(shù)處理含六價(jià)鉻的工業(yè)廢水具有 廣泛的應(yīng)用前景。近年來，國際上在微生物處理重金屬廢水的研宄中取得了很大進(jìn)展，該技 術(shù)在投資、運(yùn)行、操作管理和金屬回收、廢水回用等方面優(yōu)越于傳統(tǒng)的治理方法，展現(xiàn)出廣 闊的應(yīng)用前景。
[0005] 中國專利CN104163499A公開一株螯臺(tái)球菌在廢水處理中的應(yīng)用，該菌株為螯臺(tái) 球菌（Chelatococcus daeguensis)TADl，保藏編號(hào)為 CGMCC NO. 5226,整臺(tái)球菌 CGMCC5226 用于同步去除廢水中的氮素和六價(jià)鉻。該菌株對(duì)溫度的適應(yīng)具有廣譜性，在30?50°C均 有較高的去除效率，菌株主要將Cr (VI)還原為毒性較小的Cr (III)、部分氮素還原為隊(duì)或 N20,因此該菌株可實(shí)現(xiàn)同步脫除氮素、Cr(VI)、碳素，在污染水體修復(fù)中具有廣闊的應(yīng)用前 景。
[0006] 中國專利CN101429487公開一株對(duì)六價(jià)鉻有還原作用的間孢囊菌Q5-1及其在凈 化廢水中鉻污染方面的應(yīng)用。從湖南一錳礦土壤中分離得到一株對(duì)對(duì)六價(jià)鉻有還原作用的 間孢囊菌Q5-1。該菌株可以將含鉻廢水中的六價(jià)鉻還原為三價(jià)鉻，極大地降低了廢水中鉻 的毒性。該菌株被命名為間孢囊菌Q5-1 (Intrasporangiaceae sp. )Q5-1，是一株新發(fā)現(xiàn)的 鉻還原細(xì)菌，其保藏號(hào)為CCTCC N0:M208239。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的在于提供一種海研站菌（Mesonia sp. )S52。
[0008] 本發(fā)明的第二目的在于提供海研站菌（Mesonia sp. ) S52的篩選方法。
[0009] 本發(fā)明的第三目的在于提供海研站菌（Mesonia sp. ) S52的應(yīng)用。
[0010] 所述海研站菌（Mesonia sp.) S52已于2014年12月4日保藏于中國典型培養(yǎng) 物保藏中心，地址：中國武漢武漢大學(xué)，郵箱430072，保藏中心保藏編號(hào)為：CCTCC NO :M 2014622。所述海研站菌（Mesonia sp.)S52從廈門市翔安區(qū)大嶝島雙滬碼頭附近的近海沉 積物中分離篩選得到。經(jīng)鑒定，所述海研站菌（Mesonia sp.)S52,其16s rDNA序列與模式 菌株]^8〇1113 111〇1^118〖麗 6059(1')00367409 相似性為 93.47%。
[0011] 所述海研站菌（Mesonia sp. )S52的篩選方法，包括以下步驟：
[0012] 1)取2g沉積物加入盛有30mL已滅好菌含5mMCr6+的2216L液體培養(yǎng)基的錐形瓶 中，隨后置于28°C，200r/min恒溫?fù)u床中富集培養(yǎng)7天；
[0013] 2)第一個(gè)富集周期結(jié)束后，取獲得的富集菌液按體積比1 : 30轉(zhuǎn)接到新鮮的 30mL 2216L液體培養(yǎng)基，置于28°C，200r/min恒溫?fù)u床中培養(yǎng)7天；
[0014] 3)第二個(gè)富集周期結(jié)束后，取獲得的菌液按體積比1 : 100轉(zhuǎn)接到新鮮的30mL 2216L液體培養(yǎng)基，置于28°C，200r/min恒溫?fù)u床中培養(yǎng)7天；
[0015] 4)將獲得的富集液按體積比10倍等比稀釋，取10_6、10_7、10_ 8濃度菌液涂布在 2216L固體培養(yǎng)基上，反復(fù)平板劃線，分離純化，最終得到菌株海研站菌（Mesonia sp. )S52。
[0016] 在步驟1)和2)中，所述2216L液體培養(yǎng)基的組成可為：乙酸鈉 lg，蛋白胨10g，酵 母粉2g，普通肉汁0. 5g，檸檬酸三鈉0. 5g，硝酸銨0. 2g，過濾海水1L，pH7. 5?7. 6,磷酸二 氫鉀0. 5g/L，其中，磷酸二氫鉀滅菌后加入，母液100g/L，滅菌后，每升培養(yǎng)基加5ml。
[0017] 在步驟4)中，所述2216L固體培養(yǎng)基的組成可為：乙酸鈉 lg，蛋白胨10g，酵母粉 2g，普通肉汁0. 5g，檸檬酸三鈉0. 5g，硝酸銨0. 2g，過濾海水1L，pH7. 5?7. 6,瓊脂粉15g/ L，磷酸二氫鉀0. 5g/L，其中，磷酸二氫鉀滅菌后加入，母液100g/L，滅菌后，每升培養(yǎng)基加 5ml 〇
[0018] 經(jīng)鑒定，海研站菌（Mesonia sp. ) S52其16s rDNA序列與模式菌株Mesonia mobilis KMM6059 (T) DQ367409相似性為93. 47%，其中Cr6+測量方法采用《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn) 檢驗(yàn)方法金屬指標(biāo)》（GB/T 5750. 6-2006)中所述二苯碳酰二肼分光光度法。
[0019] 本發(fā)明海研站菌（Mesonia sp. ) S52 在 ρΗ7· 6，溫度 28°C，含 Cr6+約 50 μ g/mL 的 2216L液體培養(yǎng)基中，150r/min培養(yǎng)24h，對(duì)Cr6+去除率達(dá)77. 50 %。由此可見，海研站菌 (Mesonia sp. )S52可在制備六價(jià)鉻吸附劑中應(yīng)用，并用于含六價(jià)鉻污染廢水的處理。
【附圖說明】
[0020] 圖1為本發(fā)明的海研站菌（Mesonia sp. )S52的菌落宏觀形態(tài)圖；
[0021] 圖2為本發(fā)明的海研站菌（Mesonia sp. )S52的系統(tǒng)發(fā)育分析樹；
[0022] 圖3為本發(fā)明的海研站菌（Mesonia sp. )S52的24h去除六價(jià)鉻效果圖。
【具體實(shí)施方式】
[0023] 以下結(jié)合實(shí)施例旨在