一種無乳鏈球菌培養(yǎng)基及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
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[0001]本發(fā)明涉及一種培養(yǎng)基，尤其涉及一種無乳鏈球菌培養(yǎng)基及其制備方法。
【背景技術(shù)】
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[0002]奶牛乳房炎是世界奶牛養(yǎng)殖業(yè)中最常見的、危害最大的疾病之一。目前，全世界約有2.2億頭奶牛，其中1/3的奶?；加懈鞣N類型的乳房炎，每年因此而造成的損失高達(dá)350億美元，僅美國的損失就達(dá)20億美元以上，德國為4.5億馬克，其中70%的損失是來自隱性乳房炎引起的產(chǎn)奶量下降。我國奶牛乳房炎發(fā)病率高達(dá)50%左右，每年因隱性乳房炎造成的損失約3.15億元。據(jù)報(bào)道，引起奶牛乳房炎的病原微生物多達(dá)150多種，但較常見的有20多種。其中，金黃色葡萄球菌、鏈球菌，具有國際廣泛性，約占整個(gè)奶牛乳房炎病例的74%，約占我國病例的90%-95%。為此，選用鏈球菌和葡萄球菌作為制苗菌株，但由于葡萄球菌和鏈球菌免疫原性較弱，這給研制有效的乳房炎疫苗帶來困難。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明鑒于當(dāng)前國內(nèi)外對于奶牛乳房炎無乳鏈球菌培養(yǎng)特性研宄較少，為了研制高效的奶牛乳房炎疫苗，提高抗原生產(chǎn)量及免疫原性，對無乳鏈球菌培養(yǎng)基進(jìn)行了優(yōu)化，制備無乳鏈球菌最佳培養(yǎng)基，以期為奶牛乳房炎多聯(lián)苗的深入研宄奠定基礎(chǔ)。
[0004]本發(fā)明目的在于提供一種無乳鏈球菌培養(yǎng)基及其制備方法，能夠有利于其生長，最大程度的培養(yǎng)出最大量的無乳鏈球菌。
[0005]一種無乳鏈球菌培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基組份為:蛋白胨15_25g，酵母浸出粉3_5g，葡萄糖溶液 50-60g，NaCl l_10g，Na2HPO4 l_10g，Na2CO3 l_10g，疊氮鈉 0.5-2.5g，乳清 50_60ml溶于IL水中。
[0006]所述的無乳鏈球菌培養(yǎng)基組份為:蛋白胨20g，酵母浸出粉4g，葡萄糖溶液55g，NaCl 5g，Na2HPO4 5g，Na2CO3 5g，疊氮鈉 1.5g，乳清 55ml 溶于 IL 水中。
[0007]所述的無乳鏈球菌選擇性培養(yǎng)基的制備方法:按量稱取各組份，將蛋白胨、酵母浸出粉、NaCl、Na2HP04、Na2CO3和疊氮鈉溶于水中，滅菌后使用，在無乳鏈球菌生長過程中補(bǔ)加NaOH調(diào)節(jié)pH至7.0，調(diào)整pH值滅菌后再在前述溶液中加入乳清和滅菌的葡萄糖溶液。
[0008]本發(fā)明的有益效果在于:提供的無乳鏈球菌培養(yǎng)基能夠有利于其生長，最大程度的培養(yǎng)出最大量的無乳鏈球菌，為研制高效的奶牛乳房炎疫苗，提高抗原生產(chǎn)量及免疫原性，以期為奶牛乳房炎多聯(lián)苗的深入研宄奠定基礎(chǔ)。
【附圖說明】
[0009]圖1不同培養(yǎng)基對無乳鏈球菌生長的影響曲線【具體實(shí)施方式】:
[0010]為了加深對本發(fā)明的理解，下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳述，該實(shí)施例僅用于解釋本發(fā)明，并不構(gòu)成對本發(fā)明保護(hù)范圍的限定。
[0011]一、制備培養(yǎng)基。
[0012]實(shí)施例一:
[0013]一種無乳鏈球菌培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基組份為:蛋白胨15_25g，酵母浸出粉3_5g，葡萄糖溶液 50-60g，NaCl l_10g，Na2HPO4 l_10g，Na2CO3 l_10g，疊氮鈉 0.5-2.5g，乳清 50_60ml溶于IL水中。
[0014]所述的乳鏈球菌培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基組份為:蛋白胨20g，酵母浸出粉4g，葡萄糖溶液 55g，NaCl 5g，Na2HPO4 1-lOg, Na2CO3 5g，疊氮鈉 1.5g，乳清 55ml 溶于 IL 水中。
[0015]所述的無乳鏈球菌選擇性培養(yǎng)基基制備方法:按量稱取各組份，將蛋白胨、酵母浸出粉、NaCl、Na2HP04、Na2CO3和疊氮鈉溶于水中，滅菌后使用，在無乳鏈球菌生長過程中補(bǔ)加NaOH調(diào)節(jié)pH至7.0，調(diào)整pH值滅菌后再在前述溶液中加入乳清和滅菌的葡萄糖溶液。
[0016]實(shí)施例二:
[0017]一種無乳鏈球菌培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基組份為:蛋白胨20g，酵母浸出粉4g，葡萄糖溶液 55g，NaCl 5g，Na2HPO4 5g，Na2CO3 5g，疊氮鈉 1.5g，乳清 55ml 溶于 IL 水中。
[0018]所述的無乳鏈球菌選擇性培養(yǎng)基基制備方法:按量稱取各組份，將蛋白胨、酵母浸出粉、NaCl、Na2HP04、Na2CO3和疊氮鈉溶于水中，滅菌后使用，在無乳鏈球菌生長過程中補(bǔ)加NaOH調(diào)節(jié)pH至7.0，調(diào)整pH值滅菌后再在前述溶液中加入乳清和滅菌的葡萄糖溶液。
[0019]實(shí)施例二為優(yōu)化的培養(yǎng)基。
[0020]二、接種無乳鏈球菌，進(jìn)行培養(yǎng)基對比。
[0021]分別取培養(yǎng)好的無乳鏈球菌種子液，按2億/ml濃度加入到300ml的肉湯、實(shí)施例二培養(yǎng)基(優(yōu)化培養(yǎng)基)和THB培養(yǎng)基中，放入37°C恒溫振蕩培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)，4h后振蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)至24h終止培養(yǎng)，每間隔2h或4h取樣，用平板計(jì)數(shù)法檢測細(xì)菌數(shù)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種無乳鏈球菌培養(yǎng)基，其特征在于，包括:蛋白胨15-25g，酵母浸出粉3-5g，葡萄糖溶液 50-60g，NaCl l_10g，Na2HPO4 l_10g，Na2CO3 l_10g，疊氮鈉 0.5-2.5g，乳清 50_60ml溶于IL水中。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的無乳鏈球菌培養(yǎng)基，其特征在于，該培養(yǎng)基組份為:蛋白胨20g，酵母浸出粉4g,葡萄糖溶液55g，NaC15g，Na2HPO4 5g，Na2CO3 5g，疊氮鈉1.5g，乳清55ml溶于IL水中。
3.—種權(quán)利要求1或2所述的無乳鏈球菌培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，按量稱取各組份，將蛋白胨、酵母浸出粉、NaCl、Na2HP04、Na2C03和疊氮鈉溶于水中，滅菌后使用，在無乳鏈球菌生長過程中補(bǔ)加NaOH調(diào)節(jié)pH至7.0，調(diào)整pH值滅菌后再在前述溶液中加入乳清和滅菌的葡萄糖溶液。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種無乳鏈球菌培養(yǎng)基及其制備方法，該培養(yǎng)基組份為：蛋白胨15-25g，酵母浸出粉3-5g,葡萄糖溶液50-60g，NaCl1-10g，Na2HPO41-10g，Na2CO31-10g，疊氮鈉0.5-2.5g，乳清50-60ml溶于1L水中，滅菌后使用，在無乳鏈球菌生長過程中補(bǔ)加NaOH調(diào)節(jié)pH至7.0。本發(fā)明提供的無乳鏈球菌培養(yǎng)基能夠有利于其生長，最大程度的培養(yǎng)出最大量的無乳鏈球菌，為研制高效的奶牛乳房炎疫苗,提高抗原生產(chǎn)量及免疫原性,以期為奶牛乳房炎多聯(lián)苗的深入研究奠定基礎(chǔ)。
【IPC分類】C12N1-20, C12R1-46
【公開號(hào)】CN104593286
【申請?zhí)枴緾N201410707038
【發(fā)明人】金京勛
【申請人】蘇州嘉禧蘿生物科技有限公司
【公開日】2015年5月6日
【申請日】2014年11月27日