一種油性漆廢水降解菌及其篩選富集方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于微生物篩選技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種油性漆廢水降解菌及其篩選富集方法。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著國內(nèi)汽車工業(yè)蓬勃發(fā)展,汽車油漆的用量逐年增加,隨之產(chǎn)生的油漆廢水也不容忽視。在汽車油漆噴涂過程中,手工噴涂至少有40% -60%的過噴漆霧飛散,靜電噴涂也會產(chǎn)生10%以上的過噴漆霧,過噴漆霧凝聚下沉通過車間循環(huán)水排出產(chǎn)生油漆廢水。而油性漆廢水主要產(chǎn)生于汽車噴涂的前處理階段,據(jù)統(tǒng)計(jì)到2010年,我國汽車產(chǎn)量達(dá)1000萬輛,汽車保有量達(dá)5200萬輛,若按生產(chǎn)每輛汽車產(chǎn)生油性漆廢水0.5m3計(jì)算,每年要產(chǎn)生500萬m3油性漆廢水。油性漆廢水組分復(fù)雜、污染物濃度高、環(huán)境危害性強(qiáng),這使得油性漆廢水的處理十分困難。
[0003]當(dāng)前油性漆廢水的處理方法主要有混凝沉淀法,通過投加絮凝劑使污染物絮凝沉淀,然后經(jīng)斜板沉淀池裝置等進(jìn)行去除,此法可以有效去除油性漆廢水中的油、高分子樹脂等,但是不能從根本上降解污染物質(zhì);超濾膜法是在靜壓差推動力的作用下,使得油性漆廢水中的溶劑和小的溶質(zhì)粒子從高壓料液側(cè)透過具有選擇透過性的高分子功能超濾膜到低壓側(cè)的濾液,此法可以明顯降低油性漆廢水的濃度,但是操作繁瑣、膜組件壽命不長、成本較高;微電解一化學(xué)氧化法處理油性漆廢水主要是在化學(xué)氧化劑的作用下,使油性漆廢水中的有機(jī)物進(jìn)一步降解為穩(wěn)定的對自然環(huán)境影響小的無機(jī)鹽類,目前該技術(shù)已經(jīng)投入工業(yè)化,但是存在著填料易結(jié)塊、填料更換困難、反應(yīng)器容易堵塞等問題。利用生物法處理油性漆廢水具有能耗低、反應(yīng)條件溫和且效率較高,厭氧過程還可以回收沼氣,更加符合國家節(jié)能減排、可持續(xù)發(fā)展的戰(zhàn)略路線。研宄具有專屬適應(yīng)性微生物的篩選馴化培養(yǎng),對于提高生物反應(yīng)系統(tǒng)的耐受性和穩(wěn)定性,提尚降解效率具有重要意義。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明的首要目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點(diǎn)與不足,提供一種油性漆廢水降解菌。
[0005]本發(fā)明的另一目的在于提供所述的油性漆廢水降解菌的篩選富集方法,該方法有效的提高了油性漆廢水的降解效率。
[0006]本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):一種油性漆廢水降解菌,該菌株為微桿菌(microbacterium sp.)XR001,保藏起始日期為2014年12月23日,保藏編號為CGMCCN0.10237 ;保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC);保藏單位地址為北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號。
[0007]所述的油性漆廢水降解菌的篩選富集方法,包括如下步驟:
[0008](I)制備菌液:將汽車涂裝廢水排污口污泥加入無菌水中,汽車涂裝廢水排污口污泥的濃度為0.08g/mL,搖床避光培養(yǎng)24h,得到菌懸液;在滅菌后的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中接種菌懸液,菌懸液的接種量為無機(jī)鹽培養(yǎng)基體積的5%,搖床避光培養(yǎng)7d,得到菌液;
[0009](2)制備油性漆廢水降解菌系:將葡萄糖加入步驟(I)的菌液中,按菌液體積的5%接種油性漆廢水,搖床避光進(jìn)行傳代培養(yǎng),得到油性漆廢水降解菌系培養(yǎng)液;每次傳代培養(yǎng)時菌液中葡萄糖的量均比上一代減少1/5,油性漆廢水的量均比上一代增加,每次增加量為菌液體積的5%,每次傳代培養(yǎng)7d,傳代培養(yǎng)多五代,最后一代培養(yǎng)時培養(yǎng)基中不再添加葡萄糖;
[0010](3)篩選油性漆廢水降解菌系:往無機(jī)鹽培養(yǎng)基中加入瓊脂,滅菌后,待無機(jī)鹽培養(yǎng)基凝固后加入經(jīng)梯度稀釋的步驟(2)的油性漆廢水降解菌系培養(yǎng)液中并涂布均勻,30°C培養(yǎng)7d,挑取周圍有透明圈的菌落,重復(fù)進(jìn)行接種培養(yǎng)并劃線分離,得到純化的油性漆廢水降解菌系;
[0011](4)對純化的油性漆廢水降解菌系進(jìn)行復(fù)篩:將步驟(3)純化的油性漆廢水降解菌系接種于LB培養(yǎng)基中,長出菌落后,制備成濃度為OD_= I的菌液,備用;
[0012]步驟(I)中,
[0013]所述的搖床避光條件為30°C、130r/min ;
[0014]所述的無機(jī)鹽培養(yǎng)基的組分為:NaCl0.5g,NH4NO30.4g,KH2PO4L 0g, K2HPO4L 0g,酵母浸粉0.2g,微量元素液4mL,蒸餾水lOOOmL,調(diào)pH值為7.2 ;
[0015]所述的微量元素液的組成為:MgS042.0g, CuSO40.5g,MnSO40.5g,F(xiàn)eSO4.7H200.5g,CaCl20.5g,蒸飽水 500mLo
[0016]步驟⑵中,
[0017]所述的油性漆廢水的濃度為200mg/L ;所述的葡萄糖的重量為無機(jī)鹽培養(yǎng)基重量的 0.5% ;
[0018]所述的搖床避光的條件為于30°C、130r/min培養(yǎng)7天;
[0019]所述的無機(jī)鹽培養(yǎng)基的組分為:NaCl0.5g,NH4NO30.4g,KH2PO4L 0g, K2HPO4L 0g,酵母浸粉0.2g,微量元素液4mL,蒸餾水lOOOmL,調(diào)pH值為7.2 ;
[0020]所述的微量元素液的組成為:MgS042.0g, CuSO40.5g,MnSO40.5g,F(xiàn)eSO4.7H200.5g,CaCl20.5g,蒸飽水 500mLo
[0021]步驟(3)中,
[0022]所述的瓊脂的重量為無機(jī)鹽培養(yǎng)基重量的2% ;
[0023]所述的無機(jī)鹽培養(yǎng)基與步驟(2)的油性漆廢水降解菌系培養(yǎng)液的體積比為100:1 ;
[0024]所述的梯度稀釋為將步驟(2)的油性漆廢水降解菌系培養(yǎng)液按照體積分別稀釋103、104、105倍;
[0025]所述的無機(jī)鹽培養(yǎng)基的組分為:NaCl0.5g,NH4NO30.4g,KH2PO4L 0g, K2HPO4L 0g,酵母浸粉0.2g,微量元素液4mL,蒸餾水lOOOmL,調(diào)pH值為7.2 ;
[0026]所述的微量元素液的組成為:MgS042.0g, CuSO40.5g,MnSO40.5g,F(xiàn)eSO4.7H200.5g,CaCl20.5g,蒸飽水 500mLo
[0027]步驟⑷中,
[0028]所述的LB平板培養(yǎng)基的組成為:蛋白胨2.5g,牛肉膏0.75g,NaCl 1.25g,蒸餾水250mLo
[0029]本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點(diǎn)及效果:本發(fā)明采用生物法處理油性漆廢水,具有能耗低、反應(yīng)條件溫和且效率較高。本發(fā)明具有專屬適應(yīng)性微生物的篩選馴化培養(yǎng),降解菌株對油性漆廢水的降解效率可以達(dá)到80%以上,對于提高生物反應(yīng)系統(tǒng)的耐受性和穩(wěn)定性、提高降解效率具有重要意義。
【具體實(shí)施方式】
[0030]下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述,但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。
[0031]實(shí)施例1
[0032](I)菌源的采集與菌懸液的制備:采集鹽城東風(fēng)悅達(dá)起亞汽車油漆廠排污口土壤,將污泥置于4°C冰箱中保存?zhèn)溆茫粚?0g采集回來的土壤置于250mL的無菌水中,30°C振蕩12小時,制成菌懸液;
[0033](2)取5mL菌懸液注入盛有10mL無機(jī)鹽培養(yǎng)基的錐形瓶中,放置于30°C恒溫?fù)u床內(nèi),1