為支撐層。
[0079] 步驟10、在長X寬為0. 3mX0. 3m、厚為5cm的有機(jī)玻璃板上平鋪與有機(jī)玻璃板大 小相同的無紡布，然后將該有機(jī)玻璃板連同其上的無紡布豎直放置（同時(shí)采取措施防止無 紡布脫落），在無紡布與有機(jī)玻璃板之間、從兩者上部不斷滴加培養(yǎng)基，培養(yǎng)基自另一端留 下，落入位于有機(jī)玻璃板下方的水槽內(nèi)，該水槽為培養(yǎng)基儲存容器，設(shè)置潛水泵以及循環(huán)管 線，構(gòu)成培養(yǎng)基輸送裝置，使得培養(yǎng)基能夠循環(huán)浸潤支撐層中的無紡布與濾紙（實(shí)驗(yàn)組和 對照組各設(shè)置一套上述裝置）。
[0080]步驟20、
[0081] (1)實(shí)驗(yàn)組：對第一藻絲進(jìn)行液體培養(yǎng)，并提供過量光照和過量二氧化碳?xì)怏w，獲 得第二藻絲，第二藻絲上的螺旋數(shù)為3-4個(gè)；
[0082] (2)對照組：不對原料藻絲進(jìn)行處理，原料藻絲上的螺旋數(shù)為6-8個(gè)，長度較第二 藻絲更長。
[0083] 步驟30、通過抽濾的接種方法，將實(shí)驗(yàn)組的第二藻絲和對照組的原料藻絲分別接 種至直徑45mm的圓形玻璃纖維膜上，實(shí)驗(yàn)組設(shè)置四片接種有第二藻絲的圓形玻璃纖維膜， 對照組設(shè)置四片接種有原料藻絲的玻璃纖維膜，然后分別置于搭建好的固定化養(yǎng)殖平臺的 無紡布上。
[0084] 步驟40、向水槽中的培養(yǎng)基內(nèi)通入2 %二氧化碳與空氣的混合氣體，并通過曝氣 石對該混合氣體進(jìn)行分散，促進(jìn)該混合氣體的溶解；利用培養(yǎng)基輸送裝置進(jìn)行培養(yǎng)基的循 環(huán)，使得實(shí)驗(yàn)組和對照組中玻璃纖維膜和其上的藻類細(xì)胞層持續(xù)被培養(yǎng)基所浸潤；同時(shí)，采 用熒光燈對附著在玻璃纖維膜上的藻類細(xì)胞層的表面進(jìn)行持續(xù)照射。
[0085] (1)實(shí)驗(yàn)組：2天后，4個(gè)玻璃纖維膜上的藻類細(xì)胞層的個(gè)別位置出現(xiàn)鼓泡，通過用 水沖洗的采收方式，將實(shí)驗(yàn)組的各玻璃纖維膜上的第二藻絲分別采收，并通過抽濾的接種 方法，將采收得到的第二藻絲再次接種在各玻璃纖維膜上；
[0086] (2)對照組：2天后，4個(gè)玻璃纖維膜上的藻類細(xì)胞層的多個(gè)位置出現(xiàn)鼓泡，不對該 鼓泡進(jìn)行處理。
[0087]仍采用上述培養(yǎng)條件，分別對實(shí)驗(yàn)組的第二藻絲和對照組的原料藻絲繼續(xù)進(jìn)行培 養(yǎng)。
[0088] 步驟50、固定化培養(yǎng)共計(jì)進(jìn)行4天后，分別將實(shí)驗(yàn)組的玻璃纖維膜上的藻類細(xì)胞， 和對照組的玻璃纖維膜上的藻類細(xì)胞用水沖下，洗去藻細(xì)胞殘存的鹽分與雜質(zhì)，然后進(jìn)行 烘干和稱重，計(jì)算產(chǎn)量。
[0089]表2

[0091] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0092] 在對比實(shí)驗(yàn)2中，實(shí)驗(yàn)組的第二藻絲的長度比對照組中的原料藻絲的長度更短； 并且，在固定化培養(yǎng)進(jìn)行2天后，實(shí)驗(yàn)組將玻璃纖維膜上的第二藻絲采收并重新進(jìn)行接種， 使得在附著在玻璃纖維膜的藻類細(xì)胞層中，由生長狀態(tài)較好的表層細(xì)胞所構(gòu)成的長度增加 的第二藻絲、和由生長狀態(tài)較差的底層細(xì)胞所構(gòu)成的長度不變的第二藻絲重新混合，以減 少藻類細(xì)胞層的表層中較長的第二藻絲的比例，從而減少后續(xù)培養(yǎng)中可能產(chǎn)生的鼓泡。從 實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象來看，實(shí)驗(yàn)組中藻類細(xì)胞層僅產(chǎn)生了較少的鼓泡，而對照組中藻類細(xì)胞層僅在培 養(yǎng)2天后就產(chǎn)生了大量的鼓泡，且鼓泡現(xiàn)象在培養(yǎng)4天后變得更為嚴(yán)重；根據(jù)表2可得，實(shí) 驗(yàn)組較的平均產(chǎn)量比對照組的平均產(chǎn)量高25%，說明控制鼓泡的發(fā)生對螺旋藻的細(xì)胞養(yǎng)殖 產(chǎn)量的提高具有明顯的促進(jìn)作用。
[0093] 本說明書中的各個(gè)實(shí)施例均采用遞進(jìn)的方式描述，各個(gè)實(shí)施例之間相同或相似的 部分互相參見即可，每個(gè)實(shí)施例重點(diǎn)說明的都是與其他實(shí)施例的不同之處。
[0094]以上所述，僅為本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何 熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，可輕易想到變化或替換，都應(yīng)涵 蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。因此，本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)以所述權(quán)利要求的保護(hù)范圍為準(zhǔn)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法包括： 對所述第一藻絲進(jìn)行減短處理，獲得長度小于所述第一藻絲的第二藻絲，所述第一藻 絲和所述第二藻絲由藻類細(xì)胞構(gòu)成； 將所述第二藻絲接種在所述支撐層上，獲得附著在所述支撐層上的藻類細(xì)胞層； 對所述藻類細(xì)胞層中所述第二藻絲中的藻類細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述第二藻絲的長度為 所述第一藻絲的長度的1/5-1/2。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述減短處理包括機(jī)械 減短處理，所述機(jī)械減短處理包括： 對所述第一藻絲進(jìn)行剪裁、切割或攪拌，使得所述第一藻絲斷裂，以形成所述第二藻 絲。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述減短處理包括自然 減短處理，所述自然減短處理包括： 向所述第一藻絲提供培養(yǎng)基、二氧化碳?xì)怏w和光照，并使所述二氧化碳?xì)怏w的通氣比 大于預(yù)設(shè)的第一通氣比，和/或使所述光照的光照強(qiáng)度大于預(yù)設(shè)的第一光照強(qiáng)度，以使所 述第一藻絲生長并分裂為多個(gè)所述第二藻絲。5. 根據(jù)權(quán)利要求1、3或4所述的藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于，在所述對所述第一 藻絲進(jìn)行減短處理后，所述將所述第二藻絲接種在所述支撐層上前，還包括： 向所述第二藻絲提供培養(yǎng)基、二氧化碳?xì)怏w和光照，并使所述二氧化碳?xì)怏w的通氣比 小于預(yù)設(shè)的第二通氣比，和/或使所述光照的光照強(qiáng)度小于預(yù)設(shè)的第二光照強(qiáng)度，以使在 所述第二藻絲中因所述減短處理而受到損傷的藻類細(xì)胞的活性得到恢復(fù)。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述對所述藻類細(xì)胞層 中所述第二藻絲中的藻類細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)具體包括： 向所述藻類細(xì)胞層提供培養(yǎng)基、二氧化碳?xì)怏w及光照，并使所述光照的光照強(qiáng)度大于 第二光照強(qiáng)度，以使所述第二藻絲中的藻類細(xì)胞生長。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述對所述藻類細(xì)胞層 中所述第二藻絲中的藻類細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)還包括： 當(dāng)所述藻類細(xì)胞層中的所述第二藻絲的長度大于預(yù)設(shè)長度時(shí)，對長度大于所述預(yù)設(shè)長 度的所述第二藻絲進(jìn)行剪裁、切割或采收。8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述對所述藻類細(xì)胞層 中所述第二藻絲中的藻類細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)還包括： 當(dāng)所述藻類細(xì)胞層中的所述第二藻絲的長度大于預(yù)設(shè)長度時(shí)，對所述藻類細(xì)胞層中的 全部所述第二藻絲進(jìn)行采收； 使全部所述第二藻絲均勻混合，然后將全部所述第二藻絲接種在所述支撐層上； 對接種在所述支撐層上的所述第二藻絲中的藻類細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于，在所述對所述藻類細(xì)胞 層中的全部所述第二藻絲進(jìn)行采收后，所述使全部所述第二藻絲均勻混合前，所述對所述 藻類細(xì)胞層中所述第二藻絲中的藻類細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)還包括： 對全部所述第二藻絲中長度大于所述預(yù)設(shè)長度的所述第二藻絲進(jìn)行所述減短處理。10. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述對所述藻類細(xì)胞層 中所述第二藻絲中的藻類細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)還包括： 當(dāng)所述藻類細(xì)胞層中產(chǎn)生鼓泡時(shí)，對位于所述鼓泡處的所述第二藻絲進(jìn)行剪裁、切割 或采收，以使所述鼓泡消失。11. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述對所述藻類細(xì)胞層 中所述第二藻絲中的藻類細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)還包括： 當(dāng)所述藻類細(xì)胞層中產(chǎn)生鼓泡時(shí)，對所述藻類細(xì)胞層中的全部所述第二藻絲進(jìn)行采 收； 使全部所述第二藻絲均勻混合，然后將全部所述第二藻絲接種在所述支撐層上； 對接種在所述支撐層上的所述第二藻絲中的藻類細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。12. 根據(jù)權(quán)利要求11所述的藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于，在所述對所述藻類細(xì) 胞層中的全部所述第二藻絲進(jìn)行采收后，所述使全部所述第二藻絲均勻混合前，所述對所 述藻類細(xì)胞層中所述第二藻絲中的藻類細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)還包括： 對全部所述第二藻絲中長度大于預(yù)設(shè)長度的所述第二藻絲進(jìn)行所述減短處理。13. 根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法，其特征在于，在所述將所述 第二藻絲接種在所述支撐層上前，所述藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法還包括： 搭建所述支撐層； 設(shè)置培養(yǎng)基儲存容器，所述培養(yǎng)基儲存容器內(nèi)儲存有所述培養(yǎng)基； 在所述支撐層和所述培養(yǎng)基儲存容器之間設(shè)置培養(yǎng)基輸送裝置，以使所述培養(yǎng)基儲存 容器向所述支撐層提供所述培養(yǎng)基，且使所述支撐層向所述培養(yǎng)基儲存容器返回未被消耗 的所述培養(yǎng)基。
【專利摘要】本發(fā)明公開一種藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法，涉及細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，用于在應(yīng)用固定化培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)藻類細(xì)胞時(shí)，減輕或避免附著在支撐層上的藻類細(xì)胞層中產(chǎn)生鼓泡的現(xiàn)象，提高藻類細(xì)胞的養(yǎng)殖產(chǎn)量。所述藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法包括：對第一藻絲進(jìn)行減短處理，獲得長度小于第一藻絲的第二藻絲；將第二藻絲接種在支撐層上，獲得附著在支撐層上的藻類細(xì)胞層；對藻類細(xì)胞層中第二藻絲中的藻類細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。本發(fā)明提供的藻類細(xì)胞的培養(yǎng)方法用于藻類細(xì)胞的固定化培養(yǎng)中。
【IPC分類】C12N1/12
【公開號】CN104962474
【申請?zhí)枴緾N201510372089
【發(fā)明人】馮倩, 張凱
【申請人】新奧科技發(fā)展有限公司
【公開日】2015年10月7日
【申請日】2015年6月29日