一種燈盞乙素苷元衍生物及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及藥物化學(xué)研究領(lǐng)域，尤其設(shè)及一種新型的燈盞乙素巧元衍生物，W及 其制備方法和在制備抗氧化藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 燈盞乙素（scutellarin，又稱燈盞花素）是從菊科植物短亭飛蓬圧rigeron breviscapus(Van.t)Hand. -Mazz.]的干燥全草中提取分離得到的黃酬類化合物，是臨床用 藥燈盞花素的主要成分，其結(jié)構(gòu)式如下：
[0003]
[0004] 燈盞乙素 陽(yáng)0化]燈盞乙素在臨床上主要用于治療屯、腦血管疾病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和中風(fēng)后遺癥。現(xiàn) 代藥理研究證明，燈盞乙素具有增加腦血流量、降低腦血管阻力、改善腦循環(huán)、緩解微動(dòng)脈 疫李、提高血腦屏障通透性、括抗屯、肌缺血再灌注損傷、抑制血小板凝集、促進(jìn)纖溶活性W 及抗血栓形成的作用。但是燈盞花素臨床應(yīng)用并不理想，原因主要有兩點(diǎn)：（1)燈盞乙素水 溶性和脂溶性較差；（2)燈盞乙素生物利用度低，體內(nèi)易于代謝，不利于發(fā)揮藥效。
[0006] 燈盞乙素的剛性結(jié)構(gòu)，是限制其透膜吸收的主要原因，水解掉葡萄糖醒酸基，分子 的結(jié)構(gòu)變小，剛性降低，有利于被人體吸收。有研究表明，燈盞乙素可能在人體內(nèi)被水解為 巧元而被吸收，推斷口服燈盞乙素在體內(nèi)真正起效的可能是巧元。燈盞乙素巧元是燈盞乙 素7位脫去糖基的化合物，其結(jié)構(gòu)如下所示：
[0007] 陽(yáng)00引燈盞乙素巧元
[0009] 由于燈盞乙素巧元比燈盞乙素具有更好的藥理作用和生物利用度，因此，對(duì)生物 利用度相對(duì)較高的燈盞乙素巧元進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，提取、開發(fā)并合成出具有新型結(jié)構(gòu)的燈盞 乙素巧元衍生物，在藥物研究方面將具有重大的意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010] 本發(fā)明的目的是要克服現(xiàn)有技術(shù)不足，提供一種具有新型結(jié)構(gòu)的燈盞乙素巧元衍 生物。
[0011] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種本發(fā)明所述燈盞乙素巧元衍生物的制備方法。
[0012] 本發(fā)明進(jìn)一步的目的是提供本發(fā)明所述燈盞乙素巧元衍生物在制備抗氧化藥物 中的應(yīng)用。
[0013] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提出的技術(shù)方案為：
[0014] 本發(fā)明提供一種燈盞乙素巧元衍生物，其結(jié)構(gòu)式如下所示：
[0015]
[0016] 本發(fā)明提供上述燈盞乙素巧元衍生物的制備方法，具體包括W下步驟：
[0017] (1)取自然驚干后的斑鳩菊全草，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10 %~90 %的乙醇浸泡30天，乙 醇體積用量為原料重量的5~20倍；
[001引 似將上一步得到的浸取液過濾，濾液于50~60°C下濃縮至干，得浸膏I;
[0019] 做將浸膏I用乙酸乙醋萃取，再將得到的萃取液進(jìn)行濃縮，得浸膏II;
[0020] (4)將浸膏II用甲醇溶解，加入硅膠攬拌，得過柱樣品；
[OOW 妨將過柱樣品經(jīng)硅膠柱層析，依次用石油酸、丙酬和正丙醇洗脫，收集正丙醇洗 脫液，然后將得到的正丙醇洗脫液進(jìn)行濃縮，得濃縮液；
[0022] (6)采用DlOl大孔樹脂對(duì)得到的濃縮液進(jìn)行吸附，然后用乙醇進(jìn)行解吸，得到燈 盞乙素巧元衍生物粗品；
[0023] (7)將燈盞乙素巧元衍生物粗品用乙醇重結(jié)晶，再過濾和干燥，得到燈盞乙素巧元 衍生物精制品。
[0024] 優(yōu)選的，W上所述燈盞乙素巧元衍生物的制備方法，所述步驟（1)中的乙醇體積 用量為原料重量的10倍。
[00巧]本發(fā)明還提供上述燈盞乙素巧元衍生物在制備抗氧化藥物中的應(yīng)用。
[00%] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：
[0027] 本發(fā)明提供的燈盞乙素巧元衍生物的DPPH(1，1-二苯基-2-S硝基苯阱）抗氧化 活性要強(qiáng)于燈盞乙素，有望作為抗氧化藥物得到廣泛的應(yīng)用。
【具體實(shí)施方式】 陽(yáng)0測(cè)實(shí)施例1
[0029] 一種本發(fā)明提供的燈盞乙素巧元衍生物，其結(jié)構(gòu)式如下所示：
[0030]
[0031] 本實(shí)施例的燈盞乙素巧元衍生物的具體制備過程為：取斑鳩菊全草I千克，自然 驚干，用20升濃度為50%的乙醇浸泡30天；將浸取液過濾，所得濾液在50°C濃縮至干，得 浸膏I;將浸膏I用5升乙酸乙醋萃取，得萃取液，再將萃取液濃縮，得浸膏II;將浸膏II 用3升甲醇溶解，加入100g硅膠攬拌，得過柱樣品；將過柱樣品經(jīng)硅膠柱層析，依次用石油 酸、丙酬和正丙醇洗脫，收集正丙醇洗脫液，將所得的正丙醇洗脫液進(jìn)行濃縮，得濃縮液；采 用DlOl大孔樹脂對(duì)所得的濃縮液進(jìn)行吸附，然后用乙醇進(jìn)行解吸，獲得0. 25g燈盞乙素巧 元衍生物粗品；將燈盞乙素巧元衍生物粗品用乙醇重結(jié)晶，然后過濾和干燥，得到0. 19g燈 盞乙素巧元衍生物精制品。
[0032] 本實(shí)施例制備的燈盞乙素巧元衍生物精制品經(jīng)Ih-NMR和MS確認(rèn)，數(shù)據(jù)如下： 陽(yáng)03引 1h-NMR(400MHz,DMSO-de) 5 :4. 40-4. 71 (m, 2H,CH)，5. 0 (S, 1H, -0H)， 5. 12 (S, 1H, -OH)，5. 84 (S, 1H, -CH)，6. 58 (d, 1H, -CH)，6. 68 (d, 2H, -CH)，6. 71 (S, 1H, -CH)， 7. 13(d，2H，-CH)，7. 36(d，lH，-CH)。ESI-MS:m/z363[M-田。
[0034] 將獲得的精制品用乙醇和正己燒混合溶劑（體積比3:1)重結(jié)晶，得到單晶。經(jīng)元 素分析確認(rèn)其分子式為：〔1班12〇6尸2。 陽(yáng)0對(duì)實(shí)施例2
[0036] 一種本發(fā)明提供的燈盞乙素巧元衍生物，其結(jié)構(gòu)式同實(shí)施例1的結(jié)構(gòu)式。
[0037] 本實(shí)施例的燈盞乙素巧元衍生物的具體制備過程為：取斑鳩菊全草1千克，自然 驚干，用10升濃度為90%的乙醇浸泡30天；將浸取液過濾，所得濾液在60°C濃縮至干，得 浸膏I;將浸膏I用5升乙酸乙醋萃取，得萃取液，再將萃取液濃縮，得浸膏II;將浸膏II 用3升甲醇溶解，加入100g硅膠攬拌，得過柱樣品；將過柱樣品經(jīng)硅膠柱層析，依次用石油 酸、丙酬和正丙醇洗脫，收集正丙醇洗脫液，將所得的正丙醇洗脫液進(jìn)行濃縮，得濃縮液；采 用DlOl大孔樹脂對(duì)所得的濃縮液進(jìn)行吸附，然后用乙醇進(jìn)行解吸，獲得0. 28g燈盞乙素巧 元衍生物粗品；將燈盞乙素巧元衍生物粗品用乙醇重結(jié)晶，然后過濾和干燥，得到0. 20g燈 盞乙素巧元衍生物精制品。
[0038] 本實(shí)施例制備的燈盞乙素巧元衍生物精制品的Ih-NMR和MS數(shù)據(jù)同實(shí)施例1。
[0039] 體外檢測(cè)抗氧化劑清除自由基的方法中W清除DPPH(1，1-二苯基-2-S硝基苯 阱）自由基最為常用。DPPH溶液在517nm處具有較強(qiáng)吸收，當(dāng)有供氨能力的抗氧化劑存在 時(shí)，與DPPH禪合使DPPH紫色消退或減弱，且吸光度與自由基被清除的程度呈線性關(guān)系，通 過加入抗氧化劑前后吸光度的線性變化計(jì)算自由基清除率。研究比較燈盞乙素巧元衍生物 對(duì)自由基的清除作用，對(duì)于抗氧化藥物的開發(fā)具有重要意義。
[0040] 將實(shí)施例1制備得到的燈盞乙素巧元衍生物與DPPH用無水乙醇溶解。分別把 100yL受試物（濃度為300ymol?L1)加到96孔板中，然后加入100yLDPPH溶液（濃度 為45ymol?L1)，振搖均勻，避光反應(yīng)30分鐘，在517皿處測(cè)定吸光值。按照W下公式計(jì) 算自由基清除率：
[0042] A。:溶劑與DPPH作用后的吸光度；A1:本發(fā)明提供的燈盞乙素巧元衍生物與DPPH 作用后的吸光度；As:未加DPPH時(shí)的吸光度。具體實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)如表1所不：
[0043] 表1燈盞乙素巧元衍生物DPPH抗氧化活性數(shù)據(jù)
[0044]
[0045] 從表I可W看出，本發(fā)明提供的燈盞乙素巧元衍生物的DPPH抗氧化活性要強(qiáng)于燈 盞乙素，可W作為抗氧化藥物進(jìn)行后續(xù)開發(fā)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種燈盞乙素苷元衍生物，其特征在于，其結(jié)構(gòu)式如下所示：2. -種制備如權(quán)利要求1所述的燈盞乙素苷元衍生物的方法，其特征在于，包括以下 步驟： (1) 取自然晾干后的斑鳩菊全草，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%~90%的乙醇浸泡30天，乙醇體 積用量為原料重量的5~20倍； (2) 將上一步得到的浸取液過濾，濾液于50~60°C下濃縮至干，得浸膏I; (3) 將浸膏I用乙酸乙酯萃取，再將得到的萃取液進(jìn)行濃縮，得浸膏II; (4) 將浸膏II用甲醇溶解，加入硅膠攪拌，得過柱樣品； (5) 將過柱樣品經(jīng)硅膠柱層析，依次用石油醚、丙酮和正丙醇洗脫，收集正丙醇洗脫液， 然后將得到的正丙醇洗脫液進(jìn)行濃縮，得濃縮液； (6) 采用D101大孔樹脂對(duì)得到的濃縮液進(jìn)行吸附，然后用乙醇進(jìn)行解吸，得到燈盞乙 素苷元衍生物粗品； (7) 將燈盞乙素苷元衍生物粗品用乙醇重結(jié)晶，再過濾和干燥，得到燈盞乙素苷元衍生 物精制品。3. 如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述步驟（1)中的乙醇體積用量為原料重量 的10倍。4. 一種如權(quán)利要求1所述的燈盞乙素苷元衍生物在制備抗氧化藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種具有新型結(jié)構(gòu)的燈盞乙素苷元衍生物，以及它的制備方法和在制備抗氧化藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明所述的燈盞乙素苷元衍生物的制備方法為：乙醇浸泡斑鳩菊全草得浸取液、浸取液過濾濃縮得到浸膏I、乙酸乙酯萃取浸膏I后濃縮得到浸膏II、用浸膏II制備得到過柱樣品、過柱樣品經(jīng)硅膠柱層析后濃縮得到濃縮液、濃縮液進(jìn)行吸附和解吸后得到燈盞乙素苷元衍生物粗品、燈盞乙素苷元衍生物粗品經(jīng)乙醇重結(jié)晶并過濾和干燥后得到燈盞乙素苷元衍生物精制品。體外檢測(cè)抗氧化劑清除自由基的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明提供的燈盞乙素苷元衍生物的抗氧化活性要強(qiáng)于燈盞乙素，有望作為抗氧化藥物而得到廣泛的應(yīng)用。
【IPC分類】C07D311/40, A61P39/06, A61K31/352, C07D311/30
【公開號(hào)】CN105294626
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510687596
【發(fā)明人】郭鑫, 吳義強(qiáng), 胡云楚
【申請(qǐng)人】中南林業(yè)科技大學(xué)
【公開日】2016年2月3日
【申請(qǐng)日】2015年10月21日