一種肝臟保護(hù)作用的檸檬苦素類化合物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從兩面針的干燥根中分離得到的一種檸檬苦 素化合物，含其的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 兩面針[Zanthoxylum nitidum(Roxb. )DC.]又名蔓椒、兩背針、入地金牛，屬蕓香 科花椒屬植物，傳統(tǒng)入藥部位為根，是臨床常用中藥，廣泛分布于我國廣西、廣東、云南、臺(tái) 灣等南方省份。兩面針最早以蔓椒之名記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》;《全國中草藥匯編》記載："兩 面針活血，麻醉止痛，主治神經(jīng)痛、胃、十二指腸潰瘍、胃腸絞痛、膽道蛔蟲病引起的疼痛、咽 喉腫痛，并用于皮膚粘膜麻醉"。它在中醫(yī)臨床上的應(yīng)用十分廣泛，可治療風(fēng)濕麻痹、牙痛、 腰腿痛、跌打損傷腫痛以及咽炎、淋巴結(jié)炎等感染性疾病。
[0003] 兩面針化學(xué)成分方面的研究較為系統(tǒng)，目前從兩面針中已分離多種化合物，分屬 于生物堿類、木脂素類、香豆素類、脂肪酸類等。生物堿類化合物是兩面針中最主要的化學(xué) 成分，其藥理活性最為顯著，具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性。
[0004] 氯化兩面針堿是兩面針中活性生物堿類的主成分，在抗炎、鎮(zhèn)痛、心血管系統(tǒng)疾病 以及抗氧化活性等方面具有廣泛的藥理活性。兩面針的提取物具有廣泛的藥理活性，如鎮(zhèn) 痛、消炎、止血作用及對(duì)化學(xué)性肝損傷的保護(hù)作用等；其作為馳名的牙膏品牌而開發(fā)的系列 口腔護(hù)理產(chǎn)品，則是基于兩面針提取液顯著的抗菌消炎和止血作用。而兩面針在民間用藥 的組合方劑中應(yīng)用也十分廣泛，對(duì)等常見病癥均有顯著的療效，也有報(bào)道以兩面針為主成 分的組合中藥對(duì)跌打損傷、關(guān)節(jié)腫痛、腰椎間盤突出癥、痛經(jīng)、血栓外痔、凍瘡、口腔潰瘍及 慢性潰瘍性結(jié)腸炎等病癥均有較好的療效。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從兩面針的干燥根中分離得到的一種檸檬苦素化合物， 含其的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0007] 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I ):
[0008]
G
[0009] 所述的化合物（I )的制備方法，包含以下操作步驟：(a)將兩面針的干燥根粉 碎，用80~90 %乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和 水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步驟 (a)中正丁醇取物用大孔樹脂除雜，先用5%乙醇洗脫6個(gè)柱體積，再用75%乙醇洗脫8個(gè) 柱體積，收集75 %洗脫液，減壓濃縮得75 %乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟（b)中75 %乙醇洗脫 濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為65:1、30:1、15:1和8:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗 脫得到4個(gè)組分；（d)步驟（c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為15:1、8:1 和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟（d)中組分2用十八烷基硅烷 鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75%的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~12個(gè)柱體 積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I )。
[0010] 進(jìn)一步地，步驟（a)中，用85%乙醇熱回流提取，合并提取液。
[0011] 進(jìn)一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0012] 藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I )和藥學(xué)上可接受的載體。
[0013] 所述的化合物（I )在制備肝臟保護(hù)的藥物中的應(yīng)用。
[0014] 所述的藥物組合物在制備肝臟保護(hù)的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 本發(fā)明化合物用作藥物時(shí)，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0016] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I )，其余為藥物學(xué)上可接受的、 對(duì)人和動(dòng)物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0017] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時(shí)，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【附圖說明】
[0018] 圖1為化合物（I )結(jié)構(gòu)式；
[0019] 圖2為化合物（I )計(jì)算E⑶和實(shí)驗(yàn)E⑶圖。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0021] 主要材料、試劑來源及儀器類型：
[0022] 乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海凌峰化學(xué)試劑有限 公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0023] 實(shí)施例1 :化合物（I )分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0024] (a)將兩面針的干燥根（8kg)粉碎，用85%乙醇熱回流提?。?0LX 3次），合并提 取液，濃縮至無醇味（6L)，依次用石油醚（6LX 3次）、乙酸乙酯（6LX 3次）和水飽和的正 丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物（375g)和正丁醇萃取物； (b) 步驟（a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8大孔樹脂除雜，先用5%乙醇洗脫6個(gè)柱體積，再 用75%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，收集75%洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫濃縮物（129g); (c) 步驟（b)中75%乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為65:1 (8個(gè)柱體積）、 30:1 (8個(gè)柱體積）、15:1 (8個(gè)柱體積）和8:1 (10個(gè)柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得 到4個(gè)組分；（d)步驟（c)中組分4(27g)用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為12:1(8 個(gè)柱體積）、8:1 (10個(gè)柱體積）和5:1 (8個(gè)柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè) 組分；（e)步驟（d)中組分2 (15g)用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度 為75%的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~12個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化 合物（I ) (40mg)。
[0025] 結(jié)構(gòu)確證：HR-ES頂S顯示[M+Na]+為m/z 621. 2308,結(jié)合核磁特征可得分子式 為 C32H38O11，不飽和度為 14。核磁共振氫譜數(shù)據(jù) SH(ppm，DMS0-d6,400MHz) :Η-3(4·82， s)，Η-5(2·83, s)，Η-6(4· 18, s)，Η-11(5·91，dd，J = 4·7,2·5)，Η-12(2·09, dd，J = 19. 2,4· 7)，Η-12(2· 54, dd，J = 19. 2,2· 5)，Η-14(1· 67, dd，J = 11. 8,7· 5)，Η-15(2· 58， dd，J = 18. 8,7· 5)，Η-15(2· 70, dd，J = 18. 8,11. 8)，Η-17(5· 02, s)，Η-18(0· 97, s)， Η-19 (1· 38, s)，Η-21 (7· 25, br，s)，Η-22 (6· 16, br，s)，Η-23 (7· 33, t，J = L 7)，Η-28 (1· 00， s)，Η-29 (0· 75, s)，Η-30 (3· 27, s)，Η-3'（6· 89, q，J = 7· I)，Η-4'（1· 82, d，J = 7· 1)， Η-5'（1.84, s)，6-OH(3.06, br，s)，8-OH(4.05, br，s)，7-0CH3(3.78, s);核磁共振碳譜 數(shù)據(jù) δ c (ppm，DMS0-d6,100MHz) :209. I (C，1-C)，78. 5 (C，2-C)，85. 3 (CH，3-C)，39. 6 (C， 4-C)，49. 8 (CH，5-C)，68. 4 (CH，6-C)，175. 2 (C，7-C)，60. 0 (C，8-C)，136. 3 (C，9-C)，51. 6 (C， 10-C)，125. 9 (CH，11-C)，30. 8 (CH2,12-C)，34. 0 (C，13-C)，37. 7 (CH，14-C)，28. I (CH2,15-C)， 168. 4 (C，16-C)，81. 6 (CH，17-C)，22. 2 (CH3, 18-C)，14. 7 (CH3, 19-C)，121. 3 (C，20-C)， 140. 0 (CH，2卜C)，108. 6 (CH，22-C)，143. 2 (CH，23-C)，21. 3 (CH3, 28-C)，21. 8 (CH3, 29-C)， 63. 5(CH，30-C)，165. 8(C，Γ -C)，127. 5(C，2' -C)，138. 2(CH，3' -C)，14. 2(CH3,4' -C)， 12. 1(CH3,5' -C)，52. 7(CH3,7-0CH3);碳原子標(biāo)記參見圖1。紅外光譜顯示該化合物含有 羥基和羰基基團(tuán)