Ezh2甲基轉移酶抑制劑gsk126的合成方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種給突變性淋巴瘤的治療提供良好前景的GSK126的合成新方法，屬 于藥物合成領域。
【背景技術】
[0002] 631(126:(3)-6-溴-1-(異丁基）-氮-((4,6-二甲基-2-氧-1，2-二氫吡啶-3基）甲 基)-3_甲基-6-(6-(對二氮己烷-2-基）哌啶-2-基)-1_氫-吲哚-4-甲酰胺，CAS號1346574-57_9，分子式〇311138仏〇2，分子量526.67。近幾年的研究顯不，人類的惡性腫瘤與。〇15^〇11^ group(PcG)蛋白的異常表達有著密切的關系，特別是polycomb repressive complex 1 (PRCl)蛋白復合物和PRC2蛋白復合物。而PRC2復合物的催化活性亞單位則是Zeste基因增 強子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,簡稱EZIKhEZiK與果繩基因同源，是PcG基 因家族的核心成員，位于染色體7q35上，通過催化組蛋白H3第27位賴氨酸三甲基化 (H3K27m3)，從而達到抑制基因表達的效果。
[0003] 由于EZH2與腫瘤的惡性進程、侵襲性、轉移能力關系密切，所以在淋巴瘤、乳腺癌、 胃癌、前列腺癌等多種惡性腫瘤中呈現高表達。隨著對其在腫瘤中分子功能、上下游調控機 制和臨床病理特點的深入了解，EZH2有望做為新靶點，為腫瘤治療提供新的途徑。
[0004] 為了證實抑制劑對于EZH2甲基轉化酶活性的抑制效果，通過高通量篩查，發(fā)現了 含氮五元雜環(huán)PRC2蛋白有較好的效果，之后通過大量藥物化學實驗的優(yōu)化衍生出了GSK126 化合物。GSK126就是含有雜環(huán)吲哚的具有高選擇性、有效、競爭性S-腺苷蛋氨酸、小分子的 EZH2甲基轉移酶的抑制劑，它對于EZH2藥理機制的抑制或許給突變性淋巴瘤的治療提供一 個很好的前景。
[0005] GSK126有效抑制了突變的EZH2彌漫性大B細胞淋巴瘤的增殖，并且在老鼠的異種 移植實驗中顯著抑制了突變的EZH2彌漫性大B細胞淋巴瘤的生長。因此，GSK126引起了藥學 家和有機化學家的研究興趣。
[0006] GSK126現有的合成方法(Nature, 2012,492:108-112)(如下式），主要是利用2-甲 基-3-硝基苯甲酸與1，3-二溴-5，5-二甲基海因以濃硫酸做溶劑，生成5-溴-2-甲基-3硝基 苯甲酸酯，然后與N，N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛作用后在鐵粉和冰醋酸的作用下進行Heck 反應，得到6-溴-4-B引噪甲酸甲酯。后者再與2-溴丁烷通過親核取代反應得至Ij IH-吲哚-4-羧 基，6-溴-1-(1-異丁基）甲酯，之后與三氯氧磷反應在吲哚的三位置上醛基，再經過還原得 到6-溴-1-(異丁基)_3_甲基-1-氫-吲哚-4-甲酸甲酯，得到的脂在氫氧化鈉的甲醇四氫呋 喃的溶液中水解成6-溴-1-(異丁基)_3_甲基-1-氫-吲哚-4-甲酸，繼而與3-氨甲基-4,6-二 甲基-2-羥基吡啶在偶聯試劑1_( 3-二甲氨基丙基)_3_乙基碳二亞胺鹽酸鹽、1-羥基_7_偶 氮苯并三氮唑、N-嗎啡啉的作用下得到消旋的偶聯產物，通過手性柱拆分的方法得到S-型 的，最后與2-(哌嗪-1-基）吡啶-5-硼酸頻那醇酯進行Suzuki偶聯反應，得到目標產物 GSK126?，F有的方法有兩個缺陷：（1)得到關鍵的吲哚中間產物需要經過七步才能得到，反 應路線繁瑣冗長；（2)需要通過手性拆分方法才能得到手性關鍵中間體，效率低，耗時長，成 本高。目前GSK126的市場價格是每克22，800元人民幣左右。


【發(fā)明內容】

[0008] 本發(fā)明為了克服上述現有技術中的耗時長成本高的缺陷，提出了一種改進GSK126 的合成新方法。這個方法相對于已經投入生產的那種方法有兩個優(yōu)點：一、簡化了步驟，從 而減少了原料的消耗，提高了總產率，從而取得更好的經濟效益。二、采用了手性控制的方 法，已經投入生產的方法是使用手性柱的方法，但是成本高，耗時長，效率低，導致了該藥物 的合成的成本較高。
[0009] 本發(fā)明解決其技術問題所采用的技術方案是：
[0010] EZH2甲基轉移酶抑制劑GSK126的合成方法，包括以下步驟：
[0011] (1 )2，5-二溴苯甲酸在濃硫酸中與濃硝酸反應，得到2，5-二溴-3-硝基苯甲酸；
[0012] (2) 2，5-二溴-3-硝基苯甲酸與酸在甲醇中加熱反應，得到2，5-二溴-3-硝基苯甲 酉支甲醋；
[0013] (3)2,5_二溴-3-硝基苯甲酸甲酯與還原劑在酸和溶劑中反應，得到2,5_二溴-3-氨基苯甲酸甲酯；
[0014] (4)在堿存在下，2,5_二溴-3-氨基苯甲酸甲酯與烯丙基溴在堿和溶劑中反應，得 到2,5_二溴-3-(烯丙基胺)苯甲酸甲酯；
[0015] (5)在有機堿的存在下，2,5_二溴_3-(烯丙基胺)苯甲酸甲酯在催化劑、配體和相 轉移催化劑的作用下在溶劑中反應，經過萃取、水洗、干燥和柱層析純化后得到6-溴-3-甲 基-1-氫吲哚-4-甲酸甲酯；
[0016] (6)(1〇-異丁醇與對甲基苯磺酰氯反應，得到的產物在堿作用下與6-溴-3-甲基- 1-氫吲哚-4-甲酸甲酯在溶劑中反應，經過萃取、水洗、干燥和柱層析純化后得到(5)-6-溴_ 1_(異丁基)_3_甲基-1-氫吲哚-4-甲酸甲酯；
[0017] (7)在堿的作用下，（S)-6_溴-1-(異丁基)_3_甲基-1-氫吲哚-4-甲酸甲酯在溶劑 中發(fā)生水解反應，得到(S)-6-溴-1-(異丁基)-3_甲基-1-氫吲哚-4-甲酸；
[0018] (8)(S)-6-溴-1-(異丁基)-3_甲基-1-氫吲哚-4-甲酸與3-氨甲基-4,6-二甲基-2-羥基吡啶在偶聯試劑作用下在N，N-二甲基甲酰胺中偶聯，得到（S)-6-溴-1-(異丁基)-氮_ ((4,6_二甲基-2-氧-1，2-二氫吡啶-3基）甲基)-3_甲基-1-氫-B引噪甲酰胺。
[0019] (9)(S)-6-溴-1-(異丁基)-氮-((4,6-二甲基-2-氧-l，2-二氫吡啶-3基）甲基)-3-甲基-1-氫-吲哚甲酰胺與2-(哌嗪-1-基）吡啶-5-硼酸頻那醇酯在催化劑和溶劑作用下進 行Suzuki偶聯反應，得到最終產物GSK126。其反應過程如下式：
[0021] 作為優(yōu)選，步驟(1)中反應溫度為60°c-130°c，優(yōu)選80°c-l 10°C。
[0022]作為優(yōu)選，步驟（2)中所述酸為濃硫酸、濃鹽酸或濃硝酸，其中反應溫度為30°C_ 120°C，優(yōu)選 30°C_80°C。
[0023]作為優(yōu)選，步驟(3)中所述還原劑為鐵粉、鋅粉或氯化亞錫，所述溶劑為甲醇、乙醇 或二氯甲烷，所述酸為鹽酸或冰醋酸，其中所述2,5_二溴-3-硝基苯甲酸甲酯與還原劑的摩 爾比為1:2-10，優(yōu)選1:4，其反應溫度為20°C_120°C，優(yōu)選50°C_80°C。
[0024] 作為優(yōu)選，步驟(4)中所述溶劑為N，N_二甲基甲酰胺、二甲基亞砜或二氯甲烷，所 述堿為氫化鈉、碳酸鉀或氫氧化鉀，所述2,5_二溴-3-氨基苯甲酸甲酯、烯丙基溴和堿的摩 爾比為1:1-4:2-10，優(yōu)選1:2:4，其反應溫度為25°C_100°C，優(yōu)選50°C_90°C。
[0025] 作為優(yōu)選，步驟(5)中所述有機堿為醋酸鈉或醋酸鉀，所述催化劑為氯化鈀、醋酸 鈀、雙三苯基膦二氯化鈀或雙(三環(huán)己基膦)二氯化鈀，所述相轉移催化劑為四丁基溴化銨、 四丁基氯化銨或四丁基氟化銨，所述配體為亞磷酸三苯酯或1，3-雙(三苯基膦)丙烷;所述 溶劑為N，N-二甲基甲酰胺或二甲基亞砜，所述2,5_二溴-3-(烯丙基胺）苯甲酸甲酯與催化 劑的摩爾比為1:0 · 01-0 · 5，優(yōu)選1:0 · 02-0 · 1，其反應溫度為60°C_130°C，優(yōu)選80°C_110°C。
[0026] 作為優(yōu)選，步驟(6)中所述堿為氫化鈉、碳酸鉀、氫氧化鉀或氫氧化鈉，所述溶劑為 N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、四氫呋喃或二氯甲烷，所述6-溴-3-甲基-1-氫吲哚-4-甲 酸甲酯與(R)-異丁醇的摩爾比為1:1-4;其反應溫度為0°C_100°C，優(yōu)選20°C_50°C。
[0027] 作為優(yōu)選，步驟(7)中所述堿為氫氧化鈉、氫氧化鋰或氫氧化鉀，所述溶劑為甲醇、 乙醇、二氯甲烷或四氫呋喃，所述(S)-6_溴-1-(異丁基)_3_甲基-1-氫吲哚-4-甲酸甲酯與 堿的摩爾比為1:1-5。
[0028]作為優(yōu)選，步驟(8)中所述偶聯試劑為1-(3_二甲氨基丙基)_3_乙基碳二亞胺或1， 3-二環(huán)己基碳二亞胺，其反應溫度為20°C-100°C，優(yōu)選60°C_80°C。
[0029] 作為優(yōu)選，步驟(9)中所述溶劑為1，4_二環(huán)氧六環(huán)和水，所述催化劑為[1，1'_雙 (二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合