專利名稱：一種膜過濾濃縮動物血漿的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種濃縮動物血漿的方法，具體地說涉及一種膜過濾濃縮動物血漿的方法。
背景技術(shù)：
動物血中含有豐富的蛋白質(zhì)、酶、維生素等生物活性物質(zhì)。利用動物血漿可以生產(chǎn)很多生化制品，這些制品被廣泛地應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、飼料加工和化工等許多領(lǐng)域。但是，由于動物血漿中含水量高達93％左右，在制備相應(yīng)的目標化合物之前，有必要對血漿進行濃縮，以便下一步的分離制備或者干燥，從而達到降低試劑消耗及能源消耗的目的。另外，由于血漿中蛋白質(zhì)組分的復(fù)雜性以及各組分理化性質(zhì)的差異，所以在實際的生產(chǎn)中，要想保證血漿中蛋白質(zhì)、酶活性不受影響的情況下，對原血漿進行濃縮并不是一件容易的事。
血漿中蛋白質(zhì)7％左右，其余93％左右為水分。血漿蛋白質(zhì)是許多蛋白質(zhì)的混合物(約200余種)，包括單純蛋白質(zhì)和結(jié)合蛋白質(zhì)，而且血漿蛋白質(zhì)平均濃度相差較大。對血漿中主要的38種蛋白質(zhì)的研究表明，約90％的血漿蛋白質(zhì)含量在100mg/100ml以下，只有其余10％的血漿蛋白質(zhì)的含量超過100mg/100ml。在這38種最主要的血漿蛋白質(zhì)中分子量在5萬以上的有29種，其余9種分子量在5萬以下。用中空纖維超濾方法進行動物血漿濃縮是一種高效低能耗的方法，但是因為血漿中含有大量的纖維蛋白質(zhì)，其濃度達200-600mg/100ml，于是在實際運用中常常會因血漿中凝血因子的協(xié)同作用轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白質(zhì)析出，從而容易造成中空纖維超濾裝置中的預(yù)過濾器、中空纖維組件以及中空纖維表面膜孔堵塞，從而影響裝置的使用效果與壽命。目前，還未曾見到有關(guān)能解決上述問題的血漿濃縮方法的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種能保證血漿中蛋白質(zhì)、酶活性不受影響，且不會造成中空纖維超濾裝置中的預(yù)過濾器、中空纖維組件以及中空纖維表面膜孔堵塞的一種新的膜過濾濃縮動物血漿的方法。
為了達到上述目的，本發(fā)明人對血漿理化性質(zhì)進行了大量的研究，發(fā)明了一種新的血漿濃縮的方法，該方法首先對血漿中主要的38種蛋白質(zhì)按分子量進行分組，其結(jié)果如下有9種蛋白質(zhì)分子量在20-95萬之間，在血漿中的總濃度達到1163-2588mg/100ml；有20種蛋白質(zhì)分子量在5-20萬之間，在血漿中的總濃度達到5083-8473mg/100ml；另有9種蛋白質(zhì)分子量在50萬以下，總濃度達到377-682mg/100ml。
由于纖維蛋白質(zhì)分子量為34.1萬，因此可采用按分子量分段進行膜分離濃縮過濾。
對分子量在20萬以上的血漿蛋白質(zhì)組分用管式超濾濃縮回收；對分子量在5-20萬之間的蛋白質(zhì)組分用中空纖維超濾裝置回收。由于血漿中的纖維蛋白質(zhì)分子量約為34萬，因此，在第一個濃縮階段就被分開了，從而不會影響到中空纖維階段。分子量在5萬以下的組分中蛋白質(zhì)濃度已經(jīng)很低了，如果回收其中的有效組分，則必須再用切割分子量在4-5萬之間的中空纖維超濾裝置進行濃縮回收。
本發(fā)明的一種膜過濾濃縮動物血漿的方法，包括下述步驟(1)首先將動物血液，按1％的比例加入檸檬酸鈉進行抗凝處理，絡(luò)合血漿中的Ca2+；(2)經(jīng)抗凝處理的動物全血用離心分離制備出血漿；(3)在上述血漿中，按0.1-0.25％的比例加入乙二胺四乙酸二鈉，保持輕緩均勻攪拌，溫度控制在4-10℃之間，調(diào)節(jié)PH值在6.8-7.2之間，進一步絡(luò)合血漿中殘留的Ca2+；(4)然后將血漿進入到切割分子量20-95萬的管式超濾組件階段進行濃縮，濃縮倍數(shù)2-3，操作壓力維持在0.4-0.5mPa，把血漿分子量在20-95萬的蛋白質(zhì)組分分離出來，并且經(jīng)此階段的濃縮(濃縮倍數(shù)2-3)處理后，此部分濃縮液可供干燥或者轉(zhuǎn)入下一階段的目標蛋白質(zhì)的分離制備；(5)經(jīng)管式超濾組件分離出的滲透液，進入到切割分子量5-20萬的中空纖維超濾組件階段進行濃縮，操作壓力維持在0.2-0.25mPa，濃縮倍數(shù)達到4-5倍，濃縮液供干燥或轉(zhuǎn)入下一階段目標蛋白質(zhì)的分離制備，滲透液直接排放或用切割分子量在4-5萬的中空纖維超濾膜進一步濃縮。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有明顯的優(yōu)點和有益效果。由以上技術(shù)方案可知，本發(fā)明的方法的優(yōu)點是按血漿中主要蛋白質(zhì)組分分子量劃分階段，用膜分離裝置分級濃度回收蛋白質(zhì)組分效率高，能源消耗低，由于在4-10℃的環(huán)境中進行，所以對血漿中主要蛋白質(zhì)的活性影響甚微，有利于下一步制備相關(guān)的目標蛋白質(zhì)產(chǎn)物，同時還在最大程度上降低了相應(yīng)試劑的消耗，且不會造成中空纖維超濾裝置中的預(yù)過濾器、中空纖維組件以及中空纖維表面膜孔堵塞。
具體實施例方式
利用本發(fā)明的方法對1000kg動物血液進行濃縮，步驟如下(1)在需要濃縮的1000kg動物血液中，加入10kg檸檬酸鈉進行抗凝處理，絡(luò)合血漿中的Ca2+；(2)經(jīng)抗凝處理的動物全血用離心分離制備出血漿約為520kg；(3)在上述520kg血漿中，加入0.78kg乙二胺四乙酸二鈉，保持輕緩均勻攪拌，溫度控制在4-10℃之間，調(diào)節(jié)PH值在6.8-7.2之間，進一步絡(luò)合血漿中殘留的Ca離子；(4)經(jīng)第一步處理的血漿首先進入到切割分子量20-95萬的管式超濾組件階段進行濃縮，操作壓力維持在0.4-0.5mPa，把血漿分子量在20-95萬的蛋白質(zhì)組分分離出來，并且經(jīng)此階段的濃縮(濃縮倍數(shù)2-3)處理后，此部分濃縮液大約130kg，可供干燥或者轉(zhuǎn)入下一階段的目標蛋白質(zhì)的分離制備；(5)經(jīng)管式超濾組件分離出的滲透液約390kg左右，進入到切割分子量5-20萬的中空纖維超濾組件階段進行濃縮，操作壓力維持在0.2-0.25mPa，濃縮倍數(shù)達到4-5倍，得到濃縮液約120kg左右，供干燥或轉(zhuǎn)入下一階段目標蛋白質(zhì)的分離制備，滲透液約270kg左右直接排放或用切割分子量在4-5萬的中空纖維超濾膜進一步濃縮。
以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實施例而已，并非對本發(fā)明作任何形式上的限制，任何未脫離本發(fā)明技術(shù)方案內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實質(zhì)對以上實施例所作的任何簡單修改、等同變化與修飾，均仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種膜過濾濃縮動物血漿的方法，包括下述步驟(1)首先將動物血液，按1％的比例加入檸檬酸鈉進行抗凝處理；(2)經(jīng)抗凝處理的動物全血用離心分離制備出血漿；(3)在上述血漿中，按0.1-0.25％的比例加入乙二胺四乙酸二鈉，保持輕緩均勻攪拌，溫度控制在4-10℃之間，調(diào)節(jié)PH值在6.8-7.2之間；(4)然后將血漿進入到切割分子量20-95萬的管式超濾組件階段進行濃縮，濃縮倍數(shù)2-3，把血漿分子量在20-95萬的蛋白質(zhì)組分分離出來，并且經(jīng)此階段的濃縮處理后，此部分濃縮液可供干燥或者轉(zhuǎn)入下一階段的目標蛋白質(zhì)的分離制備；(5)經(jīng)管式超濾組件分離出的滲透液，進入到切割分子量5-20萬的中空纖維超濾組件階段進行濃縮，濃縮倍數(shù)達到4-5倍，濃縮液供干燥或轉(zhuǎn)入下一階段目標蛋白質(zhì)的分離制備，滲透液直接排放或用切割分子量在4-5萬的中空纖維超濾膜進一步濃縮。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中管式超濾組件操作壓力維持在0.4-0.5mPa。
3.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其中中空纖維超濾組件操作壓力維持在0.2-0.25mPa。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種膜過濾濃縮動物血漿的方法，通過抗凝處理，離心分離出血漿，進一步絡(luò)合血漿中的殘留的Ca離子，經(jīng)管式超濾組件階段進行濃縮后，分離出的滲透液，進入中空纖維超濾組件階段進行濃縮等步驟來完成血漿的濃縮，本發(fā)明的優(yōu)點是能保證血漿中蛋白質(zhì)、酶活性不受影響，且不會造成中空纖維超濾裝置中的預(yù)過濾器、中空纖維組件以及中空纖維表面膜孔堵塞，對于進一步加工生化制品來說能降低能源和試劑的消耗。
文檔編號B01D61/16GK1531995SQ0311751
公開日2004年9月29日 申請日期2003年3月21日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月21日
發(fā)明者陳彬, 陳 彬 申請人:陳彬, 陳 彬