專利名稱：一種從夏天無中提純原阿片堿的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從夏天無中提取純化原阿片堿的方法，尤其是一種采用膜分離、 混合樹脂富集技術(shù)純化原阿片堿的方法。
背景技術(shù)：
原阿片堿又稱原鴉片堿，普羅托平，原托品堿，普魯托品。分子式=C2tlH19NO5分子量353·36分子結(jié)構(gòu)<formula>formula see original document page 3</formula>原阿片堿為單斜棱晶(乙醇-氯仿)。熔點208°C。溶于15份氯仿、900份乙醇、 1000份乙醚，微溶于乙酸乙酯、二硫化碳、苯、石油醚，幾乎不溶于水。具有鎮(zhèn)痛、解痙、止咳、 平喘、改善微血管循環(huán)、抗血小板聚集，促進戊巴比妥鈉的催眠作用，并有弱的殺菌和抗腫 瘤作用。可用于治療眼底充血及抗血栓等。原阿片堿存在于存在于罌粟科植物罌粟(Papaver somniferum L.)的愈合組織， 延胡索(Corydalis yanhusuoff. T. Wang)的塊莖，白屈菜(Chelidonium，majus L.)的帶花 全草、伏生紫堇[Corydalis decumbens (Thunb.) Pers]的塊莖等植物中。其中夏天無系伏 生紫堇[Corydalisdecumbens (Thunb.) Pers]的塊莖含量較高，《解放軍藥學(xué)報》第25卷第 3期“HPLC法測定夏天無中原阿片堿延胡索乙素和巴馬亭”文獻報道夏天無藥材中含原阿 片堿高達0. 48%?！端幍洹分幸惨?guī)定夏天無中原阿片堿含量不得低于0. 3%，也是判定夏天 無藥材好壞的標(biāo)準。目前天然產(chǎn)物原阿片堿多是從夏天無中提取純化所得?，F(xiàn)有公開提取原阿片堿的方法，多是酸水、酸醇滲漉或乙醇回流提取，再多次堿沉 酸沉，乙多次氯仿等有機試劑結(jié)晶。如中國專利200510024334. 3 (申請?zhí)?“從夏天無中提 取原阿片堿的方法”和專利號200410042527. X(申請?zhí)?“一種從植物中提取原阿片堿及 其藥物制劑的制備應(yīng)用”所公開的方法中，即采用所舉方法。分離純化的方法中也有采用大 孔樹脂吸附，如中國專利03118261. 5(申請?zhí)?“夏天無總生物堿及其制備方法”公開了大 孔樹脂吸附純化生物總堿的方法。膜分離技術(shù)應(yīng)用純化原阿片堿的方法也有公開，如《中草 藥》第36卷第9期2005 “超濾膜純化夏天無總堿的研究”文獻公開了膜分離技術(shù)的應(yīng)用， 后序的純化沒有研究?，F(xiàn)有公開的方法，多是毒性試劑應(yīng)用較多和樹脂專屬性低。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明人經(jīng)多年樹脂篩選試驗和工藝優(yōu)化試驗，發(fā)明了一種提取純化原阿片堿的方法。該方法能夠減少有毒試劑的用量，提高產(chǎn)品收率，降低生產(chǎn)成本。本發(fā)明是采用以下技術(shù)方案實現(xiàn)的一種從夏天無中提純原阿片堿的方法，其特征在于包含以下步驟1.乙醇提取將夏天無原料粉碎，加入85-95%乙醇回流提取，提取2 3次，濾過合并提取液體；2.膜分離將上述提取液減壓濃縮至醇濃度30-40%加入乙酸，先通過微濾膜系 統(tǒng)微濾，再通過超濾膜系統(tǒng)超濾，收集透過液；3.混合樹脂富集上述透過液通過混合樹脂柱飽和吸附，梯度溶液洗脫，收集原 阿片堿洗脫液，加入洗脫液量的0. 1 0. 3%的濃氨水，放置結(jié)晶，得粗結(jié)晶；4.結(jié)晶將上述粗結(jié)晶在乙醇中回流飽和溶解，放置結(jié)晶，過濾結(jié)晶物用氯仿乙 醇混合溶回流飽和溶解，放置結(jié)晶，過濾干燥即得產(chǎn)品。所述乙醇提取條件每次乙醇加入量為原料的5-8量，提取時間1-2小時。優(yōu)選6、
5、5倍量三次回流提取。所述膜分離的加酸步驟為濃縮液先緩慢加入其體積的0. 1 0.3%的乙酸，充分 攪拌。所述超濾膜選用截留分子量3000-6000的管式復(fù)合超濾膜。所述混合樹脂為AB-8大空樹脂和110弱酸性陽離子樹脂2 3 1混合。優(yōu)選 3 1組合。所述樹脂柱飽和吸附條件樹脂柱下柱液流速(升/小時)為柱體積量的1/2 1/3，流出液(高效液相檢測)阿片堿濃度不超過0.01%。所述混合樹脂梯度洗脫為先水洗中性，再用5-6倍柱體積量50-60%乙醇溶液洗 脫雜質(zhì)，最后用5-6倍柱體積量90-95%乙醇洗脫原阿片堿。所述結(jié)晶條件為乙醇濃度90-95%，氯仿乙醇混合比為1 2 3。綜上所述，本發(fā)明存在以下優(yōu)點1)提取液濃縮至低醇調(diào)酸，提高了膜分離的速度，減少產(chǎn)品在膜分離過程的損失。2)膜分離的應(yīng)用除去大量雜質(zhì)，后序無需活性炭脫色，增加了樹脂的吸附量。3)混合樹脂應(yīng)用，提高了樹脂的吸附量和選擇性。下面將結(jié)合具體實施方式
進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限 于下列實施方式。
具體實施例方式下述實施例中原阿片堿的含量測定采用高效液相色譜法(參照中國藥典2005版 夏天無藥材檢測方法)，具體方法如下色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-三乙胺 醋酸溶液(取三乙胺8ml，冰醋酸30ml，加水稀釋至1000ml) (18 82)為流動相；檢測波長 為289nm。理論板數(shù)按原阿片堿峰計算應(yīng)不低于3000。對照品溶液的制備精密稱取原阿片 堿對照品IOmg.置50ml量瓶中，加的鹽酸溶液5ml使溶解，再加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻。精密量取5ml，置25ml量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每Iml含原阿 片堿40 μ g)。供試品配制參照對照品。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10-20 μ 1，注入液相色譜儀， 測定，即得。實施例1 第一步提取。稱取夏天無20千克(原阿片堿含量0.4%)粉碎20目，先加入 120L85%的乙醇回流提取2小時，濾過，加入100L85%的乙醇，回流提取1小時，濾過，再加 100L85%的乙醇，回流提取1小時；合并三次提取液得280L。第二步膜分離。減壓濃縮提取液至醇濃度40%放出，得濃縮液80L，緩慢加入濃 縮240ml乙酸，充分攪拌，濾過，加入微濾膜系統(tǒng)過濾，再通過分子截留量3000的復(fù)合超濾 膜超濾，收集透過液。第三步混合樹脂富集。透過液加入10LAB-8和110樹脂3 1混合樹脂柱吸 附，柱流速5L/小時。洗脫時先去離子水洗中性，再用60L50%乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，最后用 50L95%乙醇洗脫原阿片堿，收集洗脫液45L，加入130ml濃氨水，放置結(jié)晶。第四步過濾粗結(jié)晶物，90%乙醇回流飽和溶解，放置結(jié)晶。過濾結(jié)晶物，氯仿乙醇 (混合比1 2)混合溶劑回流飽和溶解，放置結(jié)晶，過濾得成品54克，含量98. 3% (HPLC)。實施例2 第一步提取。稱取夏天無20千克(原阿片堿含量0.4%)粉碎40目，先加入 160L90%的乙醇回流提取2小時，濾過，然后再加入120L90%的乙醇，回流提取1小時，合并 提取液得240L。第二步膜分離。減壓濃縮提取液至醇濃度30%放出，得濃縮液70L，緩慢加入濃 縮140ml乙酸，充分攪拌，濾過，加入微濾膜系統(tǒng)過濾，再通過分子截留量3000的復(fù)合超濾 膜超濾，收集透過液。第三步混合樹脂富集。透過液加入10LAB-8和110樹脂2 1混合樹脂柱吸 附，柱流速5L/小時。洗脫時先去離子水洗中性，再用50L60%乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，最后用 60L90%乙醇洗脫原阿片堿，收集洗脫液45L，加入90ml濃氨水，放置結(jié)晶。第四步過濾粗結(jié)晶物，95%乙醇回流飽和溶解，放置結(jié)晶。過濾結(jié)晶物，氯仿乙醇 (混合比1 3)混合溶劑回流飽和溶解，放置結(jié)晶，過濾得成品52克，含量98. 5% (HPLC)。實施例3 第一步提取。稱取夏天無10千克(原阿片堿含量0.45%)粉碎20目，先加入 60L90%的乙醇回流提取2小時，濾過，然后再加入50L90%的乙醇，回流提取1小時，濾過， 再加50L90%的乙醇，回流提取1小時；合并三次提取液得140L。第二步膜分離。減壓濃縮提取液至醇濃度30%放出，得濃縮液40L，緩慢加入濃 縮40ml乙酸，充分攪拌，濾過，加入微濾膜系統(tǒng)過濾，再通過分子截留量6000的復(fù)合超濾膜 超濾，收集透過液。第三步混合樹脂富集。透過液加入5LAB-8和110樹脂3 1混合樹脂柱吸附，柱 流速5L/小時。洗脫時先去離子水洗中性，再用60L50%乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，最后用30L95% 乙醇洗脫原阿片堿，收集洗脫液26L，加入26ml濃氨水，放置結(jié)晶。第四步過濾粗結(jié)晶物，95%乙醇回流飽和溶解，放置結(jié)晶。過濾結(jié)晶物，氯仿乙醇(混合比1 2)混合溶劑回流飽和溶解，放置結(jié)晶，過濾得成品26克，含量98. (HPLC)。實施例4 第一步提取。稱取夏天無10千克(原阿片堿含量0.45%)粉碎40目，先加入 80L95%的乙醇回流提取2小時，濾過，然后再加入80L95%的乙醇，回流提取1小時，合并提 取液得140L。
第二步膜分離。減壓濃縮提取液至醇濃度30%放出，得濃縮液30L，緩慢加入濃 縮120ml乙酸，充分攪拌，濾過，加入微濾膜系統(tǒng)過濾，再通過分子截留量6000的復(fù)合超濾 膜超濾，收集透過液。第三步混合樹脂富集。透過液加入5LAB-8和110樹脂2 1混合樹脂柱吸附，柱 流速2L/小時。洗脫時先去離子水洗中性，再用30L60%乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，最后用30L95% 乙醇洗脫原阿片堿，收集洗脫液25L，加入50ml濃氨水，放置結(jié)晶。第四步過濾粗結(jié)晶物，90%乙醇回流飽和溶解，放置結(jié)晶。過濾結(jié)晶物，氯仿乙醇 (混合比1 3)混合溶劑回流飽和溶解，放置結(jié)晶，過濾得成品27克，含量98. 3% (HPLC)。
權(quán)利要求
一種從夏天無中提純原阿片堿的方法，其特征在于包含以下步驟1)乙醇提取將夏天無原料粉碎，加入85-95％乙醇回流提取，提取2～3次，濾過合并提取液體；2)膜分離將上述提取液減壓濃縮至醇濃度30-40％加入乙酸，先通過微濾膜系統(tǒng)微濾，再通過超濾膜系統(tǒng)超濾，收集透過液；3)混合樹脂富集上述透過液通過混合樹脂柱飽和吸附，梯度溶液洗脫，收集原阿片堿洗脫液，加入洗脫液量的0.2～0.5％的濃氨水，放置結(jié)晶，得粗結(jié)晶；4)結(jié)晶將上述粗結(jié)晶在乙醇中回流飽和溶解，放置結(jié)晶，過濾結(jié)晶物用氯仿乙醇混合溶回流飽和溶解，放置結(jié)晶，過濾干燥即得產(chǎn)品。
2.如權(quán)利要求1所述的提純方法，其特征在于所述乙醇提取條件每次乙醇加入量為 原料的5-8量，提取時間1-2小時。
3.如權(quán)利要求1所述的提純方法，其特征在于所述膜分離的加酸步驟為濃縮液先緩 慢加入其體積的0. 1 0. 3%的乙酸，充分攪拌。
4.如權(quán)利要求1所述的提純方法，其特征在于所述超濾膜選用截留分子量3000-6000 的管式復(fù)合超濾膜。
5.如權(quán)利要求1所述的提純方法，其特征在于所述混合樹脂為AB-8大空樹脂和110 弱酸性陽離子樹脂2 3 1混合。
6.如權(quán)利要求1所述的提純方法，其特征在于所述樹脂柱飽和吸附條件樹脂柱下柱 液流速(升/小時)為柱體積量的1/2 1/3，流出液(高效液相檢測)阿片堿濃度不超過 0. 01%。
7.如權(quán)利要求1所述的提純方法，其特征在于所述混合樹脂梯度洗脫為先去離子水 洗中性，再用5-6倍柱體積量50-60%乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，最后用5-6倍柱體積量90-95% 乙醇洗脫原阿片堿。
8.如權(quán)利要求1所述的提純方法，其特征在于所述結(jié)晶條件為乙醇濃度90-95%，氯 仿乙醇混合比為1 2 3。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種操作簡便、成本低的原阿片堿提取純化方法，工藝以原阿片堿含量高的夏天無藥材為原料，粉碎，乙醇回流提取2-3次，減壓濃縮至低度醇加入乙酸助溶，復(fù)合超濾膜截留大分子雜質(zhì)，再經(jīng)混合樹脂柱富集，梯度洗脫雜質(zhì)，收集原阿片堿洗脫液氨水調(diào)節(jié)pH值結(jié)晶，分離粗結(jié)晶物，乙醇和乙醇氯仿分步重結(jié)晶。采用該法生產(chǎn)品，周期短、收率高。該工藝易放大和工業(yè)化。
文檔編號B01D61/16GK101805345SQ200910232659
公開日2010年8月18日 申請日期2009年12月4日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月4日
發(fā)明者劉東鋒, 張翼, 楊成東 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司