專利名稱：從夏天無中提取原阿片堿的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從夏天無中提取生物堿原阿片堿(Protopine)的方法。
背景技術(shù)：
夏天無系罌粟科、紫堇屬、無柄紫堇[Corydalis decumbens(Thunb)Pers.(Corydalis amabilis Migo)]的干燥塊莖，用于治療風濕性關(guān)節(jié)炎，腰肌勞損，腦血管意外引起的偏癱，具有鎮(zhèn)痙止痛，活血化瘀和降壓行氣之功效。研究人員發(fā)現(xiàn)夏天無中含有夏天無堿、紫堇米定堿、畢枯枯靈堿、四氫巴馬亭及原阿片堿等三十多種的生物堿。其中，原阿片堿(Protopine)具有膽堿酯酶抑制作用，并具有非選擇性離子通道阻滯作用，可用于治療早老性癡呆病，是早老性癡呆的一種潛在侯選藥。若從天然產(chǎn)物中提取該化合物，則不失為一種簡單、經(jīng)濟而有效的方式。原阿片堿(Protopine)化學(xué)名為7-methyl-2，39，10-bis(methlenedioxy)-7，13a-secoberbin-13a-one，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如下 從夏天無中分離生物總堿的文獻較多，但分離原阿片堿的文獻較少，且所得的原阿片堿產(chǎn)率一般不超過0.1％。如專利CN1445227A(夏天無總生物堿的提取方法及其新的用途，申請?zhí)?2111103.0)夏天無藥材在稀鹽酸中煎煮液過大孔吸附樹脂，水洗后用乙醇洗脫；乙醇洗脫液過氧化鋁凝膠柱，然后，在堿性條件下，析出生物總堿。由于夏天無中的生物堿四氫巴馬亭的鹽酸鹽，在水中溶解度很小，從而不利于原阿片堿的分離；另外，由于鹽酸的煎煮產(chǎn)生大量雜質(zhì)，結(jié)果原阿片堿不能有效地從藥材中抽提出來。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人對原阿片堿的提取進行了潛心研究，篩選出較佳地從夏天無中提取原阿片堿的方法，由此完成了本發(fā)明。
故本發(fā)明要解決的技術(shù)問題即是克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供了一種從夏天無中提取原阿片堿的方法。
本發(fā)明的上述技術(shù)問題是通過下列技術(shù)方案實現(xiàn)的一種從夏天無中提取原阿片堿的方法，其包括以下步驟(1)將夏天無藥材在85～100％乙醇中熱提，濃縮提取液；(2)回收步驟(1)中經(jīng)濃縮的提取液中的乙醇，在殘留液體中加入濃度為0.5～15％的鹽酸，放置使鹽酸不溶物充分析出；(3)將步驟(2)中的鹽酸不溶物濾去，濾液用濃度為1～30％的強堿溶液中和，得生物堿沉淀a；(4)在步驟(3)中得到的生物堿沉淀a中加入0.5～15％的鹽酸與85～100％乙醇，濾去不溶物，濾液用1～30％強堿溶液中和，再一次得生物堿沉淀b，洗滌并干燥得到固體物；(5)將步驟(4)中得到的固體物進行結(jié)晶，即得原阿片堿晶體；其中，步驟(1)中夏天無與乙醇的比例通常為1kg藥材∶5～50L乙醇，所說的熱提一般是指回流提取，相應(yīng)的溫度為78～85℃；其提取次數(shù)可以是1～5次，每次提取時間可為1.5～5小時，多次提取時，顯然也可在上述溫度下直接加熱提取，并將各次提取液合并再濃縮。
至于步驟(2)中在殘留液體中加入鹽酸，較佳地是，至pH為0.5～2，放置10～24小時使鹽酸不溶物充分析出；其中，pH太低，如接近于0，雖鹽酸不溶物析出快，但需加鹽酸量大，且操作風險大(強酸環(huán)境)，而pH高于2則鹽酸不溶物析出慢且不夠充分；至于時間太短則鹽酸不溶物不能充分析出，反之，時間越長，雖然析出充分，但延長了生產(chǎn)周期。
而步驟(3)中濾液用強堿溶液中和，較佳地是，至pH為10～12；其中，pH太高，如接近于14，則需加強堿量大，且操作風險大(強堿環(huán)境)，而pH低于10，則沉淀不夠完全。
同理，步驟(4)中在生物堿沉淀a中加入鹽酸和乙醇，較佳地是，至pH為0.5～3，而濾液用強堿溶液中和，較佳地是，至pH為8～12，從而制得生物堿沉淀b。該生物堿沉淀b進行常規(guī)洗滌以除去雜質(zhì)和過量的強堿溶液后，再進行干燥得到白色固體物。
而步驟(5)中可采用氯仿、甲醇、乙醇、乙醚和丙酮等有機溶劑中的一種或幾種來進行結(jié)晶，如可按常規(guī)方法，于60℃將白色固體溶于上述溶劑中，冷卻至室溫；還可進一步重結(jié)晶，得無色原阿片堿晶體，熔點203～204℃，與對照品作混合熔點測定亦不下降。
較佳地是，該有機溶劑為體積比1∶1～2的氯仿和甲醇。
根據(jù)本發(fā)明，上述鹽酸濃度較佳地是3～12％；更佳地是8～10％。
而上述強堿溶液可以是氫氧化鈉或氫氧化鉀等溶液，其濃度較佳地是5～20％；更佳地是9～15％。
而乙醇溶液濃度較佳地是88～98％；更佳地是90～95％。
本發(fā)明從夏天無中提取原阿片堿的方法中，步驟(2)～(4)，即將生物堿溶于鹽酸或強堿中和時的溫度條件較佳地是0℃～50℃，通常是不需額外加熱與冷卻的室溫下，可減少原阿片堿的損失。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有明顯的優(yōu)點(1)污染少如王兆全于中草藥通訊1977年第8期第13頁所報道的提取方法，采用毒性強的苯作為溶劑，本發(fā)明所采用的溶劑，均能有效地回收而重復(fù)使用，因此降低污染的同時也降低成本；(2)用時短本發(fā)明不需過柱，而且溶劑總量低，步驟少；(3)成本低本發(fā)明所采用的設(shè)備，均為常規(guī)設(shè)備，溶劑可套用，耗能低；(4)得率高采用本發(fā)明的方法，提取安全；從人工栽培的夏天無中提取，殘留于藥材與其他生物堿中原阿片堿的含量極低，晶體原阿片堿的得率明顯提高，占生藥量可大于0.24％(W/W)；(5)純度高經(jīng)高效液相色譜分析，其純度也顯著提高，大多在99.5％以上；(6)耗能低使用的溶劑總量低，涉及的水溶液，不需加熱與冷卻。
具體實施例方式
下面通過實施例進一步說明本發(fā)明。應(yīng)該理解的是，本發(fā)明的實施例是用于說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的限制。根據(jù)本發(fā)明的實質(zhì)對本發(fā)明進行的簡單改進都屬于本發(fā)明要求保護的范圍。另外，在本發(fā)明中，乙醇的濃度百分比為體積百分比；其余試劑濃度百分比為重量百分比。
其中，各實施例中制得的晶體經(jīng)高效液相色譜分析法鑒定和測定含量，具體如下1、TLC鑒定經(jīng)氯仿加乙二胺；丙酮加乙二胺；石油醚，乙醚，甲醇及氨水；多種展開劑鑒定，分離得到的原阿片堿晶體與原阿片堿對照品，其Rf值相同。
2、HPLC含量測定(顧孝紅，唐平，靳祖英.反相高效液相色譜法測定夏天無中原阿片堿的含量.時珍國醫(yī)國藥，2002，13(10)608-609)色譜儀島津SHIMADZUSPD-10A，LC-10AD，C-R8A波長282nm；流動相乙腈∶甲醇∶0.2％磷酸＝150∶100∶750，二乙胺調(diào)pH＝3色譜柱Shim Pack-CLC-ODS流速1ml/分鐘樣品濃度3.35mg/ml
溫度20℃上述對照品原阿片堿購于中國藥品生物制品檢定所。
實施例1稱取干凈的夏天無8千克，置于100L的提取釜中，加入40L 85％乙醇，加熱至80℃，2小時，將提取液經(jīng)紗布濾出，濾渣留于提取釜中，再加40L85％乙醇，繼續(xù)熱提2小時，兩次濾液合并；回收(即濃縮)其中的乙醇，得殘留液體10L。于上述殘留液體中，加入10L 5％鹽酸至pH為2，放置10小時；濾去鹽酸不溶物，濾液用15％的氫氧化鈉水溶液中和pH＝12得生物堿沉淀a；將生物堿沉淀a溶于5L 5％鹽酸，同時加入85％乙醇500ml，使溶液pH為3，濾去新產(chǎn)生的沉淀；濾液用15％的氫氧化鈉水溶液中和，pH＝12，得生物堿沉淀b，用蒸餾水洗滌該沉淀b至pH＝8，干燥得白色固體物；該固體經(jīng)氯仿與甲醇(體積比為1∶1)結(jié)晶與重結(jié)晶，得含量99.65％的無色透明原阿片堿晶體19.27g。
實施例2稱取干凈的夏天無10千克，置于100L的提取釜中，加入50L 95％乙醇，加熱至80℃，2小時，經(jīng)紗布濾出，濾渣留于提取釜中，加50L 95％乙醇，繼續(xù)熱提，兩次濾液合并；回收乙醇，得殘留液體11L，于上述殘留液體中加入10L 10％鹽酸至pH為1.5，放置12小時；濾去鹽酸不溶物，濾液用10％的氫氧化鈉水溶液中和pH＝11得生物堿沉淀a；將生物堿沉淀a溶于5L 10％鹽酸，同時加入95％乙醇500ml，使溶液pH為1，濾去新產(chǎn)生的沉淀；濾液用10％的氫氧化鈉水溶液中和，pH＝10，得生物堿沉淀b，用蒸餾水洗滌該沉淀b至pH＝8，干燥得白色固體；該固體經(jīng)氯仿與甲醇(體積比為1∶1)結(jié)晶與重結(jié)晶，得含量99.73％的原阿片堿24.11g。
實施例3稱取干凈的夏天無1千克置于10L的圓底燒瓶中，加入6L 90％乙醇，加熱至85℃，回流2h，傾出上清液，藥渣留于圓底燒瓶中，重新加入6L 90％乙醇，繼續(xù)熱提2h，合并兩次上述溶液并濃縮；回收乙醇，得殘留液體1L，于上述殘留液體中加入3％鹽酸至pH＝1，放置20小時；濾去不溶物，濾液用30％的氫氧化鈉水溶液中和pH＝11得生物堿沉淀a；將生物堿沉淀a用0.5L 10％鹽酸溶解，同時加入95％乙醇80ml，使溶液pH為1，濾去新產(chǎn)生的沉淀；濾液用20％的氫氧化鈉水溶液中和，pH＝9，得生物堿沉淀b，用蒸餾水洗滌該沉淀b至pH＝8，干燥得白色固體；該固體經(jīng)氯仿與甲醇(體積比為1∶2)結(jié)晶與重結(jié)晶，得含量99.54％的原阿片堿1.89g。
實施例4稱取干凈的夏天無1.2千克置于10L的圓底燒瓶中，加入6L 98％乙醇，加熱至85℃，回流1.5h，傾出上清液，藥渣留于圓底燒瓶中，重新加入6L 98％(V/V)乙醇，繼續(xù)熱提1.5h，合并兩次上述溶液并濃縮；回收乙醇，得殘留液體1.2L，于上述殘留液體中加入8％鹽酸至pH＝1.5，放置24小時，濾去不溶物；濾液用5％的氫氧化鈉水溶液中和pH＝10得生物堿沉淀a；將生物堿沉淀a用0.4L 15％鹽酸溶解，同時加入90％乙醇80ml使溶液pH為0.5，濾去新產(chǎn)生的沉淀；濾液用15％的氫氧化鈉水溶液中和，pH＝8.5，得生物堿沉淀b，用蒸餾水洗滌該沉淀b至pH＝8，干燥得白色固體；該固體經(jīng)氯仿與甲醇(體積比為1∶2)結(jié)晶與重結(jié)晶，得含量99.67％的原阿片堿2.86g。
實施例5稱取干凈的夏天無5千克置于50L的提取釜中，加入25L 90％乙醇，加熱至85℃，回流1.5h，傾出上清液，藥渣留于提取釜中，重新加入25L 90％乙醇，繼續(xù)熱提1.5h，合并2次上述溶液并濃縮；回收乙醇，得殘留液體6L，于上述殘留液體中加入15％鹽酸至pH＝1，放置14小時，濾去不溶物；濾液用20％的氫氧化鈉水溶液中和，pH＝12得生物堿沉淀a；將生物堿沉淀a用2.5L 10％鹽酸溶解，同時加入95％乙醇300ml使溶液pH為2，濾去新產(chǎn)生的沉淀；濾液用20％的氫氧化鈉水溶液中和，pH＝9，得生物堿沉淀b，用蒸餾水洗滌該沉淀b至pH＝8，干燥得白色固體；該固體經(jīng)氯仿與甲醇(體積比為1∶2)結(jié)晶與重結(jié)晶，得含量99.76％的原阿片堿12.10g。
實施例6稱取干凈的夏天無1千克置于100L的提取釜中，加入50L無水乙醇，加熱至78℃，5小時，經(jīng)紗布濾出，收集濾液；回收乙醇，得殘留液體1L，于上述殘留液體中加入0.5％鹽酸至pH＝2，放置15小時，濾去不溶物；濾液用1％的氫氧化鈉水溶液中和，pH＝10得生物堿沉淀a；將生物堿沉淀a用0.5L 3％鹽酸溶解，同時加入98％乙醇300ml使溶液pH為3，濾去新產(chǎn)生的沉淀；濾液用5％的氫氧化鈉水溶液中和，pH＝8，得生物堿沉淀b，用蒸餾水洗滌以除去雜質(zhì)，干燥得白色固體；該固體經(jīng)氯仿與乙醇(體積比為1∶1)結(jié)晶與重結(jié)晶，得含量99.5％的原阿片堿2.27g。
實施例7稱取干凈的夏天無6千克置于50L的提取釜中，加入30L 85％乙醇，加熱至80℃左右，3小時，經(jīng)紗布濾出，濾渣留于提取釜中，再加30L 85％乙醇，繼續(xù)熱提1.5小時，如此反復(fù)提取共5次，合并所有濾液；回收乙醇，得殘留液體6L，于上述殘留液體中加入12％鹽酸至pH＝0.8，放置12小時，濾去不溶物；濾液用9％的氫氧化鉀水溶液中和，pH＝10.5得生物堿沉淀a；將生物堿沉淀a用3L 15％鹽酸溶解，同時加入88％乙醇300ml使溶液pH為1.5，濾去新產(chǎn)生的沉淀；濾液用30％的氫氧化鉀水溶液中和，pH＝10，得生物堿沉淀b，用蒸餾水洗滌該沉淀b至pH＝8，干燥得白色固體；該固體經(jīng)乙醚結(jié)晶與重結(jié)晶，得含量99.6％的原阿片堿14.48g。
實施例8稱取干凈的夏天無5千克置于50L的提取釜中，加入25L 88％乙醇，加熱至85℃，回流1.5h，傾出上清液，藥渣留于提取釜中，重新加入25L 88％乙醇，繼續(xù)熱提1.5h，傾出上清液再重復(fù)提取1次，合并3次上述溶液；回收乙醇，得殘留液體5L，于上述殘留液體中加入15％鹽酸至pH＝0.5，放置14小時，濾去不溶物；濾液用20％的氫氧化鈉水溶液中和，pH＝12得生物堿沉淀a；將生物堿沉淀a用2.5L 8％鹽酸溶解，同時加入95％乙醇300ml使溶液pH為2，濾去新產(chǎn)生的沉淀；濾液用20％的氫氧化鈉水溶液中和，pH＝9，得生物堿沉淀b，用蒸餾水洗滌該沉淀b至pH＝8，干燥得白色固體；該固體經(jīng)氯仿與丙酮(體積比為1∶1.5)結(jié)晶，得含量99.7％的原阿片堿12.14g。
權(quán)利要求
1.一種從夏天無中提取原阿片堿的方法，其特征在于該方法包括以下步驟(1)將夏天無藥材在85～100％乙醇中熱提，濃縮提取液；(2)回收步驟(1)中經(jīng)濃縮的提取液中的乙醇，在殘留液體中加入濃度為0.5～15％的鹽酸，放置使鹽酸不溶物充分析出；(3)將步驟(2)中的鹽酸不溶物濾去，濾液用濃度為1～30％的強堿溶液中和，得生物堿沉淀a；(4)在步驟(3)中得到的生物堿沉淀a中加入0.5～15％的鹽酸與85～100％乙醇，濾去不溶物，濾液用1～30％強堿溶液中和，再一次得生物堿沉淀b，洗滌并干燥得到固體物；(5)將步驟(4)中得到的固體物進行結(jié)晶，即得原阿片堿晶體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(1)中夏天無與乙醇的比例為1kg藥材5～50L乙醇，所說的熱提是指在78～85℃溫度下進行提取或回流提取，其提取次數(shù)為1～5次，每次提取時間為1.5～5小時。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(2)中在殘留液體中加入鹽酸至pH為0.5～2，放置10～24小時。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(3)中濾液用強堿溶液中和至pH為10～12。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(4)中在生物堿沉淀a中加入鹽酸和乙醇至pH為0.5～3，濾液用強堿溶液中和至pH為8～12，而得生物堿沉淀b。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(5)采用有機溶劑氯仿、甲醇、乙醇、乙醚和丙酮中的一種或幾種來進行結(jié)晶。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于該有機溶劑為體積比1∶1～2的氯仿和甲醇。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于該乙醇溶液濃度為90～95％。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于該鹽酸濃度為3～12％。
10.根據(jù)權(quán)利要求1～9任一權(quán)利要求所述的方法，其特征在于該強堿溶液是氫氧化鈉或氫氧化鉀，其濃度為5～20％。
全文摘要
本發(fā)明公開了從中藥夏天無中提取生物堿原阿片堿的方法，其包括以下步驟(1)將夏天無藥材在85～100％乙醇中熱提，濃縮提取液；(2)回收該經(jīng)濃縮的提取液中的乙醇，在殘留液體中加入濃度為0.5～15％的鹽酸，放置；(3)將步驟(2)中的鹽酸不溶物濾去，濾液用濃度為1～30％的強堿溶液中和，得生物堿沉淀a；(4)在該生物堿沉淀a中加入0.5～15％的鹽酸與85～100％乙醇，濾去不溶物，濾液用1～30％強堿溶液中和，再一次得生物堿沉淀b，洗滌并干燥得到固體物；(5)將該固體物進行結(jié)晶。通過該方法，提取得到的原阿片堿產(chǎn)率為夏天無生藥材的0.24％以上，純度在99.5％以上。與現(xiàn)有的技術(shù)相比，具有污染少、用時短、成本低、得率高、純度高、耗能低的優(yōu)勢。
文檔編號C07D491/00GK1683372SQ20051002433
公開日2005年10月19日 申請日期2005年3月11日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月11日
發(fā)明者楊義芳, 杜立春 申請人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院