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      一種水稻根系硝化作用快速檢測方法

      文檔序號:6020248閱讀:203來源:國知局
      專利名稱:一種水稻根系硝化作用快速檢測方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明涉及植物營養(yǎng)快速化檢測技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及水稻根系硝化作 用快速檢測方法。
      背景技術(shù)
      水稻等植物根系硝化作用強(qiáng)弱差異與水稻生長及氮素吸收利用效率密 切相關(guān),表現(xiàn)為根系硝化作用強(qiáng)的水稻生長及氮素利用率均高于硝化作用弱的水稻品種。 以往檢測水稻根系硝化作用強(qiáng)弱均是通過采集水稻根表及根際土壤,測定土壤硝化強(qiáng)度的 方法進(jìn)行測定。此種方法由于將土壤取出后再進(jìn)行培養(yǎng),從而屬于非原位測定,因此增加了 測定過程中人為因素的干擾,且耗時長,測定方法復(fù)雜。

      發(fā)明內(nèi)容
      本發(fā)明的目的就是提供一種水稻根系硝化作用快速檢測方法,該方法 能在水稻植株未被破壞的情況下,能快速檢測根系硝化作用強(qiáng)弱。 本發(fā)明的具體方法如下首先配制水稻營養(yǎng)液,所述水稻營養(yǎng)液由NH4C1 10mmoll—lPKH2P04 0. 5mmol l—1配制而成,其pH值為7,將重量為上述水稻營養(yǎng)液重量 0. 8 %的瓊脂糖加入配制好的水稻營養(yǎng)液中,并放在電爐上加熱至瓊脂糖全部熔化,待營養(yǎng) 液稍冷卻后加入適量磺胺試劑,所述磺胺試劑的配制方法如下溶解10g磺胺和0. 5g萘基 乙烯胺于150ml去離子水中,加入100ml磷酸,冷卻后用去離子水定容至1000ml。所加入的 磺胺試劑為顯色劑,所述磺胺試劑的用量按體積比為水稻營養(yǎng)液的l/200。用玻璃棒小心攪 拌營養(yǎng)液,盡量避免產(chǎn)生氣泡。將攪拌均勻的營養(yǎng)液緩慢倒入玻璃培養(yǎng)皿中(培養(yǎng)皿的直 徑大小視待測水稻根系大小而定,以能將水稻根系全部放入為宜),倒入約lcm深。用去離 子水小心沖洗水稻根系,盡量避免根系損傷。將沖洗干凈的水稻根系放置于冷卻至4(TC左 右的營養(yǎng)液中,此時迅速用鑷子將植株根系均勻擺放在裝有營養(yǎng)液的培養(yǎng)皿中,待營養(yǎng)液 冷卻至3『C左右時,由于營養(yǎng)液中含有0. 8%的瓊脂糖,因此營養(yǎng)液凝固呈半透明的無色 凝膠狀,水稻整個根系固定在凝膠中,清晰可見。 大約2h后,可見到水稻根系表面變?yōu)榧t色,且可以看出新生根表面紅色較深,而 老根表面紅色較淺,甚至不變紅。出現(xiàn)上述現(xiàn)象主要是由于凝膠中含有N4C1,植株根系一 方面吸收NH/,另一方面由于水稻根表生物膜上存在硝化細(xì)菌,且根系可以泌氧,因此硝化 作用在根表發(fā)生,NH/轉(zhuǎn)化為N(V。根表由于硝化作用產(chǎn)生的N(V在磺胺試劑作用下變?yōu)?紅色,且紅色越深,說明硝化產(chǎn)生的N03—量越多。因此可以通過根表形成的紅色深淺判斷水 稻硝化作用的強(qiáng)弱。 本方法可視為半原位測定,植株在未被破壞的情況下,真實(shí)反映其根系硝化作用 強(qiáng)弱。在操作中,變色時間因測定植株不同而不同。本方法作為定性對比待測植株硝化強(qiáng) 弱,具有直觀、快速等優(yōu)點(diǎn)。
      權(quán)利要求
      一種水稻根系硝化作用快速檢測方法,其具體方法如下首先配制水稻營養(yǎng)液,所述水稻營養(yǎng)液由NH4Cl 10mmol 1-1和KH2PO40.5mmol1-1配制而成,其pH值為7,將重量為上述水稻營養(yǎng)液重量0.8%的瓊脂糖加入配制好的水稻營養(yǎng)液中,并放在電爐上加熱至瓊脂糖全部熔化,待營養(yǎng)液稍冷卻后加入適量磺胺試劑,所述磺胺試劑的配制方法如下溶解10g磺胺和0.5g萘基乙烯胺于150ml去離子水中,加入100ml磷酸,冷卻后用去離子水定容至1000ml,所述磺胺試劑的用量按體積比為水稻營養(yǎng)液的1/200,用玻璃棒小心攪拌營養(yǎng)液,將攪拌均勻的營養(yǎng)液緩慢倒入玻璃培養(yǎng)皿中,倒入約1cm深,用去離子水小心沖洗水稻根系,盡量避免根系損傷。將沖洗干凈的水稻根系放置于冷卻至40℃左右的營養(yǎng)液中,此時迅速用鑷子將植株根系均勻擺放在裝有營養(yǎng)液的培養(yǎng)皿中,通過觀測水稻根系表面顏色的變化,來測定水稻硝化作用的強(qiáng)弱。
      全文摘要
      本發(fā)明提供一種水稻根系硝化作用快速檢測方法,首先配制水稻營養(yǎng)液,所述水稻營養(yǎng)液由NH4Cl 10mmol 1-1和KH2PO40.5mmol 1-1配制而成,再將瓊脂糖加入營養(yǎng)液中,并放在電爐上加熱至瓊脂糖全部熔化,待營養(yǎng)液稍冷卻后加入適量磺胺試劑,將營養(yǎng)液倒入玻璃培養(yǎng)皿中,將植株根系均勻擺放在裝有營養(yǎng)液的培養(yǎng)皿中,通過觀測水稻根系表面顏色的變化來測定水稻硝化作用的強(qiáng)弱,本方法具有直觀、快速等優(yōu)點(diǎn)。
      文檔編號G01N33/483GK101750480SQ20081013636
      公開日2010年6月23日 申請日期2008年12月2日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月2日
      發(fā)明者李奕林, 李忠佩, 王興祥 申請人:中國科學(xué)院南京土壤研究所
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