專利名稱：一種液體中非蛋白質(zhì)氮含量的測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種氮的分析測(cè)定技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種液體中非蛋白質(zhì)氮含量的測(cè)定方法。
背景技術(shù)：
蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)，由于蛋白質(zhì)組成及其性質(zhì)的復(fù)雜性，通常用總氮含量表示蛋白質(zhì)氮的含量。然而總氮中還包含大量非蛋白質(zhì)氮成分如氨基酸、核糖核酸、生物堿、硝酸鹽、亞硝酸鹽和氨鹽等，給蛋白質(zhì)氮的測(cè)定帶來較大的誤差。例如對(duì)液體營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行測(cè)定，用上述總氮含量代替蛋白質(zhì)氮含量的方法會(huì)使得到的蛋白質(zhì)含量高于實(shí)際的蛋白質(zhì)含量，影響對(duì)液體營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)品質(zhì)的評(píng)價(jià)，還給了不法分子以可乘之機(jī)，以含氮量高的非蛋白質(zhì)氮冒充蛋白質(zhì)氮，因此為了對(duì)液體的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值做出正確地判斷，還需要對(duì)其中的非蛋白質(zhì)氮的含量進(jìn)行測(cè)定，作為判斷液體中蛋白質(zhì)氮含量的輔助手段。另外，對(duì)于水體富營(yíng)養(yǎng)化的評(píng)價(jià)，非蛋白質(zhì)氮含量是其中的評(píng)價(jià)指標(biāo)之一，常被用來作為水體受營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)污染的程度判定的輔助手段，是環(huán)境水檢測(cè)的主要項(xiàng)目之一。因此，建立一種快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確的測(cè)定液體中非蛋白質(zhì)氮含量的方法有著重要意義。
對(duì)于氮含量的測(cè)定，研究者們開展了大量的工作。如鄒琳等采用流動(dòng)注射分析儀測(cè)定了水中的總氮和總磷的含量(鄒琳，周圣東，陳衛(wèi).高壓消解\流動(dòng)注射光度法同時(shí)測(cè)定水中總氮與總磷.中國(guó)給水排水，2009，25 02) :93 97.)，其過程為在110°C下，將水樣通過堿性過硫酸鉀和硫酸兩次消解，得到的消解產(chǎn)物分別進(jìn)入流動(dòng)注射分析儀中的總氮、總磷分析系統(tǒng)，得到水樣中總氮、總磷的含量。在總氮分析系統(tǒng)中，消解產(chǎn)物通過一個(gè)鍍銅的鎘圈后，硝酸根被定量還原為亞硝酸根，在酸性條件下，亞硝酸根與磺胺和N-萘基乙二胺鹽酸鹽在45°C恒溫條件下反應(yīng)生成紫紅色偶氮產(chǎn)物，其最佳吸收波長(zhǎng)為550nm，采用分光光度法對(duì)得到的紫紅色偶氮產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)定，得到水中的總氮含量。
高壓消解對(duì)非蛋白質(zhì)氮中的無機(jī)氮消解效果較好，但是對(duì)于某些氮雜環(huán)化合物、 植物堿類的非蛋白質(zhì)氮，如茶堿等來說，由于其結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜，采用高壓消解時(shí)存在消解不完全、不徹底的現(xiàn)象，從而造成對(duì)非蛋白質(zhì)氮測(cè)定的回收率低，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。對(duì)于液體樣品來說，尤其是液體營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，其中大部分非蛋白質(zhì)氮為植物堿或氮雜環(huán)類化合物， 而且液體中還含有還原性物質(zhì)，如糖類，這些還原性物質(zhì)會(huì)與氧化劑反應(yīng)，從而影響對(duì)含氮組分的消解，采用上述方法對(duì)其中的非蛋白質(zhì)氮含量進(jìn)行測(cè)定時(shí)，得到的消解產(chǎn)物不夠完全和徹底，導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種液體中非蛋白質(zhì)氮含量的測(cè)定方法，本發(fā)明提供的方法對(duì)非蛋白質(zhì)氮的測(cè)定具有高的回收率，得到的液體中非蛋白質(zhì)氮含量的結(jié)果準(zhǔn)確。
本發(fā)明提供一種液體中非蛋白質(zhì)氮含量的測(cè)定方法，包括以下步驟
a)分離液體中的蛋白質(zhì)氮，得到含有非蛋白質(zhì)氮的待測(cè)試樣；
b)在加熱條件下，向所述待測(cè)試樣中加熱過硫酸鉀，得到混合溶液；
c)將所述混合溶液依次經(jīng)過紫外催化和高溫加熱，得到消解產(chǎn)物；
d)檢測(cè)所述消解產(chǎn)物，得到紫外光譜數(shù)據(jù)；
e)根據(jù)所述紫外光譜數(shù)據(jù)和預(yù)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到液體中非蛋白質(zhì)氮含量。
優(yōu)選的，所述紫外催化為在非硫酸酸性環(huán)境中進(jìn)行紫外催化。
優(yōu)選的，所述紫外催化的溫度為90°C 110°C。
優(yōu)選的，所述高溫加熱的溫度為95°C 150°C。
優(yōu)選的，所述高溫加熱為加壓高溫加熱。
優(yōu)選的，所述加壓高溫加熱的壓力為5Psi 8Psi。
優(yōu)選的，所述步驟b)中的加熱溫度為90°C 110°C。
優(yōu)選的，所述步驟a)具體為
向液體中加入蛋白質(zhì)變性試劑，加熱得到的混合物，分離后得到含有非蛋白質(zhì)氮的待測(cè)試樣。
優(yōu)選的，所述蛋白質(zhì)變性試劑為有機(jī)酸。
優(yōu)選的，所述步驟b)前還包括
向所述待測(cè)試樣中加入過氧化氫，氧化所述待測(cè)試樣中的還原性組分；
和/或向所述待測(cè)試樣中加入活性炭，除去所述待測(cè)試樣中的無機(jī)色素；
和/或向所述待測(cè)試樣中加入乙二胺四乙酸二鈉，除去所述待測(cè)試樣中的金屬離子。
本發(fā)明提供了一種液體中非蛋白質(zhì)氮含量的測(cè)定方法，包括以下步驟分離液體中的蛋白質(zhì)氮，得到含有非蛋白質(zhì)氮的待測(cè)試樣；在加熱條件下，向所述待測(cè)試樣中加入過硫酸鉀，得到混合溶液；將所述混合溶液依次經(jīng)過紫外催化和高溫加熱，得到消解產(chǎn)物；檢測(cè)所述消解產(chǎn)物，得到紫外光譜數(shù)據(jù)；根據(jù)所述紫外光譜數(shù)據(jù)和預(yù)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到液體樣品中非蛋白質(zhì)氮含量。在本發(fā)明中，過硫酸鉀在加熱條件下會(huì)產(chǎn)生活性氧原子
，得到的活性氧原子
對(duì)液體樣品進(jìn)行初步消解，然后在紫外催化條件下，部分活性氧原子
在紫外催化條件下與水反應(yīng)生成自由基，該自由基使液體樣品中的非蛋白質(zhì)氮類化合物得到消解；接著，在高溫條件下，活性氧原子
對(duì)液體中的非蛋白質(zhì)氮類化合物進(jìn)行進(jìn)一步地消解，最終使各類非蛋白質(zhì)氮組分消解。本發(fā)明提供的方法在對(duì)液體中的非蛋白質(zhì)氮類化合物消解的同時(shí)也消解了其中的還原性組分，使其失去了還原作用，消除了對(duì)非蛋白質(zhì)氮化合物消解的干擾，提高了消解結(jié)果的均一性，提高了對(duì)非蛋白質(zhì)氮測(cè)定的回收率和準(zhǔn)確性。另外，本發(fā)明提供的測(cè)定方法具有良好的穩(wěn)定和重復(fù)性。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明提供的方法對(duì)液體中的茶堿的回收率達(dá)到100.8%，另外， 本發(fā)明提供的方法采用連續(xù)消解的方式，且消解條件溫和，操作簡(jiǎn)單、省時(shí)，步驟簡(jiǎn)便；本發(fā)明提供的方法批量處理樣品能力較強(qiáng)，處理周期較短，大大提高了檢測(cè)效率。


圖1為本發(fā)明實(shí)施例1得到的紫外光譜圖2為本發(fā)明實(shí)施例1得到的非線性二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)曲線；
圖3為本發(fā)明實(shí)施例1得到的線性標(biāo)準(zhǔn)曲線。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明提供了一種液體中非蛋白質(zhì)氮含量的測(cè)定方法，包括以下步驟
a)分離液體中的蛋白質(zhì)氮，得到含有非蛋白質(zhì)氮的待測(cè)試樣；
b)在加熱條件下，向所述待測(cè)試樣中加入過硫酸鉀，得到混合溶液；
c)將所述混合溶液依次經(jīng)過紫外催化和高溫加熱，得到消解產(chǎn)物；
d)檢測(cè)所述消解產(chǎn)物，得到紫外光譜數(shù)據(jù)；
e)根據(jù)所述紫外光譜數(shù)據(jù)和預(yù)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到液體中非蛋白質(zhì)氮含量。
為了便于對(duì)液體中非蛋白質(zhì)氮含量進(jìn)行測(cè)定，本發(fā)明優(yōu)選對(duì)所述液體進(jìn)行前處理，具體包括以下步驟
如果所述液體中含有不溶性雜質(zhì)，如污水，過濾所述液體，除去其中的不溶性雜質(zhì)，得到濾液；如果所述液體中氮含量較高，本發(fā)明將所述液體優(yōu)選稀釋2 20倍，更優(yōu)選為5 15倍，最優(yōu)選為8 10倍；如果所述液體中氮含量較低，本發(fā)明優(yōu)選將所述液體濃縮2 20倍，更優(yōu)選為5 15倍，最優(yōu)選為8 10倍。
對(duì)所述液體進(jìn)行前處理后，分離所述液體中的蛋白質(zhì)氮，得到含有非蛋白質(zhì)氮的待測(cè)試樣。
本發(fā)明可以采用向液體中加入蛋白質(zhì)變性試劑，加熱得到的混合物，或紫外烘烤所述液體的方法，固化其中的蛋白質(zhì)，分離固化后的蛋白質(zhì)氮，得到含有非蛋白質(zhì)氮的待測(cè)試樣；本發(fā)明優(yōu)選向液體中加入蛋白質(zhì)變性試劑，將得到的混合物加熱，分離固化后的蛋白質(zhì)氮，得到含有非蛋白質(zhì)氮的待測(cè)試樣。所述蛋白質(zhì)變性試劑優(yōu)選為有機(jī)酸，更優(yōu)選為醋酸水溶液；所述醋酸水溶液的體積分?jǐn)?shù)優(yōu)選為0. 5%，更優(yōu)選為0. 3% 4%，最優(yōu)選為0.5% 3% ；所述蛋白質(zhì)變性試劑與液體的體積比優(yōu)選為25 (1 10)，更優(yōu)選為 25 (3 幻；優(yōu)選將得到的混合物加熱至沸騰；所述加熱時(shí)間優(yōu)選為5分鐘 50分鐘，更優(yōu)選為8分鐘 40分鐘，最優(yōu)選為20分鐘 30分鐘。
停止加熱后，優(yōu)選將得到的溶液趁熱過濾，用所述蛋白質(zhì)變性試劑優(yōu)選淋洗1 次 10次，更優(yōu)選為2次 8次，最優(yōu)選為3 5次，合并每次得到的濾液，冷卻后定容，得到含有非蛋白質(zhì)氮的待測(cè)試樣。
為了減小液體樣品中的還原性組分對(duì)其中的非蛋白氮含量測(cè)定的干擾，本發(fā)明對(duì)所述待測(cè)試樣進(jìn)行消解前優(yōu)選氧化所述待測(cè)試樣中的還原性組分。在本發(fā)明中，優(yōu)選向所述待測(cè)試樣中加入過氧化氫，氧化所述待測(cè)試樣中的還原性組分。所述過氧化氫與所述待測(cè)試樣中的還原性組分進(jìn)行氧化還原反應(yīng)，使其失去還原作用，所述過氧化氫的質(zhì)量濃度優(yōu)選為3 % 50 %，更優(yōu)選為10 % 30 %，本發(fā)明對(duì)所述氧化還原反應(yīng)中原料的配比，反應(yīng)條件等沒有特殊限制，為本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的還原性物質(zhì)與過氧化氫之間的氧化還原反應(yīng)。
為了減小雜質(zhì)對(duì)非蛋白質(zhì)氮測(cè)定的干擾，本發(fā)明在對(duì)所述待測(cè)試樣進(jìn)行消解前優(yōu)選除去其中的雜質(zhì)，得到含有非蛋白質(zhì)氮的待測(cè)試樣。如所述待測(cè)試樣中含有無機(jī)色素時(shí)， 可以采用以下方法處理優(yōu)選向所述待測(cè)試樣中加入活性炭，過濾得到的混合溶液，除去其中的無機(jī)色素；所述待測(cè)試樣中含有金屬離子時(shí)，可以采用以下方法處理優(yōu)選向所述待測(cè)試樣中加入乙二胺四乙酸二鈉溶液，過濾得到的混合溶液，除去其中的金屬離子，所述乙二胺四乙酸二鈉溶液的濃度優(yōu)選為0. lg/L 5g/L，更優(yōu)選為0. 2g/L 3g/L，最優(yōu)選為 0. 8g/L 2g/L ；所述待測(cè)試樣中含有無機(jī)色素和金屬離子時(shí)，可以先用上述方法除去無機(jī)色素再除去金屬離子，也可以先用上述方法除去金屬離子再除去無機(jī)色素。
得到含有非蛋白質(zhì)氮的待測(cè)試樣后，本發(fā)明在加熱條件下，向所述待測(cè)試樣中加入過硫酸鉀，得到混合溶液。所述過硫酸鉀在加熱條件下釋放出活性氧原子
，得到的活性氧原子
會(huì)對(duì)待測(cè)試樣中的非蛋白質(zhì)氮化合物進(jìn)行消解，得到消解產(chǎn)物。所述過硫酸鉀的質(zhì)量與所述液體的體積比優(yōu)選為Ig (1 20)mL，更優(yōu)選為Ig Q M)mL，最優(yōu)選為Ig (3 10)mL;優(yōu)選向所述待測(cè)試樣中加入過硫酸鉀溶液，所述過硫酸鉀溶液的摩爾濃度優(yōu)選為0. lmol/L lmol/L，更優(yōu)選為0. 15mol/L 0. 8mol/L,最優(yōu)選為0. 25mol/ L 0. 5mol/L ；所述加熱溫度優(yōu)選為90°C 110°C，更優(yōu)選為95°C 105°C。
得到混合溶液后，本發(fā)明將所述混合溶液依次進(jìn)行紫外催化和高溫加熱，得到消解產(chǎn)物。
首先將所述混合溶液進(jìn)行紫外催化，得到紫外催化的消解產(chǎn)物。在紫外催化過程中，上述得到的部分活性氧原子
在紫外催化的條件下與水反應(yīng)，優(yōu)選在紫外燈照射條件下，生成自由基，所述自由基可對(duì)待測(cè)試樣中的各類有機(jī)氮等還原性組分進(jìn)行消解，得到紫外催化的消解產(chǎn)物。所述紫外催化優(yōu)選在非硫酸酸性環(huán)境中進(jìn)行紫外催化，更優(yōu)選為在鹽酸酸性環(huán)境中進(jìn)行紫外催化；所述紫外催化的溫度優(yōu)選為90°C 110°C，更優(yōu)選為 95°C 105 "C。
得到紫外催化的消解產(chǎn)物后，本發(fā)明將所述紫外催化的消解產(chǎn)物繼續(xù)進(jìn)行高溫加熱，得到所述待測(cè)試樣的消解產(chǎn)物。在高溫加熱過程中，上述得到的活性氧原子
在高溫條件下對(duì)所述紫外催化的消解產(chǎn)物進(jìn)行更進(jìn)一步的消解，得到所述待測(cè)樣品的消解產(chǎn)物。所述高溫加熱的溫度優(yōu)選為95°C 150°C，更優(yōu)選為110°C 140°C，最優(yōu)選為120°C 130°C ；所述高溫加熱優(yōu)選為加壓高溫加熱，所述加壓高溫加熱的壓力優(yōu)選為5Psi 8I^i， 更優(yōu)選為5. 5Psi 7. 5Psi。
得到所述待測(cè)試樣的消解產(chǎn)物后，檢測(cè)所述消解產(chǎn)物，本發(fā)明優(yōu)選采用紫外分光光度法檢測(cè)所述消解產(chǎn)物，得到所述消解產(chǎn)物的紫外光譜數(shù)據(jù)。首先將得到的消解產(chǎn)物還原，得到亞硝酸鹽，然后將所述亞硝酸鹽優(yōu)選與磺胺和Ν-α-萘基)乙二胺二鹽酸鹽反應(yīng)， 得到紫紅色產(chǎn)物，采用紫外分光光度法測(cè)定得到的紫紅色產(chǎn)物，得到所述消解產(chǎn)物的紫外光譜數(shù)據(jù)。優(yōu)選用鎘將得到的消解產(chǎn)物還原，得到亞硝酸鹽；所述磺胺的濃度優(yōu)選為Ig/ L 50g/L，更優(yōu)選為10g/L 40g/L，最優(yōu)選為20g/L 30g/L ；所述N-萘基乙二胺鹽酸鹽的濃度優(yōu)選為0. lg/L 10g/L,更優(yōu)選為0. 5g/L 8g/L，最優(yōu)選為lg/L 5g/L ；所述測(cè)定波長(zhǎng)優(yōu)選為520nm 560nm，更優(yōu)選為530nm 550nm，最優(yōu)選為5;35nm M5nm。
根據(jù)上述技術(shù)方案得到的液體的待測(cè)試樣的紫外光譜數(shù)據(jù)和預(yù)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可得到液體中非蛋白質(zhì)氮含量。
在本發(fā)明中，所述標(biāo)準(zhǔn)曲線優(yōu)選按照以下方法獲得
配制系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液；
在加熱條件下，向所述標(biāo)準(zhǔn)溶液中加入過硫酸鉀，得到混合溶液；
將所述混合溶液依次經(jīng)過紫外催化和高溫加熱，得到消解產(chǎn)物；
檢測(cè)所述消解產(chǎn)物，得到系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的紫外光譜數(shù)據(jù)；
根據(jù)所述紫外光譜數(shù)據(jù)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
本發(fā)明中所述標(biāo)準(zhǔn)溶液優(yōu)選為硝酸鈉水溶液，采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心的硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)，配制系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。首先，配制標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的儲(chǔ)備液，將得到的儲(chǔ)備液稀釋至標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。所述標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度優(yōu)選為0.001% 10%，更優(yōu)選為0. 01% 5%，最優(yōu)選為0. ；優(yōu)選用醋酸溶液將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)儲(chǔ)備液稀釋到標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，所述醋酸溶液的體積分?jǐn)?shù)優(yōu)選為0. 1 % 10 %，更優(yōu)選為0. 25 % 8 %，最優(yōu)選為0. 5 % 5%。
得到系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液后，本發(fā)明將在加熱條件下，向所述標(biāo)準(zhǔn)溶液中加入過硫酸鉀，得到混合溶液。所述過硫酸鉀在加熱條件下釋放出活性氧原子
，得到的活性氧原子
會(huì)對(duì)所述標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行消解，得到消解產(chǎn)物。所述過硫酸鉀與所述標(biāo)準(zhǔn)溶液中標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的質(zhì)量比優(yōu)選為1 (1 20)，更優(yōu)選為1 0 15)，最優(yōu)選為1 (3 10); 優(yōu)選向所述標(biāo)準(zhǔn)溶液中加入過硫酸鉀溶液，所述過硫酸鉀溶液的摩爾濃度優(yōu)選為0. Imol/ L lmol/L，更優(yōu)選為0. 15mol/L 0. 8mol/L,最優(yōu)選為0. 25mol/L 0. 5mol/L ；所述加熱溫度優(yōu)選為90°C 110°C，更優(yōu)選為95°C 105°C。
得到混合溶液后，將所述混合溶液依次進(jìn)行紫外催化和高溫加熱，得到消解產(chǎn)物。 所述紫外催化和高溫加熱過程與上述技術(shù)方案中的紫外催化和高溫加熱的過程相同。
按照上述技術(shù)方案中的紫外催化和高溫加熱過程，得到消解產(chǎn)物后，檢測(cè)所述消解產(chǎn)物，得到系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的紫外光譜數(shù)據(jù)。所述檢測(cè)過程與上述技術(shù)方案中的檢測(cè)過程相同。
根據(jù)上述技術(shù)方案中的檢測(cè)過程，得到系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的紫外光譜數(shù)據(jù)后，根據(jù)所述紫外光譜數(shù)據(jù)及其對(duì)應(yīng)的濃度繪制得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。所述標(biāo)準(zhǔn)曲線優(yōu)選為非線性二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)曲線或線性標(biāo)準(zhǔn)曲線。
根據(jù)上述技術(shù)方案得到的液體樣品消解產(chǎn)物的紫外光譜數(shù)據(jù)和標(biāo)準(zhǔn)曲線，經(jīng)過計(jì)算得到液體中非蛋白質(zhì)氮的質(zhì)量，再將所述非蛋白質(zhì)氮的質(zhì)量除以所述液體的體積或質(zhì)量，得到液體中非蛋白質(zhì)氮含量。
本發(fā)明對(duì)液體含有的非蛋白質(zhì)氮化合物中的茶堿進(jìn)行測(cè)定，得到對(duì)茶堿測(cè)定的回收率達(dá)到了 100.8%。
茶堿是甲基嘌呤類藥物，是氮雜環(huán)化合物，具有式(I)結(jié)構(gòu)
權(quán)利要求
1.一種液體中非蛋白質(zhì)氮含量的測(cè)定方法，包括以下步驟a)分離液體中的蛋白質(zhì)氮，得到含有非蛋白質(zhì)氮的待測(cè)試樣；b)在加熱條件下，向所述待測(cè)試樣中加熱過硫酸鉀，得到混合溶液；c)將所述混合溶液依次經(jīng)過紫外催化和高溫加熱，得到消解產(chǎn)物；d)檢測(cè)所述消解產(chǎn)物，得到紫外光譜數(shù)據(jù)；e)根據(jù)所述紫外光譜數(shù)據(jù)和預(yù)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到液體中非蛋白質(zhì)氮含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定方法，其特征在于，所述紫外催化為在非硫酸酸性環(huán)境中進(jìn)行紫外催化。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定方法，其特征在于，所述紫外催化的溫度為90°C 110°C。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定方法，其特征在于，所述高溫加熱的溫度為95°C 150°C。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定方法，其特征在于，所述高溫加熱為加壓高溫加熱。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的測(cè)定方法，其特征在于，所述加壓高溫加熱的壓力為5Psi SI3Si。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定方法，其特征在于，所述步驟b)中的加熱溫度為90°C 110°C。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定方法，其特征在于，所述步驟a)具體為向液體中加入蛋白質(zhì)變性試劑，加熱得到的混合物，分離后得到含有非蛋白質(zhì)氮的待測(cè)試樣。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的測(cè)定方法，其特征在于，所述蛋白質(zhì)變性試劑為有機(jī)酸。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定方法，其特征在于，所述步驟b)前還包括向所述待測(cè)試樣中加入過氧化氫，氧化所述待測(cè)試樣中的還原性組分；和/或向所述待測(cè)試樣中加入活性炭，除去所述待測(cè)試樣中的無機(jī)色素；和/或向所述待測(cè)試樣中加入乙二胺四乙酸二鈉，除去所述待測(cè)試樣中的金屬離子。
全文摘要
本發(fā)明提供一種液體中非蛋白質(zhì)氮含量的測(cè)定方法，包括以下步驟分離液體中的蛋白質(zhì)氮，得到含有非蛋白質(zhì)氮的待測(cè)試樣；在加熱條件下，向所述待測(cè)試樣中加熱過硫酸鉀，得到混合溶液；將所述混合溶液依次經(jīng)過紫外催化和高溫加熱，得到消解產(chǎn)物；檢測(cè)所述消解產(chǎn)物，得到紫外光譜數(shù)據(jù)；根據(jù)所述紫外光譜數(shù)據(jù)和預(yù)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到液體中的非蛋白質(zhì)氮含量。本發(fā)明的方法能夠更加完全和徹底的消解液體中的非蛋白質(zhì)氮，具有良好的消解效果，在對(duì)液體中非蛋白質(zhì)氮消解的同時(shí)也消解了其中的還原性組分，使其失去了還原作用，減少對(duì)非蛋白質(zhì)氮消解的干擾，從而提高了消解結(jié)果的均一性，提高了對(duì)非蛋白質(zhì)氮測(cè)定的回收率，提高了測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。
文檔編號(hào)G01N21/33GK102519901SQ20111046014
公開日2012年6月27日 申請(qǐng)日期2011年12月30日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月30日
發(fā)明者孔浩輝 申請(qǐng)人:廣東中煙工業(yè)有限責(zé)任公司