用作沉默調(diào)節(jié)蛋白調(diào)節(jié)劑的取代的雙環(huán)氮雜雜環(huán)化合物和類似物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了新的取代的雙環(huán)氮雜雜環(huán)沉默調(diào)節(jié)蛋白調(diào)節(jié)化合物和其使用方法。該沉默調(diào)節(jié)蛋白-調(diào)節(jié)化合物可用于提高細(xì)胞壽命，以及治療和/或預(yù)防多種疾病和病癥，包括，例如，與衰老或應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)的疾病或病癥，糖尿病，肥胖癥，神經(jīng)變性疾病，心血管疾病，血液凝固病癥，炎癥，癌癥，和/或潮紅，以及受益于線粒體的活性增加的疾病或病癥。還提供了包含與另一種治療劑組合的沉默調(diào)節(jié)蛋白調(diào)節(jié)化合物的組合物。
【專利說(shuō)明】用作沉默調(diào)節(jié)蛋白調(diào)節(jié)劑的取代的雙環(huán)氮雜雜環(huán)化合物和類似物
[0001]發(fā)明背景
[0002]沉默信息調(diào)節(jié)劑(Silent Information Regulator, SIR)基因家族代表存在于范圍從古細(xì)菌(archaebacteria)至真核生物的生物體的基因組中的高度保守性的一組基因。編碼的SIR蛋白質(zhì)涉及從基因沉默的調(diào)節(jié)至DNA修復(fù)的各種不同程序。此家族中完善表征的基因?yàn)獒劸平湍窼IR2(S.cerevisiae SIR2)，其涉及含有規(guī)定酵母交配型、端粒位置效應(yīng)及細(xì)胞老化的信息的沉默HM基因座。由SIR基因家族成員編碼的蛋白質(zhì)顯示:在250個(gè)氨基酸的核心結(jié)構(gòu)域中有高度序列保守。于鼠傷寒沙門(mén)氏菌(Salmonella typhimurium)中的Sir2同系物CobB起到NAD (煙酰胺腺嘌呤二核苷酸)-依賴性ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶的作用。
[0003]Sir2蛋白為使用NAD作為協(xié)同底物的第III類脫乙?；?。不同于其它脫乙?；?，這些中的許多涉及基因沉默，Sir2對(duì)第I類及第II類組蛋白脫乙?；敢种苿?，例如曲古抑菌素A(trichostatin A, TSA)不具敏感性。
[0004]通過(guò)Sir2進(jìn)行的乙?；?賴氨酸的脫乙酰基化與NAD水解作用緊密結(jié)合，產(chǎn)生煙酰胺與新的乙?；?ADP核糖化合物。Sir2的NAD-依賴性脫乙?；富钚詫?duì)于可以將其生物學(xué)作用與酵母中的細(xì)胞代謝作用結(jié)合的這一功能而言是必需的。哺乳動(dòng)物Sir2同系物具有NAD-依賴性組蛋白脫乙?；富钚?。
[0005]生物化學(xué)的研究已顯示，Sir2可容易地將組蛋白H3與H4的氨基端尾部脫乙?；瑢?dǎo)致形成2’ /3’ -O-乙?；?ADP-核糖(OAADPR)與煙酰胺。具有額外的SIR2拷貝的菌株顯示rDNA沉默增加且壽命增長(zhǎng)30 %。還已經(jīng)表明，秀麗隱桿線蟲(chóng)(C.elegans) SIR2同系物(sir-2.1)及果蜆( D.melanogaster) dSir2基因的額外拷貝會(huì)延長(zhǎng)那些生物體的壽命。這暗示了針對(duì)老化(aging)的SIR2-依賴性調(diào)節(jié)途徑在進(jìn)化早期出現(xiàn)且已經(jīng)是相當(dāng)保守的?，F(xiàn)今，Sir2基因據(jù)相信已經(jīng)進(jìn)化為增強(qiáng)生物體的健康與應(yīng)激反應(yīng)，以增加其逆境存活(surviving adversity)的機(jī)會(huì)。
[0006]在人中有7種Sir2樣基因(SIRT1-SIRT7)，它們共享Sir2的保守催化結(jié)構(gòu)域。SIRTl為具有與Sir2最高程度序列相似性的核蛋白。SIRTl通過(guò)脫乙?；饔谜{(diào)節(jié)多種細(xì)胞靶物，包括腫瘤抑制基因P53、細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)因子NF-kB和F0X0轉(zhuǎn)錄因子。
[0007]SIRT3為SIRTl的同系物，其在原核生物與真核生物中具保守性。SIRT3蛋白通過(guò)位于N-末端的獨(dú)特結(jié)構(gòu)域而祀向至線粒體嵴(cristae)。SIRT3具有NAD+-依賴性蛋白質(zhì)脫乙?；富钚裕冶樵诒磉_(dá)，特別是在代謝活性的組織中。在轉(zhuǎn)移至線粒體后，認(rèn)為SIRT3被線粒體基質(zhì)加工肽酶(MPP)裂解成更小的活性形式。
[0008]已知70年以上的熱量限制(caloric restriction)增進(jìn)健康并延長(zhǎng)哺乳動(dòng)物的壽命。酵母壽命(如后生動(dòng)物的)也通過(guò)類似熱量限制(例如低葡萄糖)的介入來(lái)增長(zhǎng)。發(fā)現(xiàn)缺乏SIR2基因的酵母與蠅類在被熱量限制時(shí)都不活得更長(zhǎng)，這為SIR2基因介導(dǎo)限制性熱量飲食的有益健康功效提供了證據(jù)。而且，降低酵母葡萄糖-響應(yīng)性cAMP (腺苷3’，5’ -單磷酸)_依賴性(PKA)途徑活性的突變延長(zhǎng)野生型細(xì)胞的壽命，但在突變型sir2菌株中則不會(huì)延長(zhǎng)，這證明SIR2可能是熱量限制途徑的關(guān)鍵下游組分。[0009]發(fā)明概述
[0010]本發(fā)明提供了新的沉默調(diào)節(jié)蛋白(sirtuin)調(diào)節(jié)化合物和其使用方法。
[0011]在一方面，本發(fā)明提供了下面詳細(xì)描述的結(jié)構(gòu)式(I)的沉默調(diào)節(jié)蛋白-調(diào)節(jié)化合物。
[0012]在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了使用沉默調(diào)節(jié)蛋白-調(diào)節(jié)化合物的方法、或包含沉默調(diào)節(jié)蛋白-調(diào)節(jié)化合物的組合物。在某些實(shí)施方案中，提高沉默調(diào)節(jié)蛋白的水平和/或活性的沉默調(diào)節(jié)蛋白-調(diào)節(jié)化合物可以用于各種治療應(yīng)用，包括，例如，提高細(xì)胞壽命，治療和/或預(yù)防多種疾病和病癥，包括，例如，與衰老或應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)的疾病或病癥，糖尿病，肥胖癥，神經(jīng)變性疾病，化學(xué)療法引起的神經(jīng)病，與缺血狀況有關(guān)的神經(jīng)病，眼睛疾病和/或病癥，心血管疾病，血液凝固病癥，炎癥，和/或潮紅，等等。提高沉默調(diào)節(jié)蛋白的水平和/或活性的沉默調(diào)節(jié)蛋白調(diào)節(jié)化合物也可以用于治療患者的受益于線粒體活性提高的疾病或病癥，用于增強(qiáng)肌肉性能，用于提高肌肉ATP水平，或用于治療或預(yù)防與缺氧或局部缺血有關(guān)的肌肉組織傷害。在其它實(shí)施方案中，降低沉默調(diào)節(jié)蛋白的水平和/或活性的沉默調(diào)節(jié)蛋白-調(diào)節(jié)化合物可以用于各種治療應(yīng)用，包括，例如，提高細(xì)胞對(duì)應(yīng)激反應(yīng)的敏感性，提高細(xì)胞程序死亡，治療癌癥，刺激食欲，和/或刺激體重增加，等等。如下面進(jìn)一步所描述，該方法包括給藥需要的患者藥物有效量的沉默調(diào)節(jié)蛋白-調(diào)節(jié)化合物。
[0013]在某些方面，沉默調(diào)節(jié)蛋白-調(diào)節(jié)化合物可以單獨(dú)給藥，或與其它化合物(包括其它沉默調(diào)節(jié)蛋白-調(diào)節(jié)化合物或其它治療劑)組合給藥。 [0014]發(fā)明詳述
[0015]1.定義
[0016]用于本文的下列術(shù)語(yǔ)及短語(yǔ)應(yīng)具有于下文所敘述的含義。除非另行定義，所有于本文中所使用的技術(shù)與科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有與本領(lǐng)域普通技術(shù)人員通常理解的相同的含義。
[0017]本文中術(shù)語(yǔ)“藥物(agent) ”用于表示化合物、化合物的混合物、生物大分子(例如核酸、抗體、蛋白或其部分例如肽)、或從生物材料例如細(xì)菌、植物、真菌或動(dòng)物(特別是哺乳動(dòng)物)細(xì)胞或組織制得的提取物。
[0018]術(shù)語(yǔ)“生物可利用的”當(dāng)涉及化合物時(shí)為本領(lǐng)域所認(rèn)知的，且所考慮到的涉及化合物形式或所給藥化合物的一部分的量，能夠被所給藥的受試者或患者吸收、引入或以其它方式在生理學(xué)上被利用。
[0019]“沉默調(diào)節(jié)蛋白的生物學(xué)上具活性的部分”是指具有生物活性(例如脫乙?；芰?的沉默調(diào)節(jié)蛋白的一部分(“催化活性”)。沉默調(diào)節(jié)蛋白的催化活性部分可包含沉默調(diào)節(jié)蛋白的核心結(jié)構(gòu)域。具有GenBank登錄編號(hào)NP_036370的SIRTl的催化活性部分，包括NAD+結(jié)合結(jié)構(gòu)域與底物結(jié)合結(jié)構(gòu)域，例如，可包括但不限于GenBank登錄編號(hào)NP_036370的氨基酸240-664或240-505，其由GenBank登錄編號(hào)NM_012238的核苷酸所編碼。因此，此區(qū)域有時(shí)被稱作核心結(jié)構(gòu)域。SIRTl的其它催化活性部分(也有時(shí)也被稱作核心結(jié)構(gòu)域)包括GenBank登錄編號(hào)NP_036370的大致氨基酸261至447，其由GenBank登錄編號(hào)NM_012238的核苷酸834至1394所編碼；GenBank登錄編號(hào)NP_036370的大致氨基酸242至493，其由GenBank登錄編號(hào)NM_012238的核苷酸777至1532所編碼；或GenBank登錄編號(hào)NP_036370的大致氨基酸254至495，其由GenBank登錄編號(hào)NM_012238的核苷酸813至1538所編碼。SIRTl的其他“生物學(xué)上具有活性”的部分為GenBank登錄編號(hào)NP_036370的氨基酸62-293或183-225，其包括對(duì)于化合物結(jié)合位點(diǎn)重要的核心結(jié)構(gòu)域的N-端結(jié)構(gòu)域。
[0020]術(shù)語(yǔ)“陪伴動(dòng)物”是指貓與狗。用于本文的術(shù)語(yǔ)“狗”是指犬科家族(Canisfamiliaris)的任一成員，其中有許多不同品種。術(shù)語(yǔ)“貓”是指貓科動(dòng)物，包括馴養(yǎng)貓及貓科貓屬(family Felidae, genus Felis)的其它成員。
[0021]“糖尿病”是指高血糖或酮酸中毒，以及因長(zhǎng)期高血糖狀態(tài)或葡萄糖耐受性減低所引起的慢性、一般性代謝異常?！疤悄虿　卑摷膊〉腎與II型(非胰島素依賴性糖尿病或NIDDM)兩種形式。糖尿病的危險(xiǎn)因素包括下列因素:男子腰圍超過(guò)40英寸或女子腰圍超過(guò)35英寸，血壓為130/85mmHg或以上，甘油三酸酯高于150mg/dl，空腹血糖大于IOOmg/dl,或高密度脂蛋白男子中少于40mg/dl或女子中少于50mg/dl。
[0022]術(shù)語(yǔ)“ED5Q”是本領(lǐng)域公知的有效量的度量。在一些實(shí)施方式中，ED5tl是指藥物產(chǎn)生其最大響應(yīng)或功效的50%時(shí)的劑量,或者在50%的測(cè)試的受試者或制劑(例如分離的組織或細(xì)胞)中產(chǎn)生預(yù)定響應(yīng)的劑量。術(shù)語(yǔ)“LD5(I”是本領(lǐng)域公知的致死劑量的度量。在一些實(shí)施方式中，LD5tl是指藥物使50%的測(cè)試受試者致死的劑量。術(shù)語(yǔ)“治療指數(shù)”為本領(lǐng)域所認(rèn)知的術(shù)語(yǔ)，是指藥物的治療指數(shù)，定義為L(zhǎng)D5(i/ED5(i。
[0023]術(shù)語(yǔ)“高胰島素血癥”是指?jìng)€(gè)體血液中胰島素水平高于正常值的狀態(tài)。
[0024]術(shù)語(yǔ)“胰島素抵抗”是指這樣的一種狀態(tài)，其中相對(duì)于在不具有胰島素抵抗的受試者中的生物響應(yīng)而言，正常量胰島素產(chǎn)生低于正常(subnormal)生物響應(yīng)的狀態(tài)。
[0025]本文所討論的“胰島素抵抗病癥”是指由胰島素抵抗所引起或促成的任何疾病或狀況。實(shí)例包括:糖尿病、肥胖癥、代謝綜合征、胰島素抵抗綜合征、綜合征X、胰島素抵抗、高血壓、血壓過(guò)高、 高血膽固醇、血脂異常、高脂血癥、動(dòng)脈粥樣硬化疾病，包括中風(fēng)、冠狀動(dòng)脈疾病或心肌梗塞、高血糖癥、高胰島素血癥和/或高胰島素原血癥、葡萄糖耐受性不良、延遲胰島素釋放、糖尿病并發(fā)癥,包括冠心病、心絞痛、充血性心臟衰竭、中風(fēng)、癡呆的識(shí)別功能、視網(wǎng)膜病、周圍神經(jīng)病、腎病、腎小球腎炎、腎小球硬化癥、腎病變綜合征、高血壓性腎硬化、一些類型癌癥(如子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌、前列腺癌與結(jié)腸癌)、妊娠并發(fā)癥、雌性生殖健康變差(例如月經(jīng)不調(diào)、不育、不定期排卵、多囊卵巢性綜合征(PCOS))、脂肪代謝障礙、膽固醇相關(guān)病癥，例如膽結(jié)石、膽囊炎與膽石病，痛風(fēng)、阻塞性睡眠呼吸暫停與呼吸問(wèn)題、骨關(guān)節(jié)炎，以及骨丟失，例如尤其是骨質(zhì)疏松癥。
[0026]術(shù)語(yǔ)“家畜動(dòng)物”是指經(jīng)馴化的四足動(dòng)物，其包括那些為肉類與各類副產(chǎn)品而飼養(yǎng)的動(dòng)物，例如牛類動(dòng)物，包括牛與牛屬(genus Bos)的其它成員，豬類動(dòng)物，包括馴養(yǎng)豬與豬屬(genus Sus)的其它成員，羊類動(dòng)物,包括綿羊與其它羊?qū)?genus Ovis)的成員、馴養(yǎng)山羊與山羊?qū)?genus Capra)的其它成員；為特定任務(wù)例如用做負(fù)重畜牲而飼養(yǎng)的經(jīng)馴化的四足動(dòng)物，例如馬類動(dòng)物，包括馴養(yǎng)馬與馬科馬屬(family Equidae, genus Equus)的其它成員。
[0027]術(shù)語(yǔ)“哺乳動(dòng)物”為本領(lǐng)域已知的，且例舉性哺乳動(dòng)物包括人、靈長(zhǎng)類、家畜動(dòng)物(包括牛類、豬類等)、陪伴動(dòng)物(例如犬類、貓類等)及嚙齒類(例如小鼠與大鼠)。
[0028]“肥胖”個(gè)體或患有肥胖癥的個(gè)體，一般指具有的體重指數(shù)(BMI)為至少25或以上的個(gè)體。肥胖可以與或不與胰島素抵抗相關(guān)。
[0029]術(shù)語(yǔ)“經(jīng)腸胃外給藥”及“經(jīng)腸胃外進(jìn)行給藥”為本領(lǐng)域公認(rèn)的，且指除了腸與表面給藥外的給藥模式，一般經(jīng)由注射，且包括但不限定于:靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、鞘內(nèi)、囊內(nèi)、眶內(nèi)、心內(nèi)、真皮內(nèi)、腹膜內(nèi)、經(jīng)氣管、皮下、表皮下、關(guān)節(jié)內(nèi)、囊下、蛛網(wǎng)膜下、脊柱內(nèi)與胸骨內(nèi)注射及輸注給藥。
[0030]“患者”、“受試者”、“個(gè)體”或“宿主”是指人或非人動(dòng)物。
[0031]術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的載體”為本領(lǐng)域公認(rèn)的，且是指與攜帶或運(yùn)送任何主體組合物或其組分有關(guān)的藥學(xué)上可接受的材料、組合物或載體，例如液體或固體填充劑、稀釋劑、賦形劑、溶劑或包封物料。各種載體就其可與主體組合物或其組分相容的意義而言必須為“可接受的”，且對(duì)患者是無(wú)害的?？捎米魉帉W(xué)上可接受載體的材料的一些實(shí)例包括:(I)糖類，例如乳糖、葡萄糖與蔗糖；(2)淀粉，例如玉米淀粉與馬鈴薯淀粉；(3)纖維素與其衍生物，例如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和醋酸纖維素；(4)成粉末的西黃耆膠；(5)麥芽；(6)明膠；(7)滑石粉；(8)賦形劑，例如可可脂與栓劑蠟；(9)油類，例如花生油、蓖麻油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油與大豆油；(10) 二醇類，例如丙二醇；(11)多元醇類，例如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇與聚乙二醇；(12)酯類，例如油酸乙酯與月桂酸乙酯；(13)瓊脂；(14)緩沖劑，例如氫氧化鎂與氫氧化鋁；(15)藻酸；(16)無(wú)熱源水；(17)等滲鹽水；(18)林格氏溶液；(19)乙醇；(20)磷酸鹽緩沖溶液 '及(21)其它用于醫(yī)藥制劑的無(wú)毒性相容物質(zhì)。
[0032]術(shù)語(yǔ)“預(yù)防”為本領(lǐng)域所認(rèn)知的，且與涉及在病癥(例如局部復(fù)發(fā)(如疼痛))、疾病(例如癌癥)、癥候群(例如心力衰竭)或任何其他醫(yī)學(xué)病癥使用時(shí)，其在本領(lǐng)域中是公知的，包括給藥組合物(與沒(méi)有接受該組合物的患者相比，其在患者中降低了醫(yī)學(xué)病癥的癥狀的頻率或延遲了其發(fā)作。因此，癌癥的預(yù)防包括，例如，在接受預(yù)防性治療的人群中降低了可檢測(cè)到的癌生長(zhǎng)的數(shù)量(相對(duì)于未治療的對(duì)照人群)，和/或在治療的人群中延遲了可檢測(cè)癌生長(zhǎng)的出現(xiàn)(與未治療的對(duì)照人群相比)，例如，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)和/或臨床顯著性的量。感染的預(yù)防包括，例如，在治療的人群中降低了診斷的感染的數(shù)量(與未治療的對(duì)照人群相比)，和/或在治療的人群中延遲了感染癥狀的發(fā)作(與未治療的對(duì)照人群相比)。疼痛的預(yù)防包括，例如，在治療的人群中降低了由該患者覺(jué)察到的疼痛感的程度或者延遲了該感覺(jué)(與未治療的對(duì)照人群相比)。
[0033]術(shù)語(yǔ)“預(yù)防性”或“治療性”治療為本領(lǐng)域所認(rèn)知的，且指將藥物給藥至宿主。如果在臨床顯現(xiàn)不希望病癥(例如，宿主動(dòng)物的疾病或其它不希望狀態(tài))之前進(jìn)行給藥，則該治療為預(yù)防性，即其保護(hù)宿主不會(huì)發(fā)展成該不希望病癥，而如果在顯現(xiàn)不希望病癥之后進(jìn)行給藥，則該治療為治療性的(即意在減少、改善或維持現(xiàn)有的不希望病癥或由其產(chǎn)生的副作用)。
[0034]術(shù)語(yǔ)“無(wú)熱源(pyrogen-free) ”在關(guān)于組合物時(shí)，是指不含有熱源的組合物，而其含量會(huì)在已給藥該組合物的受試者中導(dǎo)致有害作用(例如，刺激、發(fā)熱、炎癥、腹瀉、呼吸窘迫、內(nèi)毒素性休克等)。例如，該術(shù)語(yǔ)意包括不含或基本上不含諸如脂多糖(LPS)等內(nèi)毒素的組合物。
[0035] 細(xì)胞的“復(fù)制壽命”是指由單個(gè)“母細(xì)胞”所產(chǎn)生的許多子細(xì)胞。另一方面，“時(shí)序衰老(chronolo gical aging) ”或“時(shí)序壽命”是指一群不分裂的細(xì)胞當(dāng)被除去養(yǎng)分時(shí)仍保持存活的時(shí)間長(zhǎng)度?！霸黾蛹?xì)胞壽命”或“延長(zhǎng)細(xì)胞壽命”當(dāng)應(yīng)用于細(xì)胞或生物體時(shí)，是指增加由一個(gè)細(xì)胞所產(chǎn)生的許多子細(xì)胞；增加細(xì)胞或生物體對(duì)抗應(yīng)激及對(duì)抗損傷，例如對(duì)DNA、蛋白的應(yīng)激和損傷的能力；和/或增加細(xì)胞或生物體可于特別條件例如應(yīng)激(如熱休克、滲透壓力、高能量照射、化學(xué)誘導(dǎo)的應(yīng)激、DNA損傷、不適當(dāng)?shù)柠}水平、不適當(dāng)?shù)牡交虿怀渥愕臓I(yíng)養(yǎng)物水平)下存活和生存的狀態(tài)存在較長(zhǎng)時(shí)間的能力。使用本文中所述的方法，壽命可增加至少約 10%、20%、30%、40%、50%、60%，或20%至70%、30%至60%、40%至60%或以上。
[0036]“沉默調(diào)節(jié)蛋白的調(diào)節(jié)化合物”是指增加沉默調(diào)節(jié)蛋白水平，和/或增加沉默調(diào)節(jié)蛋白的至少一種活性的化合物。在例舉性的實(shí)施方式中，沉默調(diào)節(jié)蛋白的調(diào)節(jié)化合物可使沉默調(diào)節(jié)蛋白的至少一種生物活性增加至少約10%、25%、50%、75%、100%或以上。沉默調(diào)節(jié)蛋白的例舉性生物活性包括例如組蛋白與P53的脫乙?；?；延長(zhǎng)壽命；增加基因組的穩(wěn)定性；沉默轉(zhuǎn)錄作用；及調(diào)控母細(xì)胞與子細(xì)胞間的經(jīng)氧化蛋白的分離。
[0037]“沉默調(diào)節(jié)蛋白”是指沉默調(diào)節(jié)蛋白的脫乙?；傅鞍准易寤騼?yōu)選指sir2家族的成員，其包括酵母Sir2 (GenBank登錄編號(hào)P53685)、秀麗隱桿線蟲(chóng)Sir_2.1 (GenBank登錄編號(hào) NP_501912)及人 SIRTl (GenBank 登錄編號(hào) NM_012238 與 NP_036370 (或 AF083106))與 SIRT2 (GenBank 登錄編號(hào) NM_012237、NM_030593、NP_036369、NP_085096 與 AF083107)蛋白。其它家族成員包括四種稱作“HST基因”(Sir2的同系物)的其它酵母Sir2類基因 HSTl、HST2、HST3 與 HST4,及五種其它人同系物 hSIRT3、hSIRT4、hSIRT5、hSIRT6 與hSIRT7 (Brachmann 等人，(1995) Genes Dev.9:2888 及 Frye 等人(1999) BBRC260:273)。優(yōu)選的沉默調(diào)節(jié)蛋白是那些和SIRT2相比，與SIRTl，即hSIRTl和/或Sir2共有更多相似性的沉默調(diào)節(jié)蛋白，例如那些具有至少一部分存在于SIRTl中而不存在于SIRT2中的，例如SIRT3所具有的N-末端序列的成員。
[0038]“SIRT1蛋白”是指沉默調(diào)節(jié)蛋白的脫乙?；傅腟ir2家族的成員。在一些實(shí)施方式中，SIRTl蛋白包括酵母Sir2 (GenBank登錄編號(hào)P53685)、秀麗隱桿線蟲(chóng) Sir-2.1 (GenBank 登錄編號(hào) NP_501912)、人 SIRTl (GenBank 登錄編號(hào) NM_012238 或NP_036370(或AF083106))，及其等同物與片段。在另一個(gè)實(shí)施方式中，SIRTl蛋白包括多肽，其包含由或基本上由 列示于GenBank登錄編號(hào)NP_036370、NP_501912、NP_085096、NP_036369或P53685中的氨基酸序列所組成的序列。SIRTl蛋白包括含有下列氨基酸序列的全部或一部分的多肽及其功能性片段:列示于GenBank登錄編號(hào)NP_036370、NP_501912、NP_085096、NP_036369或P53685中的氨基酸序列；列示于GenBank登錄編號(hào)NP_036370、NP_501912、NP_085096、NP_036369 或 P53685 中的具有 I 至約 2、3、5、7、10、15、20、30、50、75或更多保守性氨基酸取代的氨基酸序列；與GenBank登錄編號(hào)NP_036370、NP_501912、NP_085096、NP_036369 或 P53685 至少 60%、70%、80%、90%、95%、96%、97%、98% 或 99%相同的氨基酸序列。本發(fā)明中的多肽也包括GenBank登錄編號(hào)NP_036370、NP_501912、NP_085096、NP_036369或P53685的同源物(直向同源物(orthologs)與側(cè)向同源物(paralogs))、變體或片段。
[0039]在此使用的“SIRT2 蛋白”、“SIRT3 蛋白”、“SIRT4 蛋白”、“SIRT5 蛋白”、“SIRT6 蛋白”和“SIRT7蛋白”指的的是其他的哺乳動(dòng)物(例如人)的沉默調(diào)節(jié)蛋白的脫乙?；傅鞍?其與SIRTl蛋白同源)，尤其在約275氨基酸保守催化結(jié)構(gòu)域。例如，“SIRT3蛋白”指的是沉默調(diào)節(jié)蛋白的脫乙酰基酶蛋白家族(其與SIRTl蛋白同源)的成員。在一些實(shí)施方式中，“SIRT3蛋白”是指沉默調(diào)節(jié)蛋白的脫乙?；傅鞍准易宓某蓡T和/或SIRTl蛋白的同源物。在一個(gè)實(shí)施方式中，SIRT3蛋白包括人SIRT3 (GenBank登錄編號(hào)AAH01042、NP_036371 或 NP_001017524)與小鼠 SIRT3 (GenBank 登錄編號(hào) NP_071878)蛋白，及其等同物與片段。在另一個(gè)實(shí)施方式中，SIRT3蛋白包括多肽，其包含由或基本上由列示于GenBank 登錄編號(hào) AAHO1042、NP_036371、NP_001017524 或 NP_071878 中的氨基酸序列所組成的序列。SIRT3蛋白包括含有下列氨基酸序列的全部或一部分的多肽及其功能性片段:列示于 GenBank 登錄編號(hào) AAH01042、NP_036371、NP_001017524 或 NP_071878 中的氨基酸序列；列示于 GenBank 登錄編號(hào) AAH01042、NP_036371、NP_001017524 或 NP_071878 中的具有I至約2、3、5、7、10、15、20、30、50、75或更多保守性氨基酸取代的氨基酸序列；與GenBank登錄編號(hào) AAH01042、NP_036371、NP_001017524 或 NP_071878 至少 60%、70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%相同的氨基酸序列。本發(fā)明中的多肽也包括GenBank登錄編號(hào)AAH01042、NP_036371、NP_001017524或NP_071878的同源物(直向同源物與側(cè)向同源物)、變體或片段。在一些實(shí)施方式中，SIRT3蛋白包括以線粒體基質(zhì)加工肽酶(MPP)和/或線粒體中間體肽酶(MIP)裂解而產(chǎn)生的SIRT3蛋白片段。
[0040]本文中所使用的術(shù)語(yǔ)“立體異構(gòu)體”為本領(lǐng)域所認(rèn)知的，且指具有任一兩個(gè)或多個(gè)異構(gòu)體(其具有相同分子組成且僅在空間它們的原子的三維排列不同)。當(dāng)在此處用于描述化合物或通式化合物時(shí)，立體異構(gòu)體包括該化合物的任一部分或全部化合物。例如，非對(duì)映異構(gòu)體和對(duì)映異構(gòu)體是立體異構(gòu)體。
[0041]術(shù)語(yǔ)“全身性給藥”和“全身地給藥”為本領(lǐng)域所認(rèn)知的，且指將主題組合物、治療劑或其它物質(zhì)腸內(nèi)給藥或腸胃 外給藥。
[0042]本文中使用的術(shù)語(yǔ)“互變異構(gòu)體”為本領(lǐng)域所認(rèn)知的，且指由互變異構(gòu)現(xiàn)象造成可能存在的任一可能的結(jié)構(gòu)式變化，其指的是構(gòu)造異構(gòu)形式，其中癌結(jié)構(gòu)可以以兩種或多種構(gòu)造排列形式存在，尤其是在連接至氧的氫的位置方面。當(dāng)在此處用于描述化合物或通式化合物時(shí)，其進(jìn)一步理解為“互變異構(gòu)體”是容易互相轉(zhuǎn)變的且處于平衡狀態(tài)。例如，酮式和烯醇式互變異構(gòu)體以一定的比例存在，這取決于給定條件或設(shè)定條件下的平衡位置:
【權(quán)利要求】
1.由結(jié)構(gòu)式(I)所表示的化合物或其鹽:
2.權(quán)利要求1的化合物，其中X選自C ( = O) -NH- f、NH-C ( = O)-卞、S ( = O) -NH-卞、S( = O)2-NH-f, NH-C( = O)-O-CR4R5-f> NH-C( = S)-f > C( = S)-NH-f ,NH-S( = 0)-f、NH-S ( = 0) 2- f、NH-S ( = 0) 2-NR4- f、NR4-S ( = 0) 2_NH_ f、NH-C ( = 0) 0- f、0_C (=0) -NH- f、NH-C ( = 0) NH- f、NH-C ( = 0) NR4- f、NR4-C ( = 0) NH- f 、CR4R5-NH-C (=0)- f 、NH-C ( = S) -CR4R5- f 、CR4R5-C ( = S) -NH- f 、NH-S ( = 0) -CR4R5- f 、CR4R5-S ( = O) -NH- f 、NH-S ( = O) 2_CR4R5_ f 、CR4R5-S ( = 0) 2_NH_ f 、CR4R5-O-C (=0) -NH- f 、NH-C ( = 0) -CR4R5- f、NH-C ( = 0) -CR4R5-NH f 和 CR4R5-NH-C ( = 0)-0-fo
3.權(quán)利要求1或2的化合物，其中R選自氫、鹵素、C1-C4烷基、O-R3和4-至8-元非芳香雜環(huán)。
4.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的化合物，其中R1選自任選取代的:

5.權(quán)利要求4的化合物，其中R1選自:
6.權(quán)利要求5的化合物，其中R1選自:
7.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的化合物，其中R2選自任選取代的:
8.權(quán)利要求7的化合物，其中R2選自:
9.權(quán)利要求8的化合物，其中R2選自:
10.權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的化合物，其中R2選自任選取代的碳環(huán)和任選取代的非芳香雜環(huán)。
11.權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的化合物，其中R2選自任選取代的芳香碳環(huán)和任選取代的非芳香雜環(huán)。
12.權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的化合物，其中R2選自任選取代的非芳香碳環(huán)和任選取代的非芳香雜環(huán)。
13.權(quán)利要求10-12中任一項(xiàng)的化合物，其中R2為任選取代的非芳香雜環(huán)。
14.權(quán)利要求13的化合物，其中R2通過(guò)R2的氮原子連接至該化合物的其余部分。
15.權(quán)利要求1-14中任一項(xiàng)的化合物，其中X為C(= O)-NH-f。.
16.權(quán)利要求1-14中任一項(xiàng)的化合物，其中X為NH-C(= 0)-fo
17.權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)的化合物，其中B為N。
18.權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)的化合物，其中A為N。
19.藥物組合物，其包含藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑和權(quán)利要求1-18中任一項(xiàng)的化合物。
20.一種在細(xì)胞 中增加沉默調(diào)節(jié)蛋白(sirtuin)-l活性的方法，其包括將該細(xì)胞與權(quán)利要求19的組合物接觸。
21.一種治療罹患或易患胰島素抵抗、代謝綜合征、糖尿病或其并發(fā)癥的受試者，或增加受試者胰島素敏感性的方法，其包括向有此需要的受試者給藥權(quán)利要求19的組合物。
【文檔編號(hào)】C07D487/04GK103998451SQ201280062914
【公開(kāi)日】2014年8月20日 申請(qǐng)日期:2012年10月19日 優(yōu)先權(quán)日:2011年10月20日
【發(fā)明者】C.A.布盧姆, J.S.迪希, S.K.斯普林格 申請(qǐng)人:葛蘭素史密斯克萊有限責(zé)任公司