一種紅豆杉中巴卡亭Ⅲ的薄層色譜檢測(cè)方法
【專利摘要】一種紅豆杉中巴卡亭Ⅲ的薄層色譜檢測(cè)方法,涉及一種檢測(cè)方法,具體涉及一種紅豆杉中巴卡亭Ⅲ的薄層色譜檢測(cè)方法,所述方法包括如下步驟:⑴巴卡亭Ⅲ對(duì)照品溶液制備;⑵樣品溶液制備;⑶薄層色譜檢測(cè)。本發(fā)明有益效果是檢測(cè)巴卡亭Ⅲ方法簡(jiǎn)單、實(shí)用和經(jīng)濟(jì)。
【專利說(shuō)明】—種紅豆杉中巴卡亭III的薄層色譜檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種檢測(cè)方法,具體涉及一種紅豆杉中巴卡亭III的薄層色譜檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]紫杉醇是紅豆杉屬植物中的一種復(fù)雜的次生代謝產(chǎn)物,也是目前所了解的惟一一種可以促進(jìn)微管聚合和穩(wěn)定已聚合微管的藥物。同位素示蹤表明,紫杉醇只結(jié)合到聚合的微管上,不與未聚合的微管蛋白二聚體反應(yīng)。細(xì)胞接觸紫杉醇后會(huì)在細(xì)胞內(nèi)積累大量的微管,這些微管的積累干擾了細(xì)胞的各種功能,特別是使細(xì)胞分裂停止于有絲分裂期,阻斷了細(xì)胞的正常分裂。通過(guò)I1-1II臨床研究,紫杉醇主要適用于卵巢癌和乳腺癌,對(duì)肺癌、大腸癌、黑色素瘤、頭頸部癌、淋巴瘤、腦瘤也都有一定療效。
[0003]巴卡亭III可以通過(guò)化學(xué)合成為紫杉醇,所以檢測(cè)巴卡亭III是重要的。
[0004]常規(guī)的巴卡亭III檢測(cè)方法為HPLC檢測(cè),填料為反相填料。流動(dòng)相為乙腈-水,檢測(cè)器是紫外檢測(cè)器。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005]常規(guī)的HPLC檢測(cè)巴卡亭III方法要求高:
[0006]⑴需要一臺(tái)HPLC,一臺(tái)HPLC價(jià)格通常10萬(wàn)以上,HPLC價(jià)格高,普及率低;
[0007](2) HPLC需要有專業(yè)的人員操作、維護(hù)和維修;
[0008](3) HPLC檢測(cè)需要大量溶劑,大量溶劑的使用對(duì)環(huán)境也造成了極大的污染;
[0009](4) HPLC檢測(cè)每次只能檢測(cè)一個(gè)樣品,檢測(cè)時(shí)間也長(zhǎng)。
[0010]本發(fā)明提供了一種易于操作、能定性半定量和經(jīng)濟(jì)的薄層色譜檢測(cè)方法,該方法解決HPLC檢測(cè)的部分弊端。
[0011]一種紅豆杉中巴卡亭III的薄層色譜檢測(cè)方法,所述方法包括如下步驟:
[0012]⑴稱取巴卡亭III 0.1?lmg,用Iml有機(jī)溶劑溶解,得到巴卡亭III對(duì)照品溶液;
[0013]⑵將紅豆杉原料粉碎,用醇溶液浸提三次,合并三次浸提溶液,濃縮浸提溶液至原體積的1/3?1/2,用等體積有機(jī)溶劑I萃取三次,合并三次萃取相,蒸干萃取相,稱取蒸干粉末0.1?lmg,用Iml有機(jī)溶劑II溶解,得到樣品溶液;
[0014]⑶吸取步驟⑴和⑵制備的溶液各5?10 μ 1,點(diǎn)在同一硅膠G薄層板上,展開劑是鹵代烴和醇,鹵代烴和醇的體積比是100:10?I,展開,取出,晾干,用5?10%濃硫酸乙醇溶液顯色,用105°C烘干薄層板至斑點(diǎn)顯色。
[0015]所述方法步驟⑴中的有機(jī)溶劑優(yōu)選為甲醇、無(wú)水乙醇或N,N-二甲基甲酰胺,N,N- 二甲基甲酰胺溶解巴卡亭III溶解度高,甲醇和無(wú)水乙醇沸點(diǎn)低。
[0016]所述方法步驟⑴紅豆杉原料優(yōu)選為樹皮、枝葉和樹根。
[0017]所述方法步驟⑵醇溶液優(yōu)選為甲醇、無(wú)水乙醇、甲醇水溶液或乙醇水溶液。
[0018]所述方法步驟⑵有機(jī)溶劑I優(yōu)選為二氯甲烷、三氯甲烷或乙酸乙酯。[0019]所述方法步驟⑵有機(jī)溶劑II優(yōu)選為甲醇、無(wú)水乙醇或N,N- 二甲基甲酰胺,N,N- 二甲基甲酰胺溶解巴卡亭III溶解度高,甲醇和無(wú)水乙醇沸點(diǎn)低。
[0020]所述方法步驟⑶鹵代烴優(yōu)選為二氯甲烷或三氯甲烷。
[0021]所述方法步驟⑶醇優(yōu)選為甲醇或無(wú)水乙醇。
[0022]本發(fā)明有益效果是:
[0023]⑴巴卡亭III檢測(cè)方法簡(jiǎn)單、實(shí)用和經(jīng)濟(jì)。
[0024]⑵一次檢測(cè)可以同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品。
[0025]⑶檢測(cè)結(jié)果可以定性和半定量。
【具體實(shí)施方式】
[0026]下述非限制性實(shí)施例可以使本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明,但不以任何方式限制本發(fā)明。
[0027]實(shí)施例1
[0028]一種紅豆杉中巴卡亭III的薄層色譜檢測(cè)方法,所述方法包括如下步驟:
[0029]⑴稱取巴卡亭III標(biāo)準(zhǔn)品0.5mg,用Iml甲醇超聲溶解,得到巴卡亭III對(duì)照品溶液,濃度0.5mg/ml,作為定性和半定量的標(biāo)準(zhǔn);
[0030]⑵將紅豆杉樹皮、枝葉和樹根粉碎,粉碎后用無(wú)水乙醇浸提三次,合并三次浸提溶液,減壓蒸餾法濃縮浸提溶液,真空度0.8MPa,水浴溫度55°C,濃縮至原體積的1/3,用等體積二氯甲烷萃取濃縮液三次,合并三次萃取相,減壓蒸餾法蒸干萃取相,真空度0.4MPa,水浴溫度35°C,稱取蒸干粉末0.5mg,用Iml甲醇超聲溶解,得到樣品溶液;
[0031]⑶用玻璃點(diǎn)樣毛細(xì)管吸取步驟⑴和⑵制備的溶液各10 μ 1,點(diǎn)在同一硅膠G薄層板、距板底Icm處同一水平線上,展開劑是三氯甲烷和無(wú)水乙醇,三氯甲烷和無(wú)水乙醇的體積比是100:5,平衡5?lOmin,展開,展開至距板頂Icm處取出,取出,用熱風(fēng)吹干,用10%濃硫酸乙醇溶液顯色,用105°C烘干薄層板至斑點(diǎn)顯色。
【權(quán)利要求】
1.一種紅豆杉中巴卡亭III的薄層色譜檢測(cè)方法,所述方法包括如下步驟: ⑴稱取巴卡亭III 0.1?lmg,用Iml有機(jī)溶劑溶解,得到巴卡亭III對(duì)照品溶液; ⑵將紅豆杉原料粉碎,用醇溶液浸提三次,合并三次浸提溶液,濃縮浸提溶液至原體積的1/3?1/2,用等體積有機(jī)溶劑I萃取三次,合并三次萃取相,蒸干萃取相,稱取蒸干粉末0.1?lmg,用Iml有機(jī)溶劑II溶解,得到樣品溶液; ⑶吸取步驟⑴和⑵制備的溶液各5?10 μ 1,點(diǎn)在同一硅膠G薄層板上,展開劑是鹵代烴和醇,鹵代烴和醇的體積比是100:10?I,展開,取出,晾干,用5?10%濃硫酸乙醇溶液顯色,用105°C烘干薄層板至斑點(diǎn)顯色。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:所述方法步驟⑴有機(jī)溶劑是甲醇、無(wú)水乙醇或N,N-甲基甲酰胺。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:所述方法步驟⑴紅豆杉原料是樹皮、枝葉和樹根。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:所述方法步驟⑵醇溶液是甲醇、無(wú)水乙醇、甲醇水溶液或乙醇水溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:所述方法步驟⑵有機(jī)溶劑I是二氯甲烷、三氯甲烷或乙酸乙酯。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:所述方法步驟⑵有機(jī)溶劑II是甲醇、無(wú)水乙醇或N,N-甲基甲酰胺。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:所述方法步驟⑶鹵代烴是二氯甲烷或三氯甲烷。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:所述方法步驟⑶醇是甲醇或無(wú)水乙醇。
【文檔編號(hào)】G01N30/90GK103808854SQ201210461237
【公開日】2014年5月21日 申請(qǐng)日期:2012年11月15日 優(yōu)先權(quán)日:2012年11月15日
【發(fā)明者】劉勝遠(yuǎn) 申請(qǐng)人:劉勝遠(yuǎn)