一種提高動(dòng)物免疫力的中藥組合物的薄層色譜檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種提高動(dòng)物免疫力的中藥組合物的薄層色譜檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]薄層色譜(法)是一種常用的中藥材鑒別方法，具有設(shè)備簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便、分離速度快、靈敏度和分辨率較高等優(yōu)點(diǎn)。
[0003]黃芪，又名黃耆，為豆科植物蒙古黃芪的干燥根，具有補(bǔ)氣固表、利水退腫、托毒排膿、生肌等功效，是一種中藥材。黃芪的化學(xué)成分復(fù)雜，主要有皂苷類、黃酮類及其苷類、多糖類、氨基酸類等。女貞子是木犀科女貞屬植物女貞的干燥成熟果實(shí)，味甘、微苦澀，具有滋補(bǔ)肝腎、明目烏發(fā)之功，可用于肝腎陰虛、眩暈耳鳴、須發(fā)早白、目暗不明、內(nèi)熱消渴、骨蒸潮熱等癥狀，是一種中藥材。女貞子的化學(xué)成分復(fù)雜，主要有三菇類、黃酮類、苯乙醇類等。
[0004]現(xiàn)有技術(shù)中，黃芪、女貞子及其組合物等藥材通常采用薄層色譜進(jìn)行鑒別，然而，現(xiàn)有的鑒別方法只能對(duì)黃芪、女貞子中的一種藥材進(jìn)行定性鑒別，如:劉曉慶等(劉曉慶李軍胡景蓮李曉艷門啟鳴康廷國(guó).黃芪藥材中毛蕊異黃酮葡萄糖苷薄層色譜快速鑒別.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2013年7月，第15卷，第7期.)通過(guò)特定的前處理制備得到供試品溶液，并選用特定的三氯甲烷-甲醇-水(7.5:2.5:0.2)為展開劑，才能獲得薄層斑點(diǎn)清晰、分離度較好的檢測(cè)結(jié)果；周揚(yáng)等(周揚(yáng)劉力徐德生.女貞子飲片中特女貞苦的薄層色譜鑒另Ij.中國(guó)藥業(yè)，2013年10月5日，第22卷，第19期.)通過(guò)特定的前處理制備得到供試品溶液，并選用特定的乙酸乙醋-丙酮-甲酸-水(6:3:1:1)為展開劑，才能獲得薄層斑點(diǎn)清晰、分離度較好的檢測(cè)結(jié)果。
[0005]中國(guó)文獻(xiàn)(翟少欽曹國(guó)文李成君.復(fù)方黃金顆粒的薄層鑒別.中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2010年，第6期.)公開了復(fù)方黃金顆粒的薄層鑒別方法，該方法需要對(duì)黃芪、女貞子等分別采用不同的前處理制備得到供試品溶液，分別選用不同的展開劑，分別進(jìn)行薄層色譜檢測(cè)，該方法不能對(duì)復(fù)方顆粒中黃芪、女貞子等組分同時(shí)進(jìn)行前處理和薄層色譜檢測(cè)，存在工序多、操作復(fù)雜、檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、成本高等諸多缺陷。
[0006]因此，需要發(fā)明一種工序少、操作簡(jiǎn)便且可以對(duì)黃芪、女貞子同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)的新方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的在于提供一種中藥組合物的薄層色譜檢測(cè)方法。
[0008]本發(fā)明提供的一種中藥組合物的薄層色譜檢測(cè)方法，包括以下步驟:
[0009]a、制備供試品溶液:取中藥組合物，加入甲醇A，超聲處理，過(guò)濾，取上清液；上清液用微孔濾膜濾過(guò)，蒸干，殘?jiān)?0% v/v氨水溶解后，用水飽和正丁醇萃取，得到萃取液；將萃取液蒸干，殘?jiān)眉状糂溶解，即得供試品溶液；
[0010]b、制備對(duì)照品溶液:取毛蕊異黃酮葡萄糖苷、特女貞苷分別用甲醇溶解，得到毛蕊異黃酮葡萄糖苷的對(duì)照品溶液、特女貞苷的對(duì)照品溶液；
[0011]C、將供試品溶液、毛蕊異黃酮葡萄糖苷的對(duì)照品溶液、特女貞苷的對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)樣于同一硅膠GF254薄層板，以氯仿-甲醇-水為展開劑，展開，取出，晾干；于254nm下檢視，供試品色譜中在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯示相同顏色的斑點(diǎn)。
[0012]進(jìn)一步的，步驟a中，所述中藥組合物是由以下原料組成:黃芪、女貞子。
[0013]進(jìn)一步的，步驟a中，所述中藥組合物是由以下重量份數(shù)的原料組成:黃芪4份、女貞子I份。
[0014]進(jìn)一步的，步驟a中，所述中藥組合物按照以下步驟制備而成:
[0015]①、取黃芪、女貞子，混勻，粉碎至80目，得到粗粉；
[0016]②、在-10°C?_20°C條件下，將步驟①得到的粗粉進(jìn)一步粉碎至100目?800目的粒度，即得。
[0017]進(jìn)一步的，步驟a中，中藥組合物與甲醇A的重量體積比為1:20g/ml ;甲醇A、10%v/v氨水、水飽和正丁醇、甲醇B的體積比為8:2:3:1。
[0018]進(jìn)一步的，步驟a中，超聲處理的時(shí)間為60min ;微孔濾膜的孔徑為0.45 μ m。
[0019]進(jìn)一步的，步驟b中，毛蕊異黃酮葡萄糖苷的對(duì)照品溶液、特女貞苷的對(duì)照品溶液的濃度分別為lmg/ml。
[0020]進(jìn)一步的，步驟c中，所述娃膠板為娃膠GF254薄層板。
[0021]進(jìn)一步的，步驟c中，氯仿-甲醇-水中，氯仿、甲醇、水的體積比為7.5:2.5:0.2。
[0022]本發(fā)明中藥組合物的薄層色譜檢測(cè)方法，可以對(duì)中藥組合物中的黃芪、女貞子同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，同時(shí)，本發(fā)明方法具有工序少、操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)時(shí)間短、成本低等優(yōu)點(diǎn)，非常適合產(chǎn)業(yè)上的應(yīng)用。
[0023]顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
[0024]以下通過(guò)實(shí)施例形式的【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
【附圖說(shuō)明】
[0025]圖1為本發(fā)明中藥組合物的薄層色譜檢測(cè)結(jié)果，其中，“I”代表“特女貞苷”，“2”代表“供試品”，“3”代表“毛蕊異黃酮葡萄糖苷”。
【具體實(shí)施方式】
[0026]本發(fā)明【具體實(shí)施方式】中使用的原料、設(shè)備均為已知產(chǎn)品，通過(guò)購(gòu)買市售產(chǎn)品獲得。
[0027]實(shí)施例1、本發(fā)明中藥組合物的薄層色譜檢測(cè)方法
[0028]1、制備中藥組合物
[0029]按重量份數(shù)計(jì):取黃芪4份、女貞子I份，混合，用萬(wàn)能粉碎機(jī)粉碎至80目，得到藥材粗粉，再將藥材粗粉用超微粉碎機(jī)在溫度為-10°C?20°C條件下粉碎至藥物粒徑為100?800目，得到。中藥組合物。
[0030]2、檢測(cè)方法
[0031]精密稱取上述中藥組合物的粉末2.0g，置于三角瓶中，加甲醇40ml，超聲處理60min，過(guò)濾，取上清液；上清液用0.45 μ m微孔濾膜(PTFE)濾過(guò)，置于蒸發(fā)皿中蒸干；殘?jiān)?ml 10% (V/V)氨水溶解，放置lOmin，不時(shí)振搖；將溶液移至分液漏斗中，用15ml水飽和正丁醇萃取3次；合并萃取液，用蒸發(fā)皿蒸干，殘?jiān)?ml甲醇溶解，即得供試品溶液；
[0032]取毛蕊異黃酮葡萄糖苷、特女貞苷，加入甲醇，分別制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液。
[0033]按照薄層色譜法(中華人民共和國(guó)藥典2010版附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液、對(duì)照品溶液各3 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以氯仿-甲醇-水(7.5:2.5:
0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(254nm)下檢視；其檢測(cè)結(jié)果見圖1，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，供試品色譜顯示相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
[0034]本發(fā)明中藥組合物的薄層色譜檢測(cè)方法，可以對(duì)中藥組合物中的黃芪、女貞子同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，同時(shí)，本發(fā)明方法具有工序少、操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)時(shí)間短、成本低等優(yōu)點(diǎn)，非常適合產(chǎn)業(yè)上的應(yīng)用。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種中藥組合物的薄層色譜檢測(cè)方法，其特征在于:所述鑒別方法包括以下步驟: a、制備供試品溶液:取中藥組合物，加入甲醇A，超聲處理，過(guò)濾，取上清液；上清液用微孔濾膜濾過(guò)，蒸干，殘?jiān)?0% v/v氨水溶解后，用水飽和正丁醇萃取，得到萃取液；將萃取液蒸干，殘?jiān)眉状糂溶解，即得供試品溶液； b、制備對(duì)照品溶液:取毛蕊異黃酮葡萄糖苷、特女貞苷分別用甲醇溶解，得到毛蕊異黃酮葡萄糖苷的對(duì)照品溶液、特女貞苷的對(duì)照品溶液； C、將供試品溶液、毛蕊異黃酮葡萄糖苷的對(duì)照品溶液、特女貞苷的對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)樣于同一娃膠GF254薄層板，以氯仿-甲醇-水為展開劑，展開，取出，瞭干；于254]11]1下檢視，供試品色譜中在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯示相同顏色的斑點(diǎn)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的薄層色譜檢測(cè)方法，其特征在于:步驟a中，所述中藥組合物是由以下原料組成:黃芪、女貞子。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的薄層色譜檢測(cè)方法，其特征在于:步驟a中，所述中藥組合物是由以下重量份數(shù)的原料組成:黃芪4份、女貞子I份。4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的薄層色譜檢測(cè)方法，其特征在于:步驟a中，所述中藥組合物按照以下步驟制備而成: ①、取黃芪、女貞子，混勻，粉碎至80目，得到粗粉； ②、在-10°C?-20°C條件下，將步驟①得到的粗粉進(jìn)一步粉碎至100目?800目的粒度，即得。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的薄層色譜檢測(cè)方法，其特征在于:步驟a中，中藥組合物與甲醇A的重量體積比為1:20g/ml ;甲醇A、10% v/v氨水、水飽和正丁醇、甲醇B的體積比為8:2:3:1ο6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的薄層色譜檢測(cè)方法，其特征在于:步驟a中，超聲處理的時(shí)間為60min ;微孔濾膜的孔徑為0.45 μπι。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的薄層色譜檢測(cè)方法，其特征在于:步驟b中，毛蕊異黃酮葡萄糖苷的對(duì)照品溶液、特女貞苷的對(duì)照品溶液的濃度分別為lmg/ml。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的薄層色譜檢測(cè)方法，其特征在于:步驟c中，所述硅膠板為硅膠GF254薄層板。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的薄層色譜檢測(cè)方法，其特征在于:步驟c中，氯仿-甲醇-水中，氯仿、甲醇、水的體積比為7.5:2.5:0.2。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種中藥組合物的薄層色譜檢測(cè)方法，包括以下步驟：a、制備供試品溶液；b、制備對(duì)照品溶液；c、將供試品溶液、毛蕊異黃酮葡萄糖苷的對(duì)照品溶液、特女貞苷的對(duì)照品溶液，分別點(diǎn)樣于同一硅膠GF254薄層板，以氯仿-甲醇-水為展開劑，展開，取出，晾干；d、置紫外燈(254nm)下檢視。本發(fā)明中藥組合物的薄層色譜檢測(cè)方法，可以對(duì)中藥組合物中的黃芪、女貞子同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，同時(shí)，本發(fā)明方法具有工序少、操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)時(shí)間短、成本低等優(yōu)點(diǎn)，非常適合產(chǎn)業(yè)上的應(yīng)用。
【IPC分類】G01N30/90
【公開號(hào)】CN104931640
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510307087
【發(fā)明人】李超, 唐華僑, 房春林, 吳學(xué)淵, 楊海涵
【申請(qǐng)人】成都乾坤動(dòng)物藥業(yè)有限公司
【公開日】2015年9月23日
【申請(qǐng)日】2015年6月5日