專利名稱：超聲波溶劑提取測定煙草及煙草制品中有機(jī)氯農(nóng)殘的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種測定煙草中農(nóng)藥殘留的方法，特別是指一種超聲波溶劑提取測定煙草及煙草制品中有機(jī)氯農(nóng)殘的方法。
背景技術(shù)：
有機(jī)氯殺蟲劑曾在農(nóng)藥領(lǐng)域中風(fēng)靡一時(shí)，為農(nóng)業(yè)蟲害防治做出過卓越貢獻(xiàn)。但由于此類藥劑的高殘留等因素而引起的環(huán)境問題，使絕大多數(shù)有機(jī)氯農(nóng)藥被禁用或限制使用。2003年國際煙草科學(xué)研究合作中心(C0RESTA)提出了煙草及煙草制品中99種農(nóng)藥的指導(dǎo)性殘留限量(GRLs)，其中有機(jī)氯農(nóng)殘占絕對(duì)部分。目前，煙草中有機(jī)氯類農(nóng)殘檢測的國際和國家標(biāo)準(zhǔn)方法均采用索氏提取來進(jìn)行樣品前處理，操作復(fù)雜，浪費(fèi)大量溶劑，且需要5 6h。因此，開發(fā)一種快速、可靠的煙草有機(jī)氯農(nóng)藥殘留分析技術(shù)具有十分重要的意義。超聲波溶劑提取是 近年來發(fā)展起來的一種萃取新方法，該方法操作簡單、萃取效率良好，同時(shí)設(shè)備簡單，已被廣泛用于水果、茶葉、土壤及蔬菜樣品殘留分析，但在煙草農(nóng)藥殘留分析中的應(yīng)用報(bào)道較少。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)在技術(shù)存在的不足之處，本發(fā)明提供一種超聲波溶劑提取測定煙草及煙草制品中有機(jī)氯農(nóng)殘的方法。該方法解決了煙草中有機(jī)氯類農(nóng)殘檢測的國際和國家標(biāo)準(zhǔn)方法均采用索氏提取來進(jìn)行樣品前處理，操作復(fù)雜，浪費(fèi)大量溶劑，且需要5 6h的問題；豐富了煙草中有機(jī)氯類農(nóng)殘檢測的技術(shù)參考，且樣品處理過程簡單、樣品穩(wěn)定性好、可同時(shí)檢測多種類別，檢出限低、重復(fù)性好、樣品回收率高，適合于廣泛推廣。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案:一種超聲波溶劑提取測定煙草及煙草制品中有機(jī)氯農(nóng)殘的方法，該方法包含樣品前處理和檢測步驟；所述的樣品前處理步驟是稱取一定量的樣品，以有機(jī)溶劑為萃取試劑萃取樣品中的有機(jī)氯后，采用固相萃取柱對(duì)萃取液進(jìn)行凈化；所述的檢測步驟是:凈化后的萃取液，采用氣相色譜分離并檢測，以保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。進(jìn)一步說，樣品前處理的步驟:稱取0.5 1.5g樣品于IOOmL的錐形瓶中，用l(T20mL水潤濕,依次加入l(T30mL正己燒、3、mL丙酮、5g無水硫酸鈉作為萃取試劑,超聲提取15飛O分鐘后離心3 10分鐘，離心速度為4000r/分鐘；提取上清液于蒸餾瓶中，重復(fù)三次，合并上清液于自動(dòng)旋流濃縮儀上氮吹至干，用2mL正己烷定容，渦旋，即得萃取液，待凈化。進(jìn)一步說，萃取液的凈化方法:用吸管吸取約0.Γ0.5g的中性氧化鋁于Florisil固相萃取柱上，用丙酮活化柱子后加入萃取液，依次用6 12mL正己烷、6 12mL丙酮:正己烷(1:1，v/v)淋洗柱子，收集所有的洗脫液，氮吹至干后用ImL正己烷定容，渦旋后經(jīng)過
0.2μπι濾膜過濾，即得凈化后的萃取液，待檢測。進(jìn)一步說，檢測的方法為:取ImL凈化后的萃取液于色譜瓶中，采用氣相色譜儀進(jìn)行測定。其中色譜柱為毛細(xì)管柱:DB-1701 (30m*0.25mm*0.25um);載氣:氮?dú)?；升溫程?始溫度80°C保持1.0O分鐘，以8.0O0C /分鐘的速率上升至150°C保持I分鐘，以6.0O0C /分鐘的速率上升至270°C保持10.00分鐘；進(jìn)樣口比:1:l(Tl:30 ;進(jìn)樣器溫度:210^2500C ;檢測器溫度:25(T280°C ;進(jìn)樣量I 5um。
上述技術(shù)方案的有益之處在于:
本發(fā)明以超聲為萃取方式，操作簡單、效率高；采用氣相色譜分離，可分離測定的有機(jī)氯農(nóng)殘最多可達(dá)19種；采用電子捕獲檢測器測定，基體小、靈敏度高；方法普適性強(qiáng)，適用于烤煙、白肋煙、香料煙、混合型 卷煙、烤煙型卷煙等不同類型的樣品；能滿足煙草及其制品多種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的一次性快速萃取分離測定的要求。


圖1是本發(fā)明實(shí)施例1中樣品溶液的色譜分離圖(1.六氯苯(Bexachlorobenzeoe)，2.α -六六六(a-BHC), 3.Y -六六六(Y_BHC),4.七氯(Heptachlor), 5.艾氏劑(aldrin), 6.β -六六六(β -BHC),7.δ -六六六(δ -BHC),8.順氯丹(cis-Chlordane),9.環(huán)氧七氯(Heptachlor epoxide), 10.反氯丹(trans-Chlordane), 11.α-硫丹(a- Codosulfan), 12.氧氯丹(Oxychlordane)，13.甲氧氯(Benzene)，14.P, P’-滴滴伊(P, p’-DDE)，15.狄氏劑(dicldrin), 16.ο, p’-滴滴涕(ο, p’-DDT)，17.p, p’-滴滴滴(p，p’-DDD)，18.β-硫丹(β- Codosulfan)，19.硫丹硫酸鹽(Endosulfansul fate))。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明。這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。
一種超聲波溶劑提取測定煙草及煙草制品中有機(jī)氯農(nóng)殘的方法，該方法包含樣品前處理和檢測步驟；所述的樣品前處理步驟是稱取一定量的樣品，以有機(jī)溶劑為萃取試劑萃取樣品中的有機(jī)氯后，采用固相萃取柱對(duì)萃取液進(jìn)行凈化；所述的檢測步驟是:凈化后的萃取液，采用氣相分離并檢測，以保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。
本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式如下:
實(shí)施例1:
樣品前處理步驟:稱取0.5g樣品于IOOmL的錐形瓶中，用IOmL水潤濕，依次加入IOmL正己烷、3mL丙酮、Ig無水硫酸鈉，超聲提取15分鐘后離心(4000r/分鐘)3分鐘，提取上清液于蒸餾瓶中，重復(fù)三次，合并上清液于自動(dòng)旋流濃縮儀上氮吹至干，用2mL正己烷定容，渦旋，即得萃取液，待凈化。
萃取液的凈化方法:用吸管吸取約0.1g的中性氧化鋁于Florisil固相萃取柱上，用丙酮活化柱子后加入萃取液，依次用6mL正己燒、6mL丙酮:正己燒(1:1，v/v)淋洗柱子，收集所有的洗脫液，氮吹至干后用ImL正己烷定容，渦旋后經(jīng)過0.2μπι濾膜過濾，所得溶液待檢測。
檢測的方法:取ImL凈化后的萃取液于色譜瓶中，采用氣相色譜儀進(jìn)行測定。其中色譜柱為毛細(xì)管柱:DB-1701 (30m*0.25mm*0.25um);載氣:氮?dú)?；升溫程?始溫度80°C保持1.0O分鐘，以8.0O0C /分鐘的速率上升至150°C保持I分鐘，以6.00°C /分鐘的速率上升至270°C保持10.00分鐘；進(jìn)樣口比:1:10 ;進(jìn)樣器溫度:230°C ;檢測器溫度:280°C ；進(jìn)樣量I 5um。檢測結(jié)果:樣品萃取液的色譜圖如圖1所示，19種有機(jī)氯達(dá)到基線分離，檢測時(shí)間為25分鐘。實(shí)施例2:樣品前處理步驟:將煙葉樣品在22°C ±1°C和相對(duì)濕度60%±2%條件下平衡48 h，稱取1.0g樣品于IOOmL的錐形瓶中，用15mL水潤濕,依次加入IOmL正己燒、6mL丙酮、2g無水硫酸鈉，超聲提取30分鐘后離心(40001./分鐘)8分鐘，提取上清液于蒸餾瓶中，重復(fù)三次，合并上清液于自動(dòng)旋流濃縮儀上氮吹至干，用2mL正己烷定容，渦旋，即得萃取液，待凈化。萃取液的凈化條件::用吸管吸取約0.5g的中性氧化鋁于Florisil固相萃取柱上，用丙酮活化柱子后加入萃取液，依次用IOmL正己烷、12mL丙酮:正己烷(1:l，v/v)淋洗柱子，收集所有的洗脫液，氮吹至干后用ImL正己烷定容，渦旋后經(jīng)過0.2 μ m濾膜過濾，所得溶液待檢測。檢測的方法為:取ImL凈化后的萃取液于色譜瓶中，采用氣相色譜儀進(jìn)行測定。其中色譜柱為毛細(xì)管柱:DB-1701(30m*0.25mm*0.25um);載氣:氮?dú)?；升溫程?始溫度80°C保持1.00分鐘，以8.0O0C /分鐘的速率上升至150°C保持I分鐘，以6.00°C /分鐘的速率上升至270°C保持10.00分鐘；進(jìn)樣口比:1:15 ;進(jìn)樣器溫度:240°C ;檢測器溫度:250°C ；進(jìn)樣量2um。實(shí)施例3:`對(duì)部分煙葉樣品進(jìn)行檢測。樣品前處理步驟:將煙葉樣品在22°C ±1°C和相對(duì)濕度60%±2%條件下平衡48 h，稱取1.5g樣品于IOOmL的錐形瓶中，用20mL水潤濕,依次加入30mL正己燒、9mL丙酮、5g無水硫酸鈉，超聲提取60分鐘后離心(4000r/分鐘)10分鐘，提取上清液于蒸餾瓶中，重復(fù)三次，合并上清液于自動(dòng)旋流濃縮儀上氮吹至干，用2mL正己烷定容，渦旋，即得萃取液，待凈化。萃取液的凈化方法:用吸管吸取約0.3g的中性氧化鋁于Florisil固相萃取柱上，用丙酮活化柱子后加入萃取液，依次用12mL正己烷、12mL丙酮:正己烷(1:1，v/v)淋洗柱子，收集所有的洗脫液，氮吹至干后用ImL正己烷定容，渦旋后經(jīng)過0.2 μ m濾膜過濾，所得溶液待檢測。檢測的方法為:取ImL凈化后的萃取液于色譜瓶中，采用氣相色譜儀進(jìn)行測定。其中色譜柱為毛細(xì)管柱:DB-1701(30m*0.25mm*0.25um);載氣:氮?dú)?；升溫程?始溫度80°C保持1.00分鐘，以8.0O0C /分鐘的速率上升至150°C保持I分鐘，以6.00°C /分鐘的速率上升至270°C保持10.00分鐘；進(jìn)樣口比:1:10 ;進(jìn)樣器溫度:250°C ;檢測器溫度:280°C ；進(jìn)樣量2um。標(biāo)準(zhǔn)曲線:用有機(jī)氯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液分別配制成濃度為0.005mg/L,0.010 mg/L,
0.050 mg/L, 0.1mg/L,0.2 mg/L工作液，在選定的實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)樣，以進(jìn)樣濃度(X)為橫坐標(biāo)，峰面積(Y)為縱坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，按信噪比(S/N)3倍計(jì)算檢出限(L0D)，如表I所示:大部分有機(jī)氯類農(nóng)藥在0.05mg/r0.2mg/L之間具有良好的線性相關(guān)系數(shù)，檢出限(LOD)在0.0015mg/kg 0.0080mg/kg 之間。
表I方法的線性及檢出限
權(quán)利要求
1.超聲波溶劑提取測定煙草及煙草制品中有機(jī)氯農(nóng)殘的方法，其特征在于:該方法包含樣品前處理和檢測步驟；所述的樣品前處理步驟是稱取一定量的樣品，以有機(jī)溶劑為萃取試劑萃取樣品中的有機(jī)氯后，采用固相萃取柱對(duì)萃取液進(jìn)行凈化；所述的檢測步驟是:凈化后的萃取液，采用氣相分離并檢測，以保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。
2.如權(quán)利要求1所述的超聲波溶劑提取測定煙草及煙草制品中有機(jī)氯農(nóng)殘的方法，其特征在于:所述的樣品前處理步驟:稱取0.5^1.5g樣品于IOOmL的錐形瓶中，用l(T20mL水潤濕，依次加入l(T30mL正己烷、3、mL丙酮、Hg無水硫酸鈉作為萃取試劑，超聲提取15飛O分鐘后離心3 10分鐘，離心速度為4000r/分鐘；提取上清液于蒸餾瓶中，重復(fù)三次，合并上清液于自動(dòng)旋流濃縮儀上氮吹至干，用2mL正己烷定容，渦旋，即得萃取液，待凈化。
3.如權(quán)利要求2所述的超聲波溶劑提取測定煙草及煙草制品中有機(jī)氯農(nóng)殘的方法，其特征在于:所述萃取液的凈化方法:用吸管吸取約0.Γ0.5g的中性氧化鋁于Florisil固相萃取柱上，用丙酮活化柱子后加入萃取液，依次用6 12mL正己烷、6 12mL丙酮:正己烷(1:1，v/v)淋洗柱子，收集所有的洗脫液，氮吹至干后用ImL正己烷定容，渦旋后經(jīng)過0.2μπι濾膜過濾，即得凈化后的萃取液，待檢測。
4.如權(quán)利要求1、2或3所述的一種超聲波溶劑提取測定煙草及煙草制品中有機(jī)氯農(nóng)殘的方法，其特征在于:所述檢測的方法為:取ImL凈化后的萃取液于色譜瓶中，采用氣相色譜儀進(jìn)行測定。其中色譜柱為毛細(xì)管柱:DB-1701 (30m*0.25mm*0.25um);載氣:氮?dú)猓簧郎爻绦?始溫度80°C保持1.00分鐘，以8.0O0C /分鐘的速率上升至150°C保持I分鐘，以.6.0O0C /分鐘的速率上升至270°C保持10.00分鐘；進(jìn)樣口比:1:10 1:30 ;進(jìn)樣器溫度:.210^2500C ;檢測器溫度:25(T 280°C ;進(jìn)樣量I 5um。
全文摘要
本發(fā)明公開一種超聲波溶劑提取測定煙草及煙草制品中有機(jī)氯農(nóng)殘的方法，該方法包含樣品前處理和檢測步驟；所述的樣品前處理步驟是稱取一定量的樣品，以有機(jī)溶劑為萃取試劑萃取樣品中的有機(jī)氯后，采用固相萃取柱對(duì)萃取液進(jìn)行凈化；所述的檢測步驟是凈化后的萃取液，采用氣相分離并檢測，以保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。本發(fā)明以超聲為萃取方式，操作簡單、效率高；采用氣相色譜分離，可分離測定的有機(jī)氯農(nóng)殘最多可達(dá)19種；采用電子捕獲檢測器測定，基體小、靈敏度高；方法普適性強(qiáng)，適用于烤煙、白肋煙、香料煙、混合型卷煙、烤煙型卷煙等不同類型的樣品；能滿足煙草及其制品多種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的一次性快速萃取分離測定的要求。
文檔編號(hào)G01N30/02GK103175918SQ20131005919
公開日2013年6月26日 申請(qǐng)日期2013年2月26日 優(yōu)先權(quán)日2013年2月26日
發(fā)明者葉仲力, 張建平, 吳清輝, 鄧其馨, 劉江生, 周培琛, 黃華發(fā), 蘇明亮, 黃朝章, 趙藝強(qiáng), 白雪平, 蔡國華, 許寒春, 謝衛(wèi) 申請(qǐng)人:福建中煙工業(yè)有限責(zé)任公司