一種化妝品中氯霉素的檢測(cè)試劑盒及檢測(cè)方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種化妝品中氯霉素的檢測(cè)試劑盒及檢測(cè)方法，該檢測(cè)試劑盒包括：分析純、提取液、雙蒸水、緩沖液、試劑板。采用該檢測(cè)試劑盒對(duì)化妝品中氯霉素進(jìn)行檢測(cè)的方法為，先將樣品進(jìn)行均質(zhì)，提取及離心，制得備用底層溶液，再將備用底層溶液加至樣品待測(cè)管中，并滴加分析純離心，最后取離心后的上層液加至別一試管中，旋轉(zhuǎn)蒸干，并采用緩沖液洗去殘留物，制得凈化后的待測(cè)樣品溶液；最后將凈化后的待測(cè)樣品溶液，滴于試劑板的加樣孔中，進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)觀察檢測(cè)線與控制線顏色來(lái)判斷待測(cè)樣品氯霉素為陽(yáng)性或陰性。該檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確，不需要特殊設(shè)備和儀器，尤其適用于化妝品監(jiān)管部門(mén)對(duì)化妝品中氯霉素的隨機(jī)大樣本抽查。
【專利說(shuō)明】一種化妝品中氯霉素的檢測(cè)試劑盒及檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于化妝品檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種化妝品中氯霉素的檢測(cè)試劑盒及檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]氯霉素是一種廣譜抗生素，低濃度時(shí)可抑菌，高濃度時(shí)可殺菌。因其具有抗菌及消炎作用，對(duì)皮膚炎癥具有一定療效，所以被違法添加至多種化妝品中，如祛痘、除螨類化妝品。近年來(lái)，消費(fèi)者因使用祛辣等功能化妝品后發(fā)生嚴(yán)重不良反應(yīng)的事件屢有發(fā)生，為此，衛(wèi)生部及化妝品有關(guān)監(jiān)管部門(mén)開(kāi)展了專項(xiàng)抽檢工作，檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，13種化妝品違禁添加了抗菌素，不合格率高達(dá)26%。2005年專項(xiàng)抽查結(jié)果顯示，54種祛痘、除螨類化妝品中也有部分添加抗菌素，不合格率達(dá)22.2%。
[0003]氯霉素長(zhǎng)期微量吸收后可引起再生障礙性貧血及粒細(xì)胞缺乏等多種血液疾病，此夕卜，還可引起菌群失調(diào)。即使外用，其含量也有嚴(yán)格限定。長(zhǎng)期使用含有氯霉素的化妝品，由于皮膚粘膜血管豐富，也可大量吸收，易引起皮瘆等過(guò)敏反應(yīng)，嚴(yán)重者可至皮膚潰瘍。
[0004]2002年衛(wèi)生部頒部的《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》明確規(guī)定，禁止化妝品中違法添加氯霉素類等抗生素。雖然相關(guān)部門(mén)嚴(yán)格規(guī)定及加大了監(jiān)督力度，但市售有關(guān)化妝品氯霉素等抗生素添加行為仍然不樂(lè)觀。因此，加強(qiáng)監(jiān)測(cè)仍然至關(guān)重要。目前，化妝品中氯霉素的檢測(cè)方法主要為儀器法，該法特異性高，準(zhǔn)確度高，但對(duì)操作環(huán)境及設(shè)備要求也高，不利于大樣本抽查。為此，尋求一種檢測(cè)迅速，檢測(cè)成本低，而檢測(cè)準(zhǔn)確度及靈敏度高的方法是迫在眉睫的冋題。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005]本發(fā)明的目的就是針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺陷提供一種化妝品中氯霉素的檢測(cè)試劑盒及檢測(cè)方法。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
[0007]一種化妝品中氯霉素的檢測(cè)試劑盒，該檢測(cè)試劑盒包括:分析純、提取液、雙蒸水、緩沖液、試劑板。
[0008]優(yōu)選的，所述的分析純?yōu)橐宜嵋阴ァ?br>
[0009]優(yōu)選的，所述的提取液選自正已烷、乙醇或丙三醇中的一種或多種。
[0010]優(yōu)選的，所述的正已烷、乙醇或丙三醇的體積濃度為70% -80%。
[0011]優(yōu)選的，所述的緩沖液為0.02-0.05mol/L的PBS溶液。
[0012]所述的試劑板由上下兩塊塑料模板和背襯組成，所述的試劑板背襯上依次緊密粘貼有樣品墊、硝酸纖維膜及吸水墊。
[0013]所述的樣品墊、硝酸纖維膜及吸水墊各部分間均有1-2_的重疊。
[0014]所述的硝酸纖維素膜從樣品墊至吸水墊方向依次噴有檢測(cè)線與質(zhì)控線。
[0015]所述的檢測(cè)線為氯霉素與BSA的偶聯(lián)物，所述的質(zhì)控線為羊抗鼠IgG。
[0016]采用如上所述的檢測(cè)試劑盒檢測(cè)化妝品中氯霉素的檢測(cè)方法，包括以下步驟:
[0017](I)取樣品5-10g加至試管中，加入5-10ml雙蒸水，均質(zhì)3-5分鐘，取3-5g均質(zhì)后的樣品加至離心管中，加入提取液，震蕩混勾3-5min，以1800_2000r/min離心5_10min，靜置l_3min，取底層溶液備用；
[0018](2)將步驟⑴中制得的備用底層溶液5-10ml加至樣品待測(cè)管中，滴加3_5ml分析純，采用混勾器混勾5-10min，再以4000-5000r/min速度離心2_5min，靜置；
[0019](3)凈化:從離心管中移取Iml上層液加至另一試管中，旋轉(zhuǎn)蒸干，加入緩沖液1-3滴，洗去殘留物，制得凈化后的待測(cè)樣品溶液；
[0020](4)檢測(cè):吸取步驟(3)中制得的凈化后的待測(cè)樣品溶液，滴于試劑板的加樣孔中，2-5min后觀察檢測(cè)線顏色變化，并與控制線顏色對(duì)比，判斷待測(cè)樣品氯霉素為陽(yáng)性或陰性。
[0021]檢測(cè)結(jié)果判斷:
[0022]陽(yáng)性:檢測(cè)線與質(zhì)控線相比，顏色深或一樣深。
[0023]陰性:檢測(cè)線與質(zhì)控線相比，無(wú)顯線或顏色淺。
[0024]無(wú)效:未出現(xiàn)質(zhì)控C線，表果操作不當(dāng)或檢測(cè)過(guò)程無(wú)效。
[0025]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下有益效果:
[0026]1.本發(fā)明對(duì)待測(cè)樣品先進(jìn)行預(yù)處理，包括有機(jī)溶劑及乙酸乙酯提取，再經(jīng)過(guò)凈化、緩沖液洗脫殘留物，可將樣品中氯霉素最大程度的提取，從而保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性與靈敏度。
[0027]2.本發(fā)明根據(jù)氯膠體金試紙?jiān)?，將樣品?jīng)過(guò)預(yù)處理后采用試劑板檢測(cè)，通過(guò)對(duì)質(zhì)控線及檢測(cè)測(cè)的顏色進(jìn)行對(duì)比，來(lái)判斷樣品中是否含有氯霉素，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程僅需采用常規(guī)的化學(xué)提取、凈化等操作，采用常規(guī)試劑即可完成，操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)成本低，費(fèi)時(shí)短。
【具體實(shí)施方式】
[0028]本發(fā)明通過(guò)以下具體實(shí)施例更詳細(xì)的說(shuō)明本發(fā)明，可以使本專業(yè)技術(shù)人員更全面的了解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。
[0029]實(shí)施例1.
[0030]一種化妝品中氯霉素的檢測(cè)試劑盒，該檢測(cè)試劑盒包括:乙酸乙酯、體積濃度為70%的正已烷、雙蒸水、0.02mol/L的PBS溶液、試劑板。
[0031]所述的試劑板由上下兩塊塑料模板和背襯組成，所述的試劑板背襯上依次緊密粘貼有樣品墊、硝酸纖維膜及吸水墊。
[0032]所述的樣品墊、硝酸纖維膜及吸水墊各部分間均有Imm的重疊。
[0033]所述的硝酸纖維素膜從樣品墊至吸水墊方向依次噴有檢測(cè)線與質(zhì)控線。
[0034]所述的檢測(cè)線為氯霉素與BSA的偶聯(lián)物，所述的質(zhì)控線為羊抗鼠IgG。
[0035]采用如上所述的檢測(cè)試劑盒檢測(cè)化妝品中氯霉素的檢測(cè)方法，包括以下步驟:
[0036](I)取樣品5g加至試管中，加入5ml雙蒸水，均質(zhì)3分鐘，取3g均質(zhì)后的樣品加至離心管中，加入提取液，震蕩混勻3min，以1800r/min離心5min，靜置lmin，取底層溶液備用；
[0037](2)將步驟(I)中制得的備用底層溶液5ml加至樣品待測(cè)管中，滴加3ml分析純，采用混勾器混勾5min，再以4000r/min速度離心2min,靜置；
[0038](3)凈化:從離心管中移取Iml上層液加至另一試管中，旋轉(zhuǎn)蒸干，加入緩沖液I滴，洗去殘留物，制得凈化后的待測(cè)樣品溶液；
[0039](4)檢測(cè):吸取步驟(3)中制得的凈化后的待測(cè)樣品溶液，滴于試劑板的加樣孔中，2min后觀察檢測(cè)線顏色變化，并與控制線顏色對(duì)比，判斷待測(cè)樣品氯霉素為陽(yáng)性或陰性。
[0040]結(jié)果顯示，檢測(cè)線顏色比質(zhì)控線顏色淺，判斷該樣品中含有氯霉素。
[0041]實(shí)施例2.
[0042]—種化妝品中氯霉素的檢測(cè)試劑盒，該檢測(cè)試劑盒包括:乙酸乙酯、體積濃度為80%的乙醇、雙蒸水、0.05mol/L的PBS溶液、試劑板。
[0043]所述的試劑板由上下兩塊塑料模板和背襯組成，所述的試劑板背襯上依次緊密粘貼有樣品墊、硝酸纖維膜及吸水墊。
[0044]所述的樣品墊、硝酸纖維膜及吸水墊各部分間均有1-2_的重疊。
[0045]所述的硝酸纖維素膜從樣品墊至吸水墊方向依次噴有檢測(cè)線與質(zhì)控線。
[0046]所述的檢測(cè)線為氯霉素與BSA的偶聯(lián)物，所述的質(zhì)控線為羊抗鼠IgG。
[0047]采用如上所述的檢測(cè)試劑盒檢測(cè)化妝品中氯霉素的檢測(cè)方法，包括以下步驟:
[0048](I)取樣品1g加至試管中，加入1ml雙蒸水，均質(zhì)5分鐘，取5g均質(zhì)后的樣品加至離心管中，加入提取液，震蕩混勻5min，以2000r/min離心lOmin，靜置3min，取底層溶液備用;
[0049](2)將步驟(I)中制得的備用底層溶液1ml加至樣品待測(cè)管中，滴加5ml分析純，采用混勾器混勾lOmin，再以5000r/min速度離心5min,靜置；
[0050](3)凈化:從離心管中移取Iml上層液加至另一試管中，旋轉(zhuǎn)蒸干，加入緩沖液3滴，洗去殘留物，制得凈化后的待測(cè)樣品溶液；
[0051](4)檢測(cè):吸取步驟(3)中制得的凈化后的待測(cè)樣品溶液，滴于試劑板的加樣孔中，5min后觀察檢測(cè)線顏色變化，并與控制線顏色對(duì)比，判斷待測(cè)樣品氯霉素為陽(yáng)性或陰性。
[0052]結(jié)果顯示，檢測(cè)線顏色比質(zhì)控線顏色淺，判斷該樣品中含有氯霉素。
[0053]實(shí)施例3.
[0054]—種化妝品中氯霉素的檢測(cè)試劑盒，該檢測(cè)試劑盒包括:乙酸乙酯、體積濃度為75%的丙三醇、雙蒸水、0.04mol/L的PBS溶液、試劑板。
[0055]優(yōu)選的，所述的分析純?yōu)橐宜嵋阴ァ?br>
[0056]所述的試劑板由上下兩塊塑料模板和背襯組成，所述的試劑板背襯上依次緊密粘貼有樣品墊、硝酸纖維膜及吸水墊。
[0057]所述的樣品墊、硝酸纖維膜及吸水墊各部分間均有1-2_的重疊。
[0058]所述的硝酸纖維素膜從樣品墊至吸水墊方向依次噴有檢測(cè)線與質(zhì)控線。
[0059]所述的檢測(cè)線為氯霉素與BSA的偶聯(lián)物，所述的質(zhì)控線為羊抗鼠IgG。
[0060]采用如上所述的檢測(cè)試劑盒檢測(cè)化妝品中氯霉素的檢測(cè)方法，包括以下步驟:
[0061](I)取樣品8g加至試管中，加入8ml雙蒸水，均質(zhì)4分鐘，取4g均質(zhì)后的樣品加至離心管中，加入提取液，震蕩混勻4min，以1900r/min離心8min，靜置l_3min，取底層溶液備用；
[0062](2)將步驟(I)中制得的備用底層溶液8ml加至樣品待測(cè)管中，滴加4ml分析純，采用混勾器混勾8min，再以4500r/min速度離心3min,靜置；
[0063](3)凈化:從離心管中移取Iml上層液加至另一試管中，旋轉(zhuǎn)蒸干，加入緩沖液2滴，洗去殘留物，制得凈化后的待測(cè)樣品溶液；
[0064](4)檢測(cè):吸取步驟(3)中制得的凈化后的待測(cè)樣品溶液，滴于試劑板的加樣孔中，3min后觀察檢測(cè)線顏色變化，并與控制線顏色對(duì)比，判斷待測(cè)樣品氯霉素為陽(yáng)性或陰性。
[0065]結(jié)果顯示，檢測(cè)線顏色比質(zhì)控線顏色深，判斷該樣品中不含有氯霉素。
[0066]以上所述實(shí)施例只是本發(fā)明的較佳實(shí)例，并非來(lái)限制本發(fā)明實(shí)施范圍，故凡依本發(fā)明申請(qǐng)專利范圍所述的構(gòu)造、特征及原理所做的等效變化或修飾，均應(yīng)包括本發(fā)明專利申請(qǐng)范圍內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種化妝品中氯霉素的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，該檢測(cè)試劑盒包括:分析純、提取液、雙蒸水、緩沖液、試劑板。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化妝品中氯霉素的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的分析純?yōu)橐宜嵋阴ァ?br>
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化妝品中氯霉素的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的提取液選自正已烷、乙醇或丙三醇中的一種或多種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化妝品中氯霉素的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的正已烷、乙醇或丙三醇的體積濃度為70%-80%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化妝品中氯霉素的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的緩沖液為 0.02-0.05mol/L 的 PBS 溶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化妝品中氯霉素的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的試劑板由上下兩塊塑料模板和背襯組成，所述的試劑板背襯上依次緊密粘貼有樣品墊、硝酸纖維膜及吸水墊。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化妝品中氯霉素的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的樣品墊、硝酸纖維膜及吸水墊各部分間均有l(wèi)_2mm的重疊。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化妝品中氯霉素的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的硝酸纖維素膜從樣品墊至吸水墊方向依次噴有檢測(cè)線與質(zhì)控線。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化妝品中氯霉素的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的檢測(cè)線為氯霉素與BSA的偶聯(lián)物，所述的質(zhì)控線為羊抗鼠IgG。
10.采用如權(quán)利要求1-9任一所述的檢測(cè)試劑盒檢測(cè)化妝品中氯霉素的檢測(cè)方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)取樣品5-10g加至試管中，加入5-10ml雙蒸水，均質(zhì)3_5分鐘，取3_5g均質(zhì)后的樣品加至離心管中，加入提取液，震蕩混勾3_5min，以1800_2000r/min離心5_10min，靜置1-3min，取底層溶液備用； (2)將步驟(I)中制得的備用底層溶液5-10ml加至樣品待測(cè)管中，滴加3-5ml分析純，采用混勻器混勻5-10min，再以4000-5000r/min速度離心2_5min，靜置； (3)凈化:從離心管中移取Iml上層液加至另一試管中，旋轉(zhuǎn)蒸干，加入緩沖液1-3滴，洗去殘留物，制得凈化后的待測(cè)樣品溶液； (4)檢測(cè):吸取步驟(3)中制得的凈化后的待測(cè)樣品溶液，滴于試劑板的加樣孔中，2-5min后觀察檢測(cè)線顏色變化，并與控制線顏色對(duì)比，判斷待測(cè)樣品氯霉素為陽(yáng)性或陰性。
【文檔編號(hào)】G01N33/00GK104515834SQ201410482560
【公開(kāi)日】2015年4月15日 申請(qǐng)日期:2014年9月20日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月20日
【發(fā)明者】郭狄 申請(qǐng)人:中山鼎晟生物科技有限公司