當歸定性定量中藥飲片的質量標準與制造工藝的制作方法

文檔序號：11676123閱讀：804來源：國知局

本發(fā)明涉及中藥領域，具體為當歸定性定量中藥飲片的質量標準、操作規(guī)程與制造工藝。

背景技術：

當歸(學名：angelicasinensisradix)，別名：干歸、馬尾當歸、秦哪、馬尾歸、云歸、西當歸、岷當歸、金當歸、涵歸尾、土當歸，屬傘形科植物當歸的干燥根，始載于東漢《神農本草經》，列為中品?！蹲⒔鈧摗酚惺觥懊}者血之府，諸血皆屬心，凡通脈者必先補心益血，故張仲景治手足厥寒，脈細欲絕者，用當歸之苦溫以助心血?！?，據現(xiàn)行版《中國藥典》記載，其功能與主治為補血活血，調經止痛，潤腸通便。用于血虛萎黃，眩暈心悸，月經不調，經閉痛經，虛寒腹痛，風濕痹痛，跌撲損傷，癰疽瘡瘍，腸燥便秘。當歸素有“十方九歸”之稱，廣泛應用于臨床各科?，F(xiàn)代研究表明，當歸功效的物質基礎主要是揮發(fā)性油、有機酸類、多糖類等，尚含有維生素a、維生素b12、維生素e，17種氨基酸以及鈉、鉀、鈣、鎂等20余種無機元素。姚成的博士學位論文《當歸和貓爪草成分的綜合分析方法研究》中的1.4.5當歸化學成分的研究詳細綜合了現(xiàn)代研究成果，并采用gc-ms分析揮發(fā)油分離得到72個色譜峰，并鑒定出其中44個成分等等，宋秋月等的《當歸化學成分研究》則采用柱色譜法，利用理化性質及波譜數(shù)據分析，對當歸的醋酸乙酯提取部位中的16個化合物分離鑒定等，均表明對當歸成分的分析已達到較高水平。

中藥飲片是中國中藥產業(yè)不可缺失的部分，是中醫(yī)臨床辯證施治必需的傳統(tǒng)武器，其品質直接影響中醫(yī)臨床防病、治病的療效，本發(fā)明供的高品質的中藥飲片有較大的市場需求。另外針對現(xiàn)代人快速的生活節(jié)奏，本發(fā)明提供一種炮制工藝，將符合質量標準的當歸制備成片厚0.3～1mm的中藥飲片，可沖泡服用改變傳統(tǒng)煎煮服用方法。

當歸，據《本草綱目》記載，“當歸在隴西川谷四陽(五陽今漳縣、岷陽今岷縣、首陽今渭源、洮陽今臨洮)”，相比較其它品種，當歸種植地高度集中，我國甘肅中部為主產區(qū)，約占全國產量的70％，以岷縣品質最佳，習稱“岷歸”。秉持對中藥材高品質的追求，本公司對甘肅省岷縣寺溝鄉(xiāng)、清水鄉(xiāng)等進行實地考察，選擇甘肅岷歸中藥材科技有限公司等實力企業(yè)作為供貨商，確保原料為高品質的道地藥材。嚴輝的《我國當歸藥材生產現(xiàn)狀與分析》就當歸藥材資源生產現(xiàn)狀、存在的問題進行總結分析，文中提及“藥材中農藥殘留超標和藥性降低，臨床療效減弱。另外，加工規(guī)格多年來無突破、無創(chuàng)新?！保c本發(fā)明所要解決的問題-解決目前市場上的普遍存在中藥飲片療效不明顯與中藥材因環(huán)境污染而重金屬超標、農藥殘留超標等質量問題，以及提供可沖泡服用改變傳統(tǒng)煎煮服用方法，不謀而合。

附圖說明

附圖1是當歸定性定量中藥飲片生產工藝流程圖。

技術實現(xiàn)要素：

為了確保當歸飲片的高品質要求，本發(fā)明提供的當歸定性定量中藥飲片的質量標準與制造工藝，增加藥屑雜質、重金屬及有害元素、有機氯農藥殘留量、黃曲霉毒素b1、二氧化硫殘留量、含量測定，并將含量測定中的阿魏酸的標準限度從0.050％(現(xiàn)行版《中國藥典》未對當歸飲片作含量測定要求，為當歸中藥材標準)提高至0.055％。并通過特定的工序生產出片厚0.3～1mm的當歸中藥飲片，確保中藥飲片符合高標準高品質的要求。

本發(fā)明提供的當歸定性定量中藥飲片的制造工藝，包括以下步驟：

a10、凈制：清除混在當歸中的雜質及霉變品等，將當歸按大小進行分檔。注意：當歸經凈選后不得直接接觸地面。

a20、潤藥：凈制后當歸放置在全自動潤藥機中，真空負壓狀態(tài)下潤藥0.5-1.5h，至當歸徹底潤透，折斷面無干心。潤藥參數(shù)：溫度45-50℃，壓力-0.05mpa，噴淋時間5s，噴淋延時100s。注意：當歸需潤透，折斷面無干心，當歸材內外軟硬適宜。

切制：片厚0.3～1mm，按全自動高速切片機操作規(guī)程操作，調好刀距，切藥時先試切，用游標卡尺檢測，調整好切制厚度，符合要求后再正式切藥。

a40、干燥：采用熱風循環(huán)烘箱進行干燥，將當歸鋪于烘箱中烘盤上，攤鋪厚度均勻，厚度在3cm以下。打開電源開關，開啟加熱開關、風機，在溫度45±2℃進行干燥，在溫度達到設定溫度后干燥4～5h，干燥完畢，關閉加熱開關，繼續(xù)吹風，待箱內溫度降下至35～40℃，關閉風機。干燥后崗位人員需填寫中間產品請檢單，交質管部由qa取樣進行水分檢查。

a50、包裝：根據本品包裝規(guī)格要求進行包裝。包裝前需對包裝間進行檢查，確認包裝生產線的清場已經完成，并核對包裝材料是否符合要求。內包裝：在設備上調整好需要印制的生產日期、批號，qa監(jiān)控，稱取規(guī)定重量的當歸放入料斗中，用封口機封口，要求做到封口嚴密、平整、美觀。操作過程中每隔30min抽樣檢測裝量、封口及生產日期印制是否清晰等情況。外包裝：在設備上調整好需印制的生產日期及批號，qa監(jiān)控，在外包裝盒子上打印批號、生產日期，打印過程中需注意批號及生產日期是否清晰。將內包裝完成后的飲片及檢驗報告書放入外包盒中，4袋/盒。將每10盒飲片，套入1個熱縮膜中，進行熱收縮；熱收縮后裝入大紙箱中，240盒/箱。操作過程中，qa隨時抽檢。包裝后崗位人員需填寫成品請檢單，交質量部由qa取樣進行產品檢查。

a60、成品：包裝后崗位人員需填寫成品請檢單，交質量部由qa取樣進行產品檢查。

增加藥屑雜質、重金屬及有害元素、有機氯農藥殘留量、黃曲霉毒素b1、二氧化硫殘留量、含量測定，并將含量測定中的阿魏酸的標準限度從0.050％(現(xiàn)行版《中國藥典》未對當歸飲片作含量測定要求，為當歸中藥材標準)提高至0.055％。修訂后的當歸定性定量中藥飲片的質量標準如下所示：

當歸飲片

拼音名稱：dangguiyinpian

包裝：純鋁復合膜包裝。

【性狀】取本品適量，在日光下觀察，本品呈類圓形、橢圓形或不規(guī)則薄片。外表皮淺棕色至棕褐色。切面淺棕黃色或黃白色，平坦，有裂隙，中間有淺棕色的形成層環(huán)，并有多數(shù)棕色的油點。嗅之，香氣濃郁。嘗之，味甘、辛、微苦。

鑒別

顯微鑒別

儀器及用具：中藥粉碎機、藥典篩、顯微鏡、酒精燈

試劑及試液：水合氯醛試液、甘油醋酸試液、甘油乙醇試液、稀甘油(試劑均使用分析純，實驗用水為純化水)

測定及結果判定：取本品粉末(過四號篩)適量，挑取少許置載玻片上，滴加甘油醋酸試液、水合氯醛試液或其他試液1～2滴，蓋上蓋玻片。必要時滴加水合氯醛試液后，在酒精燈上加熱透化，并滴加甘油乙醇試液或稀甘油，蓋上蓋玻片，于顯微鏡下觀察：粉末淡黃棕色。韌皮薄壁細胞紡錘形，壁略厚，表面有極微細的斜向交錯紋理，有時可見菲薄的橫隔。梯紋導管和網紋導管多見，直徑約至8um。有時可見油室碎片。

薄層鑒別

儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、超聲波清洗機、恒溫水浴鍋、點樣器、展開缸、薄層板、三用紫外儀

試劑及試液：乙醚、乙醇、正已烷、乙酸乙酯、碳酸氫鈉、甲醇、環(huán)已烷、二氯甲烷、甲酸、稀鹽酸(試劑均使用分析純，實驗用水為純化水)

對照藥材及對照品：當歸對照藥材、阿魏酸對照品、藁本內酯對照品

取本品粉末0.5g，加乙醚20ml，超聲處理10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供拭品溶液。另取當歸對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，以正已烷-乙酸乙酯(4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。結果判定：供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。

取本品粉末3g，加1％碳酸氫鈉溶液50ml，超聲處理10分鐘，離心，取上清液用稀鹽酸調節(jié)ph值2～3，用乙醚振搖提取2次，每次20ml合并乙醚液，揮干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取阿魏酸對照品、藁本內酯對照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗，吸取上述三種溶液各10μl，分別點于同一硅膠g薄層板上，以環(huán)已烷-二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(4∶1∶1∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。結果判定：供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。

檢查

藥屑、雜質

儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩

測定及結果判定：照雜質檢查法(通則2301)測定。

取供試品約100g(精確到0.1g)，攤開，揀出雜質，用6號篩篩出藥屑，合并，稱重，計算其在供試品中的量(％)。

結果判定：本品藥屑、雜質不得過3％。

水分

儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、電熱恒溫鼓風干燥箱、稱量瓶

測定及結果判定：照水分測定法(通則0832第二法)測定。取供試品適量(約相當于含水量1～4ml)，精密稱定，置500ml的短頸圓底燒瓶中，加甲苯約200ml，必要時加入干燥、潔凈的無釉小瓷片數(shù)片或玻璃珠數(shù)粒，連接儀器，自冷凝管頂端加入甲苯至充滿水分測定管的狹細部分。將圓底燒瓶置電熱套中或用其他適宜方法緩緩加熱，待甲苯開始沸騰時，調節(jié)溫度，使每秒餾出2滴。待水分完全餾出，即測定管刻度部分的水量不再增加時，將冷凝管內部先用甲苯沖洗，再用飽蘸甲苯的長刷或其他適宜方法，將管壁上附著的甲苯推下，繼續(xù)蒸餾5分鐘，放冷至室溫，拆卸裝置，如有水黏附在水分測定管的管壁上，可用蘸甲苯的銅絲推下，放置使水分與甲苯完全分離(可加亞甲藍粉末少量，使水染成藍色，以便分離觀察)。檢讀水量，并計算成供試品的含水量(％)。結果判定：本品水分不得過15.0％。

總灰分

儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、馬弗爐、電爐、坩堝

測定及結果判定：照灰分測定法(通則2302)測定。取供試品2～3g(如須測定酸不溶性灰分，可取供試品3～5g)，置熾灼至恒重的坩堝中，稱定重量(準確至0.01g)，緩緩熾熱，注意避免燃燒，至完全炭化時，逐漸升高溫度至500～600℃，使完全灰化并至恒重。根據殘渣重量，計算供試品中總灰分的含量(％)。結果判定：本品總灰分不得過7.0％。

酸不溶性灰分

儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、馬弗爐、電爐、坩堝

試劑及試液：稀鹽酸(試劑均使用分析純，實驗用水為純化水)

測定及結果判定：照灰分測定法(通則2302)測定。取上項所得的灰分，在坩堝中小心加入稀鹽酸約10ml，用表面皿覆蓋坩堝，置水浴上加熱10分鐘，表面皿用熱水5ml沖洗，洗液并入坩堝中，用無灰濾紙濾過，坩堝內的殘渣用水洗于濾紙上，并洗滌至洗液不顯氯化物反應為止。濾渣連同濾紙移置同一坩堝中，干燥，熾灼至恒重。根據殘渣重量，計算供試品中酸不溶性灰分的含量(％)。結果判定：本品酸不溶性灰分不得過2.0％。

重金屬及有害元素

儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、微波消解儀、原子吸收分光光度計

試劑及試液：硝酸、磷酸二氫銨、硝酸鎂、碘化鉀、抗壞血酸、鹽酸、硼氫化鈉、氫氧化鈉、硫酸、高錳酸鉀、鹽酸羥胺(其中硝酸、磷酸二氫銨、硝酸鎂為優(yōu)級純，其他試劑均使用分析純，實驗用水為純化水)

標準樣品：鉛單元素標準樣品、鎘單元素標準樣品、砷單元素標準樣品、汞單元素標準樣品、銅單元素標準樣品

方法：照鉛、鎘、砷、汞、銅測定法(通則2321)測定

鉛的測定(石墨爐法)

測定條件參考條件：波長283.3nm，干燥溫度100～120℃，持續(xù)20秒；灰化溫度400～750℃，持續(xù)20～25秒；原子化溫度1700～～2100℃，持續(xù)4～5秒。

鉛標準貯備液的制備精密量取鉛單元素標準溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含鉛(pb)1μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。

標準曲線的制備分別精密量取鉛標準貯備液適量，用2％硝酸溶液制成每1ml分別含鉛0ng、5ng、20ng、40ng、60ng、80ng的溶液。分別精密量取1ml，精密加含1％磷酸二氫銨和0.2％硝酸鎂的溶液0.5ml，混勻，精密吸取20μl注入石墨爐原子化器，測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。

供試品溶液的制備a法取供試品粗粉0.5g，精密稱定，置聚四氯乙烯消解罐內，加硝酸3～5ml，混勻，浸泡過夜，蓋好內蓋，旋緊外套，置適宜的微波消解爐內，進行消解(按儀器規(guī)定的消解程序操作)。消解完全后，取消解內罐置電熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸氣揮盡，并繼續(xù)緩緩濃縮至2～3ml，放冷，用水轉入25ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，即得。同法同時制備試劑空白溶液。

測定法精密量取空白溶液與供試品溶液各1ml，精密加含1％磷酸二氫銨和0.2％硝酸鎂的溶液0.5ml，混勻，精密吸取10～20μl，照標準曲線的制備項下方法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中鉛(pb)的含量，計算，即得。

鎘的測定(石墨爐法)

測定條件參考條件：波長228.8nm，干燥溫度100～120℃，持續(xù)20秒；灰化溫度300～500℃，持續(xù)20～25秒；原子化溫度1500～1900℃，持續(xù)4～5秒。

鎘標準貯備液的制備精密量取鎘單元素標準溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含鎘(cd)lμg的溶液，即得(0～5℃貯存)。

標準曲線的制備分別精密量取鎘標準貯備液適量，用2％硝酸溶液稀釋制成每1ml分別含鎘0ng、0.8ng、2.0ng、4.0ng、6.0ng、8.0ng的溶液。分別精密吸取10μl，注入石墨爐原子化器，測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。

供試品溶液的制備同鉛測定項下供試品溶液的制備。

測定法精密吸取空白溶液與供試品溶液各10～20μl，照標準曲線的制備項下方法測定吸光度(若供試品有干擾，可分別精密量取標準溶液、空白溶液和供試品溶液各1ml，精密加含1％磷酸二氫銨和0.2％硝酸鎂的溶液0.5ml，混勻，依法測定)，從標準曲線上讀出供試品溶液中鎘(cd)的含量，計算，即得。

砷的測定(氫化物法)

測定條件采用適宜的氫化物發(fā)生裝置，以含硼氫化鈉和0.3％氫氧化鈉溶液(臨用前配制)作為還原劑，鹽酸溶液(1→100)為載液，氮氣為載氣，檢測波長為193.7nm。

砷標準貯備液的制備精密量取砷單元素標準溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含砷(as)1μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。

標準曲線的制備分別精密量取砷標準貯備液適量，用2％硝酸溶液稀釋制成每1ml分別含砷0ng、5ng、10ng、20ng、30ng、40ng的溶液。分別精密量取10ml，置25ml量瓶中，加25％碘化鉀溶液(臨用前配制)1ml，搖勻，加10％抗壞血酸溶液(臨用前配制)1ml，搖勻，用鹽酸溶液(20→100)稀釋至刻度，搖勻，密塞，置80℃水浴中加熱3分鐘，取出，放冷。取適量，吸入氫化物發(fā)生裝置，測定吸收值，以峰面積(或吸光度)為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。

供試品溶液的制備同鉛測定項下供試品溶液的制備中的a法制備。

測定法精密吸取空白溶液與供試品溶液各10ml，照標準曲線的制備項下，自“加25％碘化鉀溶液(臨用前配制)1ml”起，依法測定。從標準曲線上讀出供試品溶液中砷(as)的含量，計算，即得。

汞的測定(冷蒸氣吸收法)

測定條件采用適宜的氫化物發(fā)生裝置，以含0.5％硼氫化鈉和0.1％氫氧化鈉的溶液(臨用前配制)作為還原劑，鹽酸溶液(1→100)為載液，氮氣為載氣，檢測波長為253.6nm。

汞標準貯備液的制備精密量取汞單元素標準溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含汞(hg)1μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。

標準曲線的制備分別精密量取汞標準貯備液0ml、0.1ml、0.3ml、0.5ml、0.7ml、0.9ml，置50ml量瓶中，加20％硫酸溶液10ml、5％高錳酸鉀溶液0.5ml，搖勻，滴加5％鹽酸羥胺溶液至紫紅色恰消失，用水稀釋至刻度，搖勻。取適量，吸入氫化物發(fā)生裝置，測定吸收值，以峰面積(或吸光度)為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。

供試品溶液的制備a法取供試品粗粉0.5g，精密稱定，置聚四氟乙烯消解罐內，加硝酸3～5ml，混勻，浸泡過夜，蓋好內蓋，旋緊外套，置適宜的微波消解爐內進行消解(按儀器規(guī)定的消解程序操作)。消解完全后，取消解內罐置電熱板上，于120℃緩緩加熱至紅棕色蒸氣揮盡，并繼續(xù)濃縮至2～3ml，放冷，加20％硫酸溶液2ml、5％高錳酸鉀溶液0.5ml，搖勻，滴加5％鹽酸羥胺溶液至紫紅色恰消失，轉入10ml量瓶中，用水洗滌容器，洗液合并于量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，必要時離心，取上清液，即得。同法同時制備試劑空白溶液。

測定法精密吸取空白溶液與供試品溶液適量，照標準曲線制備項下的方法測定從標準曲線上讀出供試品溶液中汞(hg)的含量，計算，即得。

銅的測定(火焰法)

測定條件檢測波長為324.7nm，采用空氣-乙炔火焰，必要時進行背景校正。

銅標準貯備液的制備精密量取銅單元素標準溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含銅(cu)10μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。

標準曲線的制備分別精密量取銅標準貯備液適量，用2％硝酸溶液制成每1ml分別含銅0μg、0.05μg、0.2μg、0.4μg、0.6μg、0.8μg的溶液。依次噴入火焰，測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。

供試品溶液的制備同鉛測定項下供試品溶液的制備。

測定法精密吸取空白溶液與供試品溶液適量，照標準曲線的制備項下的方法測定。從標準曲線上讀出供試品溶液中銅(cu)的含量，計算，即得。

結果判定：本品含鉛不得過8mg/kg；鎘不得過0.8mg/kg；砷不得過4mg/kg；汞不得過0.8mg/kg；銅不得過20mg/kg；

有機氯類農藥殘留量

儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、旋轉蒸發(fā)儀、超聲波清洗機、氣相色譜儀

試劑及試液：石油醚(60～90℃)、丙酮、氯化鈉、二氯甲烷、無水硫酸鈉(其中石油醚(60～90℃)為色譜純，其他試劑均使用分析純，實驗用水為純化水)

對照品：α-bhc，β-bhc，γ-bhc，δ-bhc、p，p′-dde，p，p′-ddd，o，p′-ddt，p，p′-ddt、pcnb農藥對照品

方法：照農藥殘留量測定法(通則0512第一法)測定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以(14％-氰丙基-苯基)甲基聚硅氧烷或(5％苯基)甲基聚硅氧烷為固定液的彈性石英毛細管柱(30m×0.32mm×0.25μm)，63ni-ecd電子捕獲檢測器。進樣口溫度230℃，檢測器溫度300℃，不分流進樣。程序升溫：初始100℃，每分鐘10℃升至220℃，每分鐘8℃升至250℃，保持10分鐘。理論板數(shù)按α-bhc峰計算應不低于1×10⁶，兩個相鄰色譜峰的分離度應大于1.5。

對照品貯備溶液的制備精密稱取六六六(bhc)(α-bhc，β-bhc，γ-bhc，δ-bhc)、滴滴涕(ddt)(p，p′-dde，p，p′-ddd，o，p′-ddt，p，p′-ddt)及五氯硝基苯(pcnb)農藥對照品適量，用石油醚(60～90℃)分別制成每1ml約含4～5μg的溶液，即得。

混合對照品貯備溶液的制備精密量取上述各對照品貯備液0.5ml，置10ml量瓶中，用石油醚(60～90℃)稀釋至刻度，搖勻，即得。

混合對照品溶液的制備精密量取上述混合對照品貯備液，用石油醚(60～90℃)制成每1l分別含0μg、1μg、5μg、10μg、50μg、100μg、250μg的溶液，即得。

供試品溶液的制備取供試品，粉碎成粉末(過三號篩)，取約2g，精密稱定，置100ml具塞錐形瓶中，加水20ml浸泡過夜，精密加丙酮40ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用丙酮補足減失的重量，再加氯化鈉約6g，精密加二氯甲烷30ml，稱定重量，超聲15分鐘，再稱定重量，用二氯甲烷補足減失的重量，靜置(使分層)，將有機相迅速移入裝有適量無水硫酸鈉的100ml具塞錐形瓶中，放置4小時。精密量取35ml，于40℃水浴上減壓濃縮至近干，加少量石油醚(60～90℃)如前反復操作至二氯甲烷及丙酮除凈，用石油醚(60～90℃)溶解并轉移至10ml具塞刻度離心管中，加石油醚(60～90℃)精密稀釋至5ml，小心加入硫酸1ml，振搖1分鐘，離心(3000轉/分鐘)10分鐘，精密量取上清液2ml，置具刻度的濃縮瓶中，連接旋轉蒸發(fā)器，40℃下(或用氮氣)將溶液濃縮至適量，精密稀釋至1ml，即得。

測定法分別精密吸取供試品溶液和與之相對應濃度的混合對照品溶液各1μl，注入氣相色譜儀，按外標法計算供試品中9種有機氯農藥殘留量。

結果判定：本品含總六六六(α-bhc、β-bhc、γ-bhc、δ-bhc之和)不得過0.2mg/kg；總滴滴涕(pp′-dde、pp′-ddd、op′-ddt、pp′-ddt之和)不得過0.2mg/kg；五氯硝基苯不得過0.1mg/kg。

黃曲霉毒素b1

儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、均質瓶、離心機、高效液相色譜儀(配置熒光檢測器及衍生化泵、衍生化保溫箱)

試劑及試液：甲醇、乙腈、碘、氯化鈉、免疫親合柱(其中乙腈為色譜純，其他試劑為分析純，實驗用水為純化水)

對照品：黃曲霉毒素b1對照品

方法：照黃曲霉毒素測定法(通則2351)測定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-水(40∶18∶42)為流動相；采用柱后衍生法檢測，碘衍生法：衍生溶液為0.05％的碘溶液(取碘0.5g，加入甲醇100ml使溶解，用水稀釋至1000ml制成)，衍生化泵流速每分鐘0.3ml，衍生化溫度70℃以熒光檢測器檢測，激發(fā)波長λex＝360nm(或365nm)，發(fā)射波長λex＝450nm。兩個相鄰色譜峰的分離度應大于1.5。

混合對照品溶液的制備精密量取黃曲霉毒素b1對照品溶液(標示濃度為1.0μg/ml)0.5ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，作為貯備溶液。精密量取貯備溶液1ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，即得。

供試品溶液的制備取供試品粉末約15g(過二號篩)，精密稱定，置于均質瓶中，加入氯化鈉3g，精密加入70％甲醇溶液75ml，高速攪拌2分鐘(攪拌速度大于11000轉/分鐘)，離心5分鐘(離心速度2500轉/分鐘)，精密量取上清液15ml，置50ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，量取續(xù)濾液20.0ml，通過免疫親合柱，流速每分鐘3ml，用水20ml洗脫，洗脫液棄去，使空氣進入柱子，將水擠出柱子，再用適量甲醇洗脫，收集洗脫液，置2ml量瓶中，并用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

測定法分別精密吸取上述混合對照品溶液5μl、10μl、15μl、20μ1、25μl，注入液相色譜儀，測定峰面積，以峰面積為縱坐標，進樣量為橫坐標，繪制標準曲線。另精密吸取上述供試品溶液20～25μl，注入液相色譜儀，測定峰面積，從標準曲線上讀出供試品中相當于黃曲霉毒素b1的量，計算，即得。

結果判定：本品每1000g含黃曲霉毒素b1不得過5μg。

二氧化硫殘留量

儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、電熱套

試劑及試液：過氧化氫、甲基紅乙醇溶液、0.01mol/l氫氧化鈉滴定液、鹽酸溶液(6mol/l)(試劑均使用分析純，實驗用水為純化水)

方法：照二氧化硫殘留量定定法(通則2331)測定。

取藥材或飲片細粉約10g，精密稱定，置兩頸圓底燒瓶中，加水300～400ml。打開回流冷凝管開關給水，將冷凝管的上端e口處連接一橡膠導氣管置于100ml錐形瓶底部。錐形瓶內加入3％過氧化氫溶液50ml作為吸收液(橡膠導氣管的末端應在吸收液液面以下)。使用前，在吸收液中加入3滴甲基紅乙醇溶液指示劑(2.5mg/ml)，并用0.01mol/l氫氧化鈉滴定液滴定至黃色(即終點；如果超過終點，則應舍棄該吸收溶液)。開通氮氣，使用流量計調節(jié)氣體流量至約0.2l/min；打開分液漏斗c的活塞，使鹽酸溶液(6mol/l)10ml流入蒸餾瓶，立即加熱兩頸燒瓶內的溶液至沸，并保持微沸；燒瓶內的水沸騰1.5小時后，停止加熱。吸收液放冷后，置于磁力攪拌器上不斷攪拌，用氫氧化鈉滴定液(0.01mol/l)滴定，至黃色持續(xù)時間20秒不褪，并將滴定的結果用空白實驗校正。

結果判定：本品二氧化硫殘留量不得過150mg/kg。

浸出物

儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、恒溫水浴鍋、電熱恒溫鼓風干燥箱

試劑及試液：70％乙醇(試劑使用分析純，實驗用水為純化水)

方法：照醇溶性浸出物測定法(通則2201)項下的熱浸法測定，用70％乙醇作溶劑。

取供試品約2～4g，精密稱定，置100～250ml的錐形瓶中，精密加70％乙醇50～100ml，密塞，稱定重量，靜置1小時后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1小時。放冷后，取下錐形瓶，密塞，再稱定重量，用70％乙醇補足減失的重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取濾液25ml，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小時，置干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量。除另有規(guī)定外，以干燥品計算供試品中醇溶性浸出物的含量(％)。

結果判定：本品醇溶性浸出物不得少于50.0％。

含量測定

揮發(fā)油

儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、電熱套

試劑及試液：二甲苯(試劑使用分析純，實驗用水為純化水)

方法：照揮發(fā)油測定法(通則2204乙法)測定。取水約300ml與玻璃珠數(shù)粒，置燒瓶中，連接揮發(fā)油測定器。自測定器上端加水使充滿刻度部分，并溢流入燒瓶時為止，再用移液管加入二甲苯1ml，然后連接回流冷凝管。將燒瓶內容物加熱至沸騰，并繼續(xù)蒸餾，其速度以保持冷凝管的中部呈冷卻狀態(tài)為度。30分鐘后，停止加熱，放置15分鐘以上，讀取二甲苯的容積。取供試品適量，稱定重量(準確至0.01g)，置燒瓶中，置電熱套中或用其他適宜方法緩緩加熱至沸，并保持微沸約5小時，至測定器中油量不再增加，停止加熱，放置片刻，開啟測定器下端的活塞，將水緩緩放出，至油層上端到達刻度0線上面5mm處為止。放置1小時以上，再開啟活塞使油層下降至其上端恰與刻度0線平齊，讀油量，自油層量中減去二甲苯量，即為揮發(fā)油量，再計算供試品中揮發(fā)油的含量(％)。

結果判定：本品含揮發(fā)油不得少于0.4(ml/g)。

阿魏酸

儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、恒溫水浴鍋

試劑及試液：70％甲醇、乙腈、磷酸(其中乙腈為色譜純，其他試劑均使用分析純，實驗用水為純化水)

對照品：阿魏酸對照品

方法：照高效液相色譜法(通則0512)測定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.085％磷酸溶液(17∶83)為流動相；檢測波長為316mn；柱溫35℃。理論板數(shù)按阿魏酸峰計算應不低于5000。

對照品溶液的制備對照品溶液的制備取阿魏酸對照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加70％甲醇制成每1ml含12μg的溶液，即得。

供試品溶液的制備供試品溶液的制備取本品粉末(過三號篩)約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70％甲醇20ml，密塞，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用70％甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液濾過，取續(xù)濾液，即得。

測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。

結果判定：本品按干燥品計算，含阿魏酸(c10h10o4)不得少于0.055％。

微生物限度