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      用于檢測(cè)腫瘤型M2丙酮酸激酶的化學(xué)發(fā)光免疫試劑盒的制作方法

      文檔序號(hào):11131824閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

      技術(shù)特征:

      1.一種腫瘤型M2丙酮酸激酶(TU M2-PK)的定量測(cè)定試劑盒,其包含的試劑有TU M2-PK磁分離試劑,酶標(biāo)記的TU M2-PK抗體溶液,標(biāo)準(zhǔn)品,洗滌液以及化學(xué)發(fā)光底物溶液。

      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的定量測(cè)定試劑盒,其特征在于,所述TU M2-PK磁分離試劑為含有1mg/ml的偶聯(lián)有抗TU M2-PK單克隆抗體的磁性微球,0.3mg/ml的十八烷基三甲基氯化銨,0.1mg/ml的吐溫20,0.1mg/ml的PEG200的70mmol/L的PBS緩沖液,pH值為8.0。

      3.根據(jù)權(quán)利要求1所述定量測(cè)定試劑盒,其特征在于,所述酶標(biāo)記的TU M2-PK抗體溶液是含有1mg/ml辣根過(guò)氧化酶標(biāo)記的抗TU M2-PK單克隆抗體和1mg/ml BSA的50mmol/L的PBS緩沖液,pH值為8.0。

      4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的定量測(cè)定試劑盒,其特征在于,所述的標(biāo)準(zhǔn)品為不同濃度的TU M2-PK標(biāo)準(zhǔn)品溶液,其分別含有0、0.5、1、2、4、8、16、32和64U/ml的TU M2-PK標(biāo)準(zhǔn)品的50mmol/l PBS緩沖液,pH7.4。

      5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的定量測(cè)定試劑盒,其特征在于,洗滌液由在濃度為20mol/L、pH為7.4的磷酸鹽緩沖液中加入1%的Tween-20配制而成。

      6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的定量測(cè)定試劑盒,其特征在于,所述化學(xué)發(fā)光底物溶液分為發(fā)光底物A溶液和發(fā)光底物B溶液;發(fā)光底物A為0.1M、pH值為8.5的Tris-HCl緩沖液,且該緩沖液中含有終濃度為5.0mg/mL的魯米諾,所述發(fā)光底物B為是pH值為4.5的0.1M檸檬酸緩沖液,且該緩沖液中含有終濃度為100mg/mL的過(guò)氧化氫和15mg/mL辣根過(guò)氧化氫酶。

      7.一種權(quán)利要求1所述的定量測(cè)定試劑盒的制備方法,具體步驟如下:

      1)TU M2-PK磁分離試劑的制備:采用化學(xué)交聯(lián)法將TU M2-PK單克隆抗體和磁性微球偶聯(lián),磁性微球直徑在1.0μm左右,制備后用PBS緩沖液沖洗三次,然后用70mmol/L的PBS緩沖液重新懸浮,加入終濃度0.3mg/ml的十八烷基三甲基氯化銨、0.1mg/ml的吐溫20和0.1mg/ml的PEG200,調(diào)pH值至8.0即得;

      2)酶標(biāo)記的TU M2-PK抗體溶液的制備:采用NaIO4法標(biāo)記TU M2-PK單克隆抗體,反應(yīng)后透析純化,然后用20mmol/L的PBS緩沖液溶解,加入終濃度0.5mg/ml酪蛋白,調(diào)pH值至8.0即得;

      3)常規(guī)方法配置標(biāo)準(zhǔn)品、洗滌液和化學(xué)底物溶液。

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