高效植物生長調(diào)節(jié)劑的微流電色譜分離方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種高效植物生長調(diào)節(jié)劑的微流電色譜分離 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 植物生長調(diào)節(jié)劑，是用于調(diào)節(jié)植物生長發(fā)育的人工合成化學(xué)物質(zhì)，主要分為植物 生長促進(jìn)劑、植物生長延緩劑、植物生長抑制劑，其中1- (2-氯-4-吡啶基）-3-苯基脲屬于 苯脲類細(xì)胞分裂素，1-對(duì)氯苯基-2-(1，2, 4-三唑-1-基）-4, 4-二甲-3-戊醇屬于內(nèi)源赤 霉素合成的抑制劑，2, 4-二氯苯氧乙酸屬于生長素類似物，在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)用廣泛。
[0003] 關(guān)于植物生長調(diào)節(jié)劑的檢測，國內(nèi)外已建立了多種方法，主要為高效液相色譜法、 氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法等。對(duì)于1_(2_氯-4-吡啶基）-3-苯基脲、 1-對(duì)氯苯基-2- (1，2, 4-三唑-1-基）-4, 4-二甲-3-戊醇和2,4-二氯苯氧乙酸，目前主要 為反相液相色譜法和液相-質(zhì)譜聯(lián)用法。對(duì)于所述的極性植物生長調(diào)節(jié)劑，特別是強(qiáng)極性 的可離子化植物生長調(diào)節(jié)劑(如，2,4-二氯苯氧乙酸)而言，常規(guī)反相色譜保留作用較弱，單 一色譜分配作用難以實(shí)現(xiàn)高分辨分離。結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)，采用分子碎片質(zhì)譜信息二次分辨，有 助于提高分離檢測的準(zhǔn)確性，但是儀器技術(shù)復(fù)雜、成本高。
[0004] 微流電色譜，包括分離功能柱，作為一種新興的色譜微分離技術(shù)。整體柱作為新興 的分離功能材料，固定相結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，固定相擁有大量納米中孔和微米通孔構(gòu)型，溶質(zhì)洗脫傳 輸速率快，區(qū)帶擴(kuò)散效應(yīng)?。徽w柱表面鍵合功能基團(tuán)豐富、反相/親水作用、離子交換作 用強(qiáng)、生物兼容性良好，對(duì)極性植物生長調(diào)節(jié)劑在柱分離具有明顯優(yōu)勢；同時(shí)，微流電色譜 綜合了高壓電場驅(qū)動(dòng)和微流液相分配的雙重作用，溶質(zhì)洗脫遷移不僅存在固定相和流動(dòng)相 間的分配作用，而且受到電滲流的驅(qū)動(dòng)作用，分離過程快速高效。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明目的在于提供一種高效植物生長調(diào)節(jié)劑的微流電色譜分離方法，基于親水 作用整體柱為分離柱，在柱施加高壓電場和微流液相分析模式，應(yīng)用電滲流和流體壓力驅(qū) 動(dòng)、電泳分離、親水_離子交換的多重作用，實(shí)現(xiàn)高效植物生長調(diào)節(jié)劑的快速分離。
[0006] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案： 一種高效植物生長調(diào)節(jié)劑的微流電色譜分離方法，以親水作用整體柱為分離柱，在分 離柱上同時(shí)施加高壓電場和微流液相分析模式，應(yīng)用電滲流和流體壓力驅(qū)動(dòng)、電泳分離、親 水-離子交換的多重作用模式，實(shí)現(xiàn)高效植物生長調(diào)節(jié)劑的快速分離。
[0007] 所述商風(fēng)險(xiǎn)植物生長調(diào)節(jié)劑為1- (2_氯_4_批陡基）_3_苯基脈、1-對(duì)氯苯 基-2-(1，2,4_三唑-1-基）-4, 4-二甲-3-戊醇和2, 4-二氯苯氧乙酸。
[0008] 所述分離柱是以甲基丙烯酰氧乙基三甲基銨甲基硫酸鹽為單體、季戊四醇三丙烯 酸酯為交聯(lián)劑的有機(jī)聚合整體柱。
[0009] 應(yīng)用以甲基丙烯酰氧乙基三甲基銨甲基硫酸鹽為單體、季戊四醇三丙烯酸酯為交 聯(lián)劑的聚合整體柱進(jìn)行分析的條件包括：以體積比80:20的乙腈與甲酸銨-氨水緩沖溶液 的混合液為流動(dòng)相，分離電壓-15kV，液相泵壓力750psi，流速為0. 05mL/min; 所述甲酸銨-氨水緩沖溶液的pH值為3. 00,其中甲酸銨的濃度為2. 50mmol/L。
[0010] 所述以乙以甲基丙烯酰氧乙基三甲基銨甲基硫酸鹽為單體、季戊四醇三丙烯酸酯 為交聯(lián)劑的聚合整體柱中各組分質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為：甲基丙烯酰氧乙基三甲基銨甲基硫酸鹽占 12%-18%，季戊四醇三丙烯酸酯占2%-8%，引發(fā)劑占1%，致孔劑占79% ; 所述引發(fā)劑為偶氮二異丁腈； 所述致孔劑為環(huán)己醇和乙二醇的混合物，其中環(huán)己醇占致孔劑重量的45%-65%。
[0011] 本發(fā)明的顯著優(yōu)點(diǎn)在于： 本發(fā)明依靠微流電色譜系統(tǒng)，基于電滲流、電泳和液相色譜洗脫三者綜合作用，應(yīng)用極 性離子單體（甲基丙烯酰氧乙基三甲基銨甲基硫酸鹽）和極性交聯(lián)劑(季戊四醇三丙烯酸 酯）聚合的整體柱，通過優(yōu)化致孔劑(環(huán)己醇和乙二醇）比例，將會(huì)改善極性交聯(lián)劑和離子單 體在聚合混合物中的溶解度，整體柱表面可修飾上豐富的季銨離子、羧基，能夠提供強(qiáng)的反 向電滲流、親水作用、離子交換作用，可以實(shí)現(xiàn)不同電荷性質(zhì)的植物生長調(diào)節(jié)劑的電滲流和 流體壓力混合驅(qū)動(dòng)、電泳分離及親水-離子交換作用的多重作用，不僅可以加快分離速度， 同時(shí)可以基于強(qiáng)極性功能固定相，提高對(duì)極性較強(qiáng)的植物生長調(diào)節(jié)劑的保留作用，提高柱 效和響應(yīng)信號(hào)強(qiáng)度，克服常規(guī)反相色譜柱出峰慢、對(duì)于強(qiáng)極性物質(zhì)分離度不足的缺陷，滿足 不同電荷強(qiáng)度的植物生長調(diào)節(jié)劑的高效分離要求。
【附圖說明】
[0012] 圖1是植物生長調(diào)節(jié)劑的反相填充柱分離譜圖。
[0013] 圖2是植物生長調(diào)節(jié)劑的聚合整體柱分離譜圖。
[0014] 以上圖中1. 1-(2_氣_4_批陡基）_3_苯基脈；2. 1_對(duì)氣苯基_2_ (1，2, 4_二 唑-1-基）-4, 4-二甲-3-戊醇；3. 2, 4-二氯苯氧乙酸。
【具體實(shí)施方式】
[0015] 為了使本發(fā)明所述的內(nèi)容更加便于理解，下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明所述的 技術(shù)方案做進(jìn)一步的說明，但是本發(fā)明不僅限于此。
[0016] 實(shí)施例1: 基于微流電色譜，應(yīng)用十八烷基鍵合硅膠毛細(xì)管填充柱，對(duì)高效植物生長調(diào)節(jié)劑進(jìn)行 離析，其方法具體為：在毛細(xì)管柱末端施加負(fù)電荷高壓電場和進(jìn)樣端上施加液相泵輔助壓 力，進(jìn)樣體積20iiL，以乙腈：甲酸銨-氨水緩沖溶液（2.50mmol/L，pH3.00)=80:20 (v/ v)為流動(dòng)相，分離電壓-15kV，液相泵輔助壓力750psi，流速0.05mL/min, 植物生長調(diào)節(jié)劑的微流電色譜分離如圖1，整個(gè)流程約7min，洗脫峰依次為：峰1為 1- (2-氯-4-吡啶基）-3-苯基脲；峰2為1-對(duì)氯苯基-2- (1，2, 4-三唑-1-基）-4, 4-二 甲-3-戊醇；峰3為2, 4-二氯苯氧乙酸。
[0017] 實(shí)施例2: 以甲基丙烯酰氧乙基三甲基銨甲基硫酸鹽為單體、季戊四醇三丙烯酸酯為交聯(lián)劑，按 照以下配方組成，配制聚合反應(yīng)液。整體柱A-E的具體配方如下：
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 高效植物生長調(diào)節(jié)劑的微流電色譜分離方法，其特征在于：以親水作用整體柱為分 離柱，在分離柱上同時(shí)施加高壓電場和微流液相分析模式，應(yīng)用電滲流和流體壓力驅(qū)動(dòng)、電 泳分離、親水-離子交換的多重作用模式，實(shí)現(xiàn)高效植物生長調(diào)節(jié)劑的快速分離。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述分離柱是以甲基丙烯酰氧乙基三甲 基銨甲基硫酸鹽為單體、季戊四醇三丙烯酸酯為交聯(lián)劑的有機(jī)聚合整體柱。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述高風(fēng)險(xiǎn)植物生長調(diào)節(jié)劑為 1- (2-氯-4-吡啶基）-3-苯基脲、1-對(duì)氯苯基-2- (1，2, 4-三唑-1-基）-4, 4-二甲-3-戊 醇和2, 4-二氯苯氧乙酸。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：進(jìn)行分離的條件包括：以甲基丙烯酰氧 乙基三甲基銨甲基硫酸鹽為單體、季戊四醇三丙烯酸酯為交聯(lián)劑的聚合整體柱為分離柱， 以體積比80:20的乙腈與甲酸銨-氨水緩沖溶液的混合液為流動(dòng)相，分離電壓為-15 kV，液 相泵壓力為750 psi，泵流速為0? 05 mL/min ; 所述甲酸銨-氨水緩沖溶液的pH值為3. 00,其中甲酸銨的濃度為2. 50 mmol/L。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：按質(zhì)量百分?jǐn)?shù)之和為100%計(jì)，聚合整體 柱中各組分質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為：甲基丙烯酰氧乙基三甲基銨甲基硫酸鹽占12%_18%，季戊四醇 三丙烯酸酯占2%-8%，引發(fā)劑占1%，致孔劑占79% ; 所述引發(fā)劑為偶氮二異丁腈； 所述致孔劑為環(huán)己醇和乙二醇的混合物，其中環(huán)己醇占致孔劑重量的45%-65%。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種高效植物生長調(diào)節(jié)劑的微流電色譜分離方法，應(yīng)用以甲基丙烯酰氧乙基三甲基銨甲基硫酸鹽為單體、季戊四醇三丙烯酸酯為交聯(lián)劑的聚合整體柱作為分離柱，在柱施加高壓電場和微流液相分析模式，應(yīng)用電滲流和流體壓力綜合驅(qū)動(dòng)、電泳分離、親水-離子交換等多重作用模式，實(shí)現(xiàn)高效植物生長調(diào)節(jié)劑的連續(xù)分離。
【IPC分類】G01N30-06
【公開號(hào)】CN104614469
【申請?zhí)枴緾N201510058412
【發(fā)明人】林旭聰, 王緒培, 謝增鴻
【申請人】福州大學(xué)
【公開日】2015年5月13日
【申請日】2015年2月5日