用于復雜基質(zhì)中多農(nóng)藥殘留分析的層析柱及其應用方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及層析柱，尤其涉及一種用于復雜基質(zhì)（如蔥、姜、蒜等）中多農(nóng)藥殘留 分析的層析柱及其應用方法，屬于農(nóng)藥殘留監(jiān)測領域。
【背景技術】
[0002] 復雜基質(zhì)中的多農(nóng)藥殘留分析是農(nóng)藥殘留檢測的技術難點，尤其是蔥、姜、蒜等復 雜基質(zhì)。蔥姜蒜等基質(zhì)中存在大量含硫化合物，嚴重干擾了基質(zhì)中農(nóng)藥的測定。研宄認為 是其中存在的蒜氨酸酶將蒜氨酸降解為極不穩(wěn)定的蒜素，蒜素再次快速降解為硫化物，磺 酸醋，醚等（H.Zhangetal.，F(xiàn)oodChemistry, 108 (2008) 322 - 328)。而蒜氨酸酶是存在于 細胞液泡中的，在細胞不被破壞之前，蒜氨酸酶與蒜氨酸是不會發(fā)生接觸的，也就不會有硫 化物的產(chǎn)生，因此，有學者通過抑制蒜氨酸酶的活性來抑制硫化物的生成，并達到排除硫化 物干擾的目的。具體的做法，如采用緩沖鹽提取，微波加熱等方法，但是經(jīng)過試驗發(fā)現(xiàn)，這些 方法對有機磷、菊酯、有機氯等農(nóng)藥的凈化效果依然有限，很多農(nóng)藥仍被雜質(zhì)所包覆；另外， 微波處理樣品所帶來的農(nóng)藥損失也無法正確計量。
[0003] 因此，亟待開發(fā)一種新型層析柱及凈化方法，以有效降低基質(zhì)對目標化合物的干 擾，改善凈化效果，提高分析準確度。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種用于復雜基質(zhì)中多農(nóng)藥殘留分析的層析 柱及其應用方法，可以有效去除基質(zhì)中的干擾物質(zhì)，凈化效果好，提高分析準確度。
[0005] 為解決上述技術問題，本發(fā)明所采取的技術方案是：
[0006] 本發(fā)明首先公開了一種用于復雜基質(zhì)中多農(nóng)藥殘留分析的層析柱，包括層析柱管 和填料，所述填料包括以下各組分：無水硫酸鈉，石墨化碳和硅酸鎂。本發(fā)明所述復雜基質(zhì) 為蔥、姜或蒜。
[0007] 其中，所述層析柱管的內(nèi)徑0. 6-1. 5cm，長度10-20cm;優(yōu)選的，所述層析柱管的內(nèi) 徑 1. 0cm，長度 13cm。
[0008] 為了便于填料的裝填，可以將層析柱管的上端設計為漏斗狀杯體，杯體內(nèi)徑 3_4cm，長度4_8cm;優(yōu)選的，杯體內(nèi)徑3. 8cm，長度6cm。
[0009] 本發(fā)明所述層析柱管優(yōu)選為玻璃層析柱管。
[0010] 本發(fā)明在裝填填料前，先在層析柱管中裝入適量脫脂棉。脫脂棉起到防止最底層 填料泄露的作用，類似于篩板的作用，但脫脂棉更易得和價廉。
[0011] 各組分在層析柱管中的順序為：無水硫酸鈉、石墨化碳、硅酸鎂和無水硫酸鈉；各 組分自成一層，彼此獨立，不相混合。
[0012] 即本發(fā)明中各組分在層析柱管中的裝填順序可以為：按照從層析柱管的下端到上 端的順序，依次為無水硫酸鈉、石墨化碳、硅酸鎂和無水硫酸鈉；
[0013] 或者，各組分在層析柱管中的裝填順序也可以為：按照從層析柱管的下端到上端 的順序，依次為無水硫酸鈉、硅酸鎂、石墨化碳和無水硫酸鈉；
[0014] 優(yōu)選的，按照從層析柱管的下端到上端的順序，依次為無水硫酸鈉、石墨化碳、硅 酸鎂和無水硫酸鈉；其中，各組分自成一層，彼此獨立，不相混合。
[0015] 各組分的用量為：無水硫酸鈉2-5g/層，石墨化碳40-400mg/柱，娃酸鎂2-6g/柱； 優(yōu)選的，各組分的用量為：無水硫酸鈉3g/層，石墨化碳100mg/柱，娃酸鎂3g/柱。
[0016] 本發(fā)明所述填料的粒徑范圍：硅酸鎂為150-250ym，石墨化碳為37-125ym。
[0017] 本發(fā)明對填料無水硫酸鈉的粒徑?jīng)]有特殊限制。
[0018] 本發(fā)明對石墨化碳的用量進行了優(yōu)化實驗，石墨化碳用量分別為0. 04g、0. 06g、 0. 08g、0.lg、0. 2g、0. 3g和0. 4g，測定樣品回收率。結果表明，石墨化碳用量0.lg最好，樣 品回收率高；石墨化碳用量為0. 04-0. 08g時，凈化效果一般，仍有化合物不能準確定量；當 石墨化碳用量為0. 2-0. 4g，部分樣品回收率偏低，尤其是當石墨化碳用量為0. 4g時，百菌 清和蟲螨腈完全無法回收和定量。
[0019] 本發(fā)明進一步公開了一種應用所述層析柱進行復雜基質(zhì)中多農(nóng)藥殘留分析的方 法，包括以下步驟：
[0020] (1)用淋洗液預淋洗所述層析柱；
[0021] (2)在待凈化樣品中加入洗脫溶劑溶解，制備上樣液；
[0022] (3)將上樣液加到步驟⑴處理的層析柱中；
[0023] (4)用洗脫溶劑洗脫，收集洗脫液，即得。
[0024] 其中，步驟（1)所述淋洗液是正己烷；優(yōu)選的，所述正己烷的用量為5-10mL，更優(yōu) 選為6mL;步驟（2)所述溶解優(yōu)選為超聲溶解。
[0025] 按照體積比計，步驟（2)或⑷所述洗脫溶劑為由正己烷：丙酮按照8 :2的比例組 成的混合物，由正己烷：丙酮按照9 :1的比例組成的混合物，或由正已烷：乙酸乙酯：丙酮 按照90 :5 :5的比例組成的混合物；優(yōu)選的，步驟⑵和⑷所述洗脫溶劑相同；步驟（2) 和（4)所述洗脫溶劑的總用量為10_50mL。
[0026] 步驟（3)優(yōu)選為采用分次上樣的方法將上樣液完全轉(zhuǎn)移至層析柱上。
[0027] 步驟（4)還包括將洗脫液干燥，加入內(nèi)標化合物，定容，即可上機分析；優(yōu)選的，所 述干燥是將洗脫液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干后，氮氣吹干；所述定容是用正己烷定容至lmL。根據(jù)實 驗具體情況加入適量內(nèi)標化合物，例如加入50yL內(nèi)標化合物（最終濃度為0. 15mg/L)，用 正己燒定容至lmL。
[0028] 步驟（2)所述待凈化樣品是從復雜基質(zhì)中提取的含有多種農(nóng)藥殘留成分的樣品； 所述復雜基質(zhì)為蔥、姜或蒜。
[0029] 所述多農(nóng)藥殘留成分包括：五氯硝基苯、a-666、0 -666、y-666、S-666、百菌清、 乙烯菌核利、三唑酮、氟蟲腈、三氯殺螨醇、二甲戊樂靈、腐霉利、蟲螨腈、聯(lián)苯菊酯、甲氰菊 酯、異菌脲、氯氟氰菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氟氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰 菊酯。
[0030] 凈化過程中，所有的雜質(zhì)和目標化合物都在硅酸鎂層保留，部分色素等雜質(zhì)在石 墨化碳層保留；然后通過一定極性的洗脫溶劑洗脫使目標化合物被淋洗，而雜質(zhì)仍保留在 硅酸鎂或石墨化碳層。收集洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干后，氮氣吹干，加入適量內(nèi)標化合物后， 用正己烷定容至lmL，即可進行定性、定量分析，例如氣相色譜-質(zhì)譜法。
[0031] 本發(fā)明層析柱與商品化的Carb-氨基復合柱的對比實驗結果表明，本發(fā)明層析柱 的凈化效果更好，所得待進樣溶液澄清透明，化合物的色譜峰清晰可辨，樣品回收率高；操 作方法更簡便、快速，操作效率高；而使用商品化的Carb-氨基復合柱，操作方法參照國標 GB/T19648-2006的方法，所得待進樣溶液白色渾濁；部分樣品回收率低，百菌清和異菌脲 無回收，蟲螨腈、氯氰菊酯、溴氰菊酯的峰形差，影響準確定量；同時，操作方法耗時也更長。
[0032] 本發(fā)明用于多農(nóng)藥殘留分析的層析柱及凈化方法尤其適用于復雜基質(zhì)，如蔥、姜、 蒜等中的多農(nóng)藥殘留凈化。
[0033] 與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明技術方案具有以下有益效果：
[0034] (1)層析柱的裝填方法簡單，操作快速、簡便；填料易得、價廉，成本更低廉。
[0035] (2)層析柱的凈化效果好，化合物的色譜峰清晰可辨，提高定性、定量分析準確性。
[0036] (3)農(nóng)藥殘留凈化方法的操作較國標方法（GB/T19648-2006)更簡便、快速，提高 操作效率。
【附圖說明】
[0037] 圖1為實施例4中蔥樣品經(jīng)凈化后的氣相色譜-質(zhì)譜圖。
【具體實施方式】
[0038] 下面結合具體實施例來進一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點和特點將會隨著描述而 更為清楚。但是應理解所述實施例僅是范例性的，不對本發(fā)明的范圍構成任何限制。本領 域技術人員應該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對本發(fā)明技術方案的細節(jié) 和形式進行修改或替換，但這些修改或替換均落入本發(fā)明的保護范圍。
[0039] 實施例1層析柱
[0040] 玻璃層析柱管的內(nèi)徑0. 6cm，管長度為20cm;層析柱管的上端杯體內(nèi)徑3. 8cm，長 度6cm。硅酸鎂粒徑范圍為150-250ym，石墨化碳粒徑范圍為37-125ym。
[0041] 在干燥清潔的玻璃層析柱管中依次裝入適量脫脂棉，無水硫酸鈉2g，石墨化碳 40mg，娃酸鎂2g，無水硫酸鈉2g。
[0042] 各組分自成一層，彼此獨立，不相混合。
[0043] 實施例2層析柱
[0044] 玻璃層析柱管的內(nèi)徑1. 5cm，管長度為10cm;娃酸鎂粒徑范圍為150-250ym，石墨 化碳粒徑范圍為37-125ym。
[0045] 在干燥清潔的玻璃層析柱管中依次裝入適量脫脂棉，無水硫酸鈉5g，石墨化碳 400mg，娃酸鎂6g，無水硫酸鈉5g。
[0046] 各組分自成一層，彼此獨立，不相混合。