一種血型血清學(xué)檢測方法及實(shí)現(xiàn)該方法的自動(dòng)化檢測系統(tǒng)的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于涉及一種血型血清學(xué)檢測方法及其檢測系統(tǒng)。
【背景技術(shù)】
[0002]血型血清學(xué)的檢測方法大致分為兩類，一類為手工方法，一類為自動(dòng)化儀器方法。檢測的原理多數(shù)都是依據(jù)抗原抗體發(fā)生凝集反應(yīng)，人工觀察或儀器檢測凝集狀態(tài)從而判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果。人工采用的方法包括試管法和玻片法，觀察的準(zhǔn)確度依賴經(jīng)驗(yàn)積累和處理過程的準(zhǔn)確程度，對于弱凝集反應(yīng)，還需要使用其它工具(如顯微鏡)才能判斷。儀器的檢測方法大致有兩種，一種是使用微柱凝膠卡作為載體，在凝膠微柱介質(zhì)中，紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合，經(jīng)低速離心凝集的紅細(xì)胞懸浮于凝膠上部，未和抗體結(jié)合的紅細(xì)胞則沉于凝膠底部，再通過圖像識別給出反應(yīng)結(jié)果。另外一種是平板圖像識別法，平板類型還有U形或V形，不凝集的細(xì)胞會(huì)滾落在中心形成細(xì)胞扣，凝集的細(xì)胞則會(huì)鋪滿圓孔的底步，再通過對平板上的圖像進(jìn)行識別，從而判斷凝集狀態(tài)。
[0003]手工方法的缺點(diǎn)在于大批量實(shí)驗(yàn)時(shí)操作繁瑣，效率較低，實(shí)驗(yàn)結(jié)果需人工登記而不能實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，且不能保證不存在由于疏忽引起的人為差錯(cuò)；在手工復(fù)懸細(xì)胞時(shí)，如果力度掌握不好，容易破壞弱凝集狀態(tài)，從而不能得出正確結(jié)果。凝膠卡的優(yōu)點(diǎn)在于靈敏度高，但是價(jià)格較高，如果樣本出現(xiàn)細(xì)菌感染，容易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。平板圖像法處理的速度很快，但是不適合處理需要進(jìn)行細(xì)胞洗滌的實(shí)驗(yàn)，往往需要專用細(xì)胞洗滌儀器配合。
[0004]而且，手工進(jìn)行血液免疫學(xué)試驗(yàn)時(shí)，需要將樣本和試劑加入標(biāo)準(zhǔn)系列的玻璃試管進(jìn)行復(fù)懸振蕩，然后觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。使用自動(dòng)化儀器進(jìn)行檢測的時(shí)候，由于反應(yīng)管橫截面面積較小，液體流動(dòng)性差。為了將反應(yīng)物混勻和復(fù)懸，需要較大振蕩的力度。
[0005]單純的依靠振蕩力度解決懸浮液復(fù)懸的方法，存在以下缺點(diǎn):
1、如果振蕩力度偏小，則抗原抗體陰性反應(yīng)狀態(tài)下，附著在離心管底部的物質(zhì)不易懸浮;
2、如果振蕩力度偏大，則抗原抗體的陽性反應(yīng)狀態(tài)容易被破壞，尤其是弱凝集反應(yīng)；
3、震動(dòng)較大，對零部件的裝配可靠性和一致性要求高。
[0006]故，人們需要找到一種更合適的方法來解決這些問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種可以快速判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果，準(zhǔn)確率高，對弱凝集的檢出率高，有很好的靈敏度的血型血清學(xué)檢測方法及其檢測系統(tǒng)。
[0008]為了改善液體在微量離心管內(nèi)的振蕩復(fù)懸效果，本發(fā)明人想到在離心管內(nèi)加入較離心管的管底部小的鋼珠或其它材質(zhì)形狀物體的方法，具體為由于離心管在振蕩過程中，鋼珠或其它材質(zhì)形狀物體等助微量液體懸浮的振蕩體在離心管底部運(yùn)動(dòng)，會(huì)破壞液體的表面張力，帶動(dòng)液體流動(dòng)，從而將離心管內(nèi)部的未發(fā)生凝集反應(yīng)的細(xì)胞懸浮起來，同時(shí)不破壞發(fā)生凝集反應(yīng)的細(xì)胞狀態(tài)，使得結(jié)果更為可靠、精確，由此，將其與本發(fā)明的其他技術(shù)方案融合在一起，形成本發(fā)明的技術(shù)方案。
[0009]本發(fā)明所采取的技術(shù)方案為:
一種血型血清學(xué)自動(dòng)化檢測方法，其特征在于，包含如下步驟:
步驟1)、在離心管內(nèi)加入實(shí)驗(yàn)所需的樣本及試劑，混合之后放入離心機(jī)進(jìn)行離心；
步驟2)、離心之后將離心管采用光通量檢測裝置，進(jìn)行第一次光通量檢測，檢測是否有溶血現(xiàn)象并記下數(shù)值；
步驟3)、向離心管中加入較離心管的管底部小的助微量液體懸浮的振蕩體，根據(jù)相應(yīng)的試驗(yàn)類型選擇合適的振蕩頻率、幅度對離心管進(jìn)行振蕩復(fù)懸，復(fù)懸后進(jìn)行光通量第二次檢測并記下數(shù)值；由于離心管在振蕩過程中，鋼珠或其它材質(zhì)形狀物體等助微量液體懸浮的振蕩體在離心管底部運(yùn)動(dòng)，會(huì)破壞液體的表面張力，帶動(dòng)液體流動(dòng)，從而將離心管內(nèi)部的未發(fā)生凝集反應(yīng)的細(xì)胞懸浮起來，同時(shí)不破壞發(fā)生凝集反應(yīng)的細(xì)胞狀態(tài)，大幅降低了原有振蕩機(jī)構(gòu)的震動(dòng)力度，方便有效、可控地改善了微量液體的懸浮效果，滿足血液免疫反應(yīng)的操作要求，使得結(jié)果更為可靠、精確；
步驟4)、根據(jù)樣品種類的不同，選擇在相應(yīng)時(shí)間之后，再進(jìn)行第三次檢測并記下數(shù)值；步驟5)、基于不凝集的細(xì)胞懸浮在溶液中，對穿過其中的特定波長的光線(如藍(lán)光和綠光)有較強(qiáng)的吸收，即光通量較小，位于溶液另一側(cè)的光電接收器(光電二極管、光電池等)由此產(chǎn)生的光電流會(huì)較弱；如果發(fā)生了凝集反應(yīng)，那么大部分細(xì)胞落在離心管底部，溶液呈現(xiàn)透明狀，光通量較大，對應(yīng)檢測出的光電流較大，對于較弱的凝集反應(yīng)(如1+、2+)，由于若干個(gè)細(xì)胞聚集在一起，會(huì)比不凝集(陰性反應(yīng))的細(xì)胞沉降的快，對其在一定時(shí)間內(nèi)檢測的光通量變化量與陰性反應(yīng)的變化量明顯不同的原理，建立分級反應(yīng)(陰性，1+、2+、3+、4+)的光通量數(shù)學(xué)模型；更細(xì)分級的話，還可分為(陰性，可疑，1+、2+、3+、4+)的光通量數(shù)學(xué)模型。
[0010]步驟6)、依據(jù)上述步驟2) ~步驟4)記錄的三個(gè)數(shù)值即三次光電流數(shù)值及三次的變化情況，基于步驟5)的光通量數(shù)學(xué)模型判定出實(shí)驗(yàn)分級結(jié)果。
[0011]作為優(yōu)選，所述方法中所用的離心管包括離心管本體，所述離心管本體的一端比另一端長，所述離心管本體包括六個(gè)連排的倒四棱錐形的孔，所述孔的孔底為一個(gè)球曲面，相鄰兩個(gè)孔底之間管壁向內(nèi)設(shè)置有槽，所述槽共有五個(gè)。這種離心管，其包含連排的倒四棱錐形的孔，因此在做離心運(yùn)動(dòng)時(shí)，不會(huì)發(fā)生旋轉(zhuǎn)，避免了事故的發(fā)生，由于離心管本體的一端比另一端長，左右不對稱，因此試驗(yàn)人員不會(huì)將離心管的位置放錯(cuò)。
[0012]作為優(yōu)選，所述步驟2)中添加的助微量液體懸浮的振蕩體為鋼珠或其它材質(zhì)形狀物體，鋼珠或其它材質(zhì)形狀物體的直徑在1.5-2.5mm，也可根據(jù)離心管內(nèi)腔面積選定，更優(yōu)的是，選用助微量液體懸浮的振蕩體為鋼珠，鋼珠直徑為2mm。
[0013]作為優(yōu)選，所述步驟2) ~步驟4)中所用的光通量檢測裝置包含在離心管的兩側(cè)分別設(shè)置發(fā)光管和光電接收器。
[0014]作為優(yōu)選，所述步驟4)中的時(shí)間設(shè)定為1.5min~2.5min，更優(yōu)地，設(shè)定為2min。
[0015]本發(fā)明的另一目的是提供實(shí)現(xiàn)該方法的自動(dòng)化檢測系統(tǒng)。所采取的技術(shù)方案為: 一種血型血清學(xué)自動(dòng)化檢測系統(tǒng)，其特征在于，所述系統(tǒng)包含底座，所述底座上設(shè)置有大橫梁、樣本轉(zhuǎn)盤、試劑轉(zhuǎn)盤、蠕動(dòng)泵、離心管架、孵育架、離心機(jī)、攝像頭、振蕩混勻裝置和加珠裝置，所述大橫梁上設(shè)置有支座和機(jī)械手，且支座和機(jī)械手可在橫梁上做左右方向直線運(yùn)動(dòng)，所述支座上設(shè)置有吸樣針，吸樣針可沿著支座做上下方向直線運(yùn)動(dòng)，所述樣本轉(zhuǎn)盤和試劑轉(zhuǎn)盤位于吸樣針的下方，試劑轉(zhuǎn)盤和樣本轉(zhuǎn)盤可分別單獨(dú)旋轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)盤中間是清洗池，所述離心管架和孵育架可做前后方向直線運(yùn)動(dòng)，所述離心管架和孵育架上設(shè)有用于放置離心管的槽孔，所述振蕩混勻裝置位于大橫梁之下，加珠裝置的前方，所述振蕩混勻裝置上設(shè)有振蕩盒，所述振蕩盒內(nèi)用于放置離心管，所述振蕩盒上還設(shè)有光通量檢測裝置，所述光通量檢測裝置包含設(shè)置在離心管的兩側(cè)的發(fā)光管和光電接收器；攝像頭位于振蕩混勻裝置的后方，用于拍攝反應(yīng)圖像留檔查看。
[0016]作為優(yōu)選，所述加珠裝置包含加料倉，所述加料倉內(nèi)裝有助微量液體懸浮的振蕩體，加料倉前部有若干個(gè)可供振蕩體穿過的通孔，加料倉下面設(shè)有一塊活動(dòng)推板，所述活動(dòng)推板與電機(jī)上的電機(jī)齒輪嚙合，可前后運(yùn)動(dòng)，所述電機(jī)設(shè)置在活動(dòng)推板下面，在活動(dòng)推板上也對應(yīng)設(shè)有若干個(gè)可容納振蕩體的通孔，活動(dòng)推板之下還設(shè)有一塊固定板，所述活動(dòng)推板、加料倉和電機(jī)均設(shè)置在固定板之上，所述固定板的前部也對應(yīng)設(shè)有若干個(gè)可供振蕩體穿過的通孔，所述固定板安裝在導(dǎo)軌上，由設(shè)置在導(dǎo)軌上的皮帶帶動(dòng)可以前后運(yùn)動(dòng)；在所述固定板的前部還裝有光耦檢測裝置。
[0017]作為優(yōu)選，所述助微量液體懸浮的振蕩體為鋼珠或其它材質(zhì)形狀物體，鋼珠或其它材質(zhì)形狀物體的直徑在1.5-2.5_，也可根據(jù)離心管內(nèi)腔面積選定，更優(yōu)的是，選用助微量液體懸浮的振蕩體為鋼珠，鋼珠直徑為2mm。
[0018]作為優(yōu)選，所述加料倉、活動(dòng)推板和固定板上的通孔大小均與振蕩體直徑大小相匹配。
[0019]作為優(yōu)選，所述光耦檢測裝置為一個(gè)光耦檢測電路。
[0020]本發(fā)明的檢測方法是依據(jù)經(jīng)典試管法的原理，在離心管(兼做反應(yīng)杯)內(nèi)加入實(shí)驗(yàn)所需的樣本及試劑，混合之后放入離心機(jī)，在離心之后由機(jī)械手將離心管放入專用的振蕩盒內(nèi)，進(jìn)行振蕩復(fù)懸，振蕩速度由電機(jī)控制。為改善復(fù)懸效果，提供了一種在離心管內(nèi)加入鋼珠(或其它材質(zhì)形狀物體)等可助微量液體懸浮的振蕩體的方法，鋼珠(或其它材質(zhì)形狀物體)的直徑在2_，也可根據(jù)離心管內(nèi)腔面積選定，由于離心管在振蕩過程中，鋼珠(或其它材質(zhì)形狀物體)在離心管底部運(yùn)動(dòng)，會(huì)破壞液