一種黃芪藥材及其水提取物的快速多信息薄層鑒別方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種黃芪藥材及其水提取物的快速多信息薄層鑒別方法。
【背景技術(shù)】
[0002]中藥黃芪及其提取制劑的薄層鑒別方法，一直是一件令人頭痛的問題。因其樣品和對照藥材的前處理方法非常繁瑣復(fù)雜，需要用有機(jī)溶劑反復(fù)純化處理，僅樣品的前處理就要花費(fèi)近一天時間、數(shù)百ml的有機(jī)試劑，效率低、環(huán)境污染嚴(yán)重、危害操作人員的身體健康。以中國藥典2010年版藥典一部為例，就其藥材與其制劑的薄層鑒別方法，隨機(jī)摘錄列舉3例:
[0003]1、黃芪單味藥材薄層鑒別
[0004]A.取本品粉末3g，加甲醇20ml，加熱回流I小時，濾過，濾液加于中性氧化鋁柱(100?120目，5g，內(nèi)徑為10?15mm)上，用40%甲醇10ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘澄加水30m]使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗滌2次，每次20ml，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13: 7: 2)下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，日光下顯相同棕褐色斑點(diǎn)；紫外光燈365nm下顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)。
[0005]B.取本品粉末2g，加乙醇30ml，加熱回流20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?.3%氫氧化鈉溶液15ml使溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至5?6，用乙酸乙酯15ml振搖提取，分取乙酸乙酯液，用鋪有適量無水硫酸鈉的濾紙濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪對照藥材2g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(10: I)為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸氣中熏后，置紫外光燈365nm下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色熒光主斑點(diǎn)。
[0006]鑒別A是以黃芪甲苷、鑒別B是以對照藥材為參照，檢測一批黃芪藥材，要制備兩種供試品溶液，通過兩次薄層展開，總花費(fèi)時間8小時、有機(jī)溶劑250ml。
[0007]2.制劑中黃芪薄層鑒別
[0008]A.正心降脂片中黃芪薄層鑒別取本品適量，除去包衣，研細(xì)，取3g，置索式提取器中，加2%氫氧化鉀甲醇溶液，加熱回流提取至無色，提取液蒸干，殘澄用20mmll水溶解，用乙醚提取3次，每次20ml，棄去乙醚液，水液再用水飽和的三氯甲烷-正丁醇(2:1)混合溶液提取3次，每次20ml，合并下層溶液，用0.lmol/L的氫氧化鉀溶液洗滌三氯甲烷-正丁醇液，收集下層溶液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13: 7: 2)下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點(diǎn)；置紫外光燈365nm下檢視，顯相同顏色焚光斑點(diǎn)。
[0009]該鑒別方法是以黃芪甲苷為對照，僅一批樣品前處理就要花費(fèi)時間7-8小時、有機(jī)溶劑273ml ο
[0010]B.補(bǔ)腎固齒丸中黃芪薄層鑒別取本品20g，研碎，加甲醇50ml，加熱回流I小時，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶解，用水飽和的正丁醇，振搖提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次30ml，再用正丁醇飽和水洗滌2次，每次30ml，正丁醇液回收溶劑至約2ml，加中性氧化鋁(100?120目)3g，攪勻，蒸干，加在中性氧化鋁柱(100?120目，2g，內(nèi)徑為10?15mm)上，用40%甲醇10ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘澄加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪對照藥材lg，加甲醇30ml，同法制成對照藥材溶液。再取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液10 μ 1、對照藥材與對照品溶液各3μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13: 7: 2)下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點(diǎn)。
[0011]該鑒別方法鑒別一批樣品，樣品與對照藥材前處理要花費(fèi)時間7-8小時、有機(jī)溶劑 400ml ο
[0012]由上述黃芪單味藥材的薄層鑒別以及其在制劑中的薄層鑒別實(shí)例，印證了目前為止，其鑒別的繁瑣性、復(fù)雜性、費(fèi)時性、信息量的單一性、對周圍環(huán)境的污染性以及高成本、低效率。所以提高檢測效率、降低檢測成本、減少環(huán)境污染，創(chuàng)建黃芪藥材及其水提取物的快速多信息薄層鑒別方法，成了檢測人員刻不容緩的奮斗目標(biāo)，我們就是在該背景條件下，發(fā)明了黃芪藥材及其水提取物的快速多信息薄層鑒別方法。
[0013]黃芪藥材水提取物或配方顆粒的制備方法取黃芪飲片4500_5000g，分別加水8倍量，煎煮提取二次，每次1-2小時，濾過，濾液70°C減壓濃縮，濃縮液噴霧干燥或70°C減壓干燥，得各自水提取物干膏粉；或加糊精適量，混勻，制粒，分別制成1000g，分裝，得各自水提取物配方顆粒。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0014]本發(fā)明就是針對黃芪藥材及其在復(fù)方制劑中薄層鑒別繁瑣、費(fèi)時、信息量單一、方法污染環(huán)境和高成本的弊端，發(fā)明了一種黃芪藥材及其水提取物的快速多信息薄層鑒別方法。即，用簡便、快捷的前處理方法得到供試品與對照藥材溶液，在同一塊薄層板上，獲得黃芪在紫外光燈365nm和254nm、以及噴霧10%硫酸乙醇溶液顯色后，日光和紫外光燈365nm，4種檢視條件下的多信息薄層鑒別圖，斑點(diǎn)清晰，相互交錯，但又互不干擾(見圖1、2、3、4)。與常規(guī)的單信息薄層相比，不但大幅度提高了黃芪及其提取物的質(zhì)量可控性，有利于質(zhì)量監(jiān)督，而且還提高了檢測效率、節(jié)約了成本，減少了環(huán)境污染，具創(chuàng)造性與實(shí)用性。
[0015]本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的方案為:
[0016](I)黃芪藥材的薄層鑒別取黃芪藥材粉末與對照藥材各2g，分別加水80ml，小火煎煮30分鐘，棉花過濾，濾液蒸干，殘留物各加濃氨水0.5ml，振搖使?jié)駶櫨鶆?，分別加正丁醇10ml，超聲處理20分鐘，傾取正丁醇液，蒸干，殘留物各加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液與對照藥材溶液；再取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每Iml含0.25mg溶液，作為對照品溶液；吸取對照藥材溶液、對照品溶液和供試品溶液各5?6 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以體積比為1: 2: 4: 0.5的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-濃氨為展開劑，展開，取出，熱風(fēng)吹干，置紫外光燈254nm和365nm下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)和熒光主斑點(diǎn)；再噴以10%硫酸溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光和紫外光燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對照品和對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，分別顯相同顏色斑點(diǎn)和熒光主斑點(diǎn)。
[0017](2)黃芪水提取物的薄層鑒別取黃芪水提取物適量，研細(xì)，稱取1.0g，加濃氨水
1.5ml，振搖使?jié)駶櫨鶆颍诱〈?0ml，超聲處理30分鐘，傾取正丁醇液，蒸干，殘留物加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液；吸取供試品溶液與鑒別(I)項(xiàng)下的對照藥材溶液和對照品溶液各5?8μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以體積比為1:2:4:0.5的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-濃氨為展開劑，展開，取出，熱風(fēng)吹干，置紫外光燈254nm和365nm下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)和熒光主斑點(diǎn)；再噴以10%硫酸溶液，