] 由包含序列號(hào)1所表示的氨基酸序列的載脂蛋白A1的完整蛋白質(zhì)或其部分膚形成 的用于檢測(cè)認(rèn)知功能障礙疾病的生物標(biāo)記物
[0145] 由包含序列號(hào)2所表示的氨基酸序列的甲狀腺素運(yùn)載蛋白的完整蛋白質(zhì)或其部分 膚形成的用于檢測(cè)認(rèn)知功能障礙疾病的生物標(biāo)記物
[0146] 由包含序列號(hào)3所表示的氨基酸序列的補(bǔ)體C3的完整蛋白質(zhì)或其部分膚形成的用 于檢測(cè)認(rèn)知功能障礙疾病的生物標(biāo)記物。
[0147] [2]-種認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)方法，所述認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)方法同時(shí) 或分別測(cè)定生物體試樣中的、選自下述(a)、（b)及(C)中的巧巾或巧巾W上的用于檢測(cè)認(rèn)知功 能障礙疾病的生物標(biāo)記物，
[0148] (a)由包含序列號(hào)1所表示的氨基酸序列的載脂蛋白A1的完整蛋白質(zhì)或其部分膚 形成的用于檢測(cè)認(rèn)知功能障礙疾病的生物標(biāo)記物
[0149] (b)由包含序列號(hào)2所表示的氨基酸序列的甲狀腺素運(yùn)載蛋白的完整蛋白質(zhì)或其 部分膚形成的用于檢測(cè)認(rèn)知功能障礙疾病的生物標(biāo)記物
[0150] (C)由包含序列號(hào)3所表示的氨基酸序列的補(bǔ)體C3的完整蛋白質(zhì)或其部分膚形成 的用于檢測(cè)認(rèn)知功能障礙疾病的生物標(biāo)記物。
[0151] [3]根據(jù)權(quán)利要求2所述的認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)方法，包括W下的（i)及(ii)。
[0152] (i)同時(shí)或分別測(cè)定受試者的生物體試樣中的、選自下述(a)、（b)及(C)中的巧中或 巧中用于檢測(cè)認(rèn)知功能障礙疾病的生物標(biāo)記物
[0153] (a)由包含序列號(hào)1所表示的氨基酸序列的載脂蛋白A1的完整蛋白質(zhì)或其部分膚 形成的用于檢測(cè)認(rèn)知功能障礙疾病的生物標(biāo)記物
[0154] (b)由包含序列號(hào)2所表示的氨基酸序列的甲狀腺素運(yùn)載蛋白的完整蛋白質(zhì)或其 部分膚形成的用于檢測(cè)認(rèn)知功能障礙疾病的生物標(biāo)記物
[0155] (C)由包含序列號(hào)3所表示的氨基酸序列的補(bǔ)體C3的完整蛋白質(zhì)或其部分膚形成 的用于檢測(cè)認(rèn)知功能障礙疾病的生物標(biāo)記物
[0156] (ii)在至少巧巾W上的生物標(biāo)記物的測(cè)定結(jié)果被歸類于認(rèn)知功能障礙疾病的情況 下，將受試者判斷為認(rèn)知功能障礙疾病。
[0157] [4]上述[2]或[3]所述的認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)方法，其中，對(duì)上述(C)生物標(biāo) 記物和、上述(a)生物標(biāo)記物或上述(b)生物標(biāo)記物運(yùn)巧巾進(jìn)行測(cè)定。
[0158] [5]根據(jù)上述[2]~[4]中的任一項(xiàng)所述的認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)方法，其中，在 上述認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)為輕度認(rèn)知障礙的檢測(cè)的情況下，對(duì)上述(C)生物標(biāo)記物及 上述(a)生物標(biāo)記物運(yùn)巧巾進(jìn)行測(cè)定。
[0159] [6]根據(jù)上述[2]~[4]中的任一項(xiàng)所述的認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)方法，其中，在 上述認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)為阿爾茨海默病的檢測(cè)的情況下，對(duì)上述(C)生物標(biāo)記物及 上述(b)生物標(biāo)記物運(yùn)巧巾進(jìn)行測(cè)定。
[0160] [7]根據(jù)上述[2]~[6]中的任一項(xiàng)所述的認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)方法，其中，通 過免疫印跡法、Western印跡法、酶或巧光或放射性物質(zhì)的標(biāo)記法、質(zhì)譜法、immunoMS法、表 面等離子體共振法中的任一種W上的方法進(jìn)行測(cè)定。
[0161] [引一種認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)試劑盒，所述認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)試劑盒 用于測(cè)定從下述(3)、化)及山）中選擇的巧巾W上的用于檢測(cè)認(rèn)知功能障礙疾病的生物標(biāo)記 物，
[0162] (a)由包含序列號(hào)1所表示的氨基酸序列的載脂蛋白A1的完整蛋白質(zhì)或其部分膚 形成的用于檢測(cè)認(rèn)知功能障礙疾病的生物標(biāo)記物
[0163] (b)由包含序列號(hào)2所表示的氨基酸序列的甲狀腺素運(yùn)載蛋白的完整蛋白質(zhì)或其 部分膚形成的用于檢測(cè)認(rèn)知功能障礙疾病的生物標(biāo)記物
[0164] (C)由包含序列號(hào)3所表示的氨基酸序列的補(bǔ)體C3的完整蛋白質(zhì)或其部分膚形成 的用于檢測(cè)認(rèn)知功能障礙疾病的生物標(biāo)記物。
[0165] [9]根據(jù)上述[引所述的認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)試劑盒，其中，包含針對(duì)上述生 物標(biāo)記物的抗體或適體。
[0166] [10]根據(jù)上述[引或[9]所述的認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)試劑盒，其中，上述抗體 或適體被固相化在基板上。
[0167] [11]根據(jù)上述[引~[10]中的任一項(xiàng)所述的認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)試劑盒，其 中，具有上述(C)生物標(biāo)記物和上述(a)生物標(biāo)記物或上述(b)生物標(biāo)記物運(yùn)巧中。
[0168] [12]根據(jù)上述[引~[11]中的任一項(xiàng)所述的認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)試劑盒，其 中，在上述認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)為輕度認(rèn)知障礙的檢測(cè)的情況下，具有上述(C)生物標(biāo) 記物及上述(a)生物標(biāo)記物運(yùn)巧中。
[0169] [13]根據(jù)上述[引~[11]中的任一項(xiàng)所述的認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)試劑盒，其 中，上述認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)為阿爾茨海默病的檢測(cè)的情況下，具有上述k)生物標(biāo)記 物及上述(b)生物標(biāo)記物運(yùn)巧中。
[0170] 上述篩選試劑盒可W為一液型，也可W為多液型。
[0171] [14]-種認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)試劑盒，用于進(jìn)行上述[2]~[7]中的任一項(xiàng)所 述的認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)方法。
[0172] [15]根據(jù)上述[2]~[7]中的任一項(xiàng)所述的認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)方法，其中， 使用上述[引~[13]中的任一項(xiàng)所述的認(rèn)知功能障礙疾病的檢測(cè)試劑盒。
[0173] [16]-種準(zhǔn)確率高的多個(gè)認(rèn)知功能障礙疾病檢測(cè)用生物標(biāo)記物的組合選定方法， 包括:分別對(duì)受試者的生物體試樣中的認(rèn)知功能障礙疾病的巧巾W上生物標(biāo)記物進(jìn)行測(cè)定， 通過邏輯回歸分析，對(duì)所述巧巾W上的生物標(biāo)記物各自的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行解析，基于所述解析 結(jié)果選定認(rèn)知功能障礙疾病的準(zhǔn)確率高的生物標(biāo)記物的組合。
[0174] [17]根據(jù)上述[16]所述的認(rèn)知功能障礙疾病的生物標(biāo)記物的組合選定方法，其 中，包括：通過多重免疫分析法(Multiplex immunoassay)進(jìn)行巧中W上蛋白質(zhì)的測(cè)定，然 后，制作MCI(輕度認(rèn)知功能障礙)與NDC(非認(rèn)知功能障礙)的比較、AD(阿爾茨海默病)與NDC (非認(rèn)知功能障礙)的比較的R0C曲線，將AUC顯示為0.6W上的蛋白質(zhì)選定為認(rèn)知功能障礙 疾病生物標(biāo)記物。
[0175] [1引根據(jù)上述[16]或[17]所述的認(rèn)知功能障礙疾病的生物標(biāo)記物的組合選定方 法，其中，將NDC和MCI進(jìn)行對(duì)比，與MCI區(qū)分的準(zhǔn)確率為80 % W上、更優(yōu)選為85% W上，及/ 或，將NDC和AD進(jìn)行對(duì)比，與AD區(qū)分的準(zhǔn)確率為85 % % W上、更優(yōu)選為90 % W上。
[0176] [19]用于使計(jì)算機(jī)執(zhí)行上述[16]~[1引中的任一項(xiàng)所述的方法的認(rèn)知功能障礙 疾病的生物標(biāo)記物的組合選定程序或存儲(chǔ)該程序的控制部或計(jì)算機(jī)。
[0177] [20]為了使計(jì)算機(jī)執(zhí)行上述[16]~[1引中的任一項(xiàng)所述的方法而存儲(chǔ)在存儲(chǔ)介 質(zhì)上的認(rèn)知功能障礙疾病的生物標(biāo)記物的組合選定程序或存儲(chǔ)該程序的控制部或計(jì)算機(jī)。
[0178] [21]根據(jù)上述[1]~[1引中的任一項(xiàng)所述的、生物標(biāo)記物、檢測(cè)方法、檢測(cè)試劑盒 或組合選定方法，其中，上述生物標(biāo)記物是選自由序列號(hào)1所表示的氨基酸序列形成的膚、 由序列號(hào)2所表示的氨基酸序列形成的膚、及由序列號(hào)3所表示的氨基酸序列形成的膚中的 1種W上。
[0179] [22]根據(jù)上述[1]~[1引中的任一項(xiàng)所述的、生物標(biāo)記物、檢測(cè)方法、檢測(cè)試劑盒 或組合選定方法，其中，上述部分膚是完整蛋白質(zhì)的部分膚、或由該蛋白質(zhì)或膚產(chǎn)生的5個(gè) W上氨基酸殘基的膚片斷。
[0180] W下，說明具體的實(shí)施例等，但本發(fā)明（本技術(shù))并不限定于此。
[0181] 實(shí)施例
[0182] 試驗(yàn)例1
[0183] <通過多重免疫分析法檢測(cè)認(rèn)知功能障礙疾病標(biāo)記物>
[0184] 在包括阿爾茨海默病的神經(jīng)變性疾病所設(shè)及的標(biāo)記物蛋白質(zhì)中，W補(bǔ)體系的補(bǔ)體 C3、補(bǔ)體C4、補(bǔ)體因子H、與抑制作為大腦淀粉樣變性原因的Αβ纖維形成有關(guān)的甲狀腺素運(yùn) 載蛋白、α-2-巨球蛋白為標(biāo)記物，對(duì)從受試者采集的生物體試樣實(shí)施免疫分析法，W標(biāo)記物 的有無甚至量為指標(biāo)，檢測(cè)認(rèn)知功能障礙疾病。
[0185] 作為檢測(cè)方法，使用從生物體試樣中同時(shí)檢測(cè)出多個(gè)標(biāo)記物(分析物）的多重免疫 分析法。
[0186] (1)血清試樣
[0187] W下，括號(hào)前為簡稱。
[0188] 使用由AD(阿爾茨海默病）37例、NDC(沒有罹患精神疾病的受試者例、W及MCI (輕度認(rèn)知功能障礙)39例得到的血清。
[0189] (2)方法
[0190] 載脂蛋白E(ApoE)、載脂蛋白Al(ApoAl)、補(bǔ)體C3(C3)、甲狀腺素運(yùn)載蛋白（TTR)、補(bǔ) 體因子Η(因子Η)、α-2-巨球蛋白（α-2-Μ)使用MIIXIPLEX?多重免疫試劑盒化NDG1-36K, Merck Millipore公司）進(jìn)行測(cè)定。補(bǔ)體C4(C4)使用MIIXIPLEX?多重免疫試劑盒（歷062- 36K,Merck Millipore公司）進(jìn)行測(cè)定。
[0191] (2-1)血清樣品的制備
[0192] (ApoE，ApoAl，C3，TTR，因子H，α-2-Μ測(cè)定用血清樣品）
[0193] 使用將血清樣品稀釋40,000倍得到的樣品。即，將血清扣1加入到1.5ml管中，添加 995μ1分析緩沖液，平穩(wěn)地?cái)埌?。將該稀釋液?取到其他管中，添加99扣1分析緩沖液，平穩(wěn) 地?cái)埌琛此為分析樣品。
[0194] (C4測(cè)定用血清樣品）
[0195] 使用將血清樣品稀釋2,000倍得到的樣品。即，將血清化1加入到1.5ml管中，添加 495μ1分析緩沖液，平穩(wěn)地?cái)埌?。將該稀釋?0μ1取到其他管中，添加19化1分析緩沖液，平 穩(wěn)地?cái)埌琛此為分析樣品。
[0196] (2-2)珠稀釋液的制備
[0197] 將識(shí)別檢測(cè)對(duì)象的蛋白質(zhì)的抗體結(jié)合的珠混合?稀釋，制備珠稀釋液。
[019 引（ApoE，ApoAl，C3，TTR，因子H，α-2-M測(cè)定用珠稀釋液）
[0199] 在混合用瓶子中加入2，10化1珠稀釋液，再分別加入15化1的結(jié)合了各抗體的珠混 懸液6種，并進(jìn)行攬拌。W此為珠稀釋液。
[0200] (C4測(cè)定用珠稀釋液）
[0201] 在混合用瓶子中加入2,85化1珠稀釋液，再加入15化1的結(jié)合了 C4抗體的珠混懸 液，并進(jìn)行攬拌。W此為珠稀釋液。
[0202] (2-3)QC樣品的制備
[0203] 在封入有質(zhì)量控制（quality control)用蛋白質(zhì)的瓶子內(nèi)加入25化1純水，平穩(wěn)地 攬拌后，靜置5~10分鐘。W此為QC樣品。
[0204] (2-4)標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備
[0205] 定量用標(biāo)準(zhǔn)曲線制作用標(biāo)準(zhǔn)樣品通過6級(jí)的分級(jí)稀釋來制作。即，在放入了標(biāo)準(zhǔn)蛋 白質(zhì)的瓶子內(nèi)加入25化1的純水，平穩(wěn)地?cái)埌韬?，靜置5~10分鐘，W此為最高濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶 液。將其中的50μ1取到其他管中，加入15化1的分析緩沖液并攬拌。再將其中的50μ1取到其 他管中，加入15化1的分析緩沖液并攬拌