專利名稱：甘藍型油菜隱性上位互作核不育兩型系選育的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于油菜育種技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種新的甘藍型油菜隱性上位互作核不育兩型系選育的方法。
背景技術(shù)：
油菜具有較強的雜種優(yōu)勢，優(yōu)良的雜交組合一般可增產(chǎn)20% 30%。自1985年第一個審定并廣泛種植的雜交油菜秦油2號育成以來，雜交油菜生產(chǎn)在我國發(fā)展十分迅速。目前油菜雜交利用途1徑主要是油菜雄性不育，油菜雄性不育利用的關(guān)鍵是在雜交種生產(chǎn)時獲得100%不育群體，隱性細胞核不育兩系在雜交種生產(chǎn)時只能獲得50%的不育群體，雜交種生產(chǎn)費時費工，而且種子的純度難以保證，制種產(chǎn)量也很低。質(zhì)核互作不育可望獲得100%的不育群體，但是育性不穩(wěn)定，容易受到環(huán)境因素的影響，存在較大的制種風險。隱性核不育上位基因的發(fā)現(xiàn)不但使100%不育群體的培育成為可能，同時育性穩(wěn)定、不受環(huán)境因素的影響。然而，盡管該不育系統(tǒng)具有明顯的優(yōu)點，但是選育的難度很大，限制了其在生產(chǎn)實踐的廣泛應(yīng)用。隱性核不育兩系在眾多油菜育種單位均有較長的研究歷史，積累了大批高含油量、高蛋白、綜合農(nóng)藝性狀優(yōu)良的基礎(chǔ)材料。廣大油菜育種科技工作者以此為基礎(chǔ)材料，對隱性核不育三系材料進行遺傳改良，但是各油菜育種單位選育的周期長，難得大，自陳鳳祥研究員1991年發(fā)現(xiàn)隱性細胞核雄性不育材料9012AB并提出該不育系育性控制的三基因互作模式以來，歷經(jīng)30年的育種實踐，全國審定推廣的核不育三系品種一共才十幾個。因此，深入研究該不育系統(tǒng)的遺傳規(guī)律，改進技術(shù)手段，選育甘藍型油菜隱性核不育材料是我們面臨既具理論價值又具應(yīng)用前景的科學問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種甘藍型油菜隱性上位互作核不育兩型系選育的方法，降低甘藍型油菜隱性上位互作核不育兩型系選育的難度，加速甘藍型油菜隱性上位互作核不育兩型系選育的進程，把該優(yōu)良的授粉控制系統(tǒng)盡快方便的應(yīng)用于生產(chǎn)，同時，獲得的純合兩型系配合力強、遺傳穩(wěn)定，選育的程序簡單、可操作性強，以克服現(xiàn)有技術(shù)的不足。為實現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明采用了這樣的技術(shù)方案:
本發(fā)明的甘藍型油菜隱性上位互作核不育兩型系選育的方法是以無育性分離核不育兩系材料為輪回親本，在回交后代選育新的隱性上位互作核不育兩型系，主要包括以下步驟:
(I)選擇優(yōu)良隱性核不育兩系不育系B株套袋自交，獲得自交無育性分離油菜植株；優(yōu)良隱性核不育兩系不育系B株是指高含油量、高蛋白、品質(zhì)雙低及綜合農(nóng)藝性狀良好的隱性核不育兩系不育系B株,其基因型為iBnMsflisflis^is2或Bnmsfls抑fls2、。(2)以(I)中獲得的自交無育性分離油菜植株為輪回親本，與隱性上位互作核不育兩型系回交，在回交后代群體進行雜交、自交、測交選育獲得新的隱性上位互作核不育純合兩型系，其基因型為 iBnRfRftnsflisflisjns4VsBnRfRf MsflisAsfiis4)0(3)將(2)中獲得的隱性上位互作核不育純合兩型系與臨保系測交，獲得不育株100%的全不育系，從而用于隱性核不育三系油菜新品種的選育。更進一步的做法是，將所述自交無育性分離油菜植株種植成小區(qū)，從中選單株作為母本，待改良隱性上位互作核不育純合兩型系為父本進行雜交，雜交后代與所述無育性分離核不育兩系油菜回交獲得BC1FnBC1F1自交獲得BC1F2 ;如果自交后代育性分離比為3:1則在該小區(qū)進行成對測交，如果育性分離比為13:3、15:1或61:3則對可育株套袋自交，在自交后代育性分離比為3:1的小區(qū)進行成對測交，在上面兩種情況下測交后代育性分離比為1:1的小區(qū)進行兄妹交，兄妹交不育單株另一分枝與臨保系測交，如果兄妹交育性分離比為1:1，與臨保系測交全不育，即為已經(jīng)改良的隱性上位互作核不育純合兩型系。與已有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點:
(I)傳統(tǒng)育種以常規(guī)品種或品系為雜交父本，選育獲得的不育系后期需要大量進行組合測配，獲得強優(yōu)勢雜交組合的工作量很大，而本發(fā)明選隱性核不育兩系不育系B株后代為輪回親本，是利用不育系改良不育系，有利于不育系與恢復系種群的劃分，從而易測配強優(yōu)勢雜交組合。(2)傳統(tǒng)育種直接以隱性核不育兩系不育系B株為雜交父本，雜交后代同時受到核不育兩系與核不育三系兩套不育相關(guān)基因調(diào)控，育性容易發(fā)生分離，很難選育出遺傳穩(wěn)定的隱性上位互作核不育純合兩型系，而本發(fā)明對隱性核不育兩系不育系B株套袋自交，選無育性分離的后代為雜交親本，在低世代即可獲得遺傳穩(wěn)定的核不育純合兩型系。(3)本發(fā)明在第一 次雜交即以隱性核不育兩系不育系B株后代為母本，從而有利于將受細胞質(zhì)基因調(diào)控的優(yōu)良性狀傳遞到雜交后代。(4)該方法可操作性強、選育的程序簡單，任何科研育種單位均可采用，提高了隱性上位核不育純合兩型系的選育效率。
具體實施例方式下面結(jié)合實例對本發(fā)明作進一步詳細說明。實施例1:
(I)高含油量、高蛋白、品質(zhì)雙低綜合農(nóng)藝性狀良好的隱性核不育兩系不育系B株jinspis^ns2或Bnms/nsJMsjns Jlr 3株套袋自交，種植成3個小區(qū)，每個小區(qū)種植200株左右,其中第一個小區(qū)可育株:不育株=152:60,第二個小區(qū)可育株:不育株=167:65,第三個小區(qū)可育株:不育株=158:44，其中第二個小區(qū)表現(xiàn)相對優(yōu)良，從中選10株可育株套袋自交。(2)把步驟(I)所得10個單株種子種植成10個不同的小區(qū)，每個小區(qū)種植100株左右，其中有4個小區(qū)沒有育性分離，6個小區(qū)育性分離比接近3: 1，從無育性分離的4個小區(qū)中選表現(xiàn)優(yōu)良的I個小區(qū)，從該小區(qū)收獲5個自交單株種子09105B (.BnMs1Ms1Insjns2或Bnmsflis ^lsjis2 )。(3)選待改良隱性上位互作核不育純合兩型系08121AB(.BnRfRfmsfiis^isfiis4XBnRfRf MspspsAs4) 3個兄妹交后代種植成3個小區(qū),每個小區(qū)種植100株左右，從3個小區(qū)中選I個表現(xiàn)較好的小區(qū)，并從該小區(qū)中選5個單株作為父本，步驟(2)無育性分離小區(qū)選5個優(yōu)良單株09105B (,BnMs1Msflisflis2氛Bnmsfis!Ms辦2)為母本進行雜交獲得5個Fl代雜交單株。(4)步驟(3)雜交獲得的5個Fl代雜交單株種植成5個小區(qū)，每個小區(qū)種植200株左右，從其中I個小區(qū)選5個表現(xiàn)優(yōu)良的單株，以步驟(2)無育性分離核不育兩系B株09105B iBnMs!Msflis；pis2或Bnmsflis!Ms御0自交后代5個單株為輪回親本分別與上述入選的5個單株回交獲得5個BC1Fiq(5)步驟(4)的回交后代BC1F1種子成5個小區(qū)，每個小區(qū)種植200株左右，從其中I個小區(qū)選50個表現(xiàn)優(yōu)良的單株套袋自交獲得BC1F2q(6)步驟(5)的BC1F2種植成50個不同的小區(qū)，每個小區(qū)種植200株左右，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有4個小區(qū)分離出不育株，其中第一個小區(qū)分離出10個不育株，第二個小區(qū)分離出7個不育株，第三個小區(qū)分離出8個不育株，第四個小區(qū)分離出7個不育株，從有育性分離的一個小區(qū)套袋自交50個單株。(7 )步驟(6 )自交后代種植成50個不同的小區(qū)，每個小區(qū)種植200株左右，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有4個小區(qū)育性分離比為3:1，在其中一個小區(qū)內(nèi)進行可育株與不育株成對測交10對。(8)步驟(7)測交后代種植成10個小區(qū)，每個小區(qū)種植200株左右，結(jié)果發(fā)現(xiàn)3個小區(qū)無育性分離，7個小區(qū)可育株與不育株育性分離比為接近1: 1，選其中一個有育性分離且表現(xiàn)優(yōu)良的小區(qū)，小區(qū)內(nèi)進行兄妹交5對，同時兄妹交的不育株另一分枝與臨保系測交。(9)步驟(8)后代全部種植成不同小區(qū)，每個小區(qū)種植200株左右，結(jié)果發(fā)現(xiàn)5對兄妹交后代全部育性分離比為接近1:1，與臨保系的測交后代不育株率為100%。
表二:實施例1中群體兄妹交后代育性分離情況
權(quán)利要求
1.一種甘藍型油菜隱性上位互作核不育兩型系選育的方法，其特征在于以無育性分離核不育兩系材料為輪回親本，在回交后代選育新的隱性上位互作核不育兩型系，該方法包括以下步驟: (1)選擇優(yōu)良隱性核不育兩系不育系B株套袋自交，獲得自交無育性分離油菜植株； (2)以(I)中獲得的自交無育性分離油菜植株為輪回親本，與隱性上位互作核不育兩型系回交，在回交后代群體進行雜交、自交、測交選育獲得新的隱性上位互作核不育純合兩型系; (3)將(2)中獲得的隱性上位互作核不育純合兩型系與臨保系測交，獲得不育株100%的全不育系。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的甘藍型油菜隱性上位互作核不育兩型系選育的方法，其特征在于:將所述自交無育性分離油菜植株種植成小區(qū)，從中選單株作為母本，待改良隱性上位互作核不育純合兩型系為父本進行雜交，雜交后代與所述無育性分離核不育兩系油菜回交獲得BC1F1, BC1F1自交獲得BC1F2 ;如果自交后代育性分離比為3:1則在該小區(qū)進行成對測交，如果育性分離比為13:3、15:1或61:3則對可育株套袋自交，在自交后代育性分離比為3:1的小區(qū)進行成對測交，在上面兩種情況下測交后代育性分離比為1:1的小區(qū)進行兄妹交，兄妹交不育單株另一分枝與臨保系測交，如果兄妹交育性分離比為1:1，與臨保系測交全不育，即為已經(jīng)改良 的隱性上位互作核不育純合兩型系。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種甘藍型油菜隱性上位互作核不育兩型系選育的方法，該方法選擇優(yōu)良隱性核不育兩系不育系B株套袋自交，獲得自交無育性分離油菜植株；以獲得的自交無育性分離油菜植株為輪回親本，與隱性上位互作核不育兩型系回交，在回交后代群體進行自交、測交選育獲得新的隱性上位互作核不育純合兩型系；隱性上位互作核不育純合兩型系與臨保系測交，獲得不育株100%的全不育系。本發(fā)明選育程序簡單、速度快、可操作性強，獲得的純合兩型系遺傳穩(wěn)定、配合力高，可方便地應(yīng)用于隱性上位互作核不育雜交油菜新品種的選育。
文檔編號A01H1/04GK103120118SQ20131002539
公開日2013年5月29日 申請日期2013年1月22日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月22日
發(fā)明者伍林濤, 杜才富, 韓宏仕, 奉斌, 張敏琴, 曾章麗 申請人:貴州省油菜研究所