專利名稱：用糖廠廢液生產(chǎn)淡紫擬青霉菌劑的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種利用微生物真菌生產(chǎn)殺蟲(chóng)劑的方法。
植物線蟲(chóng)使農(nóng)作物減產(chǎn)，按最保守的估算，全國(guó)農(nóng)作物種植業(yè)每年約損失233億元。目前對(duì)線蟲(chóng)病的防治主要以化學(xué)殺線蟲(chóng)藥為主。雖然有一定效果，但易造成環(huán)境污染，且污染農(nóng)產(chǎn)品，造成食用農(nóng)產(chǎn)品后中毒的事件時(shí)有發(fā)生。鑒于此，人們開(kāi)始從生態(tài)角度另覓新法，采用生物防治法取代化學(xué)防治成為必然趨勢(shì)。線蟲(chóng)的天敵種類(lèi)很多，主要有真菌、細(xì)菌、病毒等。在真菌中有一種可破壞線蟲(chóng)的內(nèi)寄生真菌——淡紫擬青霉(Paecilomyces lilacinus)，該菌能感染根結(jié)線蟲(chóng)(Meloidogyne SPP.)和胞囊線蟲(chóng)(Globodera SPP.與Heterodera SPP.)等重要植物線蟲(chóng)的卵并吸收其卵內(nèi)物質(zhì)，使卵的孵化率降低，根部蟲(chóng)癭和卵塊的數(shù)量減少，因此應(yīng)用它來(lái)對(duì)于有害線蟲(chóng)進(jìn)行防治具有巨大潛力。
本發(fā)明的目的旨在提供一種以糖廠的廢料——糖蜜和甘蔗渣制造能防治經(jīng)濟(jì)作物寄生線蟲(chóng)的淡紫擬青霉菌劑的方法，該方法既可提供高效無(wú)毒的殺線蟲(chóng)藥物，又可解決糖廠的廢料處理問(wèn)題。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下步驟一一級(jí)培養(yǎng)，將普通真菌培養(yǎng)基分裝成斜面，接種淡紫擬青霉菌種，在20～30℃溫度下培養(yǎng)5～15天，以28℃培養(yǎng)7天為佳。
步驟二二級(jí)培養(yǎng)，將糖蜜稀釋成1/8～1/16，或廢糖蜜摻入1/10～1/20的糖蜜或其他碳源，PH調(diào)至5.5～7，以6～6.5最佳，混合后，經(jīng)常規(guī)高壓滅菌后接種一級(jí)培養(yǎng)物，在25～30℃溫度下振蕩培養(yǎng)5～10天，最佳條件是28℃下振蕩培養(yǎng)7天。
步驟三三級(jí)培養(yǎng)，將稀釋成1/8～1/16的糖蜜或按1/10～1/20添加糖蜜或其他碳源的廢糖蜜與甘蔗渣拌勻，成擠捏不滴水的粉團(tuán)，經(jīng)濕熱滅菌后將二級(jí)培養(yǎng)液吸附上去，在25～30℃溫度下再培養(yǎng)5～15天，一般以28℃培養(yǎng)10天最佳，風(fēng)干后成糕塊狀，淡紫色，容易散開(kāi)，以粉狀或糕塊狀保存皆可。
用此法生產(chǎn)的淡紫擬青霉菌劑，每克樣品含2.6×106～3.4×106個(gè)孢子。按4g/Kg土壤的劑量在作物移栽之前將菌劑粉碎拌入土中，可有效降低蟲(chóng)口密度(盆栽番茄試驗(yàn)，試驗(yàn)組的蟲(chóng)癭，卵塊和雌蟲(chóng)均比對(duì)照組減少90％以上)。淡紫擬青霉菌劑作為一種新型的生物殺線蟲(chóng)劑，可用于大豆、甜菜、馬鈴薯、麥類(lèi)、玉米、棉花、花生、香蕉、柑桔、菠蘿、茶苗、甘蔗、甘薯、煙草、楊梅、羅漢果、獼猴桃、桃、番茄、辣椒、茄子、柿、胡蘿卜、葡萄、草莓、無(wú)花果、黃瓜、南瓜、甜瓜、西瓜、苦瓜、菜豆等許多作物的線蟲(chóng)防治，不但提高產(chǎn)量，而且避免使用化學(xué)殺線蟲(chóng)藥。用糖廠的廢液廢渣制造該菌劑，可以使廢料資源化，既降低工業(yè)成本，又減少環(huán)境污染。
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。
實(shí)施例1將純化的淡紫擬青霉菌種接種到馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)斜面上，在28℃下培養(yǎng)7天；用糖廠的糖蜜12.5ml加水87.5ml配制成培養(yǎng)液，PH調(diào)至6.3，混合后經(jīng)常規(guī)高壓滅菌后接種上述一級(jí)培養(yǎng)物，在28℃條件下振蕩培養(yǎng)7天；再將12.5ml的糖蜜摻87.5ml水后與甘蔗渣拌勻，甘蔗渣的加入量以擠捏不滴水為度，經(jīng)濕熱滅菌后將二級(jí)培養(yǎng)液吸附上去，在28℃下再培養(yǎng)10天，風(fēng)干后成糕餅塊狀。稱取1g菌劑，置于高速組織搗碎機(jī)內(nèi)攪散，然后用清水洗出定容500ml，吸取少量滴于血球計(jì)數(shù)板上鏡檢計(jì)數(shù)，經(jīng)計(jì)算每g菌劑含3.5×106個(gè)孢子。
實(shí)施例2淡紫擬青霉菌的一級(jí)、二級(jí)培養(yǎng)同實(shí)施例1，在三級(jí)培養(yǎng)中取8.3ml糖蜜加入91.7ml水，加入甘蔗渣拌勻至擠捏不滴水，經(jīng)濕熱滅菌后將二級(jí)培養(yǎng)液吸附上去，于28℃下再培養(yǎng)10天，風(fēng)干后成糕塊狀。經(jīng)測(cè)定每克菌劑含3.0×108個(gè)孢子。
實(shí)施例3與實(shí)施例1不同的是三級(jí)培養(yǎng)物的配比，取6.3ml糖蜜加93.7ml水，加入甘蔗渣拌勻，其余方法及條件同實(shí)施例1，經(jīng)測(cè)定每克菌劑含2.3×106個(gè)孢子。
實(shí)施例4在馬鈴薯一葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)斜面上接種淡紫擬青霉菌菌種，在20℃下培養(yǎng)15天；用8.3ml糖蜜加91.7ml水制成液體培養(yǎng)液，PH調(diào)至5.5，經(jīng)高壓滅菌后接種PDA上的培養(yǎng)物，在25℃溫度下振蕩培養(yǎng)10天；用12.5ml糖蜜加87.5ml水再加甘蔗渣，濕熱滅菌后接種上述培養(yǎng)物，在25℃溫度下再培養(yǎng)15天，風(fēng)干后成糕塊狀。
實(shí)施例5在PDA培養(yǎng)基斜面上接種淡紫擬青霉菌菌種，在30℃下培養(yǎng)5天，接種到由6.3ml糖蜜和93.7ml水配成的培養(yǎng)液中，PH調(diào)至7，于30℃下振蕩培養(yǎng)5天，取12.5ml糖蜜、87.5ml水加甘蔗渣制成固體培養(yǎng)物，接種上述培養(yǎng)物，于30℃下培養(yǎng)5天。
實(shí)施例6淡紫擬青霉菌劑一級(jí)培養(yǎng)同實(shí)施例1，二級(jí)及三級(jí)培養(yǎng)中將糖蜜改為用90ml廢糖蜜加10ml糖蜜，其余條件不變。
實(shí)施例7淡紫擬青霉菌劑一級(jí)培養(yǎng)同實(shí)施例1，二級(jí)及三級(jí)培養(yǎng)中將糖蜜改成用95ml廢糖蜜加5ml糖蜜，其余條件不變。
權(quán)利要求
1.一種用糖廠廢料生產(chǎn)淡紫擬青霉菌劑的方法，其特征在于步驟一一級(jí)培養(yǎng)，用普通真菌培養(yǎng)基裝成斜面，接種淡紫擬青霉菌種，在20～30℃溫度下培養(yǎng)5～15天；步驟二二級(jí)培養(yǎng)，將糖蜜稀釋成1/8～1/16，或廢糖蜜摻入1/10～1/20的糖蜜或其他碳源，PH調(diào)至5.5～7，混合后，經(jīng)常規(guī)高壓滅菌后接種一級(jí)培養(yǎng)物，在25～30℃溫度下振蕩培養(yǎng)5～10天；步驟三三級(jí)培養(yǎng)，將稀釋成1/8～1/16的糖蜜或按1/10～1/20添加糖蜜或其他碳源的廢糖蜜與甘蔗渣拌勻，以擠捏不滴水為度，經(jīng)濕熱滅菌后將二級(jí)培養(yǎng)液吸附上去，在25～30℃溫度下再培養(yǎng)5～15天，風(fēng)干后成糕塊狀。
2.如權(quán)利要求1所述的用糖廠廢料生產(chǎn)淡紫擬青霉菌劑的方法，其特征在于一級(jí)培養(yǎng)以28℃培養(yǎng)7天；二級(jí)培養(yǎng)的培養(yǎng)液以糖蜜稀釋成1/8，PH調(diào)至6～6.5，培養(yǎng)條件為28℃，振蕩培養(yǎng)7天；三級(jí)培養(yǎng)以糖蜜稀釋成1/8，28℃下培養(yǎng)7天。
全文摘要
一種用糖廠廢料生產(chǎn)殺蟲(chóng)劑的方法，將純化后的淡紫擬青霉菌種接種在真菌培養(yǎng)基斜面上，經(jīng)培養(yǎng)后再接種到稀釋成1/8～1/16的糖蜜配成的培養(yǎng)液中，經(jīng)振蕩培養(yǎng)數(shù)天后再吸附到糖蜜和甘蔗渣組成的固體培養(yǎng)基上，在25～30℃下培養(yǎng)5～15天，制成的淡紫擬青霉菌劑作為一種殺蟲(chóng)劑，可用于許多農(nóng)作物的線蟲(chóng)防治，能有效降低蟲(chóng)口密度，提高作物產(chǎn)量。且用糖廠廢料制造該菌劑，既可使廢料資源化，又減少環(huán)境污染。
文檔編號(hào)A01N63/04GK1149394SQ95118469
公開(kāi)日1997年5月14日 申請(qǐng)日期1995年10月27日 優(yōu)先權(quán)日1995年10月27日
發(fā)明者潘滄桑, 林競(jìng) 申請(qǐng)人:廈門(mén)大學(xué)