農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)領(lǐng)域，具體而言，涉及農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法。該農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法，利用香菇菌糠生產(chǎn)農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉。利用香菇廢菌糠來(lái)生產(chǎn)，香菇菌糠作為主要培養(yǎng)材料，配制的培養(yǎng)基材料成本在805元/噸，每噸材料成本可節(jié)約1545元以上。還可以變廢為寶，減少環(huán)境污染。
【專(zhuān)利說(shuō)明】農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)領(lǐng)域，具體而言，涉及農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]淡紫擬青霉是一種農(nóng)用微生物，主要用于農(nóng)作物病原線蟲(chóng)的防控，具有高效、廣譜、長(zhǎng)效、安全、無(wú)污染、無(wú)殘留等特點(diǎn)，是生產(chǎn)高標(biāo)準(zhǔn)有機(jī)農(nóng)產(chǎn)品的首選藥劑。
[0003]目前，生產(chǎn)淡紫擬青霉活孢子菌劑主要通過(guò)以下制備方法制成:
[0004]將麩皮、玉米粉、豆柏、米糠以及其它添加劑混合配制成培養(yǎng)基；
[0005]給培養(yǎng)基內(nèi)接種淡紫擬青霉液體菌種后，裝盤(pán)，放置在層架；
[0006]在25°C _28°C溫度下進(jìn)行純培養(yǎng)，獲得含有大量活孢子的純菌體；
[0007]將獲得的含有大量活孢子的純菌體經(jīng)風(fēng)干、加工獲得產(chǎn)品。
[0008]通過(guò)以上方法制成的生產(chǎn)周期約為32-37天，每克干品含活孢子約150億左右。
[0009]但是，目前生產(chǎn)淡紫擬青霉菌劑的主要培養(yǎng)材料的成本較高，平均2350元/噸以上，進(jìn)而導(dǎo)致淡紫擬青霉產(chǎn)品的售價(jià)較高，影響了淡紫擬青霉產(chǎn)品的大面積推廣應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

`[0010]本發(fā)明的目的在于提供一種農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法，以解決上述問(wèn)題。
[0011]在本發(fā)明的實(shí)施例中提供的農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法，是利用香菇菌糠生產(chǎn)農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉。
[0012]全國(guó)大部分地區(qū)有香菇栽培，香菇栽培總量在15億袋以上，栽培香菇后的廢菌糠約60萬(wàn)噸以上，如果將其40%用于生產(chǎn)淡紫擬青霉，可產(chǎn)淡紫擬青霉產(chǎn)品24萬(wàn)噸，可有2.4億畝的農(nóng)田得到淡紫擬青霉產(chǎn)品對(duì)線蟲(chóng)的有效防控，可使這些土地的農(nóng)作物總計(jì)增產(chǎn)15%以上，可產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟(jì)效益。使用麩皮等傳統(tǒng)材料生產(chǎn)淡紫擬青霉，材料成本高，不利于普及推廣；利用香菇廢菌糠來(lái)生產(chǎn)，香菇菌糠作為主要培養(yǎng)材料，配制的培養(yǎng)基材料成本在805元/噸，每噸材料成本可節(jié)約1545元以上。還可以變廢為寶，減少環(huán)境污染。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0013]圖1為本發(fā)明提供的農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法流程圖。
【具體實(shí)施方式】
[0014]下面通過(guò)具體的實(shí)施例子并結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)描述。
[0015]實(shí)施例1:
[0016]農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法，是利用香菇菌糠生產(chǎn)農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉。[0017]全國(guó)大部分地區(qū)有香菇栽培，香菇栽培總量在15億袋以上，栽培香菇后的廢菌糠約60萬(wàn)噸以上，如果將其40%用于生產(chǎn)淡紫擬青霉，可產(chǎn)淡紫擬青霉產(chǎn)品24萬(wàn)噸，可有2.4億畝的農(nóng)田得到淡紫擬青霉產(chǎn)品對(duì)線蟲(chóng)的有效防控，可使這些土地的農(nóng)作物總計(jì)增產(chǎn)15%以上，可產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟(jì)效益。使用麩皮等傳統(tǒng)材料生產(chǎn)淡紫擬青霉，材料成本高，不利于普及推廣；利用香菇廢菌糠來(lái)生產(chǎn)，香菇菌糠作為主要培養(yǎng)材料，配制的培養(yǎng)基材料成本在805元/噸，每噸材料成本可節(jié)約1545元以上。還可以變廢為寶，減少環(huán)境污染。
[0018]實(shí)施例2:
[0019]基于上述實(shí)施例，如圖1所示的本發(fā)明中利用香菇菌糠生產(chǎn)農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的方法具體包括以下步驟:
[0020]101.以重量份數(shù)計(jì)，將77%_80%的香菇菌糠粉，15%-17%的麩皮、1.8%_2%的蔗糖和0.8%-1%的石膏粉混合制成粉料；
[0021]102.根據(jù)所述粉料和水的比例為1:0.4-1:0.5，在所述粉料中加入水，并攪拌均勻制成培養(yǎng)料；
[0022]103.將所述培養(yǎng)料裝入耐高溫高壓塑料袋中，扎緊袋口勿使漏氣，置于壓力為0.147Mp，溫度為129°C的滅菌環(huán)境中，進(jìn)行2-2.5小時(shí)持續(xù)滅菌處理；
[0023]104.滅菌處理結(jié)束，待所述培養(yǎng)料溫度降至28°C _30°C，給其中接入淡紫擬青霉液體菌種，混合均勻；其中所述培養(yǎng)料和所述淡紫擬青霉液體菌種的加入比例為1:0.65-1:0.6 ；
[0024]105.將接種過(guò)的所述培養(yǎng)料平鋪在層架上，鋪設(shè)厚度為3-3.3厘米，蓋上無(wú)紡布，四周壓嚴(yán)實(shí)，25°C恒溫，24小時(shí)內(nèi)不通風(fēng)靜置培養(yǎng)，待產(chǎn)生粉狀分生孢子；
[0025]106.將產(chǎn)生了所述粉狀分生孢子的菌塊通過(guò)自然風(fēng)干即可。
[0026]根據(jù)上述方法將粉料和水混合制成的培養(yǎng)料的pH值為5.2-6，該范圍之內(nèi)適宜淡紫擬青霉的生長(zhǎng)，如果制成的培養(yǎng)料的酸度過(guò)大，可以給其中加入石灰、石膏粉等進(jìn)行酸度調(diào)節(jié)。
[0027]因?yàn)樵诮臃N之前，需要將培養(yǎng)料中的其它微生物清除，所以，需要對(duì)培養(yǎng)料進(jìn)行滅菌處理，殺死其他微生物。滅菌處理通常需要在高溫高壓下進(jìn)行，方能實(shí)現(xiàn)徹底滅菌的目的。所以，本發(fā)明在滅菌過(guò)程中，將培養(yǎng)料裝入耐高溫高壓塑料袋中，扎緊袋口勿使漏氣，置于壓力為0.147Mp、溫度為129°C的滅菌環(huán)境中，進(jìn)行2-2.5小時(shí)持續(xù)滅菌處理。
[0028]在滅菌處理之后，需要給培養(yǎng)料接種，此時(shí)需要等待培養(yǎng)料的溫度降至淡紫擬青霉適宜生長(zhǎng)的溫度，所以，需要等待培養(yǎng)料溫度降至28°C _30°C時(shí)，方能對(duì)其進(jìn)行接種處理。
[0029]其中，培養(yǎng)料和淡紫擬青霉液體菌種的加入比例為1:0.65-1:0.6，此范圍內(nèi)適宜淡紫擬青霉的生長(zhǎng)，優(yōu)化選擇為:培養(yǎng)料和淡紫擬青霉液體菌種的加入比例為1:0.65。
[0030]培養(yǎng)料裸露在空氣中的表面積較小時(shí)，不利于粉狀分生孢子的產(chǎn)生，為了增大培養(yǎng)料裸露在空氣中的面積，可以將接種過(guò)的所述培養(yǎng)料直接平鋪在層架上。在該過(guò)程中不需要使用多個(gè)淺盤(pán)盛裝之后再放置在層架上，這樣能夠節(jié)省固定設(shè)施的投入，用工節(jié)省40%以上。
[0031]其中鋪設(shè)厚度可以為3-3.3cm,優(yōu)化選擇為:厚度為3cm。
[0032]為了進(jìn)一步提高淡紫擬青霉的產(chǎn)量，防止生成的粉狀分生孢子被流動(dòng)的空氣帶走，可以在鋪設(shè)的培養(yǎng)料上覆蓋無(wú)紡布，蓋上無(wú)紡布之后，需要將四周壓嚴(yán)實(shí)，25°C恒溫，24小時(shí)內(nèi)不通風(fēng)靜置培養(yǎng)，待產(chǎn)生粉狀分生孢子。
[0033]因?yàn)榈蠑M青霉需要在適宜的濕度和溫度條件下才能很好地生長(zhǎng)，所以需要保持無(wú)紡布具有一定濕潤(rùn)度，當(dāng)無(wú)紡布太干燥，空氣濕度太低時(shí)，淡紫擬青霉的菌絲生長(zhǎng)較慢，當(dāng)濕度過(guò)大時(shí)，透氣性較差，不利于淡紫擬青霉菌絲的生長(zhǎng)及粉狀分生孢子的產(chǎn)生。
[0034]而且在生長(zhǎng)溫度的設(shè)定中，溫度過(guò)低時(shí)，淡紫擬青霉菌絲的生長(zhǎng)速度較慢，當(dāng)溫度過(guò)高時(shí)，菌絲及粉狀分生孢子容易死掉，所以，設(shè)置的適宜溫度優(yōu)化選擇為25°C。
[0035]根據(jù)上述方法生產(chǎn)的每克干品活孢子的含量提高30億以上，而且較傳統(tǒng)方法生產(chǎn)縮短周期8-13天。
[0036]實(shí)施例3:
[0037]基于實(shí)施例2，本發(fā)明還作了如下改進(jìn):
[0038]為了使用香菇菌糠粉生產(chǎn)的淡紫擬青霉的產(chǎn)量最高，以重量份數(shù)計(jì)，所述粉料優(yōu)化配比為:由80%的香菇菌糠粉、17%的麩皮、2%的蔗糖和1%的石膏粉混合制成。當(dāng)香菇菌糠粉的含量較80%少5%以?xún)?nèi)時(shí)，對(duì)淡紫擬青霉的產(chǎn)量沒(méi)有明顯影響，當(dāng)香菇菌糠粉的含量較80%多時(shí)，不利于淡紫擬青霉的菌絲生長(zhǎng)及粉狀分生孢子的產(chǎn)生。
[0039]將所述培養(yǎng)料裝入耐高溫高壓塑料袋中的步驟中，具體包括:
[0040]將制成的所述培養(yǎng)料分裝，并在每一個(gè)分裝的袋子上標(biāo)明具體的裝入量。
[0041]在進(jìn)行滅菌處理時(shí)，為了方便后邊對(duì)培養(yǎng)料進(jìn)行淡紫擬青霉液體菌種接種量的準(zhǔn)確量化，可以將制成的所述培養(yǎng)料分裝，并在每一個(gè)分裝的袋子上標(biāo)明具體的裝入量，根據(jù)裝入培養(yǎng)料量的多少確定各個(gè)袋子中需要接入淡紫擬青霉液體菌種的量。
[0042]滅菌處理結(jié)束，待所述培養(yǎng)料溫度降至28°C -30°C，給其中接入淡紫擬青霉液體菌種，混合均勻的步驟中，具體包括以下步驟:
[0043]滅菌結(jié)束，將溫度降至28°C -30°C的所述培養(yǎng)料與所述淡紫擬青霉液體菌種一起移入接種培養(yǎng)室；
[0044]使用拌料機(jī)將所述培養(yǎng)料和所述淡紫擬青霉液體菌種混合均勻。
[0045]滅菌之后，為了在給培養(yǎng)料接種的過(guò)程中，不會(huì)有新的雜菌混入，可以將滅菌后的培養(yǎng)料移入無(wú)菌接種培養(yǎng)室中進(jìn)行接種處理。
[0046]該接種培養(yǎng)室要求足夠大，45-60平米為宜，三分之二放置培養(yǎng)架，三分之一用于拌種操作。培養(yǎng)室要有溫控、過(guò)濾通風(fēng)設(shè)施、照明與紫外線殺菌燈，放置拌料機(jī)。地面要平整光潔，最好鋪有瓷磚。使用前一周，要徹底關(guān)閉門(mén)窗消毒殺菌、殺蟲(chóng)。
[0047]在接種混合過(guò)程中，為了提高效率，可以使用拌料機(jī)將所述培養(yǎng)料和所述淡紫擬青霉液體菌種混合均勻。傳統(tǒng)的生產(chǎn)方法中使用手工翻拌，效率較低。
[0048]使用拌料機(jī)將所述培養(yǎng)料和所述淡紫擬青霉液體菌種混合均勻的步驟中，包括:
[0049]將所述培養(yǎng)料放入所述拌料機(jī)中，啟動(dòng)拌料機(jī)，邊噴灑所述液態(tài)菌種邊進(jìn)行拌料。
[0050]為了使得淡紫擬青霉液體菌種和培養(yǎng)料能夠充分地混合均勻，可以先將培養(yǎng)料放入拌料機(jī)中，啟動(dòng)拌料機(jī)，在攪拌過(guò)程中將對(duì)應(yīng)量化的淡紫擬青霉液體菌種噴灑其中。
[0051]將接種過(guò)的所述培養(yǎng)料平鋪于層架上的步驟中，具體包括:
[0052]在所述層架上鋪設(shè)塑料薄膜，將所述培養(yǎng)料鋪設(shè)在所述塑料薄膜上。
[0053]為了防止培養(yǎng)料從層架上漏下，可以在層架上鋪設(shè)塑料薄膜，之后，將培養(yǎng)料鋪設(shè)在塑料薄膜上。
[0054]將所述培養(yǎng)料鋪設(shè)在所述塑料薄膜上的步驟之后，
[0055]蓋上無(wú)紡布的步驟之前，還包括:
[0056]在所述培養(yǎng)料的表面噴一層所述淡紫擬青霉液體菌種進(jìn)行封面。使淡紫擬青霉占領(lǐng)優(yōu)勢(shì)，抑制其它雜菌的生長(zhǎng)。[0057]為了能夠有更長(zhǎng)的時(shí)間保持無(wú)紡布的濕度，可以在蓋上無(wú)紡布之后，在無(wú)紡布表面輕噴霧狀凈水進(jìn)行保濕。
[0058]在等待淡紫擬青霉產(chǎn)生粉狀分生孢子的過(guò)程中，為了使得培養(yǎng)料與空氣的接觸面足夠大，可以將長(zhǎng)滿菌絲的培養(yǎng)料進(jìn)行切塊處理，切塊之后相鄰的兩個(gè)培養(yǎng)料菌塊之間留有間隙，增大了培養(yǎng)料和空氣的接觸面，促進(jìn)了淡紫擬青霉粉狀分生孢子的大量產(chǎn)生。
[0059]在25°C恒溫條件下，24小時(shí)內(nèi)不通風(fēng)靜置培養(yǎng)，待菌絲生長(zhǎng)并產(chǎn)生粉狀分生孢子的步驟中，具體包括:
[0060]在上述條件下，經(jīng)5-6天的培養(yǎng)后，所述培養(yǎng)料上長(zhǎng)滿菌絲，但還沒(méi)有產(chǎn)生粉狀分生孢子時(shí)，用薄而鋒利的刀，將所述培養(yǎng)料切成3厘米厚、2厘米寬，15厘米長(zhǎng)的小塊，并翻面，重新覆蓋無(wú)紡布，進(jìn)行后熟培養(yǎng)；
[0061]再經(jīng)過(guò)1-2天的加強(qiáng)保濕通風(fēng)換氣；
[0062]再經(jīng)過(guò)2-3天的加強(qiáng)通風(fēng)控濕，即可產(chǎn)生大量的粉狀分生孢子。
[0063]經(jīng)和傳統(tǒng)的生產(chǎn)方法進(jìn)行比較，本發(fā)明中提供的方法中粉狀分生孢子的單位產(chǎn)量明顯高于傳統(tǒng)的生產(chǎn)方法20%以上。
[0064]在本發(fā)明中，提供了一種新的獲取淡紫擬青霉液體菌種的方法，具體如下:
[0065]制備適宜淡紫擬青霉生長(zhǎng)的試管斜面培養(yǎng)基，接種淡紫擬青霉純菌種，在250C -28°C下培養(yǎng)，培養(yǎng)7天出現(xiàn)淡紫色粉狀分生孢子后待用；
[0066]制備適宜淡紫擬青霉生長(zhǎng)的500mL的三角瓶液體培養(yǎng)基，接種2塊I平方厘米的由上述試管斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)的淡紫擬青霉的一級(jí)試管斜面菌種，置于28°C的恒溫?cái)嚢杵魃?，每分?200轉(zhuǎn)攪拌培養(yǎng)，48小時(shí)后取樣檢驗(yàn)，確認(rèn)無(wú)其它雜菌污染后，達(dá)到72小時(shí)即可待用；
[0067]制備適宜淡紫擬青霉生長(zhǎng)的500升的大型發(fā)酵罐培養(yǎng)基，將由上述的三角瓶液體培養(yǎng)基培養(yǎng)成熟的三角瓶淡紫擬青霉液體菌種，通過(guò)無(wú)菌操作接入發(fā)酵罐中，利用空壓機(jī)和空氣過(guò)濾器,持續(xù)通入無(wú)菌空氣攪拌培養(yǎng),發(fā)酵罐內(nèi)保持0.03兆帕的壓力，28°C恒溫培養(yǎng)96小時(shí)，經(jīng)取樣檢驗(yàn)無(wú)其它雜菌污染，即可用于固態(tài)培養(yǎng)接種。
[0068]通過(guò)該方法制得淡紫擬青霉的過(guò)程中，試管菌種的培養(yǎng)只需要7天，淡紫擬青霉液體菌種的培養(yǎng)只需要3天，三級(jí)液體種擴(kuò)大培養(yǎng)只需要4天，而固體培養(yǎng)只需要10天，相比較于傳統(tǒng)的制備方法，試管菌種需要10天，淡紫擬青霉液體菌種需要6天，三級(jí)液體種擴(kuò)大培養(yǎng)需要6天，固體培養(yǎng)需要10-15天而言，提高了制備效率。
[0069]綜上所述，和傳統(tǒng)的生產(chǎn)方法相比，本發(fā)明能夠產(chǎn)生的有益效果在于:
[0070]1、傳統(tǒng)方法使用麩皮等傳統(tǒng)材料生產(chǎn)淡紫擬青霉，材料成本高，不利于普及推廣；
[0071]本發(fā)明利用香菇廢菌糠來(lái)生產(chǎn)淡紫擬青霉，僅材料成本每噸即可節(jié)約1545元以上，還可以變廢為寶，減少環(huán)境污染，并可產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟(jì)效益。[0072]2、傳統(tǒng)方法在培養(yǎng)料接種時(shí)采用人工翻拌，既費(fèi)工費(fèi)時(shí)，且拌種不均，容易造成雜菌污染，成品率低；
[0073]本發(fā)明采用攪拌機(jī)拌料接種，不僅用工節(jié)省40%以上，而且菌料混合均勻，不易污染雜菌，成品率高；淺盤(pán)直接改層架，也減少了資金投入。
[0074]3、傳統(tǒng)方法是將培養(yǎng)料長(zhǎng)滿淡紫擬青霉菌絲后，脫盤(pán)風(fēng)干。
[0075]本專(zhuān)利是在菌絲長(zhǎng)滿，產(chǎn)生粉狀分生孢子前，切成小塊增大其表面積，通過(guò)保濕通氣，促其表面氣生菌絲生長(zhǎng)，再通過(guò)后期加大通風(fēng)透氣控濕，促使粉狀分生孢子的大量發(fā)生。利用無(wú)紡布覆蓋，既透氣保濕，也不會(huì)因空氣流動(dòng)而損失粉狀分生孢子。
[0076]較傳統(tǒng)方法，本發(fā)明提供的方法能夠使得每克干品活孢子含量提高30億以上，而且較傳統(tǒng)方法縮短生產(chǎn)周期8-13天。
[0077]以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法，其特征在于，利用香菇菌糠生產(chǎn)農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法，其特征在于，具體包括以下步驟: 以重量份數(shù)計(jì)，將77%-80%的香菇菌糠粉、15%-17%的麩皮、1.8%-2%的蔗糖和0.8%_1%的石膏粉混合制成粉料； 根據(jù)所述粉料和水的比例為1:0.4-1:0.5，在所述粉料中加入水，并攪拌均勻制成培養(yǎng)料； 將所述培養(yǎng)料裝入耐高溫高壓塑料袋中，扎緊袋口勿使漏氣，置于壓力為0.147Mp，溫度為129°C的滅菌環(huán)境中，進(jìn)行2-2.5小時(shí)持續(xù)滅菌處理； 滅菌處理結(jié)束，待所述培養(yǎng)料溫度降至28°C _30°C，給其中接入淡紫擬青霉液體菌種，混合均勻；其中所述培養(yǎng)料和所述淡紫擬青霉液體菌種的加入比例為1:0.65-1:0.6 ； 將接種過(guò)的所述培養(yǎng)料平鋪在層架上，鋪設(shè)厚度為3-3.3厘米，蓋上無(wú)紡布，四周壓嚴(yán)實(shí)，25°C恒溫，2 4小時(shí)內(nèi)不通風(fēng)靜置培養(yǎng)，待產(chǎn)生粉狀分生孢子； 將產(chǎn)生了所述粉狀分生孢子的菌塊通過(guò)自然風(fēng)干即可。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法，其特征在于， 以重量份數(shù)計(jì),所述粉料由80%的香菇菌糠粉，17%的麩皮、2%的鹿糖和1%的石膏粉混合制成。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法，其特征在于， 將所述培養(yǎng)料裝入耐高溫高壓塑料袋中的步驟中，具體包括: 將制成的所述培養(yǎng)料分裝，并在每一個(gè)分裝的袋子上標(biāo)明具體的裝入量。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法，其特征在于， 滅菌處理結(jié)束，待所述培養(yǎng)料溫度降至28°C -30°C，給其中接入淡紫擬青霉液體菌種，混合均勻的步驟中，具體包括以下步驟: 滅菌結(jié)束，將溫度降至28°C _30°C的所述培養(yǎng)料與所述淡紫擬青霉液體菌種一起移入接種培養(yǎng)室； 使用拌料機(jī)將所述培養(yǎng)料和所述淡紫擬青霉液體菌種混合均勻。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法，其特征在于， 使用拌料機(jī)將所述培養(yǎng)料和所述淡紫擬青霉液體菌種混合均勻的步驟中，包括: 將所述培養(yǎng)料放入所述拌料機(jī)中，啟動(dòng)拌料機(jī)，邊噴灑所述淡紫擬青霉液態(tài)菌種邊進(jìn)行拌料。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法，其特征在于， 將接種過(guò)的所述培養(yǎng)料平鋪于層架上的步驟中，具體包括: 在所述層架上鋪設(shè)塑料薄膜，將所述培養(yǎng)料鋪設(shè)在所述塑料薄膜上。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法，其特征在于， 將所述培養(yǎng)料鋪設(shè)在所述塑料薄膜上的步驟之后， 蓋上無(wú)紡布的步驟之前，還包括: 在所述培養(yǎng)料的表面噴一層所述淡紫擬青霉液體菌種進(jìn)行封面。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法，其特征在于，25°C恒溫，24小時(shí)內(nèi)不通風(fēng)靜置培養(yǎng)，待產(chǎn)生粉狀分生孢子的步驟中，具體包括:在上述條件下，經(jīng)5-6天的培養(yǎng)后，所述培養(yǎng)料上長(zhǎng)滿菌絲，但還沒(méi)有產(chǎn)生粉狀分生孢子時(shí)，用刀，將所述培養(yǎng)料切成3厘米厚、2厘米寬，15厘米長(zhǎng)的小塊，并翻面，重新覆蓋無(wú)紡布，進(jìn)行后熟培養(yǎng)； 再經(jīng)過(guò)1-2天的加強(qiáng)保濕通風(fēng)換氣； 再經(jīng)過(guò)2-3天的加強(qiáng)通風(fēng)控濕，即可產(chǎn)生大量的粉狀分生孢子。
10.根據(jù)權(quán)利要求2所述的農(nóng)用線蟲(chóng)防控微生物淡紫擬青霉的生產(chǎn)方法，其特征在于，所述淡紫擬青霉液體菌種的獲取方法如下: 制備適宜淡紫擬青霉生長(zhǎng)的試管斜面培養(yǎng)基，接種淡紫擬青霉純菌種，在25°C -28°C下培養(yǎng)，培養(yǎng)7天出現(xiàn)淡紫色粉狀分生孢子后待用； 制備適宜淡紫擬青霉生長(zhǎng)的500mL的三角瓶液體培養(yǎng)基，接種2塊I平方厘米的由上述試管斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)的淡紫擬青霉的一級(jí)試管斜面菌種，置于28°C的恒溫?cái)嚢杵魃?，每分?200轉(zhuǎn)攪拌培養(yǎng)，48小時(shí)后取樣檢驗(yàn)，確認(rèn)無(wú)其它雜菌污染后，達(dá)到72小時(shí)即可待用； 制備適宜淡紫擬青霉生長(zhǎng)的500升的大型發(fā)酵罐培養(yǎng)基，將由上述的三角瓶液體培養(yǎng)基培養(yǎng)成熟的三角瓶淡紫擬青霉液體菌種，通過(guò)無(wú)菌操作接入發(fā)酵罐中，利用空壓機(jī)和空氣過(guò)濾器,持續(xù)通入無(wú)菌空氣攪拌培養(yǎng),發(fā)酵罐內(nèi)保持0.03兆帕的壓力，28°C恒溫培養(yǎng)96小時(shí)，經(jīng)取樣檢驗(yàn)無(wú)其它雜菌污染，即可用于固態(tài)培養(yǎng)接種。
【文檔編號(hào)】C12R1/79GK103589649SQ201310552913
【公開(kāi)日】2014年2月19日 申請(qǐng)日期:2013年11月8日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月8日
【發(fā)明者】張順凱, 周偉, 楊先新, 焦海濤, 王群, 劉芳芳 申請(qǐng)人:湖北森源生態(tài)科技股份有限公司