專利名稱：包含轉(zhuǎn)基因植物材料的穩(wěn)定組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及在工業(yè)處理(如食品或飼料組合物的制造)中酶的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
在家畜飼養(yǎng)中應(yīng)用酶已成為極平常的措施。這些酶在由工業(yè)酶生產(chǎn)者操作的大規(guī)模發(fā)酵罐中生長(zhǎng)的微生物產(chǎn)生。發(fā)酵期的最后，微生物的肉湯常經(jīng)歷一系列過濾步驟以從酶中分離生物量。酶溶液或是在添加各種穩(wěn)定劑之后作為液體或是處理成干制劑后出售。
酶液和干制劑由飼料工業(yè)以商業(yè)規(guī)模利用。液體在造粒(pelleting)之后用于飼料以防止通過造粒處理引起的酶的熱失活。問題是在最終飼料制劑中酶的數(shù)量十分小，這使實(shí)現(xiàn)酶分子在飼料中均質(zhì)分布比較困難。液體明顯地比干燥成分混合起來更困難。在造粒之后把液體加到飼料中需要特定的設(shè)備，而目前大多飼料制造廠中沒有這些設(shè)備。
另一方面，酶的干制劑有在造粒過程中酶熱失活的缺點(diǎn)。在造粒過程中，飼料通過模具壓縮，形成的條塊切割成不同長(zhǎng)度的合適的小丸。當(dāng)進(jìn)入造粒設(shè)備時(shí)團(tuán)塊的濕度通常在大約18％到大約19％之間。在造粒之后，立即把溫度升高到60-95℃。高含水量和高溫的結(jié)合影響對(duì)大多數(shù)酶有害。這些缺點(diǎn)在飼料的其它類型的熱變形處理中(如擠壓(extrusion)和膨脹(expansion))也同樣存在。
為了克服這些問題，有人發(fā)表了一種用于生產(chǎn)包含一種或多種酶的熱穩(wěn)定性酶預(yù)混物的方法，所說的酶在商業(yè)飼料造粒處理中保留了有效水平的活性(Haarakilta，A(1988)歐洲專利申請(qǐng)#0257996 B1)。所說方法包括的步驟如下把生理上可接受的并能吸收含水的酶溶液的谷物載體和含水的酶溶液混合一段時(shí)間，這一時(shí)間足以把一種或多種酶吸附在載體上以形成載體/酶復(fù)合物；造粒載體/酶復(fù)合物；然后把造粒的載體/酶復(fù)合物干燥到含水量在7％到15％之間，優(yōu)選地是小于大約10％(重量比)。這種方法很費(fèi)工，而且就我們所知沒有產(chǎn)生提高的造?？剐?。
各種酶制造廠商開發(fā)了不同的制劑方法以在飼料造粒和存儲(chǔ)期間提高干酶產(chǎn)品的穩(wěn)定性。已有人提出，例如，特征在于產(chǎn)品顆粒被涂上一層粒子的制劑會(huì)提高對(duì)造粒條件的抗性(WO 92/12645)。這些努力強(qiáng)調(diào)了這一問題的重要性和工業(yè)上對(duì)解決這一應(yīng)用問題的需要。
發(fā)明概述現(xiàn)在，我們令人驚奇地發(fā)現(xiàn)當(dāng)酶以轉(zhuǎn)基因植物材料的形式添加到飼料中時(shí)，酶對(duì)熱變形處理(如造粒)更具抵抗力，在植物材料中這些酶通過轉(zhuǎn)基因的表達(dá)產(chǎn)生。這樣，本發(fā)明公開了包含作為有效成分的多肽的熱變形處理的組合物，所說的組合物可以通過使包含轉(zhuǎn)基因植物材料的原材料經(jīng)受熱變形處理獲得，由于在所說植物材料中轉(zhuǎn)基因的表達(dá)，所說的多肽已經(jīng)在該植物材料中生物合成。優(yōu)選的熱變形處理是造粒、擠壓和膨脹。
本發(fā)明公開了這些組合物作為動(dòng)物飼料或其預(yù)混物的用途。具體地說，在促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)的過程中，使用本發(fā)明的組合物，其中給動(dòng)物飼喂包含這些組合物的飼料。
本發(fā)明進(jìn)一步公開了包含作為有效成分的多肽的熱變形處理的組合物的制備方法。
發(fā)明詳述在本發(fā)明中應(yīng)用的熱變形處理經(jīng)常在商業(yè)飼料處理中使用，其中處理方法以許多形式存在，如膨脹、擠壓和造粒，或這些方法的結(jié)合。所有這些處理的特征在于熱能(通常以蒸汽的形式)和機(jī)械能(例如，通過螺旋驅(qū)動(dòng)飼料)的輸入。
在飼料生產(chǎn)中，造粒是經(jīng)典的處理方法，它也可以如對(duì)任何原材料一樣應(yīng)用熱變形處理?；旌显牧希⒃诩由蠋装偷牡蛪赫羝蟀言牧限D(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)模具上。模具通常包含幾百個(gè)洞，產(chǎn)物通過洞。通過模具里的旋轉(zhuǎn)滾筒擠壓。
擠壓是一種用于飼料生產(chǎn)的替代方法，它可以如用于任何原材料一樣用作熱變形地處理。
原材料放在通常由幾個(gè)較小的模具的壓力環(huán)組成的一個(gè)無底的螺絲上。此螺絲把產(chǎn)物推進(jìn)模具中。溫度升高是通過螺絲和外套之間的產(chǎn)物摩擦和壓力增加造成的。擠壓機(jī)的內(nèi)部和外部的壓力不同導(dǎo)致部分水在出口汽化，這樣就使產(chǎn)物膨脹。
膨脹是十分類似于擠壓但不以限制的方式使材料成形的方法，因?yàn)樗ǔ２煌ㄟ^模具。
產(chǎn)生用于動(dòng)物飼料中的酶的替代方法已通過在植物和植物種子中表達(dá)編碼飼料酶(如微生物肌醇六磷酸酶)的基因發(fā)明出來(Pen等，EP-A-0 449375)。直接的或是在處理后植物或植物種子表達(dá)的這些酶的使用與動(dòng)物飼料中的使用是協(xié)調(diào)的。
本發(fā)明的轉(zhuǎn)基因植物材料優(yōu)選地包含一種或多種所需的多肽，這種多肽是包含在衍生植物材料的植物中的轉(zhuǎn)基因的表達(dá)產(chǎn)物。這通過把包含編碼所需的多肽的DNA序列的表達(dá)構(gòu)建體導(dǎo)入植物來達(dá)到，其中多肽具有相應(yīng)的活性，例如肌醇六磷酸酶(其中詳尺的描述可在Pen等，EP-A-0 449 375中找到)。本文中的轉(zhuǎn)基因植物和轉(zhuǎn)基因植物材料定義為包括植物(以及所說植物的部分和細(xì)胞)及其后代，這些后代利用重組DNA技術(shù)遺傳改良以在植物或植物器官中產(chǎn)生、增強(qiáng)或改變所需的多肽的產(chǎn)生。在本文中，轉(zhuǎn)基因可理解為指在轉(zhuǎn)基因植物中的特定的遺傳修飾，即核苷酸序列。在本發(fā)明的組合物中，多肽用作活性成分，由此，活性成分被限定為由轉(zhuǎn)基因編碼的。
在本發(fā)明中使用的多肽在轉(zhuǎn)基因植物中可在所有組織、所有發(fā)育階段組成性地產(chǎn)生。在某些情況下，如在植物細(xì)胞壁降解酶存在的情況下，可能需要限制轉(zhuǎn)基因表達(dá)到植物的特定部分，在此部分中，表達(dá)的所需的多肽不干擾宿主植物的發(fā)育。因此，編碼所需多肽的基因也可以以階段和/或組織特異性的方式表達(dá)，或者可替代的是，可把這些基因置于可誘導(dǎo)的啟動(dòng)子的控制之下。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中使用了完整的或磨碎(milling orgringing)之后的種子，其中所需的多肽使用種子特異性啟動(dòng)子特異性表達(dá)。然而，本領(lǐng)域技術(shù)人員知道多肽在其它植物器官中表達(dá)是同樣切實(shí)可行的，而且如在本發(fā)明中公開的應(yīng)用中可以產(chǎn)生類似的優(yōu)點(diǎn)。
植物物種的選擇主要由植物或其部分的預(yù)期的用途和對(duì)轉(zhuǎn)化的適應(yīng)性確定。在本發(fā)明內(nèi)，所選擇的植物包括(但不限于)以下作物生產(chǎn)可食用花的作物，如花椰菜類(如甘藍(lán))、朝鮮薊(洋薊)，生產(chǎn)水果的作物，如蘋果類(蘋果屬，例如Malus domesticus)、香蕉類(芭蕉屬，例如，小果野蕉)、漿果類(如葡萄干，茶鑣子屬，例如，紅醋栗)、櫻桃類(如甜櫻桃，梅，例如，歐洲甜櫻桃)、黃瓜類(黃瓜屬，例如，黃瓜)、葡萄類(葡萄屬，例如，葡萄)、檸檬類(檸檬)、甜瓜類(甜瓜)、堅(jiān)果類(如核桃，核桃屬，例如，核桃；花生，落花生)、桔子類(柑桔屬，例如，Citrus maxima)、桃類(梅屬，例如，桃)、梨類(梨屬，例如，洋梨)、梅類(李屬，例如，歐洲李)、草莓類(草莓屬，例如，F(xiàn)ragaria moschata)、番茄類(番茄屬，例如，番茄)，葉用作物，如苜蓿類(苜蓿屬，例如，紫苜蓿)、甘藍(lán)類(例如，甘藍(lán))、菊苣類(菊苣屬，例如，Cichoreum endivia)、韭類(蔥屬，例如，蔥)、萵苣類(萵苣屬，例如，生菜)、菠菜類(菠菜屬，例如，菠菜)、煙草類(煙草屬，例如，煙草)，根用作物，如葛類(竹芋屬，例如，竹芋)、甜菜類(甜菜屬，例如，甜菜)、胡蘿卜類(Daucus，例如，carota)、木薯類(Manihot，例如，esculenta)、蘿卜類(蕓苔屬，例如，蕪菁)、小蘿卜類(蘿卜屬，例如，藍(lán)花子)、薯蕷類(薯蕷屬，例如，有刺甘薯)、甘薯(lpomoea batatas)以及生產(chǎn)種子的作物，如豆類(菜豆屬，例如，菜豆)、豌豆類(豌豆，例如，豌豆)，大豆類(大豆屬，例如，大豆)、小麥類(小麥屬，例如，小麥)、大麥類(大麥屬，例如，大麥)、玉米類(玉蜀黍?qū)?，例如，玉蜀?、稻類(稻屬，例如，稻)、歐洲油菜、小米(稷屬)、向日葵類(向日葵)、燕麥類(燕麥)，生產(chǎn)塊莖的作物，如大頭菜類(蕓苔屬，例如，甘藍(lán))，土豆類(茄屬，例如，馬鈴薯)等等。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是當(dāng)多肽以有效成分添加到組合物中并以轉(zhuǎn)基因植物材料的形式存在時(shí)，與常規(guī)的多肽添加到組合物中的方式相比，多肽在熱變形處理步驟期間(如造粒)對(duì)滅活具有更大的抗性。很明顯，這些優(yōu)點(diǎn)不必要限制在本申請(qǐng)的特定實(shí)施例的特定實(shí)施方案中，即造粒并用作動(dòng)物飼料的酶(如添加到組合物中的肌醇六磷酸酶或木聚糖酶)。相對(duì)地，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)使用于任何受熱變形處理并包含一種或多種多肽作為有效成分的組合物。在多肽有敏感的生物學(xué)活性的情況下(如對(duì)熱滅活敏感)，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)就更突出。在本文中，熱敏感的多肽定義為這樣的多肽，即在受到本發(fā)明中使用的熱變形處理時(shí)這些多肽失去主要的生物活性。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，多肽和/或編碼它們的DNA序列相對(duì)于DNA序列在其中表達(dá)的轉(zhuǎn)基因宿主植物是異源的。本文中的異源可理解為DNA序列和/或多肽對(duì)宿主有機(jī)體不是天然的，即它們?cè)从谄渌参锓N類、哺乳動(dòng)物或微生物，如真菌或細(xì)菌。當(dāng)糖基化的蛋白質(zhì)在轉(zhuǎn)基因植物中表達(dá)時(shí)，本發(fā)明尤其是有優(yōu)勢(shì)的，它們的糖基化可能和這些蛋白質(zhì)的天然存在的對(duì)應(yīng)物不同。
包括在本發(fā)明中的優(yōu)選的酶是在動(dòng)物飼料中使用的酶。本文中的動(dòng)物飼料可理解為也包括寵物飼料。這些酶的功能是提高飼料轉(zhuǎn)化率，例如，通過降低粘性或通過降低一定的飼料化合物的抗?fàn)I養(yǎng)影響。另外，可以使用飼料酶(例如，肌醇六磷酸酶)以減少糞便中對(duì)環(huán)境有害的化合物的量。用于這些目的優(yōu)選的酶有磷酸酶，其中優(yōu)選地是肌醇六磷酸酶和/或酸性磷酸酶；糖酶，如淀粉分解酶和植物細(xì)胞壁降解酶(其中優(yōu)選地是纖維素酶、半纖維素酶或半乳聚糖酶)；蛋白酶(優(yōu)選的蛋白酶是中性和/或酸性pH值最優(yōu)的蛋白酶)；脂酶(其中優(yōu)選的是磷脂酶，如哺乳動(dòng)物的胰磷脂酶A2)。此外，包括在本發(fā)明中的多肽也包括非酶促生物活性物，如用作疫苗和/或多肽的、用工程方法使其具有加大含量的必需氨基酸的抗原決定簇。
本領(lǐng)域技術(shù)人員明白本發(fā)明同樣地適用于所需的多肽的組合，其中所說的組合包括表達(dá)各種所需多肽的不同轉(zhuǎn)基因植物的組合，另外還包括在一種轉(zhuǎn)基因植物中共表達(dá)的各種所需多肽的組合。
在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案中，當(dāng)黑曲霉肌醇六磷酸酶包含在歐洲油菜(Brassica napus)的磨碎的種子中，而且酶的基因在其中表達(dá)時(shí)，試驗(yàn)了黑曲霉肌醇六磷酸酶的造粒穩(wěn)定性。黑曲霉肌醇六磷酸酶基因的克隆在其它文獻(xiàn)中有描述(van Gorcom等EP-A-0 420 358)。在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，曲霉屬內(nèi)源木聚糖酶(endoxylanase)的對(duì)造粒穩(wěn)定的制劑通過編碼這種酶的真菌基因在煙草種子中表達(dá)提供。曲霉屬內(nèi)源木聚糖酶基因的克隆由de Graaff等在EP-A-0 463 706中詳細(xì)描述。
實(shí)施例1黑曲霉肌醇六磷酸酶基因在cruciferin啟動(dòng)子控制下在歐洲油菜中穩(wěn)定的種子特異性表達(dá)應(yīng)用于真菌肌醇六磷酸酶在歐洲油菜中的種子特異性表達(dá)的方法之細(xì)節(jié)由Pen等在EP-A-0 449 375中描述(1991)，本文一并參考。實(shí)質(zhì)上，二元載體pMOG23(以大腸桿菌K12 DH5α于1990年1月29日保藏在CentraalBureau voor Schimmel Cultures，保藏號(hào)為CBS 102.90)用作肌醇六磷酸酶的種子特異性表達(dá)載體的構(gòu)建起點(diǎn)。種子特異性肌醇六磷酸酶的表達(dá)盒在pMOG23的多接頭中裝配，并包含下列必需成分。肌醇六磷酸酶cDNA的種子特異性轉(zhuǎn)錄與其終止分別通過衍生自編碼歐洲油菜12S貯藏蛋白cruciferin的基因的5-和3調(diào)節(jié)序列控制(cruA基因；Ryan等，1989，核酸研究.173584)。用苜蓿花葉病毒RNA4前導(dǎo)序列來穩(wěn)定mRNA(Bredcro等，1980，核酸研究.82213)，同時(shí)為了實(shí)現(xiàn)肌醇六磷酸酶的胞外表達(dá)，煙草PR-S信號(hào)肽(Cornelissen等，1986，自然，321531)符合讀框地偶聯(lián)到編碼成熟蛋白質(zhì)的肌醇六磷酸酶的cDNA部分。在和大腸桿菌K-12菌株RK2013(包含質(zhì)粒pRK2013)的三親交配時(shí)(Ditta等，1980，美國(guó)科學(xué)院學(xué)報(bào)，777347)，把這個(gè)包含嵌合的肌醇六磷酸酶基因的二元載體轉(zhuǎn)移進(jìn)土壤桿菌屬菌株LBA4404(Hoekema等，1983，自然，303179)，此菌株包含帶有對(duì)T-DNA轉(zhuǎn)移進(jìn)植物必須的毒性基因的質(zhì)粒。用此菌株轉(zhuǎn)化油菜種子(歐洲油菜)。為了這個(gè)目的，從5至6周的植物(正好在開花前)采取的表面滅菌的莖段事先在MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)24小時(shí)(Fry等(1987)，植物細(xì)胞報(bào)道，6，321)，然后在有同樣培養(yǎng)基的新鮮平板上和土壤桿菌共培養(yǎng)48小時(shí)。轉(zhuǎn)基因小植物從在選擇培養(yǎng)基(500mg/l羧芐青霉素，40mg/l巴龍霉素)中生長(zhǎng)的莖段上再生，然后進(jìn)一步通過Pen等在EP-A-0 449 375中描述的方法分析。
使用上述方法，在歐洲油菜中肌醇六磷酸酶的表達(dá)水平達(dá)到了與大約500FTU/g相對(duì)應(yīng)的多達(dá)10％的可溶性蛋白質(zhì)的水平。肌醇六磷酸酶活性物的一個(gè)單位(FTU)定義為在37℃和pH 5.5時(shí)以1μmol/分鐘的速率從1.5mM肌醇六磷酸鈉釋放無機(jī)磷的酶的量。
實(shí)施例2造粒過程中歐洲油菜中的肌醇六磷酸酶的穩(wěn)定性造粒條件如下造粒在55℃之后和造粒之后75℃的溫度下獲得。進(jìn)行了兩個(gè)獨(dú)立的試驗(yàn)，一個(gè)以實(shí)驗(yàn)室規(guī)模進(jìn)行，另一個(gè)以工業(yè)規(guī)模進(jìn)行。
令人驚奇地是，我們發(fā)現(xiàn)在歐洲油菜中產(chǎn)生的黑曲霉肌醇六磷酸酶實(shí)質(zhì)上比目前市售的黑曲霉肌醇六磷酸酶制劑對(duì)造粒條件更具抵抗力。由于使用了磨碎的種子，酶的穩(wěn)定性明顯地不依賴于種子的完墊性。
Natuphoso是一種包含黑曲霉肌醇六磷酸酶的市售產(chǎn)品，它可以從BASF，Ludwigshafen，德國(guó)獲得。
表1造粒對(duì)不同酶制劑的穩(wěn)定性影響。<
>實(shí)施例3種子磨碎過程中歐洲油菜中的肌醇六磷酸酶的穩(wěn)定性在歐洲油菜中肌醇六磷酸酶的商業(yè)開發(fā)意味著種子的磨碎。因而，比較了不同的磨碎條件以評(píng)價(jià)在磨碎過程中在歐洲油菜中表達(dá)的肌醇六磷酸酶活性的穩(wěn)定性。所使用的磨碎條件是本領(lǐng)域的熟練技術(shù)人員熟知的。結(jié)果表明磨碎的方法(表2)不強(qiáng)烈影響酶的穩(wěn)定性。
表2磨碎條件對(duì)在歐洲油菜中表達(dá)的肌醇六磷酸酶的穩(wěn)定性的影響。<
>
實(shí)施例4內(nèi)源木聚糖酶在CaMV 35S啟動(dòng)子控制下在煙草種子中穩(wěn)定表達(dá)如de Graaff等在EP-A-0 463 706中的詳盡描述克隆了曲霉屬內(nèi)源木聚糖酶基因。包含曲霉屬內(nèi)源木聚糖酶基因的大腸桿菌質(zhì)粒plM100在1990年7月7日保藏在Centraal bureau voor Schimmel cultures，定名為CBS322.90。用plM100作為模板使用融合PCR，除去木聚糖酶基因中的單一內(nèi)含子。這個(gè)人工cDNA在類似于詳盡描述的在煙草中的肌醇六磷酸酶的表達(dá)過程之后(Pen等，1993，生物技術(shù)，10811)在煙草種子中表達(dá)。實(shí)質(zhì)上，編碼成熟酶的cDNA片段在二元表達(dá)載體pMOG29中(Pen等，1992，生物技術(shù)，10292)符合讀框地融合到編碼煙草PR-S蛋白質(zhì)的信號(hào)肽序列上(Cornelissen等，1986，自然，321531)。在pMOG29中的表達(dá)盒由下列成分組成有兩個(gè)增強(qiáng)子的組成型花椰菜花葉病毒(CaMV)35S啟動(dòng)子(Guilley等，1982，細(xì)胞，30763)；穩(wěn)定mRNA的合成苜?；ㄈ~病毒RNA4前導(dǎo)序列(Bredero等，1980，核酸研究，82213)；根癌土壤桿菌胭脂氨酸合酶(NOS)終止子(Bevan，1984，核酸研究，128711)。這種包含嵌合內(nèi)源木聚糖酶基因的二元載體在和大腸桿菌K-12菌株RK2013(包含質(zhì)粒pRK2013)的三親交配時(shí)(Ditta等，1980，美國(guó)科學(xué)院學(xué)報(bào)，777347)轉(zhuǎn)移進(jìn)土壤桿菌屬菌株LBA4404(Hoekema等，1983，自然，303179)中，此菌株中包含帶有對(duì)T-DNA轉(zhuǎn)移進(jìn)植物必需的毒性基因的質(zhì)粒。用此菌株按Horschal等的方法(1985，科學(xué)，2271229)轉(zhuǎn)化煙草(煙草cv Petit Havana SR1)葉圓片。轉(zhuǎn)基因植物在包含100mg/l的卡那霉素的培養(yǎng)基上選擇。
這種內(nèi)源木聚糖酶基因在煙草中的部分表達(dá)產(chǎn)生了最大表達(dá)水平為1.5％的可溶性蛋白質(zhì)，在種子中相當(dāng)于大約1625EXU/克種子。內(nèi)源木聚集糖酶的一個(gè)活性單位(EXU)定義為在40℃和pH 3.5下釋放3.346μmol還原糖的酶的量，其中還原糖作為來自燕麥屬德國(guó)小麥的1％木聚糖的木糖等價(jià)物測(cè)定。
實(shí)施例5造粒過程中煙草種子內(nèi)源木聚糖酶的穩(wěn)定性造粒條件如下飼料在處理期間的65℃和造粒之后的75℃的溫度下獲得。試驗(yàn)以實(shí)驗(yàn)室規(guī)模進(jìn)行。
磨碎的以Lyxasan Forteo商標(biāo)出售的種子和微生物酶產(chǎn)品(可從BASF，Ludwigshafen，德國(guó)獲得)添加到飼料中至最終濃度為6500EXU/kg飼料。
由此可知，在種子中產(chǎn)生的內(nèi)源木聚糖酶實(shí)質(zhì)上比目前包含微生物酶的制劑對(duì)造粒更具抵抗力。
表3造粒對(duì)內(nèi)源木聚糖酶不同制劑的穩(wěn)定性的影響
權(quán)利要求
1.一種包含作為有效成分的多肽的熱變形處理的組合物，所說的組合物可以通過使包含轉(zhuǎn)基因植物材料的原材料經(jīng)受熱變形處理獲得，由于在所說植物材料中轉(zhuǎn)基因的表達(dá)，所說的多肽已經(jīng)在該植物材料中生物合成。
2.按照權(quán)利要求1的組合物，其中所說的熱變形處理選自造粒、擠壓和膨脹，或這些處理的結(jié)合。
3.按照權(quán)利要求1-2任一之組合物，其中所說的轉(zhuǎn)基因植物材料是種子。
4.按照權(quán)利要求1-3任一之組合物，其中所說的多肽對(duì)于轉(zhuǎn)基因植物是異源的。
5.按照權(quán)利要求1-4任一之組合物，其中所說的多肽是酶。
6.按照權(quán)利要求5的組合物，其中所說的酶選自磷酸酶、糖酶、蛋白酶以及脂酶。
7.按照權(quán)利要求6的組合物，其中所說的酶是真菌肌醇六磷酸酶和/或真菌木聚糖酶。
8.權(quán)利要求1-7任一所限定的組合物用作動(dòng)物飼料或其預(yù)混物的用途。
9.一種用于促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)的方法，其特征在于用包含權(quán)利要求1-7任一所限定的組合物的飼料飼喂動(dòng)物。
10.一種制備包含作為有效成分的多肽的熱變形處理的組合物的方法，其特征在于使包含轉(zhuǎn)基因的植物材料的原材料受到熱變形處理，由于在所說植物材料中轉(zhuǎn)基因的表達(dá)，所說的多肽已經(jīng)在該植物材料中生物合成，所說處理優(yōu)選地選自造粒、擠壓或膨脹。
全文摘要
本發(fā)明公開了包含作為有效成分的多肽的熱變形處理的組合物。所說的組合物可以通過使包含轉(zhuǎn)基因植物材料的原材料經(jīng)受熱變形處理(如造粒、擠壓或膨脹)獲得，由于在所說植物材料中轉(zhuǎn)基因的表達(dá)，所說的多肽已經(jīng)在該植物材料中生物合成。本發(fā)明的組合物較好地是用作動(dòng)物飼料或其預(yù)混物。
文檔編號(hào)A23K1/14GK1168084SQ96191368
公開日1997年12月17日 申請(qǐng)日期1996年11月6日 優(yōu)先權(quán)日1995年11月7日
發(fā)明者R·F·比德克爾 申請(qǐng)人:吉斯特·布羅卡迪斯股份有限公司