專利名稱：培植蛹蟲草的培養(yǎng)基及其方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于培植蛹蟲草的培養(yǎng)基及利用該培養(yǎng)基培植蛹蟲草的方法。
背景技術(shù)：
蛹蟲草又名北蟲草，是蟲草屬的模式種。北蟲草與冬蟲夏草極為相似，均是動物與植物的聯(lián)合體，所以兩者具有相同或相近的藥物組份。由于蟲草中含有10余種甾醇類和10余種核苷類化合物、6種二肽類化合物、蟲草多糖、多種維生素及無機鹽等，且含有20多種氨基酸和核酸，這些豐富均衡的營養(yǎng)成份特別適用于免疫功能低下者，高脂血癥和病后體虛患者服用，其獨特的抗菌、抗病毒、抗癌，以及在提高機體抗病能力方面是任何食品都無法比擬的。
然而，野生蟲草遠不能滿足人類的需要，人工大量采挖現(xiàn)已造成其嚴重的匱乏，故人工培植蟲草類物種是人類一直在探索的課題。到目前為止，北蟲草是唯一的可馴培的冬蟲夏草，在具備一定條件下，人工培植的北蟲草的藥效成份可近似或高于野生冬蟲夏草。
最近，人們開發(fā)具備產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)條件的北蟲草方面積累了相當(dāng)多的經(jīng)驗，例如，在CN1274006A公開的“人工培育冬蟲夏草的方法”中，就采用將真菌種接入以大米20-25％、玉米10-15％、谷糖4-8％、蠶蛹1-2％及由水、葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、檸檬酸三胺、維生素B配成占重量份額的50-55％營養(yǎng)液的培養(yǎng)基中，然后再在避光和光照以及晝夜溫差近10℃等條件下刺激生長。
除此之外，CN1421524A還公開了一種名稱為“蛹蟲草生長基質(zhì)的配方及配制方法”的專利技術(shù)。其生長基質(zhì)即培養(yǎng)基也是由葡萄糖、蛋白胨、檸檬酸、硫酸鎂、維生素B、水、蛹蟲粉和糙米組成。
另外，CN1148623A還公開了一種“北冬蟲草菌絲體發(fā)酵工藝”的專門用于培養(yǎng)北冬蟲夏草菌絲粉體的方法。該方法中，將北蟲草子實體中獲得的蛹草頭孢菌種，在PDA斜面培養(yǎng)基上恒溫培養(yǎng)7天制成斜面菌種，再將該菌種放入搖瓶內(nèi)振蕩3-4天，將純熟好的菌種放入溫度25-27℃，風(fēng)量1∶0.4，壓力0.05Mpa培養(yǎng)38-45小時的罐內(nèi)，最后在上述條件下接種，再經(jīng)脫水、干燥制成干菌種。
實際上，在人工培植北蟲草的工藝中，擴種是人們普遍采用的技術(shù)方案。通常擴種的過程可大至分為三個階段，第一階段是在北蟲草的母種上挖一小塊菌絲放入培養(yǎng)基斜面上培植，即菌絲培養(yǎng)階段；第二階段等菌絲長滿后再將菌絲放入液體的培養(yǎng)基中，通過搖床的搖動促使真菌生長，這一階段是液體菌種培養(yǎng)階段；第三階段再將液體菌種放入培養(yǎng)基中培植蟲草階段。在上述三個階段中，均需有培養(yǎng)基培植，而培養(yǎng)基的營養(yǎng)組份和培植環(huán)境是最關(guān)鍵的技術(shù)問題。
實踐表明，培植出的蟲草中有效藥物含量是否均衡與培養(yǎng)基內(nèi)所含的碳氮元素的比值有直接關(guān)系，由于有機碳是生成二肽、多糖，包括3-脫氧腺苷即蟲草素，氮又是蟲草生長的重要元素，且是核酸、氨基酸的組成部分。如培養(yǎng)基中碳含量過高易造成營養(yǎng)生長差，菌絲生長無力，使產(chǎn)量降低；而培養(yǎng)基中氮含量過高，會造成生長緩慢，阻礙子實體發(fā)育和成長，并使某些甾醇和核苷類營養(yǎng)成份顯著降低，而氮含量過低，不利于菌絲的生長，子實體瘦小；其次，菌種在不同的生長階段其所需碳氮含量是不完全相同的，如在營養(yǎng)生長階段所需碳含量相對較低，而在子實體生長階段，碳含量要求相對較高；另外，硒含量對提高蟲草的藥用價值能起到很重要的作用。
在培植環(huán)境方面，溫度和晝夜溫差是刺激生長的極為重要的外界因素，且在不同的生長階段，環(huán)境溫度、光照、濕度和晝夜溫差也是一個變化量，這些也是現(xiàn)有技術(shù)所忽略的問題。
可見，在現(xiàn)有公開的北蟲草培植技術(shù)中，對于碳氮比特別是動態(tài)的碳氮比并沒有得到足夠的重視，其所述的培養(yǎng)基中只是體現(xiàn)了磷、鈣、鉀等無機鹽及營養(yǎng)成份等方面的配伍，而忽略了蟲草生長所必須的內(nèi)在因素和外部條件，這樣，即影響了北蟲草的產(chǎn)出量，同時，也在很大程度上影響了北蟲草的質(zhì)量。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種根據(jù)不同生長階段調(diào)整培養(yǎng)基內(nèi)碳氮含量比及生長環(huán)境，解決人工培植的蛹蟲草所含藥物組份和提高產(chǎn)量的培植蛹蟲草的培養(yǎng)基及其方法。
本發(fā)明所提出的用于培植蛹蟲草的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中主要包括由熟谷物和蠶蛹制成的粘稠狀混合物，且在該混合物內(nèi)添加有含磷、鈣、鉀、鎂離子的無機鹽，所述混合物中碳元素的重量份額占總重量的0.4％-1.0％，而氮元素的重量份額占總重量的0.02％-0.05％。其中，混合物中的磷、鉀離子可形成核酸，促進細胞分裂，鈣離子可促進子實體生長，減少病害；混合物中碳氮比應(yīng)為20∶1左右，碳元素含量低不利于二肽、多糖、蟲草素等重要藥物成份生成，而碳元素的重量份額過高，會阻礙菌絲的細胞分裂，即不利于子實體的形成；混合物中碳氮比不合理，是所培植的北蟲草藥物成份與野生蟲草相比嚴重失衡的重要因素。
所述混合物中每公斤還應(yīng)含有0.04-0.06mg的硒元素。所述谷物優(yōu)選大米。
專門利用上述培養(yǎng)基培植蛹蟲草的方法，包括將液體蛹蟲草菌種在無菌條件下注入裝有上述培養(yǎng)基的容器中，菌種在營養(yǎng)生長期環(huán)境溫度保持在12℃-20℃，同時間隔預(yù)定時間給予避光和給予散射光照射，在后期生長階段環(huán)境溫度應(yīng)保持在16℃-25℃，相對濕度為85％-95％。菌種在營養(yǎng)生長期環(huán)境溫度低于12℃，菌絲的生長緩慢，而高于25℃，則菌絲易出現(xiàn)早衰現(xiàn)象；而在子實體后期生長階段環(huán)境溫度低于12℃，同樣造成子實體生長較慢，高于25℃，子實體生長易發(fā)生枯萎。
在菌種后期生長階段還包括向培養(yǎng)基表面噴射含有有機碳元素物料的步驟。
所述含有機碳元素物料可由液體葡萄糖構(gòu)成。
所述營養(yǎng)生長階段環(huán)境最佳溫度在14℃-18℃，而在后期生長階段環(huán)境最佳溫度在18℃-22℃。
所述菌種生長期間其前五天左右保持在避光環(huán)境下生長，后五天左右保持在散射光照射的環(huán)境下生長。
本發(fā)明所提出的培養(yǎng)基中，正確地調(diào)整碳氮比，致使蟲草中有11種甾醇、核苷和有機酸的含量達到或者高于野生蟲草的含量，并保持了3-脫氧腺苷的高含量，同時可使子實體產(chǎn)量增加10％-15％。
具體實施例方式
實施例1培養(yǎng)基的配制中，其各級份的重量份額為選用大米41％，干品蠶蛹2.5％，蛋白胨0.25％，無機鹽0.25％，葡萄糖0.6％，余量為水。經(jīng)計算，碳元互的含量為0.74％，氮含量為0.034％。將液體蛹蟲草菌種在無菌條件下注入裝有上述培養(yǎng)基的容器中，菌種在營養(yǎng)生長期環(huán)境溫度保持在16℃左右，且在前五天內(nèi)避光，后五天給予散射光照射；在后期生長階段環(huán)境溫度應(yīng)保持在20℃左右，相對濕度為85％，同時用0.5％葡萄糖溶液對培養(yǎng)基表面噴灑，以補充碳源。
權(quán)利要求
1.用于培植蛹蟲草的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中主要包括由熟谷物和蠶蛹制成的粘稠狀混合物，且在該混合物內(nèi)添加有含磷、鈣、鉀、鎂離子的無機鹽，其特征在于所述混合物中碳元素的重量份額占總重量的0.4％-1.0％，而氮元素的重量份額占總重量的0.02％-0.05％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于所述混合物中每公斤還應(yīng)含有0.04-0.06mg的硒元素。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的培養(yǎng)基，其特征在于所述谷物優(yōu)選大米。
4.專門利用上述培養(yǎng)基培植蛹蟲草的方法，其特征在于將液體蛹蟲草菌種在無菌條件下注入裝有上述培養(yǎng)基的容器中，菌種在營養(yǎng)生長期環(huán)境溫度保持在12℃-20℃，同時間隔預(yù)定時間給予避光和給予散射光照射，在后期生長階段環(huán)境溫度應(yīng)保持在16℃-25℃，相對濕度為85％-95％。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于在菌種后期生長階段還包括向培養(yǎng)基表面噴射含有有機碳元素物料的步驟。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述含有機碳元素物料可由液體葡萄糖構(gòu)成。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于所述營養(yǎng)生長階段環(huán)境最佳溫度在14℃-18℃，而在后期生長階段環(huán)境最佳溫度在18℃-22℃。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于所述菌種生長期間，其前十天左右保持在避光環(huán)境下生長，后十天左右保持在散射光照射的環(huán)境下生長。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于培植蛹蟲草的培養(yǎng)基及其方法，該培養(yǎng)基中主要包括由熟谷物和蠶蛹制成的粘稠狀混合物，混合物中碳元素的重量份額占總重量的0.4％－1.0％，而氮元素的重量份額占總重量的0.02％－0.05％。在培植蛹蟲草的方法中，菌種在營養(yǎng)生長期和在后期生長階段的環(huán)境溫度是變化的，同時采用避光和散射光照射技術(shù)。致使蟲草中的甾醇、核苷和有機酸的含量達到或者高于野生蟲草的含量，同時可使子實體產(chǎn)量增加10％－15％。
文檔編號C12N1/14GK1580234SQ0313369
公開日2005年2月16日 申請日期2003年8月15日 優(yōu)先權(quán)日2003年8月15日
發(fā)明者叢文華 申請人:叢文華