專利名稱：生產(chǎn)半發(fā)酵蔬菜的工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是關(guān)于用活化的乳酸菌發(fā)酵生產(chǎn)半發(fā)酵蔬菜的大規(guī)?；a(chǎn)的生產(chǎn)方法。該方法包括黃瓜泥的制備方法，用篩選的乳酸菌培養(yǎng)物在發(fā)酵罐中用黃瓜菜泥在GMP條件下放大1)利用發(fā)酵的黃瓜泥，并將其凍干成干粉用于發(fā)酵蔬菜的起始菌種，便于長(zhǎng)期保薦和客戶隨時(shí)用來制備新鮮的發(fā)酵蔬菜；2)利用發(fā)酵的黃瓜菜泥將新鮮的經(jīng)殺菌并被浸鹽水的蔬菜制成新鮮的發(fā)酵蔬菜.
背景技術(shù)：
乳酸菌是一群革蘭氏陽(yáng)性菌，厭氧呼吸，不形成孢子，球狀菌或棒狀，消耗碳水化合物發(fā)酵的主要終產(chǎn)品為乳酸。他們是被用于食品發(fā)酵的最重要的乳酸菌，用于對(duì)酸面團(tuán)的發(fā)酵生產(chǎn)面包、高梁啤酒的發(fā)酵生產(chǎn)、所有的發(fā)酵奶制品的生產(chǎn)、眾多的″被腌制的″(被發(fā)酵的)蔬菜的生產(chǎn)等。
乳酸菌負(fù)責(zé)將碳水化合物代謝轉(zhuǎn)換成乳酸、二氧化碳和其它有機(jī)酸，無(wú)氧呼吸。由于它們不消耗氧氣，其代謝的變化不會(huì)引起食物結(jié)構(gòu)的變化。用全發(fā)酵法，其終產(chǎn)物只有乳酸；用半發(fā)酵法，其終產(chǎn)物包括乳酸、其它揮發(fā)性的化合物和少量酒精。嗜酸性乳酸桿菌屬，如Lactobacillus acidophilus，L.bulgaricus，L.planarum，L.caret，L.pentoaceticus，L brevis and L.thermophilus在食物發(fā)酵中是生產(chǎn)乳酸的范例。所有的乳酸菌都有各自的特異反應(yīng)，但總體上，L.plantarum菌株在所有蔬菜發(fā)酵中產(chǎn)生高活性并充當(dāng)主要角色。產(chǎn)酸的所有乳酸菌是非運(yùn)動(dòng)型的、革蘭氏陽(yáng)性菌、呈棒狀，需要復(fù)雜的碳水化合物作為能源。發(fā)酵中產(chǎn)生的乳酸可以有效的抑制那些對(duì)食物有分解或損壞作用的其它細(xì)菌的生長(zhǎng)。由于這群乳酸菌看似只完成一種簡(jiǎn)單的反應(yīng)，產(chǎn)物只有一種物質(zhì)，但事實(shí)遠(yuǎn)非如此。乳酸菌具有不同的分化種屬，并且具有不同的新陳代謝容量。這些不同的分化種屬使得它們非常能適應(yīng)變化的條件，并能負(fù)責(zé)完成酸性食品發(fā)酵。
盡管乳酸菌發(fā)酵很復(fù)雜，但是乳酸發(fā)酵的整個(gè)基礎(chǔ)就是圍繞乳酸菌產(chǎn)生乳酸并抑制其它有害菌生長(zhǎng)的能力。所有產(chǎn)乳酸的乳酸菌都是厭氧菌，它們只需要少量的氧氣發(fā)揮作用。全發(fā)酵將糖主要轉(zhuǎn)化成乳酸，而半發(fā)酵則生產(chǎn)大約50％乳酸、25％乙酸和乙醇及25％的二氧化碳。這些代謝副產(chǎn)物十分重要，因?yàn)樗鼈儗?duì)最終產(chǎn)品給予了特殊的口味和芳香。這種半發(fā)酵的乳酸桿菌屬能產(chǎn)生甘露醇，其它一些菌屬還能產(chǎn)生葡聚糖。
Leuconostoc mesenteroides是一種特殊的細(xì)菌，用于德國(guó)泡菜和腌制菜的發(fā)酵，這種菌起動(dòng)這些產(chǎn)品中乳酸的發(fā)酵，不同于其它乳酸菌，它能耐受高濃度的鹽和糖(高達(dá)50％的糖)。它代謝產(chǎn)生二氧化碳和酸，迅速地降低酸堿度，抑制有害微生物的生長(zhǎng)，產(chǎn)生的二氧化碳代替了氧氣，形成厭氧環(huán)境，適合lactobacillus屬的乳酸菌的生長(zhǎng)。氧氣的驅(qū)除有利于保存菜的顏色，并能穩(wěn)定代謝中形成的抗壞血酸。
德國(guó)泡菜是蔬菜的酸發(fā)酵的例子。德國(guó)泡菜從字面上可以翻譯為酸圓白菜。德國(guó)泡菜的生產(chǎn)流程也適合于其它類型蔬菜產(chǎn)品的生產(chǎn)。由于在德國(guó)人的飲食中這個(gè)產(chǎn)品很重要，為了規(guī)范化商業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)，進(jìn)行了大量的制備工藝研究。結(jié)果，就較早地掌握了生產(chǎn)工藝和有益的微生物。其它較不知名的發(fā)酵水果和蔬菜很少受到研究者的注意，因此很少有人知道確切的生產(chǎn)過程。但是，可以設(shè)想基于這種生產(chǎn)工藝的蔬菜酸發(fā)酵過程是安全的。
乳酸發(fā)酵是在三種基本的條件下進(jìn)行的干鹽，、浸鹽和非鹽條件。鹽為乳酸菌提供了一個(gè)合適的生長(zhǎng)環(huán)境，并給予蔬菜酸味。
切細(xì)的圓白菜或其它適當(dāng)?shù)牟吮环胖迷谄孔又胁⒓欲}。用機(jī)械壓力加壓圓白菜軋出汁液，其中含有可發(fā)酵的糖和其它營(yíng)養(yǎng)可供微生物活化。第一個(gè)開始發(fā)酵作用的微生物是產(chǎn)氣的球菌(L.Mesenteroides)。這些微生物發(fā)酵產(chǎn)生酸。當(dāng)酸度到達(dá)0.25-0.3％(以乳酸量計(jì)算)時(shí)，盡管酶還繼續(xù)起作用，但這些菌生長(zhǎng)緩慢并開始死亡。由L.mesenteroides菌起動(dòng)的發(fā)酵活性可以由乳酸桿菌屬(L.plantarum和L.Cucumeris)持續(xù)到酸度達(dá)到1.5-2％時(shí)為止。高鹽濃度和低溫在某種程度上抑制這些菌的生長(zhǎng)。最后，L.pentoaceticus菌繼續(xù)發(fā)酵，使酸度達(dá)到2-2.5％，因此完成發(fā)酵。
正常泡菜發(fā)酵的終產(chǎn)物是乳酸、少量乙酸和以二氧化碳為主混有少量酒精和芳香酯類的混合氣體。酸與醇結(jié)合形成酯，賦予德國(guó)泡菜獨(dú)具特色的味道。酸度有助于控制有害微生物的生長(zhǎng)，有助于延長(zhǎng)產(chǎn)品的貯存期。有益菌或有害菌出現(xiàn)順序的變化會(huì)改變產(chǎn)品的品味與質(zhì)量。
但現(xiàn)有技術(shù)中的泡菜發(fā)酵沒有提供具有GMP條件的設(shè)備條件和操作流程，也沒有將將增味劑加入全發(fā)酵的黃瓜泥中，然后將全發(fā)酵的黃瓜泥進(jìn)一步的發(fā)酵蔬菜的步驟，因而其產(chǎn)品質(zhì)量難以有效控制，可能引起味道過輕或過重。
在本發(fā)明中，將我們?cè)诖笠?guī)模生物反應(yīng)器發(fā)酵、GMP(藥品生產(chǎn)管理規(guī)范)細(xì)胞建庫(kù)方面的專門技術(shù)和治療性重組蛋白質(zhì)生產(chǎn)方面的知識(shí)整合入我們?cè)谥袊?guó)制作發(fā)酵蔬菜的實(shí)驗(yàn)中，其重點(diǎn)是可滿足FDA(食品藥品管理局)要求的可產(chǎn)業(yè)化的GMP生產(chǎn)過程。更為重要的是將增味劑加入全發(fā)酵的黃瓜泥中，并利用它們發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵的新鮮蔬菜，或者制備乳酸菌的培養(yǎng)物干粉作為發(fā)酵的種子，便于長(zhǎng)期保存和客戶隨時(shí)便利地制備新鮮的發(fā)酵蔬菜。
這種GMP條件下利用黃瓜泥培養(yǎng)物生產(chǎn)的干粉菌種可以作為口服藥物的給藥途徑，允許運(yùn)用天然篩選的或經(jīng)生物工程改造的乳酸菌生產(chǎn)重組蛋白(如leptin融合GLP-1或HPVE7抗原)用于病毒性疾病預(yù)防或肥胖性疾病的治療目的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種發(fā)酵蔬菜的方法，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，利用黃瓜泥適應(yīng)的乳酸菌株對(duì)黃瓜泥發(fā)酵，制備一種黃瓜泥和乳酸菌一同混合發(fā)酵產(chǎn)生的一種混合的乳酸菌發(fā)酵凍干粉，該凍干粉可以長(zhǎng)期保藏，可以進(jìn)一步的制備新鮮的發(fā)酵蔬菜。本發(fā)明的發(fā)酵是符合GMP的生產(chǎn)過程，可以滿足食品監(jiān)督部門的要求。
為此，本發(fā)明提供一種制備用黃瓜泥發(fā)酵得到的乳酸菌發(fā)酵凍干粉的方法和制備新鮮發(fā)酵蔬菜的方法，該方法經(jīng)過以下步驟步驟1、對(duì)黃瓜冼滌、巴氏滅菌并制備黃瓜泥；步驟2、將黃瓜泥和乳酸菌混合，加入鹽水，在發(fā)酵罐中發(fā)酵，根據(jù)需要可以加入增味劑，如大蒜，番茄等，得到發(fā)酵的黃瓜泥；步驟3a、將發(fā)酵的黃瓜泥制備成凍干粉，得到本發(fā)明的乳酸菌發(fā)酵凍干粉；步驟3b、將新鮮的殺菌并被浸鹽水的蔬菜和上述發(fā)酵的黃瓜泥混合，得到本發(fā)明的發(fā)酵蔬菜；步驟4、包裝并儲(chǔ)存步驟3a得到的乳酸菌發(fā)酵凍干粉或步驟3b得到的發(fā)酵蔬菜。
以上步驟中，
所述蔬菜選自市售或農(nóng)民在大地中生產(chǎn)的蔬菜，包括黃瓜、胡蘿卜、甜菜、芹菜和圓白菜等；所述乳酸菌來源于市售的半腌汁產(chǎn)品或其他自然篩選的具有抗炎癥功能的菌株或表達(dá)減肥蛋白GLP-1的工程菌或表達(dá)HPV E7等抗原的疫苗的菌株；這些菌株被描述如下半腌汁產(chǎn)品所用的菌株來源于非巴氏滅菌的美國(guó)FDA批準(zhǔn)的商品半腌法酸菜制品(Half sour pickles，BA-TAMPLE Pickle Products Inc，Brooklyn，NY11236)，菌株可經(jīng)分離得到，并進(jìn)行建庫(kù)保存。這些菌株適應(yīng)于在勻漿的黃瓜泥中生長(zhǎng)，因此其味道就如黃瓜香味，發(fā)酵時(shí)可以使用分離的菌株，也可以使用半腌法酸菜制品，優(yōu)選后者(即使用含有乳酸菌的半腌汁產(chǎn)品，也可以稱為乳酸菌培養(yǎng)物，市場(chǎng)上有售)表達(dá)減肥蛋白GLP-1的工程菌，系經(jīng)基因工程手段將GLP-1基因克隆入乳酸菌表達(dá)質(zhì)粒中，并經(jīng)酶切鑒定確實(shí)重組成功，轉(zhuǎn)化乳酸菌中所得，該重組質(zhì)粒能在乳酸菌代謝中不斷表達(dá)GLP-1蛋白。
表達(dá)HPV E7等抗原的疫苗的菌株，系經(jīng)基因工程手段構(gòu)建的重組菌株，將HPV E7基因重組入乳酸菌表達(dá)質(zhì)粒中，并轉(zhuǎn)化乳酸菌，該質(zhì)粒能在乳酸菌中有效表達(dá)抗原。
所述黃瓜泥為將全發(fā)酵的黃瓜用勻漿機(jī)粉碎并攪拌成泥狀，粒度可在1-500微米之間；所述增味劑選自大蒜，其與菜泥的比例為1％-0.1％；發(fā)酵在GMP條件下進(jìn)行，將新鮮的殺菌并被浸鹽水的黃瓜和上述發(fā)酵的加入增味劑的黃瓜泥混合發(fā)酵，其中新鮮蔬菜和菜泥的比例為1％-10％；其中GMP條件是建立菌種庫(kù)，菜泥及發(fā)酵蔬菜在密封的生物反應(yīng)器中進(jìn)，發(fā)酵時(shí)間為24-72小時(shí)。
所述存貯，菌種在-20℃貯存，半發(fā)酵蔬菜或全發(fā)酵蔬菜可在溫度為4℃或室溫條件下保存。
本發(fā)明可以采用以下操作步驟進(jìn)行具體操作新鮮的整體黃瓜用水冼，在熱水中殺菌，殺菌后的整體黃瓜與小量大蒜或番茄用攪拌器一起勻漿。勻漿的黃瓜泥加入2.0-2.5％的食鹽后置生物反應(yīng)器中。將上述乳酸菌(優(yōu)選的是乳酸菌培養(yǎng)物，如市場(chǎng)銷售的半腌汁產(chǎn)品)加入反應(yīng)器，混合均勻，向反應(yīng)器中充入二氧化碳或氮?dú)庖则?qū)除空氣，生物反應(yīng)器置于20℃的恒溫室中，不需攪拌經(jīng)12-24小時(shí)發(fā)酵后，PH降至3.7以下，得到本發(fā)明的全發(fā)酵的黃瓜泥。
進(jìn)一步將全發(fā)酵的黃瓜泥制成干粉(凍干粉或在4-55℃抽干粉)，包裝，便于客戶應(yīng)用和保藏?；蛘哌M(jìn)一步的將全發(fā)酵的黃瓜泥加入容器中，將冼凈的殺菌后的和被浸鹽水的新鮮的黃瓜(整體或切片)加入到此容器，室溫發(fā)酵2-3天，在4℃存貯，即可得到本發(fā)明的半發(fā)酵蔬菜。
本發(fā)明的泡菜在18-20℃可以進(jìn)一步發(fā)酵，制成全發(fā)酵的蔬菜，時(shí)間需要2-3天。該全發(fā)酵的蔬菜在4℃可以存放1-14天，可以使味道品嘗起來更好而且脆嫩無(wú)比。
在上述的工作中，盡量努力使整體菜的巴氏滅菌以保留新鮮蔬菜味道，因?yàn)闊岵⑽赐耆┤氩死锩?。密封的發(fā)酵系統(tǒng)、過濾的無(wú)菌水、用二氧化碳或氮?dú)鈬娚潋?qū)除氧氣，在低PH(＜4.5)制備起始培養(yǎng)物，并在凈化的GMP生產(chǎn)環(huán)境中生產(chǎn)，目的是防止有害菌的污染，符合食品監(jiān)管部門對(duì)發(fā)酵食品和工程菌株生產(chǎn)的相關(guān)條款。
對(duì)于其他蔬菜品種，可以采用混合加工的方法得到不同口味的發(fā)酵蔬菜，如將以上步驟中所述的全發(fā)酵的勻漿黃瓜泥加到盛有洗凈的并經(jīng)加熱殺菌的新鮮紅蘿卜、芹菜，和甜菜的切片或整體的容器中，在室溫(18-20℃)發(fā)酵3-4天后，上述半發(fā)酵或全發(fā)酵的蔬菜就可以食用了。在4℃存放1-14天后，口味更好，更脆。使用全發(fā)酵或腌制的勻漿黃瓜和大蒜混合物，就可以增加上述發(fā)酵產(chǎn)品的黃瓜和大蒜味。本發(fā)明利用發(fā)酵過程的易蒸發(fā)特性并在半發(fā)酵的蔬菜中增加了大蒜和黃瓜味。此過程除走了原蔬菜的異味，除了大蒜和黃瓜味，還可以通過此過程添加其它所需的口味。
在此發(fā)明過程中，沒有污染機(jī)會(huì)，表明這是一個(gè)非常穩(wěn)定的制造過程。成功的關(guān)鍵是將全發(fā)酵的低PH的含鹽的勻漿黃瓜泥直接加入到殺菌的和被浸鹽水的新鮮蔬菜中。在這樣的低PH和乳酸菌占優(yōu)勢(shì)的環(huán)境中沒有雜菌污染的機(jī)會(huì)。另外，所有半發(fā)酵或全發(fā)酵的菜沒有異味，而呈黃瓜和大蒜味。這個(gè)生產(chǎn)過程的重要性在于可以放大，適宜于在GMP條件下進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)。更為重要的是，此工藝適于在GMP條件下，不破壞乳酸菌活性而能生產(chǎn)篩選的抗炎性菌或工程菌的產(chǎn)物。
本發(fā)明得到的蔬菜制品具有口感好，儲(chǔ)存時(shí)間長(zhǎng)，外觀好，干凈，沒有污染，使用經(jīng)過基因重組技術(shù)轉(zhuǎn)染的的乳酸菌發(fā)酵得到的蔬菜還可用于預(yù)防和治療肥胖等疾病。本發(fā)明得到的發(fā)酵干粉，可用于進(jìn)一步的蔬菜發(fā)酵，使用方便，快捷。
具體實(shí)施例方式以下通過實(shí)施例，進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不作為對(duì)本發(fā)明的限制。
實(shí)施例1.
發(fā)酵的黃瓜在水槽中用一個(gè)高壓水龍頭沖冼新鮮的黃瓜，并在88℃熱水鍋進(jìn)行加熱殺菌15秒。將加熱殺菌的黃瓜與小量的大蒜一起勻漿。在蔬菜泥中加入大蒜味或其它增味劑為發(fā)酵產(chǎn)品增加口味，因?yàn)槭卟税l(fā)酵過程中會(huì)產(chǎn)生易蒸發(fā)的二氧化碳?xì)怏w和異味。勻漿的黃瓜菜泥泵入20升的瓶狀生物反應(yīng)器中，將經(jīng)0.22.um過濾器過濾的水和乳酸菌培養(yǎng)物(半腌汁產(chǎn)品)一起加入瓶中。用二氧化碳或N2從瓶狀生物反應(yīng)器中驅(qū)除空氣，形成相對(duì)的無(wú)氧發(fā)酵，并較好地混合。瓶狀生物反應(yīng)器置于20℃的環(huán)境中。靜置發(fā)酵24小時(shí)后，PH降為3.7或更低。發(fā)酵3-4天后，全發(fā)酵的黃瓜菜泥抽到凍干機(jī)或干燥機(jī)中干燥1-3天。然后，將凍于粉包成小包裝，保藏或供客戶應(yīng)用。
用全發(fā)酵的上述凍干的黃瓜菜泥干粉作為商品，將黃瓜、紅蘿卜、芹菜、甜菜、圓白菜和其它菜蔬菜等洗凈，并對(duì)其進(jìn)行加熱殺菌和浸鹽。將它們切成所需的形狀和大小后，裝入容器中。加入上述例1全發(fā)酵的的黃瓜和大蒜菜泥發(fā)酵2-5天，就可以制成半被發(fā)酵的蔬菜。
在本例中，盡力于整體蔬菜的巴氏滅菌作用以保留新鮮蔬菜味道，因方熱未能穿透蔬菜。采用密封的發(fā)酵系統(tǒng)、過濾的除菌的水系統(tǒng)、用CO2或N2噴射法驅(qū)除氧氣、低PH(＜4.5)的種子菌培養(yǎng)物和凈化的GMP生產(chǎn)房間，目的就是防止雜菌的污染，并能滿足FDA對(duì)發(fā)酵食品的要求。
實(shí)施例2.
發(fā)酵的黃瓜在水槽中用一個(gè)高壓水龍頭沖冼新鮮的黃瓜，并在88℃熱水鍋進(jìn)行加熱殺菌15秒。將加熱殺菌的黃瓜與小量的大蒜一起勻漿。在蔬菜泥中加入大蒜味或其它增味劑為發(fā)酵產(chǎn)品增加口味，因?yàn)槭卟税l(fā)酵過程中會(huì)產(chǎn)生易蒸發(fā)的二氧化碳?xì)怏w和異味。勻漿的黃瓜菜泥泵入20升的瓶狀生物反應(yīng)器中，將經(jīng)0.22.um過濾器過濾的水和乳酸菌培養(yǎng)物(半腌汁產(chǎn)品)一起加入瓶中。用二氧化碳或N2從瓶狀生物反應(yīng)器中驅(qū)除空氣，形成相對(duì)的無(wú)氧發(fā)酵，并較好地混合。瓶狀生物反應(yīng)器置于20℃的環(huán)境中。靜置發(fā)酵24小時(shí)后，PH降為3.7或更低。發(fā)酵一天后，全發(fā)酵的黃瓜菜泥抽到玻璃容器中。將冼凈并加熱殺菌的新鮮的黃瓜(整體或切)加入容器，準(zhǔn)備運(yùn)輸或存貯在4℃冰箱。在室溫20-22℃再發(fā)酵2-3天后，美味的半發(fā)酵蔬菜就做成了，可在4℃貯存1-14天，口味更好。
在本例中，盡力于整體蔬菜的巴氏滅菌作用以保留新鮮蔬菜味道，因?yàn)闊嵛茨艽┩甘卟?。采用密封的發(fā)酵系統(tǒng)、過濾的除菌的水系統(tǒng)、用CO2或N2噴射法驅(qū)除氧氣、低PH(＜4.5)的種子菌培養(yǎng)物和凈化的GMP生產(chǎn)房間，目的就是防止雜菌的污染，并能滿足FDA對(duì)發(fā)酵食品的要求。
為了制備半發(fā)酵或全發(fā)酵的紅蘿卜、芹菜、甜菜、圓白菜和其它菜，將上述例1中全發(fā)酵的勻漿黃瓜菜泥加入盛有洗凈的加熱殺菌的和被浸鹽水的新鮮的紅蘿卜、芹菜、甜菜和其它菜的玻璃容器中。在室溫20-22℃繼續(xù)發(fā)酵3-4天后，半發(fā)酵或全發(fā)酵的蔬菜就制備好了。在4℃存放1-14天后口味更好。使用全發(fā)酵或腌制的勻漿黃瓜和大蒜混合物，就可以增加上述發(fā)酵產(chǎn)品的黃瓜和大蒜味。本發(fā)明利用發(fā)酵過程的易蒸發(fā)特性并在半發(fā)酵的蔬菜中增加了大蒜和黃瓜味。此過程除走了原蔬菜的異味，除了大蒜和黃瓜味，還可以通過此過程添加其它所需的口味。
實(shí)施例3.
利用實(shí)施例1的發(fā)酵的黃瓜泥干粉作為以下基因工程藥物的輸送體系，GLP-1、exetind-4、GLP-1-leptin、Byetta-leptin、Byetta-IL-18、IL-18-leptin、Symlin-Leptin和PYY-leptin，這些蛋白屬于現(xiàn)有技術(shù)，我們將上述重組蛋白的基因重組入乳酸菌表達(dá)質(zhì)粒，并轉(zhuǎn)化入上述黃瓜泥培養(yǎng)的乳酸菌中，該轉(zhuǎn)化的乳酸菌可以進(jìn)一步的制備本發(fā)明的發(fā)酵蔬菜，其制備步驟除所用菌株不同外，其他步驟同實(shí)施例1，以上所述基因重組技術(shù)屬于現(xiàn)有技術(shù)。用實(shí)施例3方法發(fā)酵得到的蔬菜經(jīng)過服用具有預(yù)防和治療疾病的作用。
權(quán)利要求
1.一種制備用黃瓜泥發(fā)酵得到的乳酸菌發(fā)酵凍干粉的方法，其特征在于，該方法經(jīng)過以下步驟步驟1、對(duì)黃瓜的冼滌、巴氏滅菌并制備黃瓜泥；步驟2、將黃瓜泥和乳酸菌混合，加入鹽水，在發(fā)酵罐中發(fā)酵，根據(jù)需要可以加入增味劑，得到發(fā)酵的黃瓜泥；步驟3a、將發(fā)酵的黃瓜泥制備成干粉，得到本發(fā)明的乳酸菌發(fā)酵干粉；步驟3b、將新鮮的殺菌并被浸鹽水的蔬菜和上述發(fā)酵的黃瓜泥混合，得到本發(fā)明的發(fā)酵蔬菜；步驟4、包裝并儲(chǔ)存步驟3a得到的乳酸菌發(fā)酵干粉或步驟3b得到的發(fā)酵蔬菜。
2.權(quán)利要求1的方法，所述乳酸菌來源于市售的半腌汁產(chǎn)品或其他自然篩選的具有抗炎癥功能的菌株或表達(dá)減肥蛋白GLP-1的工程菌或表達(dá)HPV E7等抗原的疫苗的菌株；
3.權(quán)利要求1的方法，所述發(fā)酵是在生物反應(yīng)器中進(jìn)行，培養(yǎng)體積大于20升。
4.權(quán)利要求1的方法，所述發(fā)酵是在GMP條件下的操作過程。
5.權(quán)利要求1的方法，所述增味劑選自大蒜，番茄。
6.權(quán)利要求3的方法，所述生物反應(yīng)器可以是攪拌漿型或者搖動(dòng)型或者搖擺型的反應(yīng)器。
7.權(quán)利要求1的方法，在生物反應(yīng)器中的生產(chǎn)過程中采用一種厭氧培養(yǎng)過程，用N2或CO2驅(qū)除O2。
8.權(quán)利要求1的方法，所述制備成干粉是利用冷凍干燥的方法或真空干燥的方法進(jìn)行制備。
9.權(quán)利要求1的方法，其中步驟3a得到的乳酸菌發(fā)酵干粉可以通過口服途徑將重組蛋白藥物或疫苗輸送到人體內(nèi)。
10.權(quán)利要求1的方法，步驟3b所述的蔬菜包括黃瓜、胡蘿卜、甜菜、芹菜和圓白菜。
全文摘要
本發(fā)明是關(guān)于用活化的乳酸菌發(fā)酵生產(chǎn)半發(fā)酵和全發(fā)酵蔬菜的可規(guī)?；a(chǎn)的工藝，包括對(duì)蔬菜的巴氏滅菌、滅菌蔬菜的勻漿、用篩選的乳酸菌培養(yǎng)物在發(fā)酵罐中用鹽水發(fā)酵蔬菜放大培養(yǎng)制備成菜泥、在GMP條件下將新鮮的加熱殺菌并被浸鹽水的蔬菜和充分發(fā)酵的菜泥包裝入容器，存貯，這種GMP條件下得到的乳酸菌可用于生產(chǎn)重組蛋白，這些蛋白可用于預(yù)防或治療疾病，這種用活乳酸菌半發(fā)酵的蔬菜包括黃瓜、紅蘿卜、甜菜、芹菜和圓白菜等。
文檔編號(hào)A23B7/14GK101019625SQ20071000283
公開日2007年8月22日 申請(qǐng)日期2007年2月1日 優(yōu)先權(quán)日2007年2月1日
發(fā)明者惠覓宙, 李會(huì)成, 冷國(guó)慶 申請(qǐng)人:哈爾濱安普科技發(fā)展有限公司