專利名稱：一種魚鱗膠原蛋白肽的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物技術(shù)，具體涉及的是采用生物技術(shù)手段制備魚鱗膠原蛋白肽的方法。
(二)
背景技術(shù)：
膠原蛋白肽是一種重要的功能性蛋白質(zhì)，它是膠原蛋白的水解產(chǎn)物，具有分子量低，易 吸收，低粘度等物理特性，它與細(xì)胞增生、分化、運(yùn)動、免疫、關(guān)節(jié)潤滑、傷口愈合等密切 相關(guān)，具有很強(qiáng)的生物活性。由于膠原蛋白肽的特殊功能，其提取物己被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、 食品、日用化工、生物合成等工業(yè)領(lǐng)域。目前生產(chǎn)膠原蛋白制品的原料基本上是豬、牛等陸 生動物的皮和骨，由于陸生動物的生存環(huán)境惡化導(dǎo)致瘋牛病等流行病的發(fā)生，使得從陸生動 物的皮、骨中提取的膠原蛋白的危險性增大，從而使其制品的使用受到限制。不少發(fā)達(dá)國家 已經(jīng)禁止使用從牛皮和牛骨中提取的膠原蛋白。因此，從水生動物中提取安全、衛(wèi)生、無害 的膠原蛋白成為這幾年各國研究的一項熱門課題。
近年來，隨著養(yǎng)殖規(guī)模的日益擴(kuò)大和養(yǎng)殖技術(shù)的不斷完善，養(yǎng)殖魚類的產(chǎn)量提高很快， 而魚鱗中所含有的豐富膠原蛋白卻未被利用。為充分利用我國現(xiàn)有的豐富的淡水魚資源，提 高其商業(yè)價值，降低水產(chǎn)品食品的生產(chǎn)成本，最大限度地提高經(jīng)濟(jì)效益，本項目以魚鱗為原 料，經(jīng)高溫蒸煮后進(jìn)行膠體磨磨漿預(yù)處理，采用生物法進(jìn)行水解，膜分離精致后，再經(jīng)濃縮、 干燥制得膠原蛋白肽粉末。目前，傳統(tǒng)的魚加工業(yè)己不能實(shí)現(xiàn)魚類資源的充分利用，大量的 魚副產(chǎn)物被拋棄或作為粗飼料，魚經(jīng)屠宰、采肉后，出肉率僅為30%左右，而有60%以上為下 腳料，如果廢棄掉這部分下腳料將是很大的浪費(fèi)。我國對魚鱗這一重要的魚副產(chǎn)物的利用還 只是處于初級階段，因此，開展低值淡水魚的深加工的研究，提高副產(chǎn)品的附加值成為但今 研究熱點(diǎn)。
(三)

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種制備工藝過程相對其他方法簡單、制備的膠原蛋白肽可完全溶 解于水冷水，水溶液低粘度，在的高濃度下也有流動性，耐酸性能好，在酸、堿的情況下均 無沉淀耐高溫性能好，IO(TC加熱亦無沉淀的魚鱗膠原蛋白肽制備方法。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的
(1) 發(fā)酵種子培養(yǎng)基的制備1%大豆蛋白胨，0.5%牛肉粉，0.5%葡萄糖，0. 1%氯化鈉， 0.01%磷酸二氫鉀，其余為蒸餾水，12rC高溫滅菌20分鐘，冷卻后備用；
(2) 發(fā)酵種子的制備以枯草芽孢桿菌CICC10071為出發(fā)菌株，接種于發(fā)酵種子培養(yǎng)基中， 35°C，搖床180r/m，培養(yǎng)48小時，發(fā)酵液中枯草芽孢桿菌〉l(f個/ml此時視同為發(fā)酵種子 培養(yǎng)成熟；(3) 魚鱗處理過程將新鮮魚鱗洗凈、除雜，加入8倍魚鱗重量的純凈水，經(jīng)IO(TC蒸煮 30分鐘，冷卻至45。C一50'C，進(jìn)入膠體磨超微粉碎，漿液透過60目篩網(wǎng)，然后進(jìn)入發(fā)酵罐 121'C高溫滅菌30分鐘后冷卻至35'C等待接種發(fā)酵；
(4) 保溫發(fā)酵按發(fā)酵液體積的5%接種成熟種子，保溫通風(fēng)發(fā)酵60小時；
(5) 分離發(fā)酵結(jié)束后12rC滅菌10分鐘，冷卻至45'C — 5(TC分離除渣，取上清液準(zhǔn)備精
致；
(6) 精致上清液經(jīng)膜系統(tǒng)分離，將分子量5000以上的大分子截留，取分子量5000以下 的小分子液體；
(7) 干燥將精致液進(jìn)行真空濃縮至濃度40%左右，然后噴霧干燥得魚鱗膠原蛋白肽粉末 成品。
本發(fā)明采用生物技術(shù)手段制備魚鱗膠原蛋白肽，具體的說利用枯草芽孢桿菌發(fā)酵龜鱗然
后提取膠原蛋白肽的方法。膠原蛋白肽營養(yǎng)及生理功能主要有以下幾方面1)蛋白質(zhì)營養(yǎng)效 果，其消化吸收率幾乎達(dá)100%; 2)保護(hù)胃粘膜以及抗?jié)冏饔茫?)抑制血壓上升作用；4) 促進(jìn)骨形成作用；5)促進(jìn)皮膚膠原代謝作用；6)其它還有對關(guān)節(jié)炎等膠原病具有很好的預(yù) 防及治療作用。微生物發(fā)酵法生產(chǎn)魚鱗膠原蛋白肽與酶法相比具有很大的優(yōu)越性首先微生 物可以產(chǎn)生水解酶系作用于底物蛋白，分別切割多種肽鍵，使產(chǎn)物分子量現(xiàn)對較小，而酶法 只能作用于一種肽鍵，而使產(chǎn)物分子量較大，產(chǎn)品中肽的種類比較單一；其次微生物可以定 向修復(fù)由于疏水鍵暴露而產(chǎn)生的苦味集團(tuán)，而酶法無論如何也達(dá)不到該項功能；另外微生物 發(fā)酵法與酶法相比可以大大降低水解成本。本發(fā)明所采用的菌種和水解工藝可以生產(chǎn)出質(zhì)量
穩(wěn)定，效果明顯的魚鱗膠原蛋白肽。
本發(fā)明制備的膠原蛋白肽可完全溶解于水冷水，水溶液低粘度，在的高濃度K也有流動 性，耐酸性能好，在酸、堿的情況下均無沉淀耐高溫性能好，IOO'C加熱亦無沉淀，由于其分 子量較小，所以更易被人體吸收。膠原多肽與植物性蛋白質(zhì)相比，其吸收利用率更高。膠原 蛋白肽的多種些生理調(diào)節(jié)功能，使其在食品、化工、醫(yī)療、化妝品行業(yè)具有廣泛的應(yīng)用。綜 上所述，膠原蛋白是動物體內(nèi)含量最大的一種蛋白質(zhì)，近年來因瘋牛病恐慌以及穆斯林信仰 者的需求，尋找豬、牛皮和骨以外的膠原蛋白原料成為當(dāng)務(wù)之急，而水產(chǎn)加工廢棄物魚鱗是 理想的替代原料。魚鱗膠原蛋白肽的研究成功將對水產(chǎn)及水產(chǎn)品加工業(yè)的發(fā)展提供廣闊的前 景。
(四)


圖1為本發(fā)明的工藝流程圖。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作更詳細(xì)的描述 實(shí)施例
1) 將枯草芽孢桿菌CICC10071進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，待種子液中菌體含量108個/ml，視同為種
子成熟。
2) 將魚鱗洗凈、除雜后，加入8倍重量的純凈水10(TC蒸煮30分鐘，然后進(jìn)入膠體磨 粉漿，漿液透過60目篩網(wǎng)后進(jìn)入發(fā)酵罐12rC、 30分鐘高溫滅菌，冷卻后準(zhǔn)備接種發(fā)酵。
3) 將成熟種子按魚鱗漿液體積的5%接種，35'C保溫發(fā)酵60小時后，12rC滅菌滅菌10 分鐘，冷卻至45'C—5(TC分離除渣，取上清液準(zhǔn)備精致。
4)上清液經(jīng)膜系統(tǒng)分離，將分子量5000以上的大分子截留，取分子量5000以下的小 分子液體進(jìn)行真空濃縮至濃度40%左右，然后噴霧干燥得魚鱗膠原蛋白肽粉末成品。
權(quán)利要求
1、一種魚鱗膠原蛋白肽的制備方法，其特征在于(1)發(fā)酵種子培養(yǎng)基的制備1％大豆蛋白胨，0.5％牛肉粉，0.5％葡萄糖，0.1％氯化鈉，0.01％磷酸二氫鉀，其余為蒸餾水，121℃高溫滅菌20分鐘，冷卻后備用；(2)發(fā)酵種子的制備以枯草芽孢桿菌為出發(fā)菌株，接種于發(fā)酵種子培養(yǎng)基中，35℃，搖床180r/m，培養(yǎng)48小時，發(fā)酵液中枯草芽孢桿菌＞108個/ml此時視同為發(fā)酵種子培養(yǎng)成熟；(3)魚鱗處理過程將新鮮魚鱗洗凈、除雜，加入8倍魚鱗重量的純凈水，經(jīng)100℃蒸煮30分鐘，冷卻至45℃-50℃，進(jìn)入膠體磨超微粉碎，漿液透過60目篩網(wǎng)，然后進(jìn)入發(fā)酵罐121℃高溫滅菌30分鐘后冷卻至35℃等待接種發(fā)酵；(4)保溫發(fā)酵按發(fā)酵液體積的5％接種成熟種子，保溫通風(fēng)發(fā)酵60小時；(5)分離發(fā)酵結(jié)束后121℃滅菌10分鐘，冷卻至45℃-50℃分離除渣，取上清液準(zhǔn)備精致；(6)精致上清液經(jīng)膜系統(tǒng)分離，將分子量5000以上的大分子截留，取分子量5000以下的小分子液體；(7)干燥將精致液進(jìn)行真空濃縮至濃度40％左右，然后噴霧干燥得魚鱗膠原蛋白肽粉末成品。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種魚鱗膠原蛋白肽制備方法。它是這樣實(shí)現(xiàn)的(1)發(fā)酵種子培養(yǎng)基的制備；(2)發(fā)酵種子的制備；(3)魚鱗處理過程；(4)保溫發(fā)酵；(5)分離；(6)精致；(7)干燥，得魚鱗膠原蛋白肽粉末成品。本發(fā)明的制備工藝過程相對其他方法簡單、制備的膠原蛋白肽可完全溶解于水冷水，水溶液低粘度，在的高濃度下也有流動性，耐酸性能好，在酸、堿的情況下均無沉淀耐高溫性能好，100℃加熱亦無沉淀。
文檔編號C12R1/125GK101240313SQ20081006407
公開日2008年8月13日 申請日期2008年3月7日 優(yōu)先權(quán)日2008年3月7日
發(fā)明者滕春紅, 成 陳 申請人:成 陳