專利名稱：一種海參活性膠原蛋白的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及膠原蛋白提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種海參活性膠原蛋白的提取方法。
背景技術(shù)：
海參中含有大量的膠原蛋白，具有抗凝血、免疫調(diào)節(jié)、降血脂、抗病毒、抗腫瘤等多種藥理作用，而保持活性的海參膠原蛋白的應(yīng)用價值更高，但目前膠原蛋白的提取工藝均會破壞其三維螺旋結(jié)構(gòu)，大大降低了其膠原蛋白的科研及應(yīng)用價值。發(fā)明內(nèi)容
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的目的是提供一種海參活性膠原蛋白的提取方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案是包括以下提取步驟(1)把鮮活海參除去內(nèi)臟，用剪刀剔除內(nèi)壁肌肉層，剩余海參體壁用刀切成碎塊；(2)加入10倍重量的蒸餾水，攪拌30min，用紗布濾出，再加入10倍重量的蒸餾水重洗一次；(3)然后將海參碎塊放于10倍重量的O.1 mol/L Tris-HCl溶液中，溶液pH為8. 0，還含有4 m mol/L的EDTA，攪拌過夜；(4)用紗布過濾后，再用蒸餾水洗2次，置于10倍重量的蒸餾水中攪拌過夜，溶液中即充滿絮狀膠原纖維，用紗布濾出未解離的海參塊，重復(fù)上述操作；(5)將溶液以12000rpm離心30min ；(6)所得膠原纖維沉淀加入25倍體積的O.1 mol/L NaOH溶液中，攪拌2d ；(7)12000rpm離心30min,沉淀水洗至中性，加入25倍體積的O. 5 mol/L乙酸,加入O.5%的胃蛋白酶，攪拌、消化2天；(8)12000rpm離心30min，上清液緩慢加入研磨精細(xì)的NaCl，溶液終濃度為O. 9 mol/ L，攪拌過夜；(9)12000rpm離心30min,去上清,沉淀加入少許0. 5 mol/L乙酸溶解,轉(zhuǎn)入透析袋內(nèi)對0.1 mol/L乙酸透析2d，再用蒸餾水透析2d，冷凍干燥后即得活性膠原蛋白，以上所有 操作均在4°C下進(jìn)行。
本發(fā)明工藝簡單，提取率高，且膠原蛋白的三維螺旋結(jié)構(gòu)保存完好，具有較高的科研和應(yīng)用價值。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1一種即食海參加工新工藝，包括以下提取步驟(1)把鮮活海參除去內(nèi)臟，用剪刀剔除內(nèi)壁肌肉層，剩余海參體壁用刀切成碎塊；(2)加入10倍重量的蒸餾水，攪拌30min，用紗布濾出，再加入10倍重量的蒸餾水重洗一次；(3)然后將海參碎塊放于10倍重量的O.1 mol/L Tris-HCl溶液中，溶液pH為8. 0，還含有4 m mol/L的EDTA，攪拌過夜；(4)用紗布過濾后，再用蒸餾水洗2次，置于10倍重量的蒸餾水中攪拌過夜，溶液中即充滿絮狀膠原纖維，用紗布濾出未解離的刺參塊，重復(fù)上述操作；(5)將溶液以12000rpm離心30min ；(6)所得膠原纖維沉淀加入25倍體積的O.1 mol/L NaOH溶液中，攪拌2d ；(7)12000rpm離心30min,沉淀水洗至中性，加入25倍體積的O. 5 mol/L乙酸,加入O.5%的胃蛋白酶，攪拌、消化2天；(8)12000rpm離心30min，上清液緩慢加入研磨精細(xì)的NaCl，溶液終濃度為O. 9 mol/ L，攪拌過夜；(9)12000rpm離心30min,去上清,沉淀加入少許0. 5 mol/L乙酸溶解,轉(zhuǎn)入透析袋內(nèi)對0.1 mol/L乙酸透析2d，再用蒸餾水透析2d，冷凍干燥后即得活性膠原蛋白，以上所有操作均在4°C下進(jìn)行。
上述實(shí)施例不作為對本發(fā)明的限定，凡在本發(fā)明的范圍內(nèi)所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均屬于本發(fā)明的保護(hù)范 圍。
權(quán)利要求
1.一種海參活性膠原蛋白的提取方法，其特征在于包括以下提取步驟(1)把鮮活海參除去內(nèi)臟，用剪刀剔除內(nèi)壁肌肉層，剩余海參體壁用刀切成碎塊；(2)加入10倍重量的蒸餾水，攪拌30min，用紗布濾出，再加入10倍重量的蒸餾水重洗一次；(3)然后將海參碎塊放于10倍重量的1.1 mo l/L Tris-HCl溶液中，溶液pH為8. 0，還含有4 m mo l/L的EDTA，攪拌過夜；(4)用紗布過濾后，再用蒸餾水洗2次，置于10倍重量的蒸餾水中攪拌過夜，溶液中即充滿絮狀膠原纖維，用紗布濾出未解離的海參塊，重復(fù)上述操作；(5)將溶液以12000rpm離心30min ；(6)所得膠原纖維沉淀加入25倍體積的0.1 mol/L NaOH溶液中，攪拌2d ；(7)12000rpm離心30min,沉淀水洗至中性，加入25倍體積的0. 5 mol/L乙酸,加入.1.5%的胃蛋白酶，攪拌、消化2天；(8)12000rpm離心30min，上清液緩慢加入研磨精細(xì)的NaCl，溶液終濃度為O. 9 mol/ L，攪拌過夜；(9)12000rpm離心30min,去上清,沉淀加入少許0. 5 mol/L乙酸溶解,轉(zhuǎn)入透析袋內(nèi)對0.1 mol/l乙酸透析2d，再用蒸餾水透析2d，冷凍干燥后即得活性膠原蛋白，以上所有操作均在4°C下進(jìn)行。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種海參活性膠原蛋白的提取方法，將把鮮活海參除去內(nèi)臟，切成碎塊，用蒸餾水?dāng)嚢?，過濾后再用Tris-HCl攪拌，過濾后，離心所得膠原纖維沉淀加入NaOH溶液中，攪拌、離心，沉淀加入含胃蛋白酶的乙酸溶液中，攪拌過夜，離心，沉淀透析后得活性膠原蛋白，以上所有操作均在0～4℃條件下進(jìn)行。本發(fā)明工藝簡單，提取率高，且膠原蛋白的三維螺旋結(jié)構(gòu)保存完好，具有較高的科研和應(yīng)用價值。
文檔編號C12P21/06GK103060409SQ201210589099
公開日2013年4月24日 申請日期2012年12月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月29日
發(fā)明者周偉麗 申請人:青島安芙蘭生物科技有限公司