一種植物抽穗期相關(guān)蛋白TaMYB72及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種植物抽穗期相關(guān)蛋白TaMYB72及其應(yīng)用。本發(fā)明公開(kāi)了如下任一物質(zhì)在縮短植物抽穗期和/或降低植株高度中的應(yīng)用：（1）SEQ?ID?No.2所示的蛋白；（2）SEQ?ID?No.2所示蛋白的編碼基因；（3）含有（2）所述編碼基因的重組載體、表達(dá)盒、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌。本發(fā)明公開(kāi)的TaMYB72蛋白在縮短植物抽穗期以及降低植株高度方面有重要作用。
【專利說(shuō)明】—種植物抽穗期相關(guān)蛋白TaMYB72及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種植物抽穗期相關(guān)蛋白TaMYB72及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]高等植物在其整個(gè)生活史的發(fā)育過(guò)程中，開(kāi)花是由營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)向生殖生長(zhǎng)轉(zhuǎn)變的一個(gè)重要過(guò)程，在合適的時(shí)間完成這個(gè)轉(zhuǎn)變是植物實(shí)現(xiàn)正常生殖發(fā)育所必需的。植物在長(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中已經(jīng)形成了一種對(duì)環(huán)境的適應(yīng)性，它可以通過(guò)感知晝夜長(zhǎng)短變化而控制開(kāi)花，這就是光周期現(xiàn)象。植物開(kāi)花途徑的分子生物學(xué)機(jī)制在模式植物擬南芥和水稻中的研究已取得很大的進(jìn)展，但在主要糧食作物小麥中的研究還相對(duì)薄弱。
[0003]在植物生長(zhǎng)發(fā)育的過(guò)程中，頂端分生組織(SAM)不斷分化出新的葉片，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)后，在內(nèi)外因素的雙重調(diào)控下，植物頂端細(xì)胞開(kāi)始分化出花器官組織，植物由營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)向生殖生長(zhǎng)轉(zhuǎn)變，并在合適的時(shí)間內(nèi)開(kāi)花結(jié)實(shí)，完成生活史。對(duì)于擬南芥來(lái)說(shuō)，成花時(shí)間指播種到開(kāi)花的這段時(shí)間，對(duì)于水稻來(lái)說(shuō)，成花時(shí)間就是指抽穗期，指從播種到穗子抽出劍葉葉鞘的這段時(shí)間。抽穗(開(kāi)花)是植物由營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)向生殖生長(zhǎng)轉(zhuǎn)換的重要階段。對(duì)農(nóng)作物而言，抽穗期的長(zhǎng)短直接決定作物品種的地域和季節(jié)適應(yīng)性，對(duì)品種的高產(chǎn)與穩(wěn)產(chǎn)起著重要的作用，是作物育種的重要目標(biāo)。
[0004]由于抽穗期性狀受一系列內(nèi)在及外在環(huán)境因素的影響，所以抽穗期性狀呈現(xiàn)出多樣的變化，這樣就保證了作物對(duì)不同的生態(tài)環(huán)境具有廣泛的適應(yīng)性。因此，克隆控制抽穗期的關(guān)鍵基因，并研究這些基因的功能及作用機(jī)制，對(duì)于深入探討農(nóng)作物抽穗期的遺傳本質(zhì)，為選擇性地培育適應(yīng)不同 生態(tài)地區(qū)的農(nóng)作物新品種提供候選基因及理論基礎(chǔ)。我國(guó)不同地區(qū)，尤其是南北之間的氣候差異很大，光照強(qiáng)度、日照時(shí)間及氣溫等生態(tài)環(huán)境顯著不同，因此培育具有適應(yīng)不同生態(tài)地區(qū)的品種對(duì)保證我國(guó)糧食安全具有重要的意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提供一種植物抽穗期相關(guān)蛋白TaMYB72及其應(yīng)用。
[0006]本發(fā)明提供的如下任一物質(zhì)在縮短植物抽穗期和/或降低植株高度中的應(yīng)用:
[0007](I) SEQ ID N0.2 所示的蛋白；
[0008](2) SEQ ID N0.2所示蛋白的編碼基因；
[0009](3)含有(2)所述編碼基因的重組載體、表達(dá)盒、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌。
[0010]所述抽穗期是指從播種到穗子抽出劍葉葉鞘的這段時(shí)間。
[0011]上述應(yīng)用中，所述編碼基因的核苷酸序列如SEQ ID N0.1中自5’末端起第258至第1325位核苷酸所示。
[0012]上述任一所述的應(yīng)用中,所述植物為水稻。
[0013]一種制備抽穗期變短和/或植株高度變低的轉(zhuǎn)基因植物的方法也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍，包括如下步驟:將SEQ ID N0.2所示蛋白的編碼基因?qū)氤霭l(fā)植物中，得到轉(zhuǎn)基因植物；與出發(fā)植物相比，轉(zhuǎn)基因植物的抽穗期變短和/或植株高度變低。[0014]上述方法中，所述編碼基因的核苷酸序列如SEQ ID N0.1中自5’末端起第258至第1325位核苷酸所示。
[0015]上述任一所述的方法中，所述植物為水稻。
[0016]一種蛋白也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍，為如下(I)或(2)所示:
[0017](1)SEQ ID N0.2 所示的蛋白；
[0018](2)將SEQ ID N0.2所示的氨基酸序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白質(zhì)。
[0019]上述蛋白的編碼基因也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0020]上述編碼基因中，所述編碼基因?yàn)槿缦轮兄辽僖环N:
[0021]1) SEQ ID N0.1 所示的 DNA 分子；
[0022]2) SEQ ID N0.1中自5’末端起第258至第1325位核苷酸所示的DNA分子；
[0023]3)在嚴(yán)格條件下與I)或2)限定的DNA分子雜交且編碼所述蛋白質(zhì)的DNA分子；
[0024]4)與I)或2)或3)限定的DNA分子具有90%以上的同一性且編碼所述蛋白質(zhì)的DNA分子。
[0025]含有上述任一所述編碼基因的重組載體、表達(dá)盒、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0026]本發(fā)明提供的TaMYB72蛋白在縮短植物抽穗期以及降低植株高度方面有重要作用。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0027]圖1為水稻的表型。
【具體實(shí)施方式】
[0028]下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。
[0029]下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無(wú)特殊說(shuō)明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0030]以下實(shí)施例中的定量實(shí)驗(yàn)，均設(shè)置三次重復(fù)，結(jié)果取平均值。
[0031]2XPfu PCR MasterMix購(gòu)自天根生化科技(北京)有限公司，產(chǎn)品目錄號(hào)為KP201，該試劑含pfutaq酶。
[0032]入門載體pD0NR?Zeo 購(gòu)自 Life Technologies,產(chǎn)品目錄號(hào)為 12535-035。
[0033]BP Clonase? II Enzyme Mix 購(gòu)自 Life Technologies,產(chǎn)品目錄號(hào)為 11789020。
[0034]大腸桿菌T0P10感受態(tài)細(xì)胞購(gòu)自北京全式金生物技術(shù)有限公司。
[0035]LR Clonase? II Enzyme Mix 購(gòu)自 Life Technologies,產(chǎn)品目錄號(hào)為 11791020。
[0036]Gateway ? Vector Conversion System,購(gòu)自 Life Technologies,產(chǎn)品目錄號(hào)為 11828-019。
[0037]pCUbil390在文獻(xiàn)“彭昊(2005)博士論文，《利用T-DNA插入突變和RNA干擾技術(shù)研究水稻基因功能》”中公開(kāi)過(guò)，公眾可以從中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所獲得。
[0038]目標(biāo)載體pGW_CUbil390的構(gòu)建:用平末端酶PmlI切開(kāi)pCUbil390，得到載體；利用 Gateway ? Vector Conversion System,將 gateway cassete A (平端)連入載體，具體的方法為Gateway ? Vector Conversion System標(biāo)準(zhǔn)流程，公眾可從LifeTechnologies主頁(yè)下載,所得到的重組載體即為pGW_CUbil390。
[0039]日本晴(0.Sativa L.spp.japonica, var nippobare, AA genome)在文獻(xiàn)“李嘉，薛薌，左示敏，陳宗祥，潘存紅，張亞芳，李亞超，朱俊凱，馬玉銀，潘學(xué)彪(2013)，揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)，2013年02期”中公開(kāi)過(guò)，公眾可以從中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所獲得。
[0040]中國(guó)春小麥(Triticumaestivum L.)在文獻(xiàn) “P.Sourdille, T.Cadalen, H.Guyomarc' h, J.Snape, M.Perretant, G.Charmet, C.Boeuf, S.Bernard and M.Bernard.(2003)An update of the Courtot X Chinese Spring intervarietal molecular markerlinkage map for the QTL detection of agronomic traits in wheat.Theoretical andApplied Geneticsl06(3): 530-538”中公開(kāi)過(guò)，公眾可以從中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所獲得。
[0041]—篩培養(yǎng)基:一篩培養(yǎng)基由NB基本培養(yǎng)基、2，4-D、潮霉素、噻孢霉素和Phytgel組成，ρΗ5.8 ;各成分的濃度如下:2.0mg/12, 4_D，50mg/l潮霉素，0.5g/l噻孢霉素，2.5g/lPhytgel0
[0042]二篩培養(yǎng)基:二篩培養(yǎng)基由NB基本培養(yǎng)基、脫落酸(ABA)、6_芐氨基嘌呤(BA)、α -萘乙酸(NAA)、潮霉素、噻孢霉素和phytgel組成，pH5.8 ;各成分的濃度如下:5.0mg/
1脫落酸(ABA)，2.0mg/16-芐氨基嘌呤(BA)，1.0mg/1 α -萘乙酸(NAA)，50mg/l 潮霉素，0.5g/l 噻孢霉素，2.5g/lphytgel, pH5.8。
[0043]三篩培養(yǎng)基:三篩培養(yǎng)基由MS培養(yǎng)基(含大量兀素,微量兀素和有機(jī)成分)、鹿糖和瓊脂組成，PH5.8 ;各成分的濃度如下:30g/l蔗糖，15g/l瓊脂。
[0044]實(shí)施例1、TaMYB72基因過(guò)表達(dá)載體以及重組農(nóng)桿菌的構(gòu)建
[0045]TaMYB72的全長(zhǎng)cDNA序列如SEQ ID N0.1所示，TaMYB72蛋白的氨基酸序列如SEQID N0.2 所示。
[0046]一、利用Gateway技術(shù)構(gòu)建TaMYB72基因過(guò)表達(dá)載體
[0047](一)attB 引物設(shè)計(jì)
[0048]設(shè)計(jì)并合成如下引物，并在上游引物(Fl)和下游引物(Rl)的5’端分別加入attBl和attB2重組位點(diǎn)。
[0049]Fl:5，-GGGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCT CGATGTTCTCTTCCAAGAAG-3，；
[0050]Rl:5，-GGGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGT TTATCCGTAGATCACCGAC-3，。
[0051](下劃線所示序列為attB重組位點(diǎn))
[0052](二)提取中國(guó)春小麥的總RNA，反轉(zhuǎn)錄為cDNA。
[0053](三)以步驟(二)得到的cDNA為模板，用Fl和Rl為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到PCR
擴(kuò)增產(chǎn)物。
[0054]PCR 體系(25.0μ l):12.5μ 12XPfu PCR MasterMix、3.0 μ l 上游引物(濃度為
2μ Μ)、3.0 μ l 下游引物(濃度為 2 μ Μ)、2.0 μl cDNA(質(zhì)量為 30ng)、DMS01.5 μ 1，加 ddH20補(bǔ)足體系至25.0 μ 1
[0055]PCR 程序:95°C 5min ；94°C 30sec (變性)、60°C 30sec (退火)、72°C 1.5min (延伸)，35 個(gè)循環(huán)；72°C 5min。
[0056](四)BP反應(yīng)[0057]BP反應(yīng)體系:步驟(三)得到的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物25ng、入門載體pD0NR?Zeo40ng、BPClonase? II Enzyme Mix0.3 μ 1，加滅菌 ddH20 補(bǔ)足體系至 2.5 μ I。
[0058]BP 反應(yīng)程序:25°C IOh。[0059](五)將2.5 μ I步驟(四)得到的BP反應(yīng)產(chǎn)物加入30 μ I大腸桿菌Τ0Ρ10感受態(tài)細(xì)胞，冰浴15min，42°C熱激90sec，然后迅速置于冰上2min ;加入500 μ I SOC培養(yǎng)基，37°C、225rpm/min復(fù)蘇50min ;將復(fù)蘇液均勻涂布于LB固體培養(yǎng)基(含30 μ g/mlZeocin)表面，37°C倒置培養(yǎng)過(guò)夜；pD0NR?Zeo載體自身帶有致死基因，不能在培養(yǎng)基上生存，通過(guò)BP反應(yīng)目標(biāo)基因片段會(huì)取代致死基因，所以在LB固體培養(yǎng)基(含30μ g/ml Zeocin)上生存的克隆即為含有目標(biāo)基因片段的入門克隆(entry clone)。
[0060](六)將步驟(五)得到的入門克隆提取質(zhì)粒進(jìn)行雙向測(cè)序驗(yàn)證，測(cè)序驗(yàn)證所用引物為pD0NRTMZeo通用引物，序列如下:
[0061]M13F:5，-GTAAAACGACGGCCAG-3，；
[0062]M13R:5，-CAGGAAACAGCTATGAC-3，。
[0063]測(cè)序結(jié)果表明，得到的質(zhì)粒為在入門載體pD0NR?Zeo的attPl和attP2重組位點(diǎn)之間插入了 SEQ ID N0.1中自5’末端起第258至第1325位核苷酸所示的DNA分子，將該質(zhì)粒命名為入門質(zhì)粒(entry plasmid)。
[0064](七)LR反應(yīng)
[0065]LR反應(yīng)體系:入門質(zhì)粒25ng、目標(biāo)載體pGW_CUbil39040ng、LRClonase? II EnzymeMix0.3 μ 1，加滅菌 ddH20 補(bǔ)足體系至 2.5 μ I。
[0066]LR 反應(yīng)程序:25°C、IOh。
[0067](八)將2.5 μ I步驟(七)得到的LR反應(yīng)產(chǎn)物加入30 μ I大腸桿菌Τ0Ρ10感受態(tài)細(xì)胞，冰浴15min，42°C熱激90sec，然后迅速置于冰上2min ;加入500 μ I SOC培養(yǎng)基，37°C、225rpm/min復(fù)蘇50min ;將復(fù)蘇液均勻涂布于LB固體培養(yǎng)基(含50 μ g/ml卡那霉素)表面，37°C倒置培養(yǎng)過(guò)夜；PGW-CUbil390自身帶有致死基因，不能在LB固體培養(yǎng)基(含50 μ g/ml卡那霉素)上生存，通過(guò)LR反應(yīng)目標(biāo)基因片段會(huì)取代致死基因，所以在培養(yǎng)基上生存的克隆即為含有目標(biāo)基因片段的目標(biāo)克隆(Destiantion clone)。
[0068](九)將步驟(八)得到的目標(biāo)克隆提取質(zhì)粒進(jìn)行雙向測(cè)序驗(yàn)證，測(cè)序驗(yàn)證所用引物為pGW-CUbil390載體插入片段兩端啟動(dòng)子區(qū)及終止區(qū)引物，序列如下:
[0069]Pub1:5， -TTTGTCGATGCTCACCCTG-3，；
[0070]Tnos:5， -TTGCCAAATGTTTGAACGA-3，。
[0071]測(cè)序結(jié)果表明，得到的質(zhì)粒為在目標(biāo)載體pGW_CUbil390的attRl和attR2重組位點(diǎn)之間插入了 SEQ ID N0.1中自5’末端起第258至第1325位核苷酸所示的DNA分子，將該質(zhì)粒命名為目標(biāo)質(zhì)粒。
[0072]二、重組農(nóng)桿菌的構(gòu)建
[0073]將步驟一得到的目標(biāo)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌EHA105，得到重組菌；將重組菌提質(zhì)粒，送測(cè)序,結(jié)果證明重組菌構(gòu)建正確。
[0074]同時(shí)將空載體pGW_CUbil390轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌EHA105，得到對(duì)照重組菌。
[0075]實(shí)施例2、轉(zhuǎn)基因植物的獲得
[0076]一、水稻愈傷組織的農(nóng)桿菌侵染[0077](一)取水稻日本晴的種子去殼滅菌，平鋪到愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)兩周，挑出愈傷繼代培養(yǎng)兩周至長(zhǎng)出直徑2_左右的愈傷顆粒。
[0078](二)將實(shí)施例1得到的重組菌用LB液體培養(yǎng)基(含利福平50mg/L+潮霉素50mg/L)，培養(yǎng)過(guò)夜使OD6tltl值為0.6-0.8左右，得到菌液。
[0079](三)取3mL左右的菌液4000rmp離心3分鐘，去上清，將菌液重懸于20mL左右的AMM (含ΙΟΟμπιοΙ/L乙酰丁香酮)液體培養(yǎng)基中。28°C，150rpm搖兩個(gè)小時(shí)，得到目的菌液。
[0080](四)浸染:將步驟(一)得到的愈傷顆粒在目的菌液中浸泡20分鐘，再放到有一層濾紙的共培養(yǎng)基上。三天以后將愈傷用滅菌蒸餾水洗三次，每次20分鐘左右，再用含500mg/L羧芐的滅菌水洗兩次，每次30分鐘，可重復(fù)多次直到洗液很清亮，將愈傷放在無(wú)菌濾紙上晾干，再將其放到一篩培養(yǎng)基上。兩周后將愈傷轉(zhuǎn)到二篩培養(yǎng)基上，再兩周后轉(zhuǎn)到三篩培養(yǎng)基，得到抗性愈傷。
[0081](五)將抗性愈傷轉(zhuǎn)到分化培養(yǎng)基上，等待分化小苗。
[0082](六)將分化的小苗上到1/2MS培養(yǎng)基上生根，然后轉(zhuǎn)到溫室和大田種植，得到TO代植株，收獲TO代種子，將TO代種子播種到大田中種植，得到實(shí)驗(yàn)組的Tl代植株。將Tl代植株自交，得到Tl代種子，以此方法直到獲得T2代植株。
[0083]同時(shí)將實(shí)施例1得到的對(duì)照重組菌進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)得到對(duì)照組的Tl代植株和T2代植株。
[0084]二、分別取實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的Tl代植株和T2代植株進(jìn)行分子鑒定。
`[0085]具體步驟如下:
[0086]提取實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的Tl代植株和T2代植株的葉片的基因組DNA，以F2和R2為引物進(jìn)行PCR鑒定，靶序列為約458bp的條帶。
[0087]F2:5， -CAAATGGAGGTTCAAAGGA-3，；
[0088]R2:5，-GGTGCCATCTGGAGTAGC-3，。
[0089]PCR鑒定為陽(yáng)性的植株即為轉(zhuǎn)TaMYB72基因的植株。對(duì)于某一 Tl代植株，如果由此植株自交得到的T2代植株均經(jīng)過(guò)PCR鑒定為陽(yáng)性，則該植株為純合的轉(zhuǎn)TaMYB72基因的植株，該植株及其后代即為I個(gè)純合的轉(zhuǎn)TaMYB72基因株系。
[0090]經(jīng)過(guò)上述鑒定實(shí)驗(yàn)，得到純合的轉(zhuǎn)TaMYB72基因株系的T2代水稻。
[0091]對(duì)照組的Tl代植株和T2代植株進(jìn)行上述分子鑒定，結(jié)果均為陰性。
[0092]實(shí)施例3、轉(zhuǎn)基因植物抽穗期鑒定
[0093]將實(shí)施例2鑒定的純合的轉(zhuǎn)TaMYB72基因株系的T2代水稻以及野生型日本晴水稻(以下簡(jiǎn)稱野生型水稻)在北京和廊坊兩地種植，對(duì)轉(zhuǎn)基因水稻和野生型水稻的抽穗期、株高進(jìn)行考察，結(jié)果如圖1和表1所示。
[0094]圖1A為大田中轉(zhuǎn)基因水稻和野生型水稻的生長(zhǎng)情況；圖1B為轉(zhuǎn)基因水稻和野生水稻的盆栽對(duì)照。
[0095]圖1中的轉(zhuǎn)基因株系為純合的轉(zhuǎn)TaMYB72基因株系的T2代水稻，日本晴為野生型日本晴水稻。
[0096]抽穗期和株高的數(shù)據(jù)如表1所示。
[0097]抽穗期是指從播種到穗子抽出劍葉葉鞘的這段時(shí)間。
[0098]表1北京和廊坊兩地種植的T2代轉(zhuǎn)基因水稻以及野生型日本晴水稻表型數(shù)據(jù)[0099]
【權(quán)利要求】
1.如下任一物質(zhì)在縮短植物抽穗期和/或降低植株高度中的應(yīng)用: (1)SEQ ID N0.2所示的蛋白； (2)SEQ ID N0.2所示蛋白的編碼基因； (3)含有(2)所述編碼基因的重組載體、表達(dá)盒、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于:所述編碼基因的核苷酸序列如SEQIDN0.1中自5’末端起第258至第1325位核苷酸所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于:所述植物為水稻。
4.一種制備抽穗期變短和/或植株高度變低的轉(zhuǎn)基因植物的方法，包括如下步驟:將SEQ ID N0.2所示蛋白的編碼基因?qū)氤霭l(fā)植物中，得到轉(zhuǎn)基因植物；與出發(fā)植物相比，轉(zhuǎn)基因植物的抽穗期變短和/或植株高度變低。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于:所述編碼基因的核苷酸序列如SEQIDN0.1中自5’末端起第258至第1325位核苷酸所示。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的方法，其特征在于:所述植物為水稻。
7.一種蛋白，為如下(I)或(2)所示: Cl) SEQ ID N0.2所示的蛋白； (2)將SEQ ID N0.2所示的氨基酸序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白`質(zhì)。
8.權(quán)利要求7所述蛋白的編碼基因。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的編碼基因，其特征在于:所述編碼基因?yàn)槿缦轮兄辽僖环N: 1)SEQ ID N0.1所示的DNA分子； 2)SEQ ID N0.1中自5’末端起第258至第1325位核苷酸所示的DNA分子； 3)在嚴(yán)格條件下與I)或2)限定的DNA分子雜交且編碼權(quán)利要求7所述蛋白質(zhì)的DNA分子; 4)與I)或2)或3)限定的DNA分子具有90%以上的同一性且編碼權(quán)利要求7所述蛋白質(zhì)的DNA分子。
10.含有權(quán)利要求8或9所述編碼基因的重組載體、表達(dá)盒、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌。
【文檔編號(hào)】C12N15/29GK103665129SQ201310698374
【公開(kāi)日】2014年3月26日 申請(qǐng)日期:2013年12月18日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月18日
【發(fā)明者】孔秀英, 張立超, 趙光耀, 賈繼增, 劉旭, 夏川 申請(qǐng)人:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所