一種制備sn-2位富含共軛亞油酸甘油三酯的方法
【專利摘要】一種制備sn-2位富含共軛亞油酸甘油三酯的方法，包括將含有不同水分活度的共軛亞油酸乙酯，茶油，和脂酶TLIM的預處理；原料準備后進行轉酯交換反應、除酶、分子蒸餾、脫色：該油脂中包含摩爾百分數(shù)為16.7-45.5%的共軛亞油酸，且甘油酯中sn-2位的共軛亞油酸的含量可高達42.7%。可以用于食用油或調(diào)和食用油，或用于具有抗癌、抗肥胖、和抗動脈粥樣硬化等功能性食品、飲品的加工等。
【專利說明】一種制備sn-2位富含共軛亞油酸甘油三酯的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明專利涉及以固定化脂肪酶合成富含共軛亞油酸甘油酯的制備方法，屬于食用油【技術領域】。
【背景技術】
[0002]共軛亞油酸(conjugated linoleic acids,CLA)是一系列碳原子數(shù)為18的多種幾何與位置異構體混合物的總稱。CLA是由反芻動物體內(nèi)的厭氧溶纖維丁酸弧菌亞油酸異構酶催化亞油酸轉化而成的。天然的CLA主要存在于瘤胃動物如牛、羊的乳脂及肉制品中，每克乳脂中含量從2~25mg不等，以c9，tll-CLA、tlO, cl2_CLA形式最為普遍存在。其中c9，tll-CLA是唯一能被動物細胞吸收進入其磷脂層的異構體，也是與人類和動物營養(yǎng)最為相關、最具有生物活性的CLA，被命名為瘤胃酸。另外，tlO，cl2-CLA異構體在天然存在和人工合成中含量也較高，在改善人體的身體組成等方面具有顯著作用，同c9，tll-CLA共同發(fā)揮著不同的生理作用，包括抑癌、減肥、調(diào)節(jié)血脂、調(diào)節(jié)血糖、調(diào)節(jié)血壓、抗動脈粥樣硬化、免疫調(diào)節(jié)等多種生理功能。此外，CLA還存在于植物種子中，但其異構體的分布狀況與動物食品顯著不同，在天然的植物種子中，并不存在具有生理活性的c9，tll-CLA和tlO，C12-CLA。然而，無論是從動物來源還是植物來源，人們都無法從食物中直接大量獲取CLA。
[0003]鑒于CLA的諸多生理功能，人們期望在膳食中含有一定量CLA的基礎上大大提高其吸收率。目前，國內(nèi)外市場上出現(xiàn)的CLA產(chǎn)品主要是脂肪酸形態(tài)，然而在食品不允許游離脂肪酸的大量存在，也有共軛亞油酸乙酯直接添加到植物油和食品中，但共軛亞油酸乙酯煙點低，風味差，易 于氧化。所以CLA甘油酯是補充CLA的最好形式。更值得一提的是，功能性脂肪酸位于Sn - 2位更加有利于被人體吸收利用，與CLA游離脂肪酸相比CLA的甘油酯在保持其生理和營養(yǎng)功能的同時，氣味和味道更平和、更易于被人體和動物吸收，是一種重要的低熱量油脂替代品和藥物中間體合成原料。用傳統(tǒng)化學方法合成甘油酯，存在反應溫度高，設備腐蝕嚴重，產(chǎn)物色澤差等缺點，而酶催化法具有反應條件溫和、產(chǎn)物選擇性高及對環(huán)境友好等優(yōu)點。目前，國內(nèi)外多以酯交換法進行酶催化合成甘油酯，但產(chǎn)率都較低，后處理復雜，不利于工業(yè)化生產(chǎn)，且僅有的文獻表明合成的共軛亞油酸甘油酯中，共軛亞油酸主要位于甘油三酯的sn-1, 3位，不易于被人體吸收。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術的不足提供一種制備sn-2位富含共軛亞油酸甘油三酯的方法，所制備的共軛亞油酸甘油酯中共軛亞油酸的含量在40-45%以上，其中sn-2位的共軛亞油酸超過40%，本發(fā)明的含共軛亞油酸甘油酯為淡黃色油狀液體，無異味，酸值，過氧化值符合國家一級食用油標準，亦可用于制作具有抗癌等保健功能的食品。
[0005]本發(fā)明所述一種制備sn-2位富含共軛亞油酸甘油三酯的方法工藝步驟如下:
(I)原料準備:配置一系列飽和鹽溶液，包括水分活度為0.22的KCH3CO2，水分活度為
0.43的K2CO3,水分活度為0.65的NaNO，水分活度為0.80的(NH4) 2S04,將上述各飽和鹽溶液分別倒入不同干燥器中；將裝有脂酶TLIM、共軛亞油酸乙酯、茶油的燒杯分別放入上述各飽和鹽溶液的干燥器內(nèi)，至少放置48小時，分別得到相應水分活度的脂酶TUM，共軛亞油酸乙酯和茶油；
(2)轉酯交換反應:按比例稱取某一水分活度的共軛亞油酸乙酯、茶油和脂酶放入玻璃密閉反應器內(nèi)，通入氮氣以置換密閉容器內(nèi)的空氣，混合反應底物和酶進行轉酯化反應；具體反應條件為:共軛亞油酸乙酯與茶油的摩爾比為廣3，脂酶TLIM含量為共軛亞油酸乙酯與茶油總質(zhì)量的5-30%，反應溫度為5(T70°C，反應時間為3-96h，反應的轉速為500轉/分鐘；
(3)除酶:對步驟(2)中反應得到的產(chǎn)物在2500轉/分鐘條件下離心10分鐘，上層油液取出備用，或通過濾膜過濾或抽濾方式除去固定化的脂酶；
(4)分子蒸餾:對步驟(3)中得到的油液通過短程分子蒸餾，真空度為10Pa，加熱溫度為150°C，除去未反應的共軛亞油酸酯及反應產(chǎn)生的游離脂肪酸，脂肪酸乙酯副產(chǎn)物，收集重餾分得到共軛亞油酸甘油三酯；
(5)脫色:對步驟(2)中反應超過24小時的反應物經(jīng)步驟(3)和步驟(4)純化得到的共軛亞油酸的甘油三酯進行脫色處理，即加入共軛亞油酸甘油三酯質(zhì)量的5%白土和5%的硅藻土，以250轉/分鐘的速度攪拌2小時，脫色溫度為2(T30°C，整個脫色過程需充氮；
(6)組分分析:對步驟(4)中得到的共軛亞油酸甘油三酯進行總脂肪酸及sn-2位脂肪酸分析，
其中共軛亞油酸的轉化率的計算公式為:
【權利要求】
1.一種制備sn-2位富含共軛亞油酸甘油三酯的方法，其特征是: (1)原料準備:配置一系列飽和鹽溶液，包括水分活度為0.22的KCH3CO2，水分活度為.0.43的K2CO3,水分活度為0.65的NaNO，水分活度為0.80的(NH4) 2S04,將上述各飽和鹽溶液分別倒入不同干燥器中；將裝有脂酶TLIM、共軛亞油酸乙酯、茶油的燒杯分別放入上述各飽和鹽溶液的干燥器內(nèi)，至少放置48小時，分別得到相應水分活度的脂酶TUM，共軛亞油酸乙酯和茶油； (2)轉酯交換反應:按比例稱取某一水分活度的共軛亞油酸乙酯、茶油和脂酶放入玻璃密閉反應器內(nèi)，通入氮氣以置換密閉容器內(nèi)的空氣，混合反應底物和酶進行轉酯化反應；具體反應條件為:共軛亞油酸乙酯與茶油的摩爾比為廣3，脂酶TLIM含量為共軛亞油酸乙酯與茶油總質(zhì)量的5-30%，反應溫度為5(T70°C，反應時間為3-96h，反應的轉速為500轉/分鐘； (3)除酶:對步驟(2)中反應得到的產(chǎn)物在2500轉/分鐘條件下離心10分鐘，上層油液取出備用，或通過濾膜過濾或抽濾方式除去固定化的脂酶； (4)分子蒸餾:對步驟(3)中得到的油液通過短程分子蒸餾，真空度為10Pa，加熱溫度為150°C，除去未反應的共 軛亞油酸酯及反應產(chǎn)生的游離脂肪酸，脂肪酸乙酯副產(chǎn)物，收集重餾分得到共軛亞油酸甘油三酯； (5)脫色:對步驟(2)中反應超過24小時的反應物經(jīng)步驟(3)和步驟(4)純化得到的共軛亞油酸的甘油三酯進行脫色處理，即加入共軛亞油酸甘油三酯質(zhì)量的5%白土和5%的硅藻土，以250轉/分鐘的速度攪拌2小時，脫色溫度為2(T30°C，整個脫色過程需充氮； (6)組分分析:對步驟(4)中得到的共軛亞油酸甘油三酯進行總脂肪酸及sn-2位脂肪酸分析， 其中共軛亞油酸的轉化率的計算公式為:
【文檔編號】C12P7/64GK103710400SQ201310732257
【公開日】2014年4月9日 申請日期:2013年12月27日 優(yōu)先權日:2013年12月27日
【發(fā)明者】朱雪梅, 胡蔣寧, 熊華, 張建飛, 胡居吾 申請人:南昌大學