一種復合磷酸酯酶的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種復合磷酸酯酶的制備方法。本發(fā)明的技術方案是利用復合磷酸酯酶溶于弱堿性溶液和不溶于乙醇的性質，將其分離純化。
【專利說明】一種復合磷酸酯酶的制備方法

【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及生物【技術領域】，具體地說涉及一種復合磷酸酯酶的制備方法。

【背景技術】
[0002]大麥經(jīng)浸漬、發(fā)芽、干燥除根后得到干麥芽，其副產(chǎn)物麥芽根的數(shù)量占總投料量的3%~5%左右。我國現(xiàn)有的啤酒廠及專業(yè)麥芽生產(chǎn)廠家達數(shù)百家，年產(chǎn)麥芽根的數(shù)量非常大，可達到10萬噸以上。由于人們對麥芽根營養(yǎng)價值的認識和了解不夠，對其利用也僅局限于作為飼料使用。
[0003]為充分利用大麥芽生產(chǎn)的副產(chǎn)物一一大麥芽根中的蛋白資源，采用國家標準方法測定麥芽根的主要成分，通過正交試驗研宄堿法提取麥芽根蛋白的最佳工藝條件。結果表明:麥芽根的蛋白質、灰分、水分、脂肪及粗纖維質量分數(shù)分別為29.2%、6.9%、6.42%、1.4%和10.7%。正交試驗結果表明，麥芽根中蛋白提取的最佳工藝條件為浸提液pH6.5-9.5、料液比1:6-1:15(g/mL)、浸提時間ll_18h、浸提溫度20_40°C，在此條件下麥芽根蛋白質的浸提率為20%以上。該工藝提取麥芽根蛋白簡便且提取率高。
[0004]利用大麥芽生產(chǎn)的副產(chǎn)物——大麥芽根，節(jié)約資源減少污染，創(chuàng)造新的收益。


【發(fā)明內容】

[0005]本發(fā)明的目的是一種復合磷酸酯酶的制備方法，制備復合磷酸酯酶。
[0006]本發(fā)明的技術方案是:利用復合磷酸酯酶溶于弱堿性溶液的性質，將其提取出來，利用其不溶于乙醇將其分離純化，包括如下步驟:
(1)提取工序:取大麥芽根須，粉碎，投入浸泡槽內，加水，加入的水與大麥芽根須的比為 6:1?15:1 (L/Kg);用氨水調 ρΗ6.5-9.5，溫度 20-40°C浸泡 11-18 小時；；
(2))再提取工序:抽濾，得濾液，濾渣再加水，加入的水與大麥芽根須的比為2:1~4:1(L/Kg);用氨水調pH6.5-9.5，溫度20-40°C，浸泡2_6小時，抽濾，得濾液，棄濾渣；
(3)沉淀工序:合并兩次濾液，在低溫下進行濃縮，調pH4.5-6.5，加入乙醇，加入的乙醇與濃縮液的體積比為2:1~4:1 (L/L)，沉淀，抽濾，收集沉淀；
(4)干燥工序:15-25°C下真空干燥，粉碎，過100-120目篩，即得復合磷酸酯酶。

【具體實施方式】
[0007]下面結合具體實施例對本發(fā)明作進一步說明。
[0008]實施例1
(1)提取工序:取大麥芽根須，粉碎，稱重lOOKg，投入浸泡槽內，加水600L，用氨水調ρΗ6.5，溫度20-25°C浸泡11小時；
(2)再提取工序:抽濾，得濾液，濾渣，稱重80.8Kg，再加水162L ;用氨水調pH6.5，溫度20-250C，浸泡3小時，抽濾，得濾液，棄濾渣；
(3)沉淀工序:合并兩次濾液，得781L濾液，在低溫下進行濃縮，調pH4.5，加入乙醇1562L,沉淀，抽濾，收集沉淀；
(4)干燥工序:15°C下真空干燥，粉碎，過100目篩，即得復合磷酸酯酶6.6Kg。
實施例2
(1)提取工序:取大麥芽根須，粉碎，稱重20Kg投入浸泡槽內，加水300L，用氨水調ρΗ8.5，溫度35-40°C浸泡18小時；
(2)再提取工序:抽濾，得濾液，濾渣15Kg，再加水60L，用氨水調pH8.5，溫度35-40°C，浸泡5小時，抽濾，得濾液，棄濾渣；
(3)沉淀工序:合并兩次濾液，得380L在低溫下進行濃縮，調pH6.5，加入乙醇1520L，沉淀，抽濾，收集沉淀；
(4)干燥工序:25°C下真空干燥，粉碎，過120目篩，即得復合磷酸酯酶1.47Kg。
[0009]以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實施例而已，并非是對本發(fā)明作其它形式的限制，任何熟悉本專業(yè)的技術人員可能利用上述揭示的技術內容加以變更或改型為等同變化的等效實施例。但是凡是未脫離本發(fā)明技術方案內容，依據(jù)本發(fā)明的技術實質對以上實施例所作的任何簡單修改、等同變化與改型，仍屬于本發(fā)明技術方案的保護范圍。
【權利要求】
1.一種復合磷酸酯酶的制備方法，其特征在于，該方法包括如下步驟: (1)提取工序:取大麥芽根須，粉碎，投入浸泡槽內，加水，調pH，浸泡10-20小時，抽濾，得濾液； (2)再提取工序:濾渣再加水，調pH浸泡2-8小時，抽濾，得濾液，棄濾渣； (3)沉淀工序:合并兩次濾液，濃縮，調pH，加入乙醇，沉淀，抽濾，收集沉淀； (4)干燥工序:干燥，粉碎，過篩，即得復合磷酸酯酶。
2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于:步驟(I)中，加入的水與大麥芽根須的比為6:1?15:1 (L/Kg);調節(jié)pH值至7.0~8.0 ;溫度控制在10°C -15°C ;浸泡12-18小時。
3.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于:用氨水調pH。
4.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于:步驟(2)中，加入的水與大麥芽根須的比為2:1?4:1 (L/Kg);調節(jié)pH值至7.0-8.0 ;溫度控制在10°C -15°C ;浸泡2-5小時。
5.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于:步驟(3)中，濃縮在5°C-10°C下進行；調PH5.0-6.0 ;加入的乙醇與濃縮液的體積比為2:1~4:1 (L/L)。
6.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于:在步驟(4)中，在20-25?下真空干燥；過120目篩。
【文檔編號】C12N9/16GK104498449SQ201410807933
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2014年12月23日 優(yōu)先權日:2014年12月23日
【發(fā)明者】劉乃山, 王議鋒, 劉翠珍 申請人:青島康原藥業(yè)有限公司